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3中外医疗中外医疗I N FOR I GN M DI L TR TM N T2008N O .26CH I NA FOR EI G N M EDI CAL TREATM ENT综述铜绿假单胞菌是医院内感染的重要病原菌,具有广谱耐药性的菌株日益增,其对妥布霉素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、羧苄青霉素和氧哌嗪青霉素的耐药率在30％～60％之间,且不断上升。
1994年报道对氨曲南和泰能的耐药率分别为43.7％和35％。
目前对其耐药机制研究也越来越多。
目前认为耐药机制包括β——内酰胺酶的水解、外膜通透性降低、主动外排系统的排出等以及它们之间的协同作用,使细菌产生了高度耐药。
1β-内酰胺酶的水解铜绿假单胞菌通过酶对抗生素的水解作用,可以使产酶菌在有抗生素存在的环境下仍能够生存[1]。
由β-内酰胺酶介导的耐药机制主要有:(1)铜绿假单胞菌产碳青霉烯酶水解碳青霉烯类抗生素;(2)所有的铜绿假单胞菌都能够表达由染色体介导的A m pC 酶,但β-内酰胺类抗生素等诱导剂可增加表达水平。
铜绿假单胞菌产生的A m pC 酶微弱水解碳青霉烯,合并铜绿假单胞菌膜通透性下降而导致耐药性的产生,是铜绿假单胞菌对亚胺培南产生低水平耐药的主要机制。
2氨基糖苷类修饰酶耐氨基糖苷类抗生素的主要机制是产生纯化酶,催化氨基糖苷类抗生素氨基或羧基的共价修饰,导致氨基糖苷类抗生素与核糖体结合减少,促进药物摄取的E D P-l I 阻断而产生耐药性[2]。
国内从铜绿假单胞菌中检出4种A A C 基因和2种A N T 基因以及1种A PH 基因,一种氨基糖苷类修饰酶可修饰多种氨基糖苷类药物使之失活[3]。
3改变抗生素作用靶位细菌在抗生素作用下产生诱导酶对菌体成分进行化学修饰,使其与抗生素结合的有效部位变异,使药物不敏感而细菌本身的生物功能正常。
对作用于铜绿假单胞菌的β-内酰胺类抗生素的敏感性和耐药性,PBP5的β-内酰胺酶活性具有重要作用,PB P5缺失的铜绿假单胞菌可显示高敏特性[4]。
ʌ综述ɔ铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究∗徐雁峰１ꎬ王慧敏２ꎬ张㊀冬２(１.内蒙古科技大学包头医学院ꎬ内蒙古包头０１４０００ꎻ２.内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院呼吸科)㊀㊀ＤＯＩ:１０.１６８３３/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｂｍｃ.２０１９.０９.０４８㊀㊀铜绿假单胞菌(ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＰＡ)是目前临床上常见的革兰阴性杆菌ꎬ是最常见的引起严重院内获得性感染的条件致病菌之一ꎮ在机体抵抗力下降或免疫功能受损或是侵入性操作时(如留置尿管㊁呼吸机辅助通气)易引起各种感染ꎬ如泌尿系感染㊁呼吸道感染㊁脑膜炎㊁烧伤感染等ꎬ其中以下呼吸道感染最为常见ꎬ包括支气管扩张合并感染㊁慢性阻塞性肺疾病合并感染㊁呼吸机相关性肺炎等ꎬ且主要分布于重症监护病房ꎮ铜绿假单胞菌具有易定值ꎬ易变异ꎬ易耐药特点[１]ꎮ该菌可随着医护人员的手接触㊁医疗用水㊁机械通气等直接或间接性传播ꎻ在国外ꎬ慢性铜绿假单胞菌的定植是囊性纤维化(ＣＦ)肺病过程中的核心因素ꎬ是导致ＣＦ患者发病率和死亡率上升的主要原因ꎮＺａｖａｓｃｋｉ等[２]进行的研究表明ꎬ抗生素的选择压力和长时间使用加快了细菌突变的速度ꎮ因此抗生素的滥用ꎬ使得铜绿假单胞菌基因发生突变ꎬ导致耐药性在细菌间进行水平转移ꎬ使得铜绿假单胞菌耐药现象逐渐突显ꎬ出现多重耐药铜绿假单胞菌(Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔ￣ａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＭＤＲＰＡ)ꎬ给人们的安全带来巨大的威胁ꎬ引起了感染相关专家对公共卫生的关注ꎮ由其所引起的疾病具有难治愈㊁高致死率及迁延不愈性等特点ꎬ给临床治疗带来巨大困难ꎬ严重威胁人类的健康ꎮ㊀㊀碳青霉烯类抗生素(Ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ)是抗菌谱最广㊁抗菌活性最强的一类β－内酰胺类抗生素ꎬ曾一度是治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物ꎮ２０世纪７０年代末期ꎬ默克公司研究人员从牲畜链霉菌中发现一类新的β－内酰胺类抗生素－硫霉素ꎬ这是历史上第一个碳青霉烯类抗生素ꎮ１９８７年ꎬ该公司通过对硫霉素的半合成结构修饰ꎬ成功开发出第一个用于临床的碳青霉烯类抗生素－亚胺培南ꎬ之后碳青霉烯类药物开始被陆续开发并广泛应用于临床各科室ꎬ目前以亚胺培南和美罗培南为代表的碳青霉烯类抗生素被临床广泛用于治疗铜绿假单胞菌感染ꎬ尤其在重症感染患者治疗上发挥了重要作用ꎮ然而近年来ꎬ世界各地逐渐出现了耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(Ｃａｒ￣ｂａｐｅｎｅｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａꎬＣＲＰＡ)ꎬ２０１７年世界卫生组织(ＷＨＯ)制定了一份关于全球耐药菌的排列名单ꎬ耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌与耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌ꎬ耐碳青霉烯类㊁第三代头孢菌素的肠杆菌科细菌排在最前ꎮ耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的出现使得临床上对感染性疾病的治疗变得愈加困难ꎮＨｏｎｇ等[３]通过对５０个国家临床ＣＲＰＡ分离株的耐药情况进行分析ꎬ发现在巴西㊁秘鲁㊁哥斯达黎加㊁俄罗斯㊁希腊㊁波兰㊁伊朗和沙特阿拉伯等地铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率均高于５０％ꎮ美国ＩＮ￣ＦＯＲＭ(Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｎｅｔｗｏｒｋｆｏｒｏｐｔｉｍａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｏｎｉ￣ｔｏｒｉｎｇ)监测了２０１２~２０１５年７９个美国医疗中心铜绿假单胞菌对美罗培南的耐药率ꎬ结果显示耐药率从１８.０％上升到１９.１％[４]ꎮ２０１５年㊁２０１６年㊁２０１７年中国细菌耐药性监测ＣＨＩＮＥＴ结果显示ꎬＰＡ对亚胺培南的耐药率为２７.６％㊁２８.７％㊁２３.６％ꎬ对美罗培南耐药率为２３.４％㊁２５.３％㊁２０.９％ꎮ一项对全球ＣＲ￣ＰＡ的流行病学报道显示ꎬ南美洲㊁欧州和西南亚地区是ＣＲＰＡ的主要地区ꎬ对碳青霉烯类抗生素的耐药率最高可达７５.３％ꎮ可见铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素具有很高的耐药性ꎮ㊀㊀ＣＲＰＡ的出现ꎬ给临床抗感染带来了严峻的考验ꎬ因此研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制具有重要意义ꎬ本文就其耐药机制做一综述ꎮ１ 产生碳青霉烯酶㊀㊀铜绿假单胞菌可产生β－内酰胺酶㊁氨基糖苷类钝化酶等多种酶ꎬ其中产β－内酰胺酶是ＰＡ耐药的主要机制ꎬ此酶可以通过水解或非水解方式破坏β－内酰胺酶的β－内酰胺环使抗菌药物失活而无法发挥抗菌作用ꎮ目前对于β－内酰胺酶的分类法主要有两类ꎬＡｍｂｌｅｒ分子结构法是１９８０年Ａｍｂｌｅｒ提出的ꎬ根据β－内酰胺酶氨基酸序列分为Ａ－Ｄ类ꎬ其中Ａ类㊁Ｃ类和Ｄ类β－内酰胺酶是依赖丝氨酸发挥作用ꎬ而Ｂ类β内酰胺酶是依赖金属离子发挥作用ꎬ是引起铜绿假单胞菌获得性耐药的主要酶ꎮ另一种分类方法是∗基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目[２０１７ＭＳ(ＬＨ)０８０３]通讯作者:张㊀冬Ｂｕｓｈ分类法ꎬ是Ｂｕｓｈ于１９９５年提出ꎬ他以酶作用的底物㊁抑制剂谱的不同将β－内酰胺酶分为四个大类(１－４)及六个亚类(ａ－ｆ)ꎬ主要包括超广谱β－内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)㊁金属酶(ＭＢＬｓ)㊁头孢菌素酶(ＡｍｐＣ)ꎬＯＸＡ型内酰胺酶等ꎮ碳青霉烯酶是一类能水解碳青霉烯类抗生素的β内酰胺酶ꎬ主要是指Ａｍｂｌｅｒ法的Ａ㊁Ｂ㊁Ｄ类ꎮ１.１㊀Ａ类碳青霉烯酶㊀Ａ类碳青霉烯酶包括ＫＰＣ型㊁ＧＥＳ型㊁ＳＭＥ型㊁ＩＭＩ型㊁ＳＦＣ型等ꎬ其中以ＫＰＣ型和ＧＥＳ型最为常见ꎬ以质粒形式存在ꎬ造成大范围耐药铜绿假单胞菌的传播ꎮ近年来对ＫＰＣ型碳青霉烯酶报道较多ꎬＫＰＣ多见于肺炎克雷伯杆菌ꎬ１９９６年首次在美国的一种肺炎克雷伯菌中检测到ꎮ２００６年ꎬ哥伦比亚国际医学研究和教育中心首次报道ＫＰＣ－２在假单胞菌中的存在情况ꎬ２０１１年浙江大学医学院附属第一医院报道了首例产ｂｌａＫＰＣ－２型碳青霉烯酶的铜绿假单胞菌ꎬ之后ＫＰＣ在铜绿假单胞菌的报道逐渐增多[５]ꎮＫＰＣ酶属于Ａｍｂｌｅｒ－Ａ类ꎬＢｕｓｈ－２ｆ类ꎬ位于质粒或染色体上ꎬ染色体编码的ＫＰＣ可能有利于产ＫＰＣ铜绿假单胞菌高风险克隆的扩散ꎮＧａｒｃｉａ等[６]通过比较产生ＫＰＣ酶的肺炎克雷伯菌感染爆发之前和之后铜绿假单胞菌分离株的耐药性ꎬ发现爆发后铜绿假单胞菌获得了ＫＰＣ基因ꎬ从而表明了ＫＰＣ基因可在细菌间传播导致铜绿假单胞菌获得对碳青霉烯类抗生素高水平的耐药性ꎮ目前已经鉴定出至少２３种ＫＰＣ蛋白变体ꎮ１.２㊀产金属β－内酰胺酶(ｍｅｔａｌ－β－ａｃｔａｍａｓｅｓꎬＭＢＬｓ)㊀金属β－内酰胺酶(ｍｅｔａｌ－β－ａｃｔａｍａｓｅｓꎬＭＢＬｓ)是以金属离子为活性中心的酶ꎬ可以水解大部分β－内酰胺类抗生素ꎬ且需要依赖金属离子Ｚｎ２＋发挥作用ꎮ首次发现是因蜡样芽胞杆菌产生能被ＥＤ￣ＴＡ抑制的β－内酰胺酶ꎬ之后世界各地相继报道了能产生ＭＢＬｓ的各种细菌ꎮ编码ＭＢＬｓ的基因位点存在于铜绿假单胞菌的质粒㊁转座子或染色体上ꎬ以基因盒存在于整合子之中ꎬ大部分位于Ⅰ类整合子ꎬ通过整合子传递作用ꎬ使耐药性在革兰阴性细菌间水平传播扩散ꎬ引起铜绿假单胞菌的多重耐药(ＭＤＲ)甚至泛耐药(ＸＤＲ)ꎬ进而导致感染的爆发ꎬ使得临床治疗变得复杂化ꎮＭＢＬｓ可分为天然和获得性金属酶ꎬ获得性ＭＢＬｓ主要为质粒介导的ꎬ随着质粒的移动将耐药基因播散在各个菌株ꎬ是临床上最多见的ꎮ天然ＭＢＬｓ为染色体编码的ꎬ存在于一些临床非重要致病菌中ꎬ不具有传导性ꎬ没有致病性ꎬ是细菌为适应生存环境而产生的酶ꎮ获得性ＭＢＬｓ是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生获得性耐药的主要原因ꎮ脉冲场凝胶电泳实验(ＰＦＧＥ)发现ꎬ产ＭＢＬｓ铜绿假单胞菌在遗传学上紧密相关ꎬ表明ＭＢＬｓ基因的扩散是由耐药菌株的克隆传播或耐药基因在不同菌株间传递引起的[７]ꎮＭＢＬｓ属于Ａｍｂｌｅｒ－Ｂ类ꎬＢｕｓｈ－３类ꎬ目前发现的获得性金属酶包括ＩＭＰ㊁ＶＩＭ㊁ＧＩＭ㊁ＳＰＭ㊁ＳＩＭ㊁ＮＤＭ－１㊁ＦＩＭ－１ꎬ临床最常见的是ＩＭＰ和ＶＩＭꎮ近年来发现了ＭＢＬｓ的亚类ꎬ进一步说明了ＭＢＬｓ的持续多样化以及这些酶在革兰氏阴性菌种中的持续全球传播ꎮ㊀㊀ＩＭＰ－１是１９９１年日本研究者在粘质沙雷菌体内发现了第一个获得ＭＢＬｓꎬ之后不断发现新的获得ＭＢＬｓꎬ这些金属酶的宿主也从粘质沙雷菌扩大到了铜绿假单胞菌等肠杆菌科细菌ꎬ而铜绿假单胞菌是主要宿主ꎮ目前已发现了ＩＭＰ五十几种亚型ꎬ分别由相应编码基因的不同位点发生突变产生ꎮ１９９９年意大利在铜绿假单胞菌中发现首个ＶＩＭ－１型酶ꎬ随后在美国㊁法国㊁英国㊁意大利等国家相继发现铜绿假单胞菌产不同亚型ＶＩＭ基因ꎮ目前已发现了ＶＩＭ四十几种ꎬＶＩＭ－２是铜绿假单胞菌中分布最广的ＭＢＬꎬ并且是多次爆发的来源ꎮ㊀㊀ＮＤＭ－１是一种新型金属酶ꎬ最初在２００９年从一位感染肺炎克雷伯杆菌的瑞典患者分离发现ꎬ之后在铜绿假单胞菌㊁鲍曼不动杆菌和大肠杆菌中均有发现ꎮ２０１１年ꎬ首次在塞尔维亚患者中记录了铜绿假单胞菌中ＮＤＭ－１的存在ꎬ之后在世界各地耐药铜绿假单胞菌均有发现ꎬＮＤＭ－１可以水解大部分β内酰胺类抗生素包括碳青霉烯类抗生素ꎬ是最广谱耐药的金属酶ꎮＮＤＭ－１位于质粒上ꎬ不仅可以在细菌间转移ꎬ而且能使所在宿主菌成为超级细菌ꎬ严重威胁着人类健康ꎮＦＩＭ－１是２０１２年从佛罗伦萨血管移植物感染患者培养的多重耐药铜绿假单胞菌中分离出一种新型金属酶ꎬ位于染色体上ꎬ与ＮＤＭ表现出最高的相似性(约４０％氨基酸同一性)ꎬＦＩＭ－１具有广泛的底物特异性ꎬ优选青霉素和碳青霉烯类[８]ꎮ㊀㊀ＫＨＭ－１是１９９７年在日本的多重耐药柠檬酸杆菌分离物中鉴定出来的ꎬ之后再未报道过ꎮＰｆｅｎｎｉｇｗ￣ｅｒｔｈ等[９]在铜绿假单胞菌分离物发现了新的金属酶ＨＭＢ－１ꎬ与ＫＨＭ－１在核苷酸水平上的同一性为７３.６％ꎬ在氨基酸水平上的同一性为７４.３％ꎬ但在碳青霉烯酶水解方面表现出明显差异ꎬ通过测定最低抑菌浓度(ＭＩＣ)发现ＨＭＢ－１对亚胺培南的水解高于ＫＨＭ－１的２倍ꎬ而对美罗培南㊁厄他培南的水解效率非常相似ꎮ１.３㊀产ＯＸＡ型酶㊀ＯＸＡ型酶属于ＡｍｂｌｅｒＤ类ꎬＢｕｓｈ２ｄ类ꎬ因对苯唑西林或是氯唑西林等有很强的水解能力而得名ꎮＯＸＡ型超广谱β－内酰胺酶ꎬ是从２０世纪８０年代后期随着ＤＮＡ测序技术的发展才从丝氨酸β－内酰胺酶中分离出来ꎬ并单独成为一类ꎮ之后该酶在世界范围内陆续被检测到ꎬ如法国㊁西班牙㊁英国等许多国家均检出ꎬ近日秘鲁发现了同时表达ＯＸＡ－１的铜绿假单胞菌[１０]ꎮ国内在安徽㊁湖南㊁郑州㊁苏州㊁贵州等地也曾报道过ＯＸＡ型酶ꎮＯＸＡ型酶主要分布在鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌ꎮＢｅｒｔ等[１１]阐述了ＯＸＡ型酶分５组ꎬ其中ＯＸＡ－５㊁ＯＸＡ－１０㊁ＯＸＡ－１１㊁ＯＸＡ－１４㊁ＯＸＡ－１６㊁ＯＸＡ－１７㊁ＯＸＡ－３１等见于铜绿假单胞菌内[１２]ꎮＯＸＡ－１９８是２０１１年Ｅｌ等[１３]新发现的Ｄ类β内酰胺酶ꎬＯＸＡ－１９８基因位于ＩｎｃＰ－１１型质粒携带的Ⅰ类整合子上ꎬ易于在铜绿假单胞菌或大肠杆菌中转化ꎮ最近ꎬＢｏｎｎｉｎ等[１４]描述了产生ＯＸＡ－１９８的铜绿假单胞菌与医院相关的丛集事件ꎬ揭示ＯＸＡ－１９８的产生使碳青霉烯类药物敏感性降低ꎮ２㊀膜通透性下降㊀㊀细胞膜是药物进入细菌内发挥作用的第一道屏障ꎬ铜绿假单胞菌的细胞内膜由具有流动性的脂质双分子层组成ꎬ外膜包括脂蛋白㊁外膜蛋白和脂多糖等ꎬ脂多糖为６~７条链相互共价连接而成的脂肪酸链组成ꎬ这可降低外膜的流动性ꎬ阻碍脂溶性药物通过细菌外膜ꎮ碳青霉烯类抗生素进入体内发挥作用的靶位是位于内膜上的青霉素结合蛋白(ＰＢＰｓ)ꎬ需先通过外膜才能到达靶点ꎬ所以任何导致铜绿假单胞菌外膜通透性降低的因素都会导致抗菌药物无法到达作用位点ꎬ从而使细菌对该种抗生素耐药ꎮ２.１㊀膜孔蛋白的丢失㊀铜绿假单胞菌外膜上有许多微孔通道蛋白ꎬ如ＯｐｒＣ㊁ＯｐｒＤ２㊁ＯｐｒＥꎬ其中外膜孔通道ＯｐｒＤ２是以亚胺培南为代表的碳青霉烯类抗菌药物进入ＰＡ唯一通道ꎮＯｐｒＤ２的基因突变或者缺失致使ＯｐｒＤ２功能缺失或表达下调造成细胞外膜对抗菌药物通透性下降ꎬ是铜绿假单胞菌对亚胺培南等碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制ꎮＯｐｒＤ２的缺失突变体现在编码区的一段片段缺失导致移码突变ꎬ形成新的密码子从而引起肽链异常ꎬ导致铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药ꎮＬｉｕ等[１５]通过对１７株耐亚胺培南㊁美罗培南的铜绿假单胞菌分析显示其中１４株ＯｐｒＤ２蛋白的基因由于移码ꎬ无义突变或大缺失㊁或是缺少终止密码子而导致密码子编码提前终止ꎬ进一步表明ＯｐｒＤ２的丢失使铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生耐药性ꎮ因此认为Ｏｐｒｄ２是造成ＰＡ对亚胺培南耐药的重要因素ꎮＯｐｒＤ２的基因突变体现在ＯｐｒＤ２结构基因㊁调控基因㊁调控因子等突变ꎬ进而影响ＯｐｒＤ２蛋白水平或空间构象的改变ꎮ此外插入ＯｐｒＤ２的序列(ＩＳ)元件也可导致ＯｐｒＤ２基因失活ꎬ世界范围内均有报告不同的插入元件ＩＳꎬ南非(ＩＳＰａ２６)㊁克罗地亚(ＩＳＲＰ１０)㊁伊朗(ＩＳＰａ１３２８)㊁西班牙(ＩＳＰａ１３３)㊁中国(ＩＳＰａ１３２８㊁ＩＳＰｒｅ２)等ꎮＳｈａｒｉａｔｉ等[１６]在ＯｐｒＤ２蛋白基因中发现了一个新的插入序列ＩＳＰｐｕ２１与铜绿假单胞菌的碳青霉烯耐药性密切相关ꎮ２.２㊀主动外排系统过度表达㊀铜绿假单胞菌细胞膜上存在着将抗菌药物排出体外的外排泵系统ꎮ根据染色体的不同同源性ꎬ可将外排泵系统分为易化子超家族(ＭＦＳ)㊁耐药结节化细胞分化家族(ＲＮＤ)㊁ＡＴＰ结合盒超家族(ＡＢＣ)㊁多重药物和毒性化合物外排家族(ＭＡＴＥ)和小多重性耐药家族(ＳＭＲ)五个超家族ꎬ其中ＲＮＤ外排家族与碳青霉烯抗菌药物的耐药有关也是最早发现的外排泵系统ꎬ主要分布在革兰阴性菌ꎬ参与多种抗菌药物的排出ꎮ１９９３年Ｐｏｏｌｅ等在铜绿假单胞菌中发现了第一个多药外排泵ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭꎬ之后陆续发现多个外排泵系统如:ＭｅｘＡＢ－ｏｐｒＭ㊁ＭｅｘＸＹ－ｏｐｒＭ㊁ＭｅｘＣＤ－ｏｐｒＪ㊁ＭｅｘＥＦ－ＯｐｒＮ等ꎮ外排泵系统由膜融合蛋白如ＭｅｘＡ㊁ＭｅｘＣꎬ转运蛋白如ＭｅｘＢ㊁ＭｅｘＤ和外膜蛋白如ＯｐｒＤ㊁ＯｐｒＪ三部分组成ꎬ三种蛋白协同作用将进入菌体内的碳青霉烯类药物排除体外ꎬ任一环节出现问题即可导致多重耐药甚至泛耐药ꎮＢａｂａｋ等[１７]研究显示６２％的个体外排泵ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ基因过度表达ꎬ与先前报道的这些基因的过度表达超过５０％相符ꎮＭｅｘＸＹ－ＯｐｒＭ系统和ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ系统共用ＯｐｒＭ作为其外膜通道蛋白ꎬ因此ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ低表达也降低ＭｅｘＸＹ活性ꎬ此外ＭｅｘＣＤ－ＯｐｒＪ过表达可明显使ＭｅｘＡＢ－ＯｐｒＭ产生不足ꎮ外排泵系统具有可诱导性ꎬ抗生素的不规范使用可诱导其表达增加ꎬ曾章悦等[１８－１９]通过体外碳青霉素诱导实验对敏感铜绿假单胞菌进行诱导ꎬ发现铜绿假单胞菌经其诱导后对美罗培南的最低抑菌浓度升高ꎬ考虑铜绿假单胞菌对美罗培南的耐药与外排泵表达量增加有关ꎮ３㊀细菌生物被膜(ｂａｃｔｅｒｉａｌｂｉｏｆｉｌｍꎬＢＦ)形成㊀㊀１９７８年Ｃｏｓｔｅｒｔｏｎ首先提出生物被膜这一概念ꎬ细菌生物被膜(ｂａｃｔｅｒｉａｌｂｉｏｆｉｌｍꎬＢＦ)是指细菌附着于惰性物体或生物物体表面如医疗设备ꎬ留置导管或坏死的组织上ꎬ繁殖并分泌一些多糖基质和纤维蛋白等细胞外聚合物ꎬ将细菌粘连包裹其中而形成的膜样物ꎮＢＦ结构坚韧稳固ꎬ长期存在可作为细菌的保护伞使其逃避宿主免疫应答㊁抵挡抗菌药物的杀菌作用而难以根除ꎬ对抗生素产生耐药ꎬ进而导致难治性感染和慢性㊁持续性感染ꎮ铜绿假单胞菌生物被膜细胞外聚合物(ＥＰＳ)可延缓包括抗生素的扩散ꎬ导致细菌对抗生素耐受ꎮＥＰＳ是由胞外多糖㊁蛋白质㊁核酸组成ꎬ其中主要成分胞外多糖包括ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｌｏｃｕｓ(Ｐｓｌ)ꎬｐｅｌｌｉｃｌｅＦｏｒｍａｔｉｏｎ(Ｐｅｌ)和藻酸盐(Ａｌｇｉｎａｔｅ)ꎬ尤其是Ｐｓ１对铜绿假单胞菌中ＢＦ形成具有重要作用ꎮＰｓｌ多糖的过量产生导致铜绿假单胞菌的细胞表面和细胞间粘附增强ꎬ形成微菌落ꎬ稳固生物被膜结构的同时对抗生素产生耐药ꎮ研究发现形成生物被膜的多糖物质Ｐｓｌ可作为一种信号分子通过调节鸟苷酸的产生形成一种正反馈ꎬ进一步促进细菌产生细胞外基质形成生物被膜ꎬ这对于研究铜绿假单胞菌的耐药具有重要作用[２０]ꎮｃ－ｄｉ－ＧＭＰ信号通路被发现是导致生物膜形成的主要机制ꎮ藻酸盐(Ａｌｇｉｎａｔｅ)是ＥＰＳ主要成分ꎬ可以形成稳固的保护屏障阻碍抗生素穿透生物被膜ꎬ难以对包裹其中的细菌产生抗菌作用ꎬ导致感染反复发作ꎮ小ＲＮＡ(ｓＲＮＡ)是铜绿假单胞菌生物被膜形成的重要机制ꎮＴａｙｌｏｒ等[２１]描述了一个新的非编码小ＲＮＡ(ｓＲＮＡ)转录物ｓｒｂＡ对生物膜的形成和毒力有重要影响ꎮ４㊀整合子(ｉｎｔｅｇｒｏｎ)的形成㊀㊀整合子是存在于细菌质粒㊁染色体或转座子上的一种具有识别和捕获各种耐药基因并通过移动ꎬ将耐药基因传播在同种和不同种细菌间ꎬ最终导致临床上耐药现象的泛滥ꎮ整合子是Ｓｔｏｋｅｓ和Ｈａｌｌ于１９８９年首次提出的ꎬ由两端的保守区和中间的可变区构成ꎬ可变区中含有多种基因盒ꎬ大部分为耐药基因盒ꎬ在５ᶄ端保守段包含有编码整合酶的ｉｎｔＩ基因和负责基因转录的启动子ꎬ当整合子捕获到耐药基因盒后ꎬ在启动子的作用下发生转录从而使细菌获得耐药性ꎮ整合子根据其整合酶编码基因序列的不同可分为６类ꎬ其中Ⅰ类整合子最为常见且与铜绿假单胞菌耐药密切相关ꎮ目前在Ⅰ类整合子可变区中发现多种耐药基因盒ꎬ如ＶＩＭ㊁ＩＭＰ㊁ＳＨＶ等ꎬ这些耐药基因使铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素产生高耐药水平ꎮＫｈｏｓｒａｖｉ等[２２]通过研究发现铜绿假单胞菌耐药性与整合子密切相关ꎬ发现大多数(９５.７％)分离株包含Ⅰ类整合子且对美罗培南耐药性可达到(９０.３２％)ꎬ对亚胺培南的耐药率达(８３.８７％)ꎮ㊀㊀总之ꎬ铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药现象是多种耐药机制协同作用的结果ꎬ并不单纯是由一种因素造成ꎮＣＲＰＡ的出现ꎬ给临床治疗造成了巨大的压力ꎬ这需要我们进一步深入研究其耐药及流行机制ꎬ为指导抗生素的合理使用及开发新的有效抗菌药物提供理论依据ꎮ近年来ꎬ多位点序列分型(Ｍｕｌｔｉ￣ｌｏｃｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｔｙｐｉｎｇꎬＭＬＳＴ)被广泛用于记录细菌基因的变异ꎬ进而实现耐药菌株的追踪ꎬ对研究铜绿假单胞菌的耐药机制具有重要意义ꎮ多位点序列分型是Ｍａｉｄｅｎ等人在１９９８年提出的用于分析基因的核苷酸序列ꎬ进而发现细菌基因的变异ꎮＭＬＳＴ通过使用管家基因中的序列变异来定义类型ꎬ以ＳＴ编号为基本分析单位ꎬ每一个ＳＴ标号代表一种核苷酸序列信息ꎬ目前应用于耐药菌株的追踪ꎮ通过对铜绿假单胞菌的７个管家基因(ａｃｓＡ㊁ａｒｏＥ㊁ｇｕａＡ㊁ｍｕｔＬ㊁ｎｕｏＤ㊁ｐｐｓＡ和ｔｒｐＥ)进行ＰＣＲ扩增纯化ꎬ产物测序后与ＢＬＡＳＴ对比得出七个管家基因等位基因谱编号ꎬ依据编号的组合即能够得到ＳＴ型ꎬ进而实现对全球铜绿假单胞菌的流行趋势及毒力进化变异的追踪调查ꎮ在铜绿假单胞菌中ꎬＭＢＬｓ的产生通常与序列类型(ＳＴｓ)１１１㊁１７５㊁３５７和２３５的多耐药高风险克隆相关ꎬ表明高风险克隆在成功传播临床重要抗药性决定因素中的重要作用ꎮＰａｐａｇｉａｎｎｉｔｓｉｓ等[２３]发现捷克医院中携带ＩＭＰ－７的铜绿假单胞菌中ＳＴ３５７克隆编码整合子Ｉｎ－ｐ１１０ꎬ证明大多数ＳＴ３５７分离株与ＩＭＰ型ＭＢＬｓ的产生相关ꎮＶａｎｅｇａｓ等[２４]研究表明高抗生素选择压力有利于多克隆的出现ꎬ这些克隆能够分别含有ＫＰＣ和ＶＩＭ碳青霉烯酶ꎬ主要是ＳＴ２３５和ＳＴ１１１ꎬ但同时出现其他克隆如ＳＴ１７５５㊁ＳＴ４６３ꎮ序列类型２３５(ＳＴ２３５)是重要的铜绿假单胞菌克隆ꎬ铜绿假单胞菌ＳＴ２３５可以通过突变和获得当地耐药基因ꎬ对碳青霉烯类抗生素产生耐药性[２５]ꎮ在ＳＴ２３５中已经描述了多种碳青霉烯酶ꎬ最常见的是ＶＩＭꎬ其次是ＩＭＰꎬＯＸＡꎬＧＥＳꎬＫＰＣ和ＮＤＭꎮ目前发现质粒编码的产ＮＤＭ－１的铜绿假单胞菌ＭＬＳＴ分型有ＳＴ２３５ꎬ染色体编码的ＫＰＣ基因可能有利于产生ＫＰＣ的铜绿假单胞菌ＳＴ２３５扩增时的传播ꎮＨｕ等[２６]首次报道了产生ＫＰＣ－２的ＳＴ４６３铜绿假单胞菌分离株的克隆ꎬ该克隆在浙江省快速出现和传播ꎮ参考文献[１]㊀中华医学会呼吸病学分会感染学组.铜绿假单胞菌下呼吸道感染诊治专家共识[Ｊ].中华结核和呼吸杂志ꎬ２０１４ꎬ３７(１):９－１６.[２]㊀ＺａｖａｓｃｋｉＡＰꎬＣａｒｖａｌｈａｅｓＣＧꎬＰｉｃãｏＲＣꎬｅｔａｌ.Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ－ｒｅ￣ｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｄａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒｂａｕｍａｎ￣ｎｉｉ:ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓａｎｄｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｒａｐｙ[Ｊ].ＥｘｐｅｒｔＲｅｖＡｎｔｉＩｎｆｅｃｔＴｈｅｒꎬ２０１０ꎬ８(１):７１－９３. [３]㊀ＨｏｎｇＤＪꎬＢａｅＩＫꎬＪａｎｇＩＨꎬｅｔａｌ.Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒ￣ｉｓｔｉｃｓｏｆｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ[Ｊ].ｉｎｆｅｃｔｃｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１５ꎬ４７(２):８１－９７. [４]㊀ＳａｄｅｒＨＳꎬＨｕｂａｎｄＭＤꎬＣａｓｔａｎｈｅｉｒａＭꎬｅｔａｌ.Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｆｏｕｒｙｅａｒｓ(２０１２ｔｏ２０１５)ｏｆｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｎｅｔｗｏｒｋｆｏｒｏｐｔｉｍａｌｒｅ￣ｓｉｓｔａｎｃｅｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｐｒｏｇｒａｍｉｎｔｈｅｕｎｉｔｅｄｓｔａｔｅｓ[Ｊ].Ａｎｔｉｍｉ￣ｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１７ꎬ６１(３):ｅ０２２５２－０２２６７.[５]㊀ＧｅＣꎬＷｅｉＺꎬＪｉａｎｇＹꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＫＰＣ－２－ｐｒｏ￣ｄｕｃｉｎｇｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｓｏｌａｔｅｓｉｎＣｈｉｎａ[Ｊ].ＪＡｎｔｉ￣ｍｉｃｒｏｂＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１１ꎬ６６(５):１１８４－１１８６. [６]㊀ＧａｒｃíａＲＤꎬＮｉｃｏｌａＦꎬＺａｒａｔｅＳꎬｅｔａｌ.ＥｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆＰｓｅｕｄｏ￣ｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｗｉｔｈＫＰＣ－ｔｙｐｅｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅｉｎａｔｅａｃｈｉｎｇｈｏｓｐｉｔａｌ:ａｎ８－ｙｅａｒｓｔｕｄｙ[Ｊ].ＪＭｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌꎬ２０１３ꎬ６２(Ｐｔ１０):１５６５－１５７０.[７]㊀万强ꎬ李娟ꎬ陈杨.辽宁省大连市耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β－内酰胺酶基因检测及脉冲场凝胶电泳分型[Ｊ].疾病监测ꎬ２０１７ꎬ(１):３８－４２.[８]㊀ＰｏｌｌｉｎｉＳꎬＭａｒａｄｅｉＳꎬＰｅｃｉｌｅＰꎬｅｔａｌ.ＦＩＭ－１ａｎｅｗａｃｑｕｉｒｅｄｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅｆｒｏｍａＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｃｌｉｎ￣ｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅｆｒｏｍＩｔａｌｙ[Ｊ].ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＡｇｅｎｔｓＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１３ꎬ５７(１):４１０－４１６.[９]㊀ＰｆｅｎｎｉｇｗｅｒｔｈＮꎬＬａｎｇｅＦꎬＢｅｌｍａｒＣＣꎬｅｔａｌ.Ｇｅｎｅｔｉｃａｎｄｂｉｏ￣ｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＨＭＢ－１ꎬａｎｏｖｅｌｓｕｂｃｌａｓｓＢ１ｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅｆｏｕｎｄｉｎａＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｃｌｉｎｉｃａｌｉｓｏｌａｔｅ[Ｊ].ＪＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂＣｈｅｍｏｔｈｅｒꎬ２０１７ꎬ７２(４):１０６８－１０７３.[１０]㊀ＲíｏｓＰꎬＲｏｃｈａＣꎬＣａｓｔｒｏＷꎬｅｔａｌ.Ｅｘｔｅｎｓｉｖｅｌｙｄｒｕｇ－ｒｅｓｉｓｔ￣ａｎｔ(ＸＤＲ)ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｉｎＬｉｍａＰｅ￣ｒｕｃｏ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａＶＩＭ－２ｍｅｔａｌｌｏ－β－ｌａｃｔａｍａｓｅꎬＯＸＡ－１β－ｌａｃｔａｍａｓｅａｎｄＧＥＳ－１ｅｘｔｅｎｄｅｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍβ－ｌａｃｔａｍａｓｅ[Ｊ].ＪＭＭＣａｓｅＲｅｐꎬ２０１８ꎬ５(７):ｅ００５１５４. 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铜绿假单胞菌的抗生素耐药性及其机制分析铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种常见的革兰氏阴性杆菌，具有广泛的分布和高度耐药性。
在医疗机构中，铜绿假单胞菌感染已成为严重的问题，对于治疗该菌引起的感染，抗生素耐药性的了解至关重要。
抗生素耐药性是指细菌对抗生素的抵抗能力，常见的耐药机制包括基因突变和外源性基因的水平传递。
铜绿假单胞菌对多种抗生素呈现耐药性，包括β-内酰胺类抗生素（如氨基苄青霉素、头孢菌素等）、氨基糖苷类抗生素、大环内酯类抗生素、喹诺酮类抗生素以及碳青霉烯类抗生素。
以下将对铜绿假单胞菌的抗生素耐药性及其机制进行分析。
首先，铜绿假单胞菌的内源性抗性机制是其耐药性的基础。
该菌种具有外膜结构以及多种封闭性的药物外排泵，这些结构可以拦截或排出抗生素，阻碍抗生素进入细胞或使其失效。
此外，铜绿假单胞菌具有自由基清除系统和外泌体的产生，这些机制有助于保护菌体免受抗生素的影响。
其次，铜绿假单胞菌的耐药性还可通过激活或抑制特定的耐药性相关基因来实现。
研究发现，菌体中的多个基因（如mexAB-oprM、mexXY-oprM、nfxB和ampR）在抗生素耐药性中起到关键的调控作用。
这些基因编码的蛋白质参与了药物外排泵系统或抗生素降解酶的表达，从而使菌体对抗生素的作用降低。
此外，外源性基因的水平传递也在铜绿假单胞菌的抗生素耐药性中发挥着重要作用。
许多耐药性基因以质粒或整合子的形式存在，它们可以通过转染、共同耐药岛（Resistance Island）或转座子的介导而传递给铜绿假单胞菌。
这种方式使菌体获得多样的抗生素耐药基因，从而增加了其对不同类别抗生素的耐药性。
在临床实践中，铜绿假单胞菌的抗生素耐药性对治疗选择带来了挑战。
然而，通过深入了解其耐药机制，可以为抗生素的合理使用提供指导。
当前，一些新型抗菌药物（如环丙沙星类）在对抗铜绿假单胞菌感染中显示出较好的效果，是一种潜在的治疗选择。
耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药机制及同源性研究目的分析柳州市4所医院耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的耐药机制及同源性，为指导临床合理用药、控制感染提供依据。
方法69株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌分离自柳州市工人医院（甲医院），中医院（乙医院）、妇幼保健院（丙医院）和柳铁中心医院（丁医院）。
采用纸片扩散法及微量肉汤稀释法进行药敏试验，采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性，聚合酶链反应（PCR）检测β-内酰胺酶基因和OprD2基因，使用氰氯苯腙（CCCP）进行主动外排泵筛选试验。
结果69株铜绿假单胞菌对多黏菌素B和氨基糖苷类的耐药率较低，对头孢他定、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为40.6%、40.6%、44.9%，其他抗菌药物的耐药率均>50%；β-内酰胺酶基因IMP阳性率为4.3%，OprD2基因阳性率为63.8%，VIM、KPC、GIM、OXA和SPM基因均未检出；主动外排表型阳性率为82.6%。
PFGE分型分为A～J共10个基因型，其中A型为主要基因型，占44.1%；4所医院均存在克隆传播，甲、乙、丙、丁医院分别以A型、H型、D型、C型克隆株传播为主，甲、乙医院有共同的B型克隆株存在，甲、丁医院有共同的A型克隆株存在。
结论克隆株在医院内、医院间播散已成为柳州市耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌分离率不断上升、菌株不断增加的主要原因，主动外排泵高表达、OprD2蛋白表达缺失和产IMP型金属酶是该菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制。
[Abstract] Objective To analyze drug resistance and homology of carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa of four hospitals in Liuzhou city for providing the basis of the clinical rational use of drugs and controling infection. Methods 69 strains of carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa were isolated from Worker′s Hospital （A Hospital），Hospital of Traditional Chinese Medicine （B Hospital），Maternal and Child Health Hospital （C Hospital）and Liu Railway Central Hospital （D Hospital）.Drug sensitive test was conducted by by disk diffusion and broth micro dilution，the homology of bacterial strain was analyzed by pulsed-field gel electrophoresis（PFGE），gene of β-lactamase and OprD2 was detected by PCR，active efflux pump screening test was conducted by CCCP. Results In 69 strains of Pseudomonas aeruginosa，drug resistance rate of polymyxin B and aminoglycoside was lower，ceftazidime，cefoperazone / shubatan and piperacillin/tazobactam was 40.6%，40.6%，44.9% respectively，other antibiotic′s resistance rate was >50%；the positive rate of β-lactamase gene IMP was 4.3% and the positive rate of OprD2 was 63.8%，strains positive for gene VIM，KPC，GIM，OXA and SPM were not detected；the positive rate of active efflux phenotype was 82.6%.There were 10 genotype by PFGE named A-J，the major A type was 44.1%；four hospitals（A，B，C and D Hospital）all contained clone transmission and clone strain transmission of A，B，C and D Hospital was mainly type A，type H，type D，type C respectively，both A and B Hospital exsited type B clone strain，both A and D Hospital existed type A clone strain. Conclusion Clone strain spread in the hospital and among hospitals has become the main reason of the isolated rate of carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa rising，and strain increasing inLiuzhou city，the main mechanism of drug resistance of Pseudomonas aeruginosa to carbapenem drugs was high expression of active efflux pump，OprD2 protein expression loss and production IMP type metal enzyme.[Key words] Pseudomonas aeruginosa；Drug resistance mechanism；Homology近年来，随着碳青霉烯类抗菌药物在临床上的广泛使用，在药物的选择压力下，耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的分离率也在不断增高[1-4]，给临床抗感染治疗带来极大的挑战。
铜绿假单胞菌耐药性的现状和影响因素分析铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种常见的革兰氏阴性菌，广泛存在于土壤、水体和植物根际中。
它是医院感染和呼吸道感染的主要病原体之一，且由于其多重耐药性的问题而引起了严重关注。
一、铜绿假单胞菌耐药性的现状铜绿假单胞菌对多种抗菌药物表现出耐药性，包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、碳青霉烯类等。
据统计，全球范围内大约有20%的铜绿假单胞菌菌株对氨基糖苷类抗生素耐药，30%的菌株对喹诺酮类抗生素耐药，超过50%的菌株对β-内酰胺类抗生素产生产生耐药性。
这些耐药性的扩散不仅导致了治疗难度的加大，同时也增加了治疗成本，并可能导致治疗失败和医院感染等严重后果。
二、铜绿假单胞菌耐药性的影响因素1. 染色体突变：铜绿假单胞菌可以通过基因突变来获得耐药性。
突变可能发生在菌体内部的基因，例如产生耐药相关酶的基因，进而导致抗生素的靶点发生改变，抗生素无法发挥作用。
2. 外源性基因的获取：通过水平基因转移，铜绿假单胞菌可以获得其他细菌的耐药基因。
这样的外源性基因可以编码抗生素降解酶、泵、质子泵和药物靶点变化等，从而增加抗菌药物的耐受性。
3. 细胞膜的改变：铜绿假单胞菌的细胞膜可以改变其对抗生素的透过性。
细菌通过改变细胞膜的脂多糖组成，降低了抗生素的渗透率，从而产生耐药性。
4. 多药耐药泵：铜绿假单胞菌可以通过表达多药耐药泵来排出抗生素分子，减少其在细菌内部的浓度，从而达到抵抗抗生素的效果。
5. 生物膜的形成：铜绿假单胞菌生物膜的形成使其对抗生素更加耐受。
生物膜提供了细菌对环境的保护，降低了抗生素对细菌的效果。
三、应对铜绿假单胞菌耐药性的措施1. 合理使用抗生素：抗生素的滥用和不当使用是导致细菌耐药性发展的重要原因之一。
医生和患者应该遵循抗生素使用的指导方针，避免不必要的抗生素使用和滥用。
2. 严格的感染控制：医疗机构应采取严格的感染控制措施，包括手卫生、环境清洁和设备消毒等。
作者简介：肖新荣，本科，主管检验师；研究方向：临床医学检验临床微生物技术；Ｅ ｍａｉｌ：ｘｘｒｘｉａｏ０９１０＠１６３．ｃｏｍ耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌临床分布及耐药特点分析肖新荣 王福安 王曼雅石狮市医院检验科，石狮，３６２７００，中国【摘要】 目的：分析耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌（ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ＣＲＰＡ）在临床科室的分布情况，总结其耐药特点，探讨抗菌方法。
方法：选取２０２２年３月～２０２３年２月ＣＲＰＡ菌株８０株，设为观察组，采集同期不耐碳青霉烯类药物铜绿假单胞菌８０株，设为对照组，比较临床科室分布情况、ＣＲＰＡ耐药特点、ＭＢＬ表型阳性率与基因检测结果。
结果：临床分布比较，呼吸与危重症医学科、重症医学科与普外科ＣＲＰＡ检出率较高，差异显著（犘＜０．０５）；ＣＲＰＡ耐药特点显示，ＣＲＰＡ对替卡西林／克拉维酸耐药率显著高于其他药物，耐药率较低的常用抗菌药是阿米卡星与妥布霉素；ＭＢＬ表型阳性率较高，为９２．５０％（７４／８０），ＭＤＲ ＰＡ占比５３．７５％（４３／８０），ＸＤＲ ＰＡ占比２２．５０％（１８／８０）。
结论：ＣＲＰＡ较易发生在呼吸与危重症医学科和重症医学科，阿米卡星与妥布霉素等药物在ＣＲＰＡ感染中抗菌效果较好，ＣＲＰＡ抗感染治疗中应针对性用药。
【关键词】 铜绿假单胞菌；耐药特点；临床分布；感染防控【中图分类号】 Ｒ９６９ 【文献标识码】 Ａ 犇犗犐：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５ １３９６．２０２３．０５．００７犃狀犪犾狔狊犻狊狅犳犆犾犻狀犻犮犪犾犇犻狊狋狉犻犫狌狋犻狅狀犪狀犱犇狉狌犵犚犲狊犻狊狋犪狀犮犲犆犺犪狉犪犮狋犲狉犻狊狋犻犮狊狅犳犆犪狉犫犪狆犲狀犲犿犚犲狊犻狊狋犪狀狋犘狊犲狌犱狅犿狅狀犪狊犃犲狉狌犵犻狀狅狊犪ＸＩＡＯＸｉｎ ｒｏｎｇ，ＷＡＮＧＦｕ ａｎ，ＷＡＮＧＭａｎ ｙａＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＳｈｉｓｈｉＣｉｔｙＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈｉｓｈｉ，３６２７００，Ｃｈｉｎａ【犃犅犛犜犚犃犆犜】 犗犫犼犲犮狋犻狏犲：Ｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ（ＣＲＰＡ）ｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ，ｓｕｍｍａｒｉｚｅｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｍｅｔｈｏｄｓ．犕犲狋犺狅犱狊：Ａｔｏｔａｌｏｆ８０ＣＲＰＡｓｔｒａｉｎｓｆｒｏｍＭａｒｃｈ２０２２ｔｏＦｅｂｒｕａｒｙ２０２３ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ，ａｎｄ８０ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ ｒｅｓｉｓｔａｎｔＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａｓｔｒａｉｎｓｆｒｏｍｔｈｅｓａｍｅｐｅｒｉｏｄｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ，ｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＣＲＰＡｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＭＢＬｐｈｅｎｏｔｙｐｅａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｇｅｎｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ．犚犲狊狌犾狋狊：Ｔｈｅｄｅｔｅｃ ｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＣＲＰＡｗａｓｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｇｅｎｅｒａｌｓｕｒｇｅｒｙ，ａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｗａｓｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（犘＜０．０５）．ＴｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｅｏｆＣＲＰＡｔｏｔｉｃａｒｃｉｌｌｉｎ／ｃｌａｖｕｌａｎｉｃａｃｉｄｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｔｏｏｔｈｅｒａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ．Ａｍｉｋａｃｉｎａｎｄｔｏｂｒａｍｙｃｉｎｗｅｒｅｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓｗｉｔｈｌｏｗｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｅ．ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＭＢＬｐｈｅｎｏｔｙｐｅｗａｓ９２．５０％（７４／８０），ＭＤＲ ＰＡａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ５３．７５％（４３／８０），ａｎｄＸＤＲ ＰＡａｃｃｏｕｎｔｅｄｆｏｒ２２．５０％（１８／８０）．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀：ＣＲＰＡｉｓｍｏｒｅｌｉｋｅｌｙｔｏｏｃｃｕｒｉｎｔｈｅｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｎｄｃｒｉｔｉｃａｌｃａｒｅｍｅｄｉｃｉｎｅ．ＡｍｉｋａｃｉｎａｎｄｔｏｂｒａｍｙｃｉｎｈａｖｅｇｏｏｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｉｎＣＲＰＡｉｎ ｆｅｃｔｉｏｎ．【犓犈犢犠犗犚犇犛】 ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ；ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ；ｃｌｉｎｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕ ｔｉｏｎ；ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｏｆｉｎｆｅｃｔｉｏｎ 铜绿假单胞菌（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，ＰＡ）为非发酵、专性需氧菌，属于革兰阴性杆菌，是临床常见菌。
