尿皮质醇的检测

留24小时尿1.早晨7:00将第一次尿排出不要，此时开始计时（即晨起排空膀胱开始）2.7:00后开始排尿至小桶中，将白天夜间（24小时）尿都排至小桶中（同时第一次小便后加入防腐剂）3.次日早晨7:00或同一时间，将最后次尿排入小桶，告知护士并放在科室工人间指定位置。

护士会在小桶上写上你的名字、床号。

在留取标本期间不要喝浓茶、咖啡、吃巧克力、甘草等零食。

内分泌科空腹/憋尿超声检查1.空腹B超检查者，请您于检查前4-6小时禁食、水、药。

2.憋尿B超检查者，请您多喝水并憋尿。

3.同时有多项超声检查时，请先做空腹超声，后可以进食、饮水，再进行其他检查。

4.与您同时检查的患者较多，引导员会根据预约时间分批带领，请您在病房耐心等候,勿外出。

5.如果您有心慌、出汗等低血糖等症状，请立即联系护士。

6.糖尿病患者外出检查请随身携带糖块，饼干等食物以备必须时使用。

注意：对高危跌倒的患者必须有家属陪同内分泌科OGTT、馒头餐试验1.试验前三天，每天进食碳水化合物不少于150g，并有正常的体力活动。

2. 试验开始前禁食8小时，可少量喝水。

3. 空腹抽血后，将75g无水葡萄糖溶于300ml水中或两只白馒头在5分钟内服完。

4. 服葡萄糖或馒头后30分钟、1小时、2小时、3小时分别抽血，如需延长试验，则在服糖后4小时、5小时。

注意事项：1.整个试验必须禁食，禁止吸烟，禁止喝茶和其他饮料，避免剧烈运动。

2.葡萄糖水全部服下，如遇呕吐，量不足时应改期试验3.试验期间应避免精神刺激，心肌梗塞、脑卒中、感染、外伤、手术等应激状态下至少2周不能做此试验。

4.试验前应停用避孕药，噻嗪类利尿剂，β受体阻滞剂，甲状腺激素3天以上，正在服用糖皮质激素激素者不适于做糖耐量试验。

内分泌科肾上腺功能试验（一）隔夜1mg地塞米松抑制试验目的:观察皮质醇节律改变及有无皮质醇增多1.试验日的晚上12时准时口服地塞米松1mg。

2. 次日早上8时抽血清皮质醇。

EK8100-01Cortisol Competitive ELISA Kit检测试剂盒（酶联免疫吸附法）Catalog NumberEK8100-48EK8100-96定量检测血清、血浆和细胞培养上清中的皮质醇(Cortisol)浓度。

本产品仅用于科学研究，非诊断试剂，不能用于临床诊断。

一、产品介绍1.背景介绍皮质醇，也称为醋酸氢化可的松或化合物F，是糖皮质激素中的一种类固醇激素。

在人类中，它由肾上腺中的肾上腺皮质束状带产生，在压力和低血糖时释放，可作为压力的一个生物标志物。

皮质醇的产量与ACTH依赖的昼夜节律相关，在早晨达到峰值，随后逐渐降低。

皮质醇在很多基质中可被检测到，如血液、粪便、尿液和唾液。

血清中90-95%的皮质醇与蛋白结合，包括皮质类固醇结合球蛋白和血清白蛋白。

皮质醇主要参与代谢和免疫。

在代谢方面，它可促进糖异生、肝糖原沉积和降低葡萄糖利用率。

在免疫方面，作为重要的抗炎因子，在过敏、免疫抑制和疾病抵抗中发挥重要作用。

异常的皮质醇水平与许多状况有关，包括前列腺癌、抑郁症和精神分裂症。

身体组织中皮质醇过高是库欣综合征的诱因。

2.检测原理本试剂盒采用固相竞争酶联免疫吸附检测技术。

兔抗小鼠抗体预包被在高亲和力的酶标板上。

皮质醇特异性的单克隆抗体加入至孔中，经过孵育，与固相抗体结合。

洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的皮质醇和未标记的皮质醇或样本，竞争结合单克隆抗体上有限的结合位点。

在洗涤去除未结合的物质后，加入显色底物，颜色反应的深浅与皮质醇的浓度成反比。

加入终止液终止反应，在450nm波长(参考波长570-630nm)测定吸光度值。

本试剂盒已验证人、小鼠和大鼠血清样本，但其它物种的皮质醇预计也可被检测。

3.试剂盒检测的局限1)请在本试剂盒标示的有效期内使用。

2)试剂盒的试剂不能与其他批号的试剂或其他来源的试剂混合使用。

3)任何标准品稀释、操作人员、移液技术、洗涤技术、孵育温度、试剂盒保存时间的改变，都将影响结合反应。

cushing综合征名词解释医学解释说明1. 引言1.1 概述Cushing综合征是一种内分泌紊乱的疾病，主要特点是体内皮质醇水平过高。

它可以导致多种临床表现，包括肥胖、高血压、糖尿病等。

这个综合征通常由肾上腺皮质中的肿瘤或其他异常引起，导致过多的皮质醇激素产生。

1.2 文章结构本文将围绕Cushing综合征展开详细阐述。

首先我们会讲解Cushing综合征的定义和特点，包括其病因和主要症状体征。

接着我们将介绍Cushing综合征的诊断方法，包括临床表现评估、实验室检查指标和影像学检查方法。

此外，我们还会探讨Cushing综合征的鉴别诊断。

然后我们将深入探讨Cushing综合征的治疗方法，包括药物治疗方式、手术干预以及其他治疗方式和辅助措施应用情况分析。

最后，在结论部分我们将进行对Cushing综合征的总结和回顾，并提出未来研究的方向。

1.3 目的本文旨在提供深入了解Cushing综合征的相关知识，包括其定义、特点、诊断方法和治疗方式等。

通过对Cushing综合征的全面介绍，读者可以更好地认识这种疾病，并了解其对患者健康带来的影响。

此外，我们也将探讨未来研究方向，以期为进一步深入研究和治疗Cushing综合征提供参考。

2. Cushing综合征的定义和特点:2.1 定义:Cushing综合征是一种由于长期接触过多皮质激素引起的内分泌紊乱疾病。

它通常是由于肾上腺或下丘脑-垂体轴功能异常所致，导致体内皮质醇水平过高。

该综合征最初由美国神经外科医生哈维·威廉·康寧汉姆·卡甘（Harvey Williams Cushing）于20世纪初描述并命名。

2.2 病因:Cushing综合征的主要病因分为两种类型：原发性和次发性。

原发性Cushing 综合征主要是由于肾上腺产生良性或恶性肿瘤，导致大量皮质醇的过度分泌。

次发性Cushing综合征则是由于下丘脑-垂体轴功能障碍，导致垂体释放过多的促肾上腺皮质激素（ACTH），从而刺激肾上腺皮质增生和醇类激素分泌增加。

皮质醇分析步骤用ACCESS®免疫分析系统对人血清、血浆或尿液中的皮质醇的定量检测内容表原理 2 标本采集 2 试剂和必须品 3 定标 6 质控 6 检测步骤 6 结果7 检测的说明8 检测的注意事项8 参考文献9Beckman Instruments, Inc. • Chaska, MN 55318原理检测原理Access 皮质醇检测是一种竞争抑制的酶免疫方法，样品和兔抗皮质醇、碱性磷酸酶标记的皮质醇酶结合物和和包被有羊抗兔捕捉抗体的磁性颗粒按顺序被加入到反应管中。

样品中的皮质醇与酶结合物竞争与特异性的抗皮质醇抗体相结合，再与固相上的捕捉抗体结合。

孵育后在磁性分离系统去除未与磁性颗粒结合的其它物质。

最后在反应管中加入化学发光底物（Lumi-Phos* 530）, 已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测。

最后，对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品的对应关系而计算出样品中的皮质醇浓度，反应产生的光子与样品中皮质醇含量成反比。

概述皮质醇是主要的糖皮质激素，由肾上腺皮质产生和分泌，它影响(a) 蛋白、脂肪和碳水化合物的代谢，(b)维持肌肉和心肌的完整性，(c)抑制感染原和过敏原的活性(1)。

皮质类固醇结合球蛋白和白蛋白结合了肾上腺皮质产生的大概90%的皮质醇，结合的皮质醇在循环中是处于可激活的、但暂时没有活性的状态。

皮质醇的生物活性决定于循环中未结合的皮质醇的小片段 (2)。

促肾上腺皮质激素（ACTH）刺激肾上腺合成和释放皮质醇，垂体在下丘脑释放的促皮质素释放激素（CRH）刺激下产生和释放。

未结合的皮质醇在下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）中的下丘脑-垂体水平起到了一个负反馈的机制（3，4），另外，昼夜变化以及如致热源引起的发热、严重的精神病或创伤等压力会影响到肾上腺皮质的神经内分泌的的调节(1,3,5)。

皮质醇浓度的不正常改变可由于下丘脑、垂体或肾上腺的功能异常引起，如果没有明确诊断和治疗，该异常改变可导致严重的代谢平衡失常，会引起生命危险。

皮质醇质谱方案
皮质醇质谱是一种常见的生物学检测方法，它主要用于测量人体或
动物血液、尿液等样本中的皮质醇含量。

以下是皮质醇质谱分析的详
细方案：
1. 样品准备
（1）血液样品：采集3-5ml外周静脉血，使用3ml离心管收集，离心4000r/min，4℃下离心10min，取上清液。

（2）尿液样品：取10ml晨尿，室温保存，使用时倒入10ml离心管中，离心4000r/min，4℃下离心10min，取上清液。

2. 样品前处理
（1）血清样品：使用芯片加样器加样，每个样本加入10μL 0.1%三氯
醋酸作为蛋白沉淀剂。

混匀后离心，收集上清液。

（2）尿液样品：使用芯片加样器加样，加入10μl 0.1%三氯醋酸作为
蛋白沉淀剂，混匀后离心，收集上清液。

3. 皮质醇质谱检测
（1）设定质谱仪
将质谱仪设定为离子源ESI+模式，负离子多反应监测MRM方式，监测目标离子为Cortisol（豁免）361.4→121.0，内标离子为Cortisone （豁免）347.4→341.1。

（2）质谱分析条件
电压：4.5kV；雾化气体压力：40psi；干燥气体流量：10 L/min；干燥气体温度：350℃；碰撞能量：28V。

（3）数据分析
使用质谱分析软件对测定结果进行处理，得到皮质醇浓度值。

以上就是皮质醇质谱分析的详细方案，通过使用该方案可以准确快速地测定样本中的皮质醇含量，为生物学研究提供有力的实验支持。

磁微粒A2000皮质醇尿液样本检测流程-以本次为准
一、按照临床检验24小时尿液收集操作规范，采集待检者24小时尿液，并准确记录尿液量，按照每1000ml尿液中加入10g硼酸的比例，加入防腐剂进行防腐。

二、皮质醇尿液样本直接检测流程
1、加样量为25μl，检测的流程同皮质醇EDTA血浆样本检测流程。

3、检测加样方法、所用的试剂、拟合方法、计算方式等均同皮质醇血浆检测流程。

4、得到检测结果后，乘以24小时尿液量，为24小时皮质醇的总质量，例检测结果为5pg/ml，尿液量为2000ml，则24小时尿游离总皮质醇的质量为10μg/24h。

5、24h尿游离皮质醇直接检测正常范围可参考Beckman Access 2系统尿皮质醇直接检测参考范围50-403μg/24h。

三、皮质醇尿液样本抽提检测流程
1、取1ml防腐过的尿液，加入一试管中，然后加入1ml乙酸乙酯，高速涡旋混匀30s。

2、700g离心分离5mins，抽取上清乙酸乙酯层200μl，转移至一干净的玻璃试管中。

3、在适宜的氮吹仪器或空气通风条件下蒸发至玻璃管变干。

4、使用PH=7.4的PBS溶液，具体配方百度上可以查询到，取200μl PBS溶液，加入至已蒸发干燥的玻璃管中，高速涡旋混匀1min。

5、取经涡旋混匀的样本，进行检测，检测具体流程同同皮质醇EDTA血浆样本检测流程。

6、24h尿游离皮质醇抽提检测正常范围可参考Beckman Access 2系统尿皮质醇抽提参考范围21-111μg。

8mg地塞米松抑制试验操作流程注意事项：1、试验期间患者务必要保持相对恒定的进水量（包括食物的含水量），保证每天的尿量大致相当，并且24小时总尿量保证在1.5到2.5L之间。

否则会产生很大的偏差，影响结果的评判。

2、查24小时尿皮质醇基础值时也必须保持相对恒定的进水量。

3、尿液送检前务必将尿液混匀，否则会产生很大偏差。

4、此为大剂量（8mg）地塞米松抑制试验。

评判结果时一般以第二天的血皮质醇、尿皮质醇为准，将他们与基础值比较。

若血皮质醇测得值/基础值<36%，即血皮质醇被被抑制>64%，或尿皮质醇测定值/基础值<10%，即尿皮质醇被抑制>90%则诊断库欣病的特异性可达100%，并能排除异位ACTH综合征。

5、若患者第二天的血、尿皮质醇不被抑制，但第三天的血、尿皮质醇却被抑制了，则以第三天的结果为准进行评判，一般以服地塞米松后的血、尿皮质醇的最低值为准。

6、血皮质醇的抑制试验与尿皮质醇的抑制试验的结果相比较，血皮质醇的抑制试验结果要准确得多，而尿皮质醇的抑制试验结果常因24小时尿量小于1.5L或大于2.5L，或每天尿量相差太大，或送检标本未经混匀而偏差太大，故尿皮质醇的结果很不可靠。

7、测血、尿皮质醇基础值前5天以上必须未用糖皮质激素、ACTH、避孕药等。

地塞米松抑制试验实验前五天也必须停用一切肾上腺皮质激素、ACTH、避孕药等。

8、小剂量地塞米松抑制试验的服药方法为第一天8、16、24时分别服1片地塞米松，第二天8、16、24时再分别服1片地塞米松，其余操作与8mg地塞米松抑制试验相同。

其实标准方法应该是第一天8时起，地塞米松0.5mg，q6h，连用两天。

但是地塞米松为每片0.75mg，临床应用时将其掰开后大小有偏差。

9、1mg地塞米松抑制试验，用于鉴别是否为单纯性肥胖，若能被抑制，则为单纯性肥胖所致的血尿皮质醇增高。

10、小剂量地塞米松抑制试验与大剂量地塞米松抑制试验时间间隔起码>5天，否则会影响后一个试验的结果评判。