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中国动物保健2021.03肉毒梭菌毒素通常存在于罐头、腐败的饲料、骨头等处，1896年首次从腊肠中毒的患者体内分离得到了肉毒梭菌，而后该病在全世界范围内时有发生，牛羊等草食动物的易感性最高，其次是猪，人也能被感染，故肉毒梭菌中毒症为人畜共患病。
1病原肉毒梭菌为该病的主要病原，这一细菌为有运动能力的腐生性芽孢杆菌，是梭菌属的重要成员之一[1]，是革兰氏阳性菌，专性厌氧，在环境温度为30～37℃下生长最为快速。
肉毒梭菌可以分为8个血清型，其中A 型、B 型、E 型以及F 型可以造成人肉毒梭菌中毒，主要感染牛的血清型为D 型。
肉毒梭菌的毒素是目前已知的所有天然毒素中毒性最强的物质。
2流行特点该病夏季或秋季较为常发。
该病的主要传染源是患病牛和带菌牛，传染源肠道内会有大量的细菌寄存，而后随着粪便被排出体外，变为芽孢，其芽孢在土壤、水源、饲料、粪便等环境中可长时间存活。
此外，发霉的饲料、腐败的动物遗体等也存在较多的肉毒梭菌。
这一疾病通常是膘情较好，采食量大的牛只发病。
3临床症状肉毒梭菌中毒症潜伏期的长短主要和动物摄入肉毒梭菌毒素的量有关，普遍在4h 至数天不等。
肉毒梭菌毒素通常经消化道进入牛只体内，而后被吸收进入中枢神经系统，损伤延脑神经核，毒素也可以作用于神经肌肉结合处，抑制单间神经能末梢神经释放乙酰胆碱，从而对运动神经的传导起到了阻断作用，引起患病牛肌肉麻痹和延脑麻痹的症状。
患病初期，病牛表现为吞咽困难，咀嚼功能受阻，随后出现舌头外伸，流涎[2]，瞳孔散大，步态僵硬，排便干硬，困难，触诊腹部有一定的疼痛感。
发病后期，通常会因肌肉松弛或麻痹引起运动困难，牛长时间趴卧，最后不能站立。
剖检患病牛可以看到瘤胃内有一定的杂物，瓣胃内容物干硬，皱胃内一般仅有少量的食物残渣。
支气管内有泡沫样黏液，肺脏充血水肿，肝脏肿大，质脆。
4诊断根据流行病学特点可以进行大致的诊断，临床上应当配合实验室诊断技术对该病进行进一步的诊断。
肉毒梭菌食物中毒诊断标准及处理原则肉毒梭菌是一种产生肉毒毒素的细菌，常常存在于土壤和沉积物中，也可存在于一些动物肠道中。
当食物受到肉毒梭菌的感染后，细菌会产生肉毒毒素，这种毒素能够引起食物中毒，且肉毒毒素是一种非常强力的毒素，只需少量就能够引发严重的中毒症状。
肉毒梭菌引起的食物中毒通常被称为肉毒梭菌食物中毒，该中毒一旦发生，病情严重且很容易传播。
对于肉毒梭菌食物中毒的诊断标准和处理原则至关重要，以便能够迅速检测和处理中毒病例，防止疾病的扩散。
一、肉毒梭菌食物中毒的诊断标准1. 病史和症状分析：患者通常在食用受感染食品后6-48小时出现中毒症状。
症状包括恶心、呕吐、腹泻、腹痛、头痛、眩晕、视力模糊、眼肌麻痹、喉部肌肉无力等。
当病人有食用可能感染肉毒梭菌的食物，并出现与肉毒梭菌食物中毒相关的症状时，应怀疑为肉毒梭菌食物中毒。
2. 实验室检查：可通过检验患者的血液、呕吐物、粪便等标本，来确定肉毒梭菌是否存在。
毒素测定可以通过孵育血清、胃液等进行，也可以通过PCR技术来进行。
二、肉毒梭菌食物中毒的处理原则1. 紧急处理：一旦发现中毒症状，应立即就医。
病人被送入医院后，需要进行一系列的治疗措施，以防止中毒症状的进一步发展。
2. 及时排除毒素：采取洗胃、导泻等措施，以尽快排出体内的肉毒毒素。
要保持充足的饮水量，以加速体内的毒素排出。
3. 抗毒素治疗：根据病情严重程度，可以使用抗毒素进行治疗。
肉毒毒素抗毒素可用于中毒的早期治疗，能够中和体内的肉毒毒素，减轻病情。
4. 对症治疗：根据个体病情，对症给予相应的支持性治疗。
如对呼吸系统受损的患者可给予呼吸机辅助通气；对眼肌麻痹患者可给予眼护理，定期滴眼液等；对患者出现的其他症状，也需给予相应的支持性治疗。
5. 预防传播：减低疾病传播的风险是阻断疾病扩散的关键。
应隔离患者，防止疾病传播给其他人。
要对可能被肉毒梭菌污染的食物进行严格的检测和控制，以防止重新感染。
肉毒梭菌食物中毒的诊断标准主要是根据病史和症状分析，结合实验室检查结果来确定。
特种经济动植物2019年第8期水貂肉毒梭菌中毒症的诊治●朱秋艳(乐亭县农业农村局河北唐山063600)摘要：水貂肉毒梭菌病是由C型肉毒杆菌毒素引起水貂瘫痪、呼吸困难、尿失禁等肌肉痉挛症状的一种剧烈的细菌毒素中毒性疾病，是目前已知的毒性最强的细菌性毒素，对水貂养殖业危害极为严重。
本病虽然在水貂养殖一线发病率较低，但是死亡率几乎可达100%，近几年发病有所增多，而且临床症状出现细微变化。
本文以一例水貂肉毒梭菌中毒症的诊治经验与广大水貂养殖同仁分享，以供参考。
关键词：水貂；肉毒梭菌；中毒症；诊治1发病背景2018年7月份，乐亭县一存栏1000只的养殖场出现公貂瘫痪、摇头晃脑、尿湿等症状，进而发生死亡的情况，每天死亡3~8只，后期母貂也开始出现相同症状并有零星死亡，当地兽医初步诊断为尿结石，建议其增加饮水并在饲料中添加冰醋酸、阿莫西林等消结石抗感染药物，使用5d后症状并未缓解，公貂和母貂死亡数量开始增多，每天死亡10多只，截至问诊前，已死亡水貂110余只。
经了解，水貂饲料主要是海杂鱼、鸡架、鱼排、玉米粉和维生素添加剂。
2病理变化技术员到达现场，发现死亡水貂呈瘫软状（见图1），个别貂只有流涎情况，而且采食量较大的公貂死亡较多。
剖检病貂发现，肺脏潮红，肝脏肿大（见图2）。
脾脏极度肿大呈黑色（见图3），肾脏充血肿大，脑部正常，肠道内无粪便，颜色正常（见图4）。
图1图2图3图43实验室诊断采集病死貂3只进行实验室检测，通过胃肠道内容物厌氧培养及小白鼠动物试验以及肝、脾、肺、肾进行细菌分离，结果发现，厌氧培养呈现阳性，镜检发现大量的G+杆菌。
小白鼠试验中，5只小白鼠均出现精神萎靡，其中3只死亡，在死亡小鼠肠道内分离出相同的G+杆菌，肺脏、肾脏均未分离到细菌，脾脏及肝脏分离出少量的G+杆菌，同时经生化鉴定，初步判断为肉毒梭菌中毒症。
4治疗措施再次与畜主沟通后得知，鱼排是1月份购买，保存在冷库，使用时鱼排有轻微发黏情况，适当降低了使用量但是并未更换。
2020.2作者简介:戴正浩(1979.12-),男,山东省青岛市人,大学本科,研究方向:羊、奶牛的饲养管理,反刍动物营养。
羊肉毒梭菌中毒症诊断和防治措施戴正浩祝贵华郝海玉(山东省青岛市畜牧兽医研究所266100)摘要:羊肉毒梭菌毒素中毒症出现的原因是肉毒梭菌毒素进入机体后造成的一种运动神经麻痹疾病,如果动物不慎食入含毒素的饲料将造成该种病毒的发生。
该疾病在全世界都有分布,在我国西北地区较多,一旦发生该疾病将对养羊业造成严重的影响,文中介绍诊断方法和防治措施。
关键词:羊肉毒梭菌毒素中毒症;诊断;防治措施1病原肉毒梭菌是一种腐物寄生型专性厌氧菌。
该种病菌对胃酸和消化酶的抵抗力比较强,胃肠道不会被破坏。
此外,该病毒对高温有一定抵抗力,即使在100℃下需要经过15~30min 才能消灭。
如果该病毒在动物尸体、骨骼和饲料中将存活几个月。
2流行病学肉毒梭菌很容易感染多种动物,如单蹄动物和家禽反刍兽,而猪不容易感染。
兔和小鼠比较容易感染。
该疾病的病发多数是因为动物在食入饲料过程中将病菌吞入体内,在一般情况下,该病菌不会通过患病动物传给人类。
相关的研究显示,在草原饲料青黄不接时节,因为草料缺乏,造成母畜体内流失大量钙、磷,而且母畜喜好舔舐动物尸骨,在一定程度上增加了患病可能性。
此外,该疾病的发生和土壤、区域等都有一定关系。
如果温度适合将在饲料中产生大量肉毒梭菌,尤其是温暖季节,该疾病的发病率高[1]。
3主要症状及病理变化3.1临床症状该疾病的潜伏期为4~20h,有的甚至达到数天。
该疾病的主要症状是神经麻痹,先从头部开始,之后扩展到全身。
该疾病的主要症状是肌肉麻痹和酸软,进食无力,慢慢不能采食。
舌头呈下垂状,有口水流出。
不愿意睁眼睛,对外界反应比较迟钝。
走路稳,到后期不能站立,卧地不起。
此外,瘤胃蠕动比较差,排便也不好,同时有腹痛症状,严重的将造成呼吸困难,之后可能因呼吸麻痹而死亡;如果是急性的将在数小时内死亡,死亡率达到70%~100%;如果是轻度中毒将渐渐恢复。
肉毒梭菌毒素中毒症肉毒梭菌毒素中毒症简称肉毒中毒,是因吸收肉毒梭菌毒素而发生的一种人畜共患的中毒病。
临床上以运动神经中枢麻痹和延脑麻痹为特征。
本病世界各国都有发生,但不常见。
1960年新疆曾发生马的肉毒梭菌中毒症,1987年春节新疆塔城发生一起人的肉毒梭菌中毒症。
（一）病原肉毒梭状芽孢杆菌(Clostridium botulinum,简称肉毒梭菌)属于为专性厌氧菌梭状芽胞杆菌属，革兰氏阳性杆菌，有鞭毛、形成芽孢，芽胞比繁殖体宽，呈梭状。
单个或成短链排列，运动性较强，顶端芽孢呈网球拍状。
肉毒梭菌广泛分布于自然界中，主要存在于腐败变质的肉类、鱼类等饲料中，它在厌氧环境下可产生一种强力的外毒素——肉毒毒素(botulinum toxin，BTX)，可抑制呼吸导致死亡，这是迄今为止所知的最毒的自然生成的毒素之一。
按其抗原的不同可将肉毒毒素分为7个血清型即A、B、C、D、E、F和G型, 其中C型还分为Cα和Cβ两个亚型。
各型毒素均能引起人或动物的中毒, 而在食物性肉毒中毒中, 因A 型毒素强烈的亲神经性, 故引起的中毒更为严重，C 型肉毒梭引发动物、禽类肉毒中毒，极大的影响了动物性蛋白食料的加工和储藏及使用安全性（二）免疫所有温血动物和冷血动物对肉毒毒素均有易感性。
家畜中以马类动物易感性高，猪易感性低，其它畜禽易感性介于其间。
各型肉毒梭菌毒素均可致病，C型肉毒梭菌毒素为各种畜禽及动物肉毒毒素中毒症的主要病因。
用各型毒素或类毒素免疫动物，只能获得中和相应型毒素的特异性抗毒素。
在C型毒素中，Cα毒素只能被本亚型抗毒素中和，Cβ毒素则既能被C β抗毒素中和，也能被Cα抗毒素中和。
各型或亚型菌虽产生其特异性毒素，但也存在交叉产生毒素的现象。
如Cα亚型除产生Cα毒素外，还能产生少量Cβ毒素和D型毒素；D型菌也可产生少量Cα毒素；F型菌和E型菌也能相互产生少量对方的毒素成分。
同型的抗毒素能很好地保护动物抵抗肉毒毒素中毒。
X u m u s h o u y i肉毒梭菌中毒症的毒素会在饲料、腐败的植物、骨头内和熟肉罐头中存在，该疾病的患病率较高，是牛养殖业中继牛出血性败血症的又一个具有危害程度较高的疫病。
肉毒梭菌中毒症会带来渐进性的全身肌肉麻痹和瘫痪，一经患病则具有较大的危害性，不仅威胁了牛群的健康，也给养殖户带来很大的经济损失。
肉毒梭菌中毒症因牛进食因肉毒梭菌污染后的饲料，或者舔舐尸骨后引起的中毒性疾病，主要特征为运动神经麻痹和延脑麻痹。
在世界范围内均有该疾病发生，其中以牛羊等食草动物具有较高的易感性，人群也会被感染。
本文主要就牛肉毒梭菌中毒症的病原、症状、诊治等方面展开介绍，以此为该疾病的防治提供建议。
一、肉毒梭菌中毒症的相关概述1、病原顾名思义病原为肉毒梭菌，作为腐生性芽孢杆菌，带有运动能力，属于梭菌类型之一，作为革兰氏阳性菌，具有较好的厌氧性，在温度30℃~37℃时可达到生长的高峰期。
血清分型有8类，其中A 型、B 型、E 型、F 型均可引起人肉毒梭菌中毒，D 型为牛群感染的主要血清。
该病毒为当前已知的天然毒素中毒毒性最高的物质。
2、流行病学该疾病多在秋季和夏季发病，传染源为患病牛和带菌牛，在感染肉毒梭菌后会在肠道内寄存大量的细菌，跟随排泄排出体外，转变为芽孢，在外界环境中饲料、土壤、粪便和水源等中可存活较长的时间。
此外腐败的动物遗体、发霉的饲料等也存在肉毒梭菌。
分析患病牛群，以膘情较好和采食量的牛为主。
3、临床症状摄入肉毒梭菌的含量高低关系到中毒症潜伏期的时间长短，一般在4天至数天不等。
经消化系统进入机体后，经吸收作用于中枢神经，进而对脑神经核损伤，也可在神经肌肉结合处产生作用。
患病初期表现为咀嚼功能受阻，吞咽困难，有舌外伸、流涎水、步态僵硬、瞳孔散大、排便困难等表现，对腹部触诊时有疼痛感。
患病后期因肌肉松弛或者麻痹引起运动困难，患病牛有长期趴卧，不能站立的表现。
二、牛肉毒梭菌中毒症的诊断根据流行病学特征可大致诊断，考察养殖环境，因肉毒梭菌芽孢在居留场所广泛存在，如各类植物、腐败尸体、粪便、动物肠道内容物等。
肉毒梭菌中毒症【病原及流行病学】:病原肉毒梭菌(Clostridium Botulinum)是一种专性厌氧菌，革兰氏阳性，有鞭毛，能运动，两端钝圆，长4～6μm，宽O.9～1.2μm，单个或成双排列，在不利的条件下能形成芽孢，芽孢位于菌体的次极端，比菌体粗。
有时形成长丝状或链状，有时能见到舟形、带把柄的柠檬形、蛇样线状、染色较深的球茎状，这些属于退化型。
当菌体开始形成芽胞时，常常伴随着自溶现象，可见到阴影形。
肉毒梭菌具有4～8根周毛性鞭毛，运动迟缓；没有荚膜。
在固体培养基表面上，形成不正圆形，大约3mm的菌落。
菌落半透明，表面呈颗粒状，边缘不整齐，界线不明显，向外扩散，呈绒毛网状，常常扩散成菌苔。
在血平板上，出现与菌落几乎等大或者较大的溶血环。
在乳糖卵黄牛奶平板上，菌落下培养基为乳浊，菌落表面及周围形成彩虹薄层，不分解乳糖；分解蛋白的菌株，菌落周围出现透明环。
肉毒梭菌的生化性状很不规律，即使同性，也常见到株问的差异。
肉毒梭菌发育最适温度为25～35℃，培养基的最适的酸碱度为pH6.0～8.2。
新鲜培养基的革兰氏染色为阳性，产生剧烈细菌外毒素，即肉毒毒素。
病原为肉毒梭菌，其产生的毒素有A、B、Ca、Cb、D、E、F、G等8型。
A型毒素经60℃2min加热，差不多能被完全破坏，而B、E二型毒素要经70℃2min才能被破坏；C、D二型毒素对热的抵抗更大些；C型毒素要经过90℃2min曲口热才能完全破坏，不论如何，只要煮沸1min或75℃加热5～10min，毒素都能被完全破坏。
肉毒素有耐酸、耐胃蛋白酶和胰酶的作用，80℃时30min或煮沸5～20min才被破坏，在动物尸体、骨骼、腐烂植物、青贮饲料和发霉饲料及发霉的毒甘草中，毒素能保存多月。
若存在于固体食物里，需煮沸2h才能降解。
根据所产生的神经毒素的抗原性差异可将该菌分为A、B、C(Cα和Cβ)、D、E、F和G7型。
A型毒素见于肉、鱼和罐头食品；B型毒素见于各种肉类及其制品。
犬、猫对A型毒素易感性低，对C型毒素最敏感。
流行病学该病发生于世界各地。
犬、猫发病主要因摄食腐肉、垃圾中的动物尸体、腐败饲料和被毒素污染了的饲料、饮水而引起。
存在于动物消化道内的肉毒梭菌及其芽孢一般对动物没有危害，但在特定的条件下也可能产生毒素。
动物摄人毒素量少时可不发病，大群发病者亦不多见。
健康易感动物与患病动物直接接触亦不会受到传染。
食品在制作过程巾被肉毒梭菌芽孢污染，制成后未彻底灭菌，芽孢在厌氧环境中发育繁殖产生毒素，加之食前又未经加热烹调，人食人已产生的毒素而发生中毒。
易含肉毒毒素的主要食物有罐头、香肠、腊肠、发酵豆制品及甜面酱等。
肉毒梭菌的芽胞广泛存在于自然界，土壤、水、空气、动物肠道、粪便、腐尸、腐败饲料、各种植物以及发酵食物、变质肉品、变质罐头中都含有本菌，因此，人和动物的感染多来自自然界。
肉毒中毒一年四季均可发生。
肉毒梭菌在自然界的分布上具有某种区域性差异，显示出生态上的差别倾向。
A、B型的分布最广其芽胞广泛分布于自然界，各大洲的许多国家均有检出；C、D型的芽胞一般多存在于动物的尸体中，或在腐尸附近的土壤中；E型菌及其芽胞存在于海洋的沉积物、水产品的肠道内，E型菌及其芽胞适应于深水的低温，使E型菌在海洋地区的广泛分布。
但是，越来越多的调查结果表明，除G型菌之外，其他各型菌的分布都是相当广泛的。
【症状】：犬、猫中毒后的症状及其严重程度取决于摄入毒素量及其动物的敏感性。
潜伏期数小时至数天，症状出现越早，说明中毒越严重。
病初，犬、猫出现进行性、对称性麻痹，多先发于两后肢，进而发展到两前肢，随后四肢瘫痪，俯卧在地，呼唤时尾巴尚可摆动。
猫反射性机能下降，肌肉张力降低，全身发软，下颌下垂，吞咽困难，流涎，但体温正常，意识清醒。
严重病例，眼睑反射迟钝，两耳下．垂，瞳孔散大，呼吸闲难，心悸，心律不齐。
中毒较严重的犬、猫大多数以死亡告终，轻微病例l～2周后可逐渐康复。
病理变化: 肉毒梭菌毒素主要作用于神经一肌肉结合点，动物死后剖检一般无特征性病理变化。
有些病例在咽喉及会厌部黏膜有灰黄色黏液性覆盖物，黏膜上有出血点。
胃肠黏膜有卡他性炎症和小出血点。
心内外膜有出血点。
有时肺部充血、淤血、水肿。
中枢和外周神经系统一般无肉眼可见病变。
肉毒梭菌生长和产毒的最适温度是25～30℃，而在人的体温条件下细菌表现为丝状，几乎不能产毒、芽胞也不会发芽。
肉毒中毒是由于误食含有肉毒毒素的食品而引起的纯粹的细菌毒素食物中毒。
该病的轻重和食人的量成正比，潜伏期几小时或数天，症状出现的越早说明中毒越严重。
病的症状为进行性发展，病初可见有呕吐、吐沫，发展为肢体对称性麻痹。
一般由后肢向前肢延伸，进而引起四肢瘫痪。
人和各种动物中毒后的症状有所不同，主要表现为：重症患者，如果不及时治疗和抗毒素特异治疗，多在2～4d死亡。
病犬一般体温不高、神志清醒、反射机能下降、肌肉张力降低；出现明显运动神经机能障碍。
由于咬肌麻痹，下颌下垂、流涎、咀嚼吞咽困难、两耳下垂、眼睑反射较差、视觉障碍、瞳孔扩大。
严重的犬可见膈肌张力降低，出现呼吸困难、心功能紊乱，死亡率很高。
临床上有最急性、急性和慢性3种类型。
1．最急性型不表现任何症状而突然发生死亡；2．急性型突然发生吞咽困难，卧地不起，头向侧弯，颈部、腹部和大腿肌肉松弛。
以后食欲及饮食消失，舌尖露于口外，口流黏性唾液，多数发生便秘。
但体温正常，知觉和反射活动仍存在，病情发展快者，1d之内死亡，慢者可延至4～5d。
3．慢性型除有急性型的症状外，常并发肺炎，最后常因极度消瘦而死亡。
各型病例死亡率都很高，尸体剖检时，无特征性眼观变化。
但也有少数自愈的。
【诊断】除了根据特殊的麻痹症状以外，应特别灌意肉毒梭菌及毒素检查。
因为只有通过肉毒梭菌及毒素的实验室检查，才能最后得到确诊。
1．肉毒梭茵的检验与分离鉴定程序(1)前增菌样品分别接种于疱肉培养基、TPGYF培养基，并分别与35℃、26℃培养7d。
(2)分离培养7天后，染色、镜检，观察菌的形态是否为典型的肉毒梭菌。
取1～2ml。
培养物加等量的酒精混合(或80％加热10min，)后在室温下培养1h，非蛋白分解型的肉毒梭菌，因其芽胞不耐热，不要采取热处理的方法。
用接种环涂划酒精处理液或热处理的培养物于小牛肝卵黄琼脂或厌氧卵黄琼脂平板上，厌氧培养48h，35℃。
典型菌落是隆起或扁平，光滑或粗糙，在卵黄培养基上用斜光检验时，菌落表面通常出现虹晕色(iridescence)，此光区称为“珍珠层”，C、D、E型菌通常有2～4mm黄色沉淀区围绕，A、B型菌通常显示较小的沉淀区。
挑取10个典型菌落，分别接种于疱肉培养基、TPGYT培养基，并分别与35℃、26℃培养7d，再取培养物按照肉毒毒素的检测方法即可。
生化反应试验，可以为鉴定做参考，以上肉毒梭菌的培养、分离、鉴定试验力求迅速，不要长时间接触空气，最好在厌氧条件下操作。
2．肉毒毒素的检测程序(1)初步的定性试验(小白鼠腹腔注射法)检验样品(可疑食品、饲料及病死动物的胃内容物等)经适当处理后取上清液，用明胶磷酸缓冲液稀释(1：5、l：10、1：100三个稀释度)后各取O.5mL．腹腔注射小白鼠；另取上清液100℃10min加热后注射小白鼠；另取上清液经胰酶处理后注射小白鼠；每个注射样注射2只小白鼠；注射后，定时观察小白鼠，连续观测48h；排除24h后死亡的白鼠和无症状死亡的小白鼠；48h后，如果除了经热处理后再注射样品的小白鼠未死亡，其余小白鼠均死亡的情况，重复试验，增加稀释倍数，计算最低致死量。
如用鸡做试验，分别取上述液体注射于两侧眼睑皮下，一侧供试验用，另一侧供对照，注射量均为0.1～0.2mL。
如注射0.5～2h后，试验的眼睑发生麻痹，逐渐闭合，试验鸡也于l0h之后死亡，而对照的眼睑仍正常，则证明有毒素。
豚鼠也可供试验用，取试验液体1～2mL给豚鼠注射或口服，同时取对照液体以同样方法和用量接种其他豚鼠。
如前者经3～4d出现流涎、腹壁松弛和后肢麻痹等症状，最后死亡，而对照豚鼠仍健康，即可作出诊断。
有些病动物的血液中也有较多的毒素，所以在发病以后，也可用其抗凝血液或血清0.5～1.0ml，注射于小鼠皮下，进行上述同样试验。
(2)中和试验可以为毒素定型。
用无菌生理盐水溶解冻干的抗毒素，取A、B、E、F 4种抗毒素注射于小白鼠体内；同时取未注射抗毒素的小白鼠做对照；注射抗毒素30min或1h后，注射不同稀释度(覆盖10、100、1000倍最小致死量)的含毒素样品，观察48h，如发现毒素未被中和，再取C、D型抗毒素和A～F多价抗毒素重复上述试验；如小白鼠死亡，应将含毒素样品稀释后再重复以上试验。
另外用血凝抑制试验、免疫荧光试验、PER试验也可以鉴定毒素的型。
(3)评价方法典型的肉毒中毒，小白鼠会在4～6h内死亡，而且98％～99％的小白鼠会在12h内死亡；24h后的死亡是可疑的，除非有典型的症状出现。
如果小白鼠注射经l：2或l：5倍数稀释的样品后死亡，但注射更高稀释度的样品后未死亡，这也是非常可疑的现象，一般为非特异性死亡。
食物中发现毒素，表明未经充分的加热处理，可能引起肉毒中毒。
检出肉毒梭菌，但未检出肉毒毒素，不能证明此食物会引起肉毒中毒。
肉毒中毒的诊断必须以检出食物巾的肉毒毒素为准。
确诊时，需在可疑饲料、病死动物尸体、血清及胃肠内容物内检测到肉毒梭菌毒素。
方法是采集胃肠内容物和可疑饲料，以1：2比例加人无菌生理盐水或蒸馏水制成混悬液，置室温l～2h，离心沉淀或过滤，取上清液或过滤液，分为两份：一份加胰酶处理激活，供毒素试验用；另一份则加热至100℃30min以破坏其毒素，作为对照组用。
第l组小鼠皮下或腹腔注射0.2～0.5ml上清液；第2组注射加热过的上清液；第3组先注射多价肉毒抗毒素，然后注射小加热的上清液。
如果被检材料中有毒素存在，则第l组试验鼠l～2d发病，有流涎、眼睑下垂、四肢麻痹，呼吸困难等症状，最后死亡，而第2、3组正常。
除了上述方法外，患肉毒梭菌毒素中毒的动物血清对小鼠的毒性可达20LD50/ml．因此，以患病动物血清接种于小白鼠亦有助于诊断。
【临床急救】治疗本病一般采取以下措施：(1)阻止毒素的吸收：立即停喂含有毒素的食物、饲料和饮水，灌服0.1％硫酸铜液催吐，然后用1％～2％NaHCO3溶液洗胃，再灌服1％的活性炭悬浮液或0.05％～0.1％高锰酸钾溶液以吸附或破坏胃肠道内毒素，最后灌服5％～7％硫酸镁液泻下排出毒素。
还可以采用其他各种方法帮助排出体内的毒素、例如投服泻剂或皮下注射槟榔素，进行温水灌肠，静脉输液，用胃管灌服普通水等。
(2)注射C型或多价抗毒素：犬4～8ml、猫2～4ml，肌肉或静脉注射，4～6h 重复注射1次。
(3)对症治疗：病的初期，可以静脉注射“九一四”，根据体重大小不同，剂量为0.3～0.5g，溶于10ml．灭菌蒸馏水中应用。
