水迷宫实验morris介绍
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附3. 大(小)鼠Morris水迷宫“水迷宫”是由Richard Morris在1984年发明的,随后他阐述了评估学习记忆方法的细节和步骤。
近30年来,在行为神经科学研究中,它成为最常用的验室研究工具之一。
水迷宫实验常被用于啮齿类动物神经认知疾病模型的验证和神经认知治疗可行性的评估。
有相当多的试验者利用水迷宫来评价动物的学习与记忆能力,同时也利用该实验评价水迷宫成绩、神经递质系统、药物作用之间的关系。
通过非常多的应用,水迷宫实验在当代神经科学研究中占据了一个十分重要的位置。
实验将大(小)鼠置于恒温水池中,大(小)鼠会试图找到让自己脱离浸在水中的位置,在池中特定位置放置一个平台,让大(小)鼠通过学习知道平台的位置,之后撤去平台,通过对大(小)鼠空间探索训练与定向航行实验中相关指标的检测分析,评价大(小)鼠的对空间位置学习能力以及记忆能力一、操作步骤:1. 使用CLEVER公司行为学观测系统,北京硕林苑科技有限公司的SLY-WMS装置联合分析,水迷宫主要由一圆柱型水池和一可移动位置的站台组成。
水池高70cm,直径160cm,站台直径8cm,水池上空通过一个数字摄相机与计算机相连接。
预先在水池中注入清水,水深40cm,加入炭素墨水/奶粉使池水变为不透明的黑/白色,站台表面为黑/白色,使大(小)鼠不能看到,水面高出站台表面0.5cm。
水温控制在19~21℃,在水池上标定相同一点作为每次实验大(小)鼠的入水点。
2.实验前一天让大(小)鼠自由游泳2min以适应周围环境,从第一天开始,每天训练4次,每次随机选择一个入水点,将大(小)鼠面向池壁放入水中,观察并记录大鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间(逃避潜伏期)。
4次训练大(小)鼠分别从四个不同的入水点入水,如果在120s内未找到平台,需将其引至平台。
这时潜伏期记为120s,每次训练间隔60s,连续4~7天。
3.实验时,将大(小)鼠置于水中,记录逃避潜伏期、轨迹图、各象限游泳距离。
实 验 技 术 与 管 理 第38卷 第6期 2021年6月Experimental Technology and Management Vol.38 No.6 Jun. 2021收稿日期: 2020-09-25基金项目: 国家自然科学基金项目(61977028);华中师范大学中央高校基本科研业务费专项资金项目(CCNU20KYZHSY09) 作者简介: 廖晓梅(1974—),女,湖北武汉,博士,副教授,主要从事神经生物学教学与科研工作,liaodebox@ 。
引文格式: 廖晓梅,王少辉,李兵,等. Morris 水迷宫虚拟仿真实验的设计与实践[J]. 实验技术与管理, 2021, 38(6): 147-150.Cite this article: LIAO X M, WANG S H, LI B, et al. Design and practice of virtual simulation experiment of Morris water maze system[J]. Experimental Technology and Management, 2021, 38(6): 147-150. (in Chinese)ISSN 1002-4956 CN11-2034/TDOI: 10.16791/ki.sjg.2021.06.030Morris 水迷宫虚拟仿真实验的设计与实践廖晓梅,王少辉,李 兵,杨娇艳(华中师范大学 生命科学学院,湖北 武汉 430079)摘 要:Morris 水迷宫技术是神经科学领域中用来检测啮齿类动物空间认知能力的常用技术。
结合脑立体定位注射和生物统计学技术,该技术可以方便地用来检测干扰因素对动物海马相关的空间学习与记忆能力的影响;结合相关科研成果和本科教学的需要,设计并开发了“水迷宫技术检测UCHL1对小鼠空间认知功能力的影响”的虚拟仿真实验教学资源,解决了脑立体定位注射技术和水迷宫技术因实验周期长、对实验场所要求高、操作难度大而难以在本科实验教学中推广的问题,有助于本科创新人才的培养。
Morris水迷宫实验准则目录一、实验原理(水迷宫的发展史,以及简单的实验原理和应用领域,以及在我国的发展情况和国内外的主要厂家)二、Morris水迷宫的组成(主要分为硬件和图像采集,软件)三、硬件准则(国内外文献提及到的硬件准则,我们主要针对国内文献提及到的)四、实验流程准则(实验细节)五、统计方法学准则(遵循统计学原理)六、评价指标的准则(实验数据的解释)七、实验适用范围准则(实验适用四个领域,与水迷宫的10个优点)八、实验注意事项以下准则仅供实验参考,行为学实验必须依据自身的实际课题来恰当安排实验。
地址:上海市闵行区光华路18号晶森大厦电话:021-********一、实验原理20世纪80年代初,英国的心理学家Morris和他的同事利用大鼠在盛有水和牛奶混合物的不透明水池中搜索目标物的方法,研究大鼠的海马等脑区受到损害后的学习、记忆和空间定向以及认知能力时取得了令人瞩目的结果。
这种装置不但构思新颖、实验设计合理以及方法简便和实用,而且便于观察和记录动物入水后搜索藏在水下平台所需的时间、采用的策略和它们的游泳轨迹,从而可分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。
虽然起初的实验对象为大鼠,但此后该迷宫系统成为评估啮齿类动物空间学习和记忆能力的经典程序,广泛运用于神经生物学、药理学等领域的基础和应用研究中。
它能较客观地衡量动物空间记忆、工作记忆以及空间辨别能力的改变。
因此,这种研究方法很快就引起各国神经科学家的关注,并将此法称为Morris水迷宫法。
国外有许多生产Morris水迷宫的公司,比如说德国的TSE公司,美国的Sandiegoinstruments公司、德国Biobserve公司、荷兰Noldus 等等;20世纪80年代末,中国科学院心理研究所建立了我国第一个Morris水迷宫实验室,并于90年代初建立了Morris水迷宫图像自动采集和处理系统。
国内随后出现了许多Morris 水迷宫生产厂家,比如说有上海吉量、上海欣软、上海移数等等,但是从国际到国内,Morris 水迷宫的硬件设备,软件系统,实验方法,以及实验数据的处理方法都不尽相同,因此,从Morris水迷宫法的发明到现在已有20余年的历史了,应该制定一套比较标准的实验准则了。
阿尔兹海默症小鼠评价指标和实验方法阿尔兹海默症(Alzheimer's Disease,AD)小鼠的常用评价指标和实验方法主要包括以下几种:1. 条件性恐惧实验:这是一种基于巴普洛夫的条件反射原理设计的实验,可用于评估小鼠对特定环境刺激的记忆能力。
实验中,小鼠被置于特定环境中,并给予一个声音信号作为条件刺激,紧接着给予电击作为非条件刺激。
小鼠在恐惧时会出现静止状态,即除了呼吸之外无其他任何活动的防御姿势。
随后在相同或不同的环境中测试小鼠静止状态的持续时间,以评估其条件恐惧程度和记忆能力。
该实验对于评估AD动物模型的焦虑状态和环境条件刺激记忆功能具有良好效果。
2. 放射状迷宫(八臂迷宫)实验:这是一种用于评估小鼠空间学习和记忆能力的实验方法。
在一个八臂迷宫中,小鼠需要通过探索各个臂来找到食物。
通过比较造模前后小鼠在迷宫中的表现,可以评估其空间学习和记忆能力。
该实验可以用于检测AD模型小鼠的空间认知障碍。
3. Morris水迷宫实验:这是一种评估小鼠学习和记忆能力的行为学实验。
在一个圆形水池中,小鼠需要寻找一个隐藏的平台以逃离水面。
通过记录小鼠寻找平台的时间和路径,可以评估其空间学习和记忆能力。
该实验可以用于检测AD模型小鼠的空间认知障碍。
4. 一般行为学观察:包括观察小鼠的精神状态、毛发、饮食以及开场行为(在新环境中的探究活动)等变化。
这些观察可以提供有关小鼠整体健康状况和行为表现的信息,有助于发现与AD相关的非认知行为变化。
5. 生物标志物检测:通过检测小鼠脑组织中淀粉样蛋白(Aβ)和tau蛋白等生物标志物的含量和分布,可以评估AD的病理进展。
这些标志物在AD 患者脑中沉积形成老年斑和神经纤维缠结,导致神经元死亡和认知障碍。
检测这些标志物可以帮助了解AD模型小鼠的病理状态,并可作为药物筛选的指标之一。
6. 神经电生理检测:通过记录小鼠脑电波活动和神经元放电情况,可以评估其神经功能和信息处理能力。
Morris水迷宫Morris水迷宫简介Morris水迷宫是英国心理学家Morris于20世纪80年(1981)代初设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段,其在AD研究中的应用非常普遍[3]。
较为经典的Morris水迷宫,测试程序主要包括定位航行试验和空间探索试验两个部分。
其中定位航行试验(place navigation)历时数天,每天将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中若干次,记录其寻找到隐藏在水面下平台的时间(逃避潜伏期,escape latency)。
空间探索试验(spatial probe)是在定位航行试验后去除平台,然后任选一个入水点将大鼠放入水池中,记录其在一定时间内的游泳轨迹,考察大鼠对原平台的记忆。
、自从20多年前Morris水迷宫被发明以来,很多学者都采用此方法研究动物的空间学习记忆能力,并在经典的Morris水迷宫基础上进行了很多改进,如Markowska发现如果在空间探索试验阶段中能让平台间歇性的出现,这样较经典的方案能更加敏感的地测量动物的空间记忆能力。
Arteni采用双平台的水迷宫,轮流升起其中一个平台的方法来测量动物的工作记忆等等。
Morris水迷宫广泛用于啮齿类动物的视觉相关的空间记忆和工作记忆的测量中,但是否适用于测量动物的长时记忆还存在争议。
实验原理虽然老鼠是天生的游泳健将,但是它们却厌恶处于水中的状态,同时游泳对于老鼠来说是十分消耗体力的活动,他们会本能的寻找水中的休息场所。
寻找休息场所的行为涉及到一个复杂的记忆过程,包括收集与空间定位有关的视觉信息,再对这些信息进行处理、整理、记忆、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隐藏在水中的站台,最终从水中逃脱。
Morris水迷宫系统的组成部分1、恒温游泳池1台,大鼠:直径1.2-2米小鼠0.8-1.6米2、大鼠站台,规格:直径12cm,高度在20~35cm之间3、小鼠站台,规格:直径8cm,高度在20~35cm之间4、电脑及分析软件,提供了路程、时间、百分比、专项指标等40种分析数据,在分析过程中可选择性分析,数据导EXCEL表格方便生物学软件统计。
Morris水迷宫实验一、实验用品的准备:毛巾或电吹风、染料(黑白鼠染料不一样)、细木棍、深泡沫盒二、实验前的准备:1. 在实验前一天晚上,把水迷宫和实验室打扫干净。
a. 水迷宫中动物粪便要处理干净b. 实验室内保证通风、无异味c. 实验过程中,要经常更换池中水,大鼠2-3天,小鼠6-7天。
2. 将水注入水迷宫中,水的高度在高过站台1cm左右(水深参考:大鼠:30CM;小鼠:20CM)。
注:公共平台水迷宫型号是XR-XM101,大鼠水池直径1600cm,池高50cm;小鼠水池直径1200cm,池高40cm;大鼠站台直径为20cm,小鼠为10cm,离池壁30cm。
3. 保持合适水温(参考:大鼠:25±1℃;小鼠:21~22℃),如果水温过低,请使用快速热水器将热水加入水迷宫中,调至合适温度,水迷宫池边有一个温度测量器,可显示池中温度。
4. 实验前三十分钟把动物带入实验室中熟悉环境。
5. 加入合适的染料(黑鼠加色素或牛奶,白鼠清水或黑墨水)到水中,然后打开实验电脑,通过监视系统人工调节光线来达到光的均匀分布。
如果加色素或墨水,拉上窗帘,打开室内灯,如果清水,开灯会反光,则关上室内灯,打开窗帘。
6. 检查标记物是否在固定的位置,整个几天实验中,标记物不可移动,实验人员将动物放入池中后,站到或坐到固定的位置。
三、正式实验步骤:将已经编好号的大鼠/小鼠依次放入水迷宫进行实验,具体操作如下:1. 实验人员A从鼠笼中取出小动物,然后快速放入水迷宫中。
注意:a. 将动物面向池壁放入水中;b. 快速将动物在水平面放下,不可直接扔下去;c. 入水点选4个象限的位置,每个入水点每组都检测,共四轮(按距离站台的远-近-远-近次序);d. 实验人员A把动物放入水迷宫后迅速离开。
2. 实验人员B通过监视系统观测到动物入水的一瞬间,然后快速的按下录象键。
两人配合,最好A喊一声,然后B准备,之后动物入水瞬间按键。
3. 设置录像时间为90s,当动物到达站台保持30s视为找到站台,这时录像自动停止;如果实验人员B通过监视系统观测到动物在规定时间内没有游上站台,马上通知实验人员A 用细木棍引导小动物上站台,让动物在站台上10s熟悉周边环境后取走;如果动物到达平台,未停留规定时间,也须重新在站台上熟悉10s后取走。
Morris水迷宫视频跟踪系统使用说明书Morris水迷宫行为学是医学院校开展药理行为学研究的一个经典实验,本软件采用最新图像处理算法,实时跟踪大小鼠运动轨迹,得出小鼠在设定区域内经过的路径和所花的时间以及其它相关数据,通过这些定量数据,供实验人员分析,得出精确的结论。
该系统在进行图象计算分析的时候,对鼠无需染色,即可辨别,并且采用了最先进的图象压缩技术,用户可以长时间记录图像且暂用硬盘空间极小。
并且提供事后图像分析的功能,便于用户反复分析,以得到最精确的结论。
另外该系统包含一套严格的图象定位方法,使得实验结果误差最小化。
该设备由成都仪器厂制造并生产。
软件界面简介➢视频显示区显示摄像头捕捉视频的整个范围,我们默认定义为640X480分辨率采集图像。
并且显示4个观察桶区域的定义范围。
➢视频控制区控制视频采集、暂停、记录、停止、设置、回放等功能。
➢轨迹显示区显示跟踪到的大(小)鼠运动的轨迹,并且显示其相对坐标值和活动区域等信息。
➢时间轴控制区当记录视频状态时,用于显示记录轨迹时间长度。
当分析视频状态事,用于显示记录总时间长度,并可以拖动滚动条定位视频时间位置。
➢实验信息显示区该区域用于显示水迷宫设置状态和信息参数。
➢实验数据管理区用于显示其定义的数据库所包含的所有记录的视频轨迹和统计结果所用到的统计方法。
完整实验步骤➢设置数据(数据库)保存空间状态。
该软件采用目录数据库保存方式。
目录数据库的意思是,首先你需要定义一个总目录来保存你所有的视频和轨迹、实验信息数据。
实验目录,其次你可以定义属于你自己的实验目录名称路径。
下面我们做详细说明:选择菜单“参数->设置数据库目录路径”,弹出如下对话框。
选择一个硬盘目录作为你的数据库“总目录”例如我们选择“D:\BMP”作为数据库总目录。
那么你所有的实验目录和数据都保存在这个目录下,以后你可以直接到该目录下寻找文件。
下面我们需要定义属于你自己的实验项目(目录),点击工具条上的“”弹出设置对话框。
Morris水迷宫行为测试
2011.7.5 本实验分为两部分,包括定位航行实验、空间探索实验两个实验程序。
1.定位航行实验
用于测量大鼠对水迷宫的学习能力。
第一天让大鼠自由游泳,上、下午各1次。
第二天开始对各大鼠进行Morris水迷宫测试,Morris水迷宫中安全平台放置一固定象限,离池壁20cm。
在测试前给大鼠头部涂抹黄色的苦味酸作标记,向水迷宫水池中加入适量二氧化钛粉,再加自来水至水面高出安全平台1cm,使池水为不能明显见到安全平台的不透明乳白色。
水温保持在24℃~25℃。
实验室保持安静,窗户遮以不透光窗帘,室内以恒定日光灯照明,亮度均等,水池周围参照物在进行水迷宫试验的几天时间内位置保持不变,大鼠游泳时试验者穿着工作服。
将大鼠面向池壁放入水中,每天测试1次,每只每次测试2分钟,连续5天,记录大鼠寻找并爬上平台所需时间(逃避潜伏期),。
如果大鼠在2分钟内未找到平台,须将其引至平台,这时逃避潜伏期记为2分钟,每次训练后让其在平台上停留15秒。
若大鼠在2分钟之内找到平台,也让其在平台上站15秒,这样结束一次测试。
2.空间搜索实验
用于测量大鼠学会寻找平台后对平台空间位置记忆的能力。
在测试第6天,将安全平台移走,使大鼠在无平台情况下寻找记忆中的平台。
每只大鼠只游2分钟,分别记录第一次经过平台的时间(潜伏期)和每只大鼠在1分钟内经过平台的次数。
Morris水迷宫简介Morris水迷宫是英国心理学家Morris于20世纪80年(1981)代初设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段,其在AD研究中的应用非常普遍[3]。
较为经典的Morris水迷宫,测试程序主要包括定位航行试验和空间探索试验两个部分。
其中定位航行试验(place navigation)历时数天,每天将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中若干次,记录其寻找到隐藏在水面下平台的时间(逃避潜伏期,escape latency)。
空间探索试验(spatial probe)是在定位航行试验后去除平台,然后任选一个入水点将大鼠放入水池中,记录其在一定时间内的游泳轨迹,考察大鼠对原平台的记忆。
自从20多年前Morris水迷宫被发明以来,很多学者都采用此方法研究动物的空间学习记忆能力,并在经典的Morris水迷宫基础上进行了很多改进,如Markowska发现如果在空间探索试验阶段中能让平台间歇性的出现,这样较经典的方案能更加敏感的地测量动物的空间记忆能力。
Arteni采用双平台的水迷宫,轮流升起其中一个平台的方法来测量动物的工作记忆等等。
Morris水迷宫广泛用于啮齿类动物的视觉相关的空间记忆和工作记忆的测量中,但是否适用于测量动物的长时记忆还存在争议。
应用领域Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。
被广泛应用于学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学及行为生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学等领域,在世界上已经得到广泛地认可,是医学院校开展行为学研究尤其是学习与记忆研究的首选经典实验。
Morris水迷宫其最主要的附件之一就是水池,水池的质量及功能是实验不可却少的部分,在实验中水温的温度是实验的关键,淮北正华生物仪器设备有限公司生产的恒温水池是国内唯一有此功能的,其温度控温,及准确度已达到先进水平。
实验原理虽然老鼠是天生的游泳健将,但是它们却厌恶处于水中的状态,同时游泳对于老鼠来说是十分消耗体力的活动,他们会本能的寻找水中的休息场所。
寻找休息场所的行为涉及到一个复杂的记忆过程,包括收集与空间定位有关的视觉信息,再对这些信息进行处理、整理、记忆、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隐藏在水中的站台,最终从水中逃脱。
淮北正华生产的Morris分析软件[1]Morris水迷宫的组成部分1、恒温游泳池1台,大鼠:直径1.5米小鼠1.2米2、大鼠站台,规格:直径12cm,高度在20~35cm之间3、小鼠站台,规格:直径8cm,高度在20~35cm之间4、电脑及分析软件,提供了路程、时间、百分比、专项指标等40种分析数据,在分析过程中可选择性分析,数据导EXCEL表格方便生物学软件统计。
性能介绍Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置觉和方向觉(空间定位)的学习记忆能力。
编辑本段系统特点◆采用视频摄像跟踪技术,实现了实验过程的自动化,避免了人工计数引入的主观误差和对实验动物的干扰,增加了实验结果的真实性和可靠性;◆采用视频追踪技术,提取出Morris水迷宫实验中实验动物的运动轨迹,并据此计算出丰富的行为学定量指标,实现了Morris水迷宫实验的定量化、精确化和客观性,增加了实验结果的可信性;◆Morris水迷宫的尺寸规格按照Morris本人的设计,采用玻璃钢制作,可长期使用,视频摄像系统固定在特制的支架上,可拆卸,方便实验;◆视频文件格式支持A VI和MPEG-4压缩格式,MPEG-4文件的压缩比率高,可有效减少存储空间,有利于进行长时间实验;◆面向科研和计算机辅助教学(CAI),能够储存原始的视频图像,并提供完整的实验数据库功能,作为研究的真实记录和今后进行教学演示的素材;◆可在星光条件(0.01Lux)下进行视频分析(包括实时分析),对动物的干扰更小,星光条件符合啮齿类动物(例如大鼠、小鼠)的生活习性;◆采用开放式、模块化设计,系统可扩展性强,可外接其他的分析模块,轨迹点坐标序列数据和指标结果可导入到Excel,便于用户在Excel、SPSS、SAS等分析统计软件中作进一步分析处理;◆分析灵活,支持时段分析,支持定时终止和人工终止,并具有丰富的显示方式,能对动物的运动情况采用轨迹图、参数指标、曲线、直方图等多种显示方式,并可生成完整的报告,供打印输出;◆空间分辨率最高可达640x480像素,时间分辨率最高可达25帧/秒(常用15帧/秒),测量所得的指标结果精度高。
实验室里的Mirris水迷宫仪器编辑本段提供指标○观察时间○动物搜索策略○总路程○平均速度○上台时间(潜伏期)○初始角○上台前路程○上台前平均速度○穿越平台的次数○上台情况的总结○运动轨迹图(.BMP格式)○四个象限逗留的时间和路程○中央逗留的时间和路程○周边逗留的时间和路程○平台周边逗留的时间和路程等编辑本段应用领域学习记忆、老年痴呆、海马/外海马研究、智力与衰老、新药开发/筛选/评价、药理学、毒理学、预防医学、神经生物学、动物心理学、行为生物学及时辰生物学等多个学科的科学研究和计算机辅助教学(CAI)。
【讨论】水迷宫实验前一天应该怎么做水迷宫正式实验开始前一天,是否需要让大鼠在水中试游一下,具体应该怎么操作呢,看到有人说让大鼠自由游泳1min,在这个过程中需要引导大鼠上平台么,是在什么时候引导呢?各人体会这一个过程对后面的实验影响很大。
很多protocol里面都说需要让大鼠在迷宫中适应性游泳一次,让其熟悉环境,1至三分钟均可,上平台一般是在实验时间结束时还未找到时给予引导。
依我做的实验体会,这一过程对后面的影响并不大,老鼠是种非常聪明的动物,只要训练时严格按照程序进行,大部分都会很快的找到平台的。
具体的训练期程序很多文献及仪器说明书都有,等你做了实验就会有自己的体会了。
做的时候遇到了一些问题,一是动物之间的个体差异很大,标准差大概在28±10s左右,二是训练后潜伏期并没有随训练次数增加而缩短,而是基本没有什么变化,(我做了3天,每天的对照组潜伏期平均值基本差不多。
)不知道是不是和我在预适应的时候让他们游泳的时间不一样有关。
请问在实验中还需要注意些什么问题以保证少受外界因素的影响?我们在做的时候,并不做预适应的,在第一次训练时,5分钟结束后倘若大鼠还未找到平台,就拿棍子引导它一下,以后的学习及记忆的过程中均如此。
我们一般要做6天才基本结束,第6天撤台。
动物的个体差异一般都比较大啊,不过正常对照组要好一些的。
在试验过程中尽量保持条件一致,另外,一定要平行。
因为时间很长,尽量保持各组的时间一致。
对,还有人的站位,尽量离水迷宫远一些,防止大鼠将你当作参照物,造成视觉混淆。
请教一下,看来大家都是作关于记忆方面的,不知道大家所用的分子生物学指标都是什么了?除了检测神经递质还有别的吗?都是检测哪些具体的又是怎么做的了,大家讨论下。
谢谢了。
恰好有一份水迷宫的文献,讲的非常好。
共享给大家related forms of learning and memory.pdf.part1.rar (100.0k)文件较大,分卷压缩了related forms of learning and memory.pdf.part2.rar (96.72k)请教一下,看来大家都是作关于记忆方面的,不知道大家所用的分子生物学指标都是什么了?除了检测神经递质还有别的吗?都是检测哪些具体的又是怎么做的了,大家讨论下。
谢谢了。
检测海马及边缘系统的胆碱能神经元丢失状况老年斑和神经元纤维缠结经过学习几次之后,大部分鼠都能正确找到平台,而且潜伏期随着次数的增加而缩短,很明显的。
3天太少了,鼠们基本上还没学会呢。
protocol中的一般实验程序所被采用的7天程序,3天是少了,附件有水迷宫的中文程序,里面有具体的程序包括实验天数,可能对你有所帮助。
Morris水迷宫实验.doc (52.0k)Morris水迷宫实验(一)目的和原理为了研究在疾病条件下空间记忆(Spatial memory),工作记忆(Working memory)和空间辨别能力(Spatial diariminability)的变化,可采用Morris水迷宫。
Morris水迷宫是一种训练大鼠在水箱中游泳并找藏在水下逃避平台的实验方法。
由于没有任何可接近的线索以标志平台位置,所以动物的定位能力需应用水迷宫外的结构作为线索。
学会是指动物能够在短时间内找到平台。
尽管啮齿类动物可以通过非空间策略发现平台,但采用空间策略最有方式,只需少量的实验,就可培养年轻动物的空间策略。
(二)实验装置应用于Morris水迷宫的水池是一个圆柱体,大小有两种:一种是Morris最初设计的“经典”水池。
这种水池的直径为1.32m,高度为0.60m。
第二种为目前改进的水池,直径为2.14 m,高为0.40 m。
前一种水池水深为0.40 m,后一种为0.25 m,水池的内部为均匀的乳白色,不得有任何的标记。
采用适当的恒温设备使水温保持在26±1℃。
这两种水池均在各国实验室广泛使用,研究者可根据具体情况,选择其一。
水池应放在坚固的平台上,并且有良好的注水和排水设备。
一般将水池置于坚固的、可移动支架较好。
这样不仅仅便于水迷宫的安置,而且有利于摄像头位置的调整。
但是,一旦水迷宫的位置确定,就不要轻易变动,尤其在一轮水迷宫的测试中,位置绝对不能改变。
沿水箱边缘相等分布的四个点作为起始点,这样水箱就被分四个相同象限(四分之一园),一个小的平台位于某一个象限的中央。
在进行训练(参照记忆)时间(数天),平台必须放在绝对相同的位置。
根据实验的不同,平台可以是藏于水面下(水面下1 cm)而不可见(Hidden platfarm),也可以露出水面上(水面上1cm)而可见(Cueing produce),也有采用两个平台(Two platform task),其中一个平台可提供逃避,另外一个一触即下沉,这两个平台都是可见平台,而且外观和高度完全一样。
因此,Hidden platform通常采用乳白色,与水池、水(加有牛奶)颜色的一致,使平台藏于水面下而完全看不见。
与此相反的是,Cueing produce和Two platform task为黑色或黑白相间的条纹,使平台露于水面之上而醒目。
图10-14为示意图。