谷氨酰胺促泥鳅生长机理的初步研究

第41卷 第5期 海 洋 与 湖 沼Vol.41, No.5 2010年9月OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICASep., 2010* 江苏省水产三项工程项目资助, PJ2010-58号；科技部科技人员服务企业行动项目资助, 2009GJC10044号；农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室开放基金资助, BZ2009-03号。

姚东瑞, 博士, 教授, E-mail ：yaodr@收稿日期: 2009-12-29, 收修改稿日期: 2010-03-27泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus )病原温和气单胞菌(Aeromonas sobria )分子鉴定及耐药性研究*姚东瑞1 邴旭文2 朱 明1 毕可然1 陈 丽1 张晓君1(1. 淮海工学院海洋学院 连云港 222005; 2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室 无锡 214081)提要 采用常规生理生化特性测定及16S rRNA 、gyrB 及rpoD 基因同源性检索与系统发育学分析等分子生物学方法, 对引起养殖泥鳅大量死亡的病原细菌进行了综合鉴定。

生理生化特性结果表明, 分离菌株NQ090701与气单胞菌属的温和气单胞菌相近; 16S rRNA 、gyrB 及rpoD 基因Blast 序列同源性检索与系统发育学分析均与温和气单胞菌相似性最高; 综合形态与生理生化特征及16S rRNA 、gyrB 与rpoD 基因的分子特征, 确认分离菌株NQ090701为温和气单胞菌(Aeromonas sobria )。

同时, 采用试管稀释法测定了养殖生产中常用的10种抗菌药物对病原温和气单胞菌的体外最小杀菌浓度(Minimal Bactericidal Concentration, MBC), 结果表明氟哌酸杀菌作用最好, 其次为盐酸沙拉沙星; 甲砜霉素和复方磺胺甲恶唑在所试验的药物浓度范围对温和气单胞菌无杀菌效果。

谷氨酰胺在动物生产中的应用作者：张龙林来源：《湖南饲料》 2017年第2期张龙林（湖南农业大学动物科技学院，长沙410128）摘要：谷氨酰胺作为肠上皮细胞增殖的重要能量来源、多种氨基酸合成的前体、组织间氮转运体等，在动物生产中具有重要作用。

本文就谷氨酰胺在动物生产中的应用进行综述。

关键词：谷氨酰胺：家禽：反刍动物：单胃动物：应用：生产随着规模化养殖技术的不断完善，早期断奶已成为提高畜禽生产性能的重要途径：环境的变化导致畜禽应激：居民对畜禽产品要求的不断提高等问题都成为研究热点。

营养调控成为改善以上问题的重要途径。

谷氨酰胺是属于中性氨基酸、哺乳动物中常见的游离氨基酸，是氨基酸、嘌呤、嘧啶和核苷酸合成的重要前体物质，同时也是机体内重要的能量物质。

因此，营养调控中添加谷氨酰胺在日粮中对动物生产具有重要意义。

1 谷氨酰胺的功能谷氨酰胺作为能量物质给肠粘膜细胞、白细胞等供能，研究表明，减少谷氨酰胺的摄人或者抑制其代谢会导致淋巴细胞、巨噬细胞及嗜中性粒细胞的功能降低。

谷氨酰胺通过调控基因表达和细胞信号通路、调节谷氨酰胺酶的活性和蛋白合成等促进肠上皮细胞增殖，同时缓解各种因素导致的细胞凋亡。

谷氨酰胺还具有抗氧化等作用。

2谷氨酰胺在单胃动物中的应用谷氨酰胺在单胃动物中的研究主要集中在断奶仔猪上，随着养猪规模化的不断完善，如何缓解早期断奶引起的仔猪断奶综合征成为研究的热点，谷氨酰胺作为重要的游离氨基酸，对缓解断奶应激综合征具有重要作用。

Brosnan等研究表明断奶仔猪饲粮中添加L-谷氨酰胺会增加十二指肠和空肠的黏膜谷氨酸草酰乙酸转氨酶的活性、谷氨酰胺合成酶、空肠黏膜紧密连接蛋白和紧密连接蛋白一1的mRNA表达水平。

蒋宗勇等研究表明日粮中添加1%谷氨酰胺提高了人工饲养新生仔猪14日龄肠道消化能力，改善了21日龄空肠黏膜中与谷氨酰胺代谢相关酶f谷氨酰胺合成酶、鸟氨酸转氨酶等）活性。

肖英平等研究表明添加1%谷氨酰胺饲喂断奶仔猪后能够提高空肠碱性磷酸酶活性和调控与肠道健康相关因子基因表达水平来提高断奶仔猪生长性能和营养物质表观消化率。

TGase的催化机理及对鱼糜凝胶特性的影响谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase，E.C.2.3.2.13)简称TGase，是一种具有改善蛋白质组织，风味及货架期等功能性质的生物酶。

根据来源不同，一般把TGase分为组织谷氨酰胺转氨酶(TissueTransglutaminase，tTG)和微生物谷氨酰胺转氨酶(Microbial Transglutaminase，MTG)。

1957年Clarke等人（Clarke D D et al,1959）为了描述在豚鼠肝脏中观察到的转酰胺基作用，由此提出了转谷氨酰胺酶一词。

早期的研究主要集中在动物组织中的谷氨酰胺转胺酶，而在1989年Audo等从轮枝酶链菌中分离得到TGase之后，TG酶在大规模发酵生产和食品工业的应用研究迅速发展起来（Ando H et al,1989）。

TG酶一种球状单体蛋白、亲水性高、对热稳定，活性一般为22.6U/mg，等电点为8.9，分子量为38KDa，可以催化酰基转移反应。

通过催化蛋白质分子内或分子间发生交联、蛋白质和氨基酸之间连接、以及蛋白质分子内谷氨酰胺酰胺基的水解，使蛋白质形成凝胶，改善蛋白制品的弹性、粘合性、保水性，并通过引入赖氨酸而提高了蛋白质的营养效价。

大多数转谷氨酰胺酶需要Ca2+参与，但微生物TGase不需要Ca2+激活(Z Pietrasik et al, 2003)。

通过快速原子轰击质子技术及对多肽链片段的降解, 对微生物菌株中TGase 的结构进行分析, 发现该酶的一级结构由331个氨基酸残基组成，二级结构中α-螺旋占21%，β-折叠占31%（Un-ichiy et al,2002）。

三级结构为球状，其活性中心有一个半胱氨酸残基，若该残基被取代则酶失活。

某些金属离子（Cu2+、Zn2+、Pb2+）和NEM（N-乙基-马来酰亚胺）可以抑制其活性（Christensen B M et al 1996）。

沈阡ｊ农业大学硕士学位论文圉３．６装液量和摇床转速对产酶的影响Ｆｌｇ．３．６Ｅｆｆｅｃｔｏｆｌｏａｄｖｏ】ｕｍｅａｎｄｒｏｔａｔｉｏｎｓｐｅｅｄｏｎＭＴＧａｃｔｉｖｉｔｙ３．２．２．２接种量对产酶的影响接种量的大小直接影响发酵周期，接种量大，有利于缩短发酵时间，但过大时，会使发酵前期菌体过量生长，反而会影响正常发酵。

并且较高的接种量会增加种子培养过程的难度和工作量，也会增加染菌的可能性。

接种量过小．发酵起动速度慢，菌体繁殖时间延长，也不利于酶活的提高。

从图３．７可知，当接种量增大时，婀Ｇ酶活增大．接种∥量为ｌＯ％时，酶活达到最高。

当接种量大于１０％时，婀Ｇ酶活随接种量的增大而减小。

因此，适宜的接种量为ｌＯ％。

ｌ・５３争ｚ鎏０‘９０．６０．３０Ｏ２４６８１０１２１４接种量（％）图３．７接种量对产酶的影响ｓｔａｒｔｅｒⅫｏｕｎｔ０ｎＭＴＧａｃｔｉｖｉｔｙＦｉｇ．３．７Ｅｆｆｅｃｔｏｆ３．２．２．３初始ｐＨ对产酶的影响初始ＰＨ不当，可能严重影响菌体的生长和产物的合成（郑美英等，２０００）。

通过采沈阳农业大学硕士学位论文将盐析后的酶液经聚乙二醇２０００充分浓缩后上柱，用Ｏ．２ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａｃｌ溶液洗脱，流速为１．８ｍＩ。

，瑚ｉｎ，每管收集约ｌ０１１１Ｌ。

如图４．２所示，洗脱过程中共收集到２个主要的峰，其中第二个峰为活性峰。

测定酶活及蛋自含量可知，酶经过ＳｃｐｈａｄｅｘＧ・１００层柝后，比酶活达到１．１ｌＵ／如ｇ，酶又被纯化了３．１７倍。

４．２．Ｌ３酶的纯化结果酶的各步纯化结果如表４．１所示。

寰４．１■ＴＧ的纯化结果Ｔ曲．４．１Ｒｅｓｕｌｔｏｆ口Ｌｌｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆ町Ｇ粗酶液２９”．９４６１１．３４Ｏ．２ｌ一一盐析沉淀ｌｓ髓．３６５２４．１６０．３３８５．６７ｔ．５７透析脱盐、冻千后ｔ３７９．６０４救．酾Ｏ．３５７８．９２１．６８ＳｅＤＨ８ｄｅｘＧ．１００层析３３８．００３７５．１８ｌＩＩｌ６１．３２５．２６由表４．１可知，在提取的各个步骤中，ＭＩ’Ｇ的比活力逐渐上升，由Ｏ．２ｌｕ／ｒｎｇ上升至１．１ｌｕ／ｍｇ，酶被纯化了５．２６倍，说明ＭｒＧ经过盐析沉淀、透析脱盐、冻千及Ｓ印ＨａｄｅｘＧ．１００，除去了大量的杂蛋白。

丙氨酰-谷氨酰胺投喂方式对建鲤生长和抗急性拥挤胁迫能力的影响王桂芹;芦洪梅;牛小天;李子平;韩宇田;赵朝阳;秦贵信【摘要】以初始体质量为(33.52±0.17)g建鲤为研究对象,在室内单循环养殖系统中进行8周(w)生长试验,分别配制成添加0.0％(对照)和0.5％(试验)丙氨酰-谷氨酰胺( Ala-Gln)的等氮等能(35％ CP、17 kJ/g)饲料,采用5种投喂方式:连续8w投喂对照饲料(Ⅰ)；试验饲料2 w间隔投喂(Ⅱ)；前4w投喂试验饲料,后4w投喂对照饲料的间隔投喂(Ⅲ)；前4w投喂对照饲料,后4w投喂试验饲料的间隔投喂(Ⅳ)；8w连续投喂试验饲料(V).养殖试验结束时,进行急性拥挤胁迫试验.探讨Ala-Gln投喂方式对建鲤生长和抗急性拥挤胁迫能力的影响.结果表明,Ala-Gln连续投喂和间隔投喂组的生长都显著高于对照组(P＜0.05).2w间隔投喂的特定生长率都显著高于4w间隔和连续8w投喂的饲料组(P＜0.05)；前4w间隔投喂组的特定生长率要显著高于8w连续投喂组(P＜0.05).血清皮质醇和血糖分别在急性胁迫后恢复0和1h时达到高峰,血清HSP70在胁迫后恢复1～12 h都保持较高水平,然后下降,胁迫后恢复48h达到胁迫前的水平.各种投喂方式组的血糖和血清皮质醇含量都显著低于对照组(P＜0.05).胁迫后恢复期,血糖迅速升高幅度最小的是2w间隔投喂组,最先恢复到胁迫前状态的是2 w间隔投喂组和前4w投喂的4w间隔投喂组.胁迫后恢复期,各投喂组的血清HSP70都显著高于对照组(P＜0.05),胁迫后恢复48和72 h 时,后4w投喂的4w间隔投喂组和连续8w的投喂组的血清HSP70显著高于对照组(P＜0.05).%The trial was carried out on healthy Cyprinus carpio var.jian with the initial weight(33. 52 ± 0.17) g in a single recirculating system for 8 weeks. Diet was administered at concentrations 0.0% (control diet) and 0.5% (trial diet) Ala-Gin of dietary dry matter, which were fed to the C. Carpioxai.jian in five different feeding modes, continuously fed by control diet during eight weeks( I .control group),trail diet at an interval of two weeks ( II), trail diet before four weeks at an interval of four weeks ( HI), trail diet after four weeks at an interval of four weeks (IV), and continuously fed by trail diet during eight weeks ( V ). Acute crowding stress was implemented at the last of experiment. The trail was conducted to investigate the effects of feeding modes of Ala-Gin on growth and the resisence to acute crowding stress for C. Carpio var. Jian. Results indicated that growth of different feeding modes of Ala-Gin was significantly higher than that of control group( P <0. 05). Specific growth rate of II was higher than that of DI, IV, V groups(P < 0. 05) and that of M was higher than that of V group(P <0. 05). After acute crowding stress, Serum cortisol reached peak at 0 h and glucose at lh,serum HSP70 remained high level before 1 -12 h then declined,at last,restored the normal level until 48 h. Serum cortisol and glucose were lower in every feeding mode than in control group ( P < 0.05). The smallest increase of serum glucose was II group, The first recovery occurred in II and III group after stress. Serum HSP70 in every feeding mode was significantly higher than that in the control group( P <0.05) ,and returned to normal state in 48 h and 72 h. Serum HSP70 in IV and V groups was still significantly higher than the control(P <0.05). In the current experiment,it concluded that adding Ala-Gin could improve the growth and resistance to crowding stress of C. Carpio war. Jian. There were significant differences of every feeding mode. Given economic efficiencyand practicability, interval feeding modes will be suggested in the practical culture of C. Carpio ar.jian.【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2012(036)003【总页数】7页(P459-465)【关键词】建鲤;丙氨酰-谷氨酰胺;生长;拥挤胁迫【作者】王桂芹;芦洪梅;牛小天;李子平;韩宇田;赵朝阳;秦贵信【作者单位】吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;长春通威饲料有限公司,吉林长春130456;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏无锡214081;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118【正文语种】中文【中图分类】S963.1随着集约化养殖模式的推广，水产养殖业得到了迅猛发展。

动物营养学报２０１９，３１（８）：３６８２⁃３６８９ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ㊀ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１９．０８．０２９谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响吴桐强１，２㊀钟㊀蕾１，２∗㊀刘庄鹏１，２㊀胡㊀毅１，２∗∗㊀刘㊀臻２，３∗∗㊀鲁双庆２，３（１．湖南农业大学，湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心，长沙４１０１２８；２．水产高效健康生产湖南省协同创新中心，常德４１５０００；３．长沙学院生物与环境工程学院，水生动物营养与品质调控湖南省重点实验室，长沙４１００２２）摘㊀要：本试验旨在研究饲料中添加谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响㊂选取健康㊁平均体重为（７．１６ʃ０．１０）ｇ的草鱼幼鱼７５０尾，随机分为５组，每组３个重复，每个重复５０尾，分别饲喂含０（对照组）㊁０．２５％㊁０．５０％㊁０．７５％㊁１．００％谷氨酰胺二肽的试验饲料㊂养殖试验持续８周㊂结果表明：１）与对照组相比，饲料中添加谷氨酰胺二肽显著提高了草鱼幼鱼增重率和蛋白质效率（Ｐ＜０．０５），显著降低了饲料系数（Ｐ＜０．０５）；且０．２５％㊁０．５０％组肠道脂肪酶和胰蛋白酶活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂２）与对照组相比，０．７５％组血清葡萄糖含量显著升高（Ｐ＜０．０５），饲料中添加谷氨酰胺二肽显著提高了血清尿素氮含量（Ｐ＜０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽有使血清甘油三酯和胆固醇含量下降的趋势，其中０．５０％组血清胆固醇含量显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），各添加组血清甘油三酯含量均显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂谷氨酰胺二肽添加量超过０．５０％使得血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性显著升高（Ｐ＜０．０５）㊂３）与对照组相比，０．５０％组血清溶菌酶活性显著上升（Ｐ＜０．０５）㊂０．７５％㊁１．００％组血清补体４（Ｃ４）含量显著降低（Ｐ＜０．０５），皮质醇含量显著升高（Ｐ＜０．０５）㊂各添加组血清谷胱甘肽含量㊁总抗氧化能力显著升高（Ｐ＜０．０５）㊂４）与对照组相比，０．５０％组肠道隐窝深度显著降低（Ｐ＜０．０５），０．７５％㊁１．００％组肠道黏膜厚度显著增加（Ｐ＜０．０５），０．５０％和１．００％组杯状细胞数量显著增加（Ｐ＜０．０５）㊂综上所述，饲料中添加０．５０％谷氨酰胺二肽能够促进草鱼幼鱼营养物质代谢㊁免疫以及肠道发育，进而促进生长㊂关键词：谷氨酰胺二肽；草鱼幼鱼；生长性能；免疫；肠道形态中图分类号：Ｓ９６３㊀㊀㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀㊀㊀文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１９）０８⁃３６８２⁃０８收稿日期：２０１９－０１－２１基金项目：国家自然科学基金项目（３１２７２６７５）；湖南省科技重大专项（２０１７ＮＫ１０３０）作者简介：吴桐强（１９９２ ），男，湖南郴州人，硕士研究生，研究方向为水产动物营养与饲料㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｍ１８８７４７２６２７６＠１６３．ｃｏｍ∗同等贡献作者∗∗通信作者：胡㊀毅，教授，博士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｈｕｙｉ７４０３２２＠１６３．ｃｏｍ；刘㊀臻，教授，博士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：２５３０００８５＠ｑｑ．ｃｏｍ㊀㊀谷氨酰胺（Ｇｌｎ）是动物血液和游离氨基酸库中最丰富的氨基酸，是动物能量源和蛋白质合成的前体［１］，在维持肠道和免疫系统的正常形态和功能方面有着重要的作用［２］㊂但谷氨酰胺稳定性较差，动物无法有效吸收利用谷氨酰胺单体，且在实际生产中较为困难㊂目前，作为谷氨酰胺替代品的丙氨酰－谷氨酰胺（Ａｌａ⁃Ｇｌｎ）㊁甘氨酰－谷氨酰胺（Ｇｌｙ⁃Ｇｌｎ）可弥补谷氨酰胺单体的吸收缺陷，这类谷氨酰胺二肽被动物摄取之后，在体内能快速水解释放，提升血液中谷氨酰胺含量，更高效发挥谷氨酰胺作用［３］㊂由于动物自身合成的谷氨酰胺远远不能满足自身需要，因此，谷氨酰胺二肽（Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕ）作为外源性谷氨酰胺成为了水产动物营养研究的热点㊂已有研究表明，肠外补充的谷氨酰胺８期吴桐强等：谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响二肽被水解为谷氨酰胺后，能够改善肠道屏障功能［４］，且被肠道消化吸收后，通过提高机体蛋白质的合成和增强非特异免疫力促进动物的生长［２，５－６］㊂㊀㊀草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）属鲤形目，鲤科，雅罗鱼亚科，草鱼属，为中国 四大家鱼 之一，广泛分布于我国淡水水域㊂随着近些年草鱼规模化养殖的逐年扩大，商业饲料的大量投喂，水质恶化，以致造成草鱼免疫力低下，肠道受损，病害频发㊂本试验通过在饲料中添加谷氨酰胺二肽，研究其对草鱼幼鱼生长㊁免疫和肠道形态结构的影响，旨在为配制合理健康的饲料提供理论依据㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验饲料㊀㊀设定试验饲料中谷氨酰胺二肽（纯度为９８％，购于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司）添加量分别为０（对照）㊁０．２５％㊁０．５０％㊁０．７５％㊁１．００％㊂饲料原料粉碎后过６０目筛，按照配方要求准确称量，混匀后用饲料制粒机挤压出１．５和２．０ｍｍ粒径的颗粒饲料，在阴凉处风干后置于－２０ħ冷存备用㊂试验饲料组成及营养水平见表１㊂表１㊀试验饲料组成及营养水平（风干基础）Ｔａｂｌｅ１㊀Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓｏｆｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｉｅｔｓ（ａｉｒ⁃ｄｒｙｂａｓｉｓ）％项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００原料Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ谷氨酰胺二肽Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕ０．２５０．５００．７５１．００鱼粉Ｆｉｓｈｍｅａｌ６．００６．００６．００６．００６．００豆粕Ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌ２０．００２０．００２０．００２０．００２０．００棉籽粕Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄｍｅａｌ２４．００２４．００２４．００２４．００２４．００菜籽粕Ｒａｐｅｓｅｅｄｍｅａｌ１０．００１０．００１０．００１０．００１０．００米糠Ｒｉｃｅｂｒａｎ１２．００１２．００１２．００１２．００１２．００次粉Ｗｈｅａｔｍｉｄｄｌｉｎｇ２３．８０２３．５５２３．３０２３．０５２２．８０豆油Ｓｏｙｂｅａｎｏｉｌ１．５０１．５０１．５０１．５０１．５０磷酸二氢钙Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）２１．５０１．５０１．５０１．５０１．５０预混料Ｐｒｅｍｉｘ１．００１．００１．００１．００１．００氯化胆碱Ｃｈｏｌｉｎｅｃｈｌｏｒｉｄｅ０．２００．２００．２００．２００．２０合计Ｔｏｔａｌ１００．００１００．００１００．００１００．００１００．００营养水平Ｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓ粗蛋白质Ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ３１．１０３１．６５３１．１０３１．２５３１．５５粗脂肪Ｃｒｕｄｅｌｉｐｉｄ５．４６５．４８５．１１５．２８５．５８粗灰分Ａｓｈ１１．６８１１．４９１１．８１１１．４３１１．９４㊀㊀每千克预混料含有Ｏｎｅｋｇｏｆｐｒｅｍｉｘｃｏｎｔｅｎｔｅｄ：ＶＡ１２００００ＩＵ，ＶＤ３３４００００ＩＵ，ＶＥ４８０ｍｇ，ＶＫ３３２００ｍｇ，ＶＢ１１２００ｍｇ，ＶＢ２２２８０ｍｇ，ＶＢ８８２４０ｍｇ，ＶＢ１２１２０．６ｍｇ，泛酸钙ｃａｌｃｉｕｍｐａｎｔｏｔｈｅｎａｔｅ７２０ｍｇ，烟酸ｎｉｃｏｔｉｎｉｃａｃｉｄ１０００ｍｇ，叶酸ｆｏｌｉｃａｃｉｄ６０ｍｇ，生物素ｂｉｏｔｉｎ１．２ｍｇ，维生素Ｃ磷酸酯ｖｉｔａｍｉｎＣｐｈｏｓｐｈａｔｅ６８５０ｍｇ，肌醇ｉｎｏｓｉｔｏｌ３２００ｍｇ，Ｍｇ（ａｓｍａｇｎｅｓｉｕｍｓｕｌｐｈａｔｅ）４０００ｍｇ，Ｆｅ（ａｓｆｅｒｒｏｕｓｓｕｌｆａｔｅ）４８００ｍｇ，Ｚｎ（ａｓｚｉｎｃｓｕｌｆａｔｅ）２０００ｍｇ，Ｍｎ（ａｓｍａｎｇａｎｅｓｅｓｕｌｆａｔｅ）８００ｍｇ，Ｃｕ（ａｓｃｏｐｐｅｒｓｕｌｆａｔｅ）１６０ｍｇ，Ｃｏ（ａｓｃｏｂａｌｔｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）１２ｍｇ，Ｓｅ（ａｓｓｏｄｉｕｍｓｅｌｅｎｉｔｅ）４ｍｇ，Ｉ（ａｓｐｏｔａｓｓｉｕｍｉｏ⁃ｄｉｄｅ）４０ｍｇ㊂１．２㊀饲养管理㊀㊀养殖试验在湖南省新化市车田江水库网箱养殖基地中进行㊂试验用草鱼幼鱼购自湖南省水产原种场，暂养于网箱（５ｍˑ４ｍˑ３ｍ）中，以基础饲料驯化２周㊂正式试验开始前，禁食２４ｈ后取７５０尾健康㊁平均体重为（７．１６ʃ０．１０）ｇ的草鱼幼鱼，随机分为５组，每组３个重复，每个重复５０尾，饲养于规格为１．５ｍˑ１．５ｍˑ１．５ｍ的网箱中，在试验开始的前４周投喂１．５ｍｍ粒径的颗粒饲料，待鱼达到一定规格后，在试验的第５周开始投喂２．０ｍｍ粒径的颗粒饲料，养殖试验期持续８周㊂养殖试验期间，记录每天的水温㊁天气㊁采食量和３８６３㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷死亡条数㊂１．３㊀样品采集与分析㊀㊀试验结束后，禁食２４ｈ，称重，统计存活率㊁末体重㊂从每个网箱中随机选取１４尾草鱼，用丁香油麻醉，选取６尾草鱼尾静脉取血，静置２４ｈ后，３５００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取上清液分装制备血清，－８０ħ冰箱保存备用；选取５尾草鱼于冰上迅速解剖和剥离肠道，－８０ħ冰箱保存用于肠道消化酶活性的测定㊂另外，每个网箱随机选取３尾草鱼，置于冰盘中迅速解剖，分别取中肠，生理盐水（７５％）洗净，固定于酒精醋酸福尔马林混合固定液（ＡＦＡ）中用于肠道组织切片的制作㊂１．４㊀指标测定１．４．１㊀生长性能指标的测定㊀㊀按下列公式计算生长性能指标：增重率（ｗｅｉｇｈｔｇａｉｎｒａｔｅ，ＷＧＲ，％）＝１００ˑ（Ｗｔ－Ｗ０）／Ｗ０；存活率（ｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅ，ＳＲ，％）＝１００ˑＮｔ／Ｎ０；饲料系数（ｆｅｅｄｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｒａｔｉｏ，ＦＣＲ）＝Ｆ／（Ｗｔ－Ｗ０）；蛋白质效率（ｐｒｏｔｅｉｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｒａｔｉｏ，ＰＥＲ，％）＝１００ˑ（Ｗｔ－Ｗ０）／（ＩˑＰ）㊂㊀㊀式中：Ｎｔ为终末尾数；Ｎ０为初始尾数；Ｗｔ为终末体重；Ｗ０为初始体重；ｔ为试验天数；Ｆ为饲料消耗量；Ｉ为摄入的干物质的含量，Ｐ为饲料中蛋白质的含量㊂１．４．２㊀肠道消化酶与血清免疫指标的测定㊀㊀肠道胰蛋白酶㊁脂肪酶㊁淀粉酶活性及血清谷草转氨酶（ＧＯＴ）㊁谷丙转氨酶（ＧＰＴ）㊁溶菌酶（ＬＺＭ）活性，血清总蛋白（ＴＰ）㊁尿素氮（ＵＮ）㊁葡萄糖（ＧＬＵ）㊁胆固醇（ＣＨＯ）㊁皮质醇（ＣＯＲ）㊁谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量及总抗氧化能力（Ｔ⁃ＡＯＣ）均采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定；血清补体３（Ｃ３）㊁补体４（Ｃ４）含量采用浙江伊利康生物技术有限公司的试剂盒测定；血清甘油三酯（ＴＧ）含量采用北京北化康泰临床试剂有限公司的试剂盒测定㊂１．４．３㊀肠道组织形态的测定㊀㊀中肠经过ＡＦＡ固定㊁乙醇逐级脱水㊁二甲苯透明㊁石蜡包埋㊁切片（５μｍ）㊁苏木精－伊红（ＨＥ）染色㊁脱水㊁透明㊁中性树脂封片㊂在每组选取９张非连续性切片，用ＬｅｉｃａＭＤ４０００Ｂ显微镜观察并拍照，每张切片随机选取３个视野，对３处视野内的小肠绒毛高度㊁隐窝深度㊁肌层厚度进行测量以及统计杯状细胞数量；图像由ＭｏｔｉｃＩｍａｇｅｓＰｌｕｓ６．０软件进行测量和计算（绒毛高度㊁隐窝深度㊁黏膜厚度㊁杯状细胞数量），分别取其平均值作为该样品各指标的测定结果㊂１．５㊀数据统计分析㊀㊀试验数据采用ＳＰＳＳ１７．０软件进行方差分析，试验结果采用 平均值ʃ标准差 表示㊂当差异显著（Ｐ＜０．０５）时，则采用Ｄｕｎｃａｎ氏法进行多重比较㊂２㊀结㊀果２．１㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长性能的影响㊀㊀由表２可知，饲料中添加谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼存活率无显著影响（Ｐ＞０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽使得草鱼幼鱼生长性能呈上升的趋势，各添加组草鱼幼鱼增重率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），但各添加组间差异不显著（Ｐ＞０．０５），各添加组饲料系数均显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），蛋白质效率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂２．２㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼肠道消化酶活性的影响㊀㊀由表３可知，随着饲料中谷氨酰胺二肽添加量的增加，肠道脂肪酶和胰蛋白酶活性呈先升高后降低的趋势，０．２５％㊁０．５０％组肠道脂肪酶和胰蛋白酶活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），０．７５％㊁１．００％组肠道脂肪酶和胰蛋白酶活性与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）㊂肠道淀粉酶的活性随着谷氨酰胺二肽添加量的增加呈下降的趋势，０．７５％㊁１．００％组显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂２．３㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼血清生化指标的影响㊀㊀从表４可见，各添加组草鱼幼鱼血清总蛋白含量与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）㊂当谷氨酰胺二肽的添加量超过０．５０％时，血清葡萄糖含量呈上升趋势，其中０．７５％组显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂各添加组血清尿素氮含量差异不显著（Ｐ＞０．０５），但均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽有使血清甘油三酯和胆固醇含量下降的趋势，其中０．５０％组血清胆固醇含量显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），各添加组血清甘油三酯含量均显著低于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂当饲料中谷氨酰胺二肽添加量超过０．５０％时，血清谷草转氨酶活性呈上升的趋势，其中０．７５％㊁１．００％组血清谷草４８６３８期吴桐强等：谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响转氨酶活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），１．００％组血清谷丙转氨酶活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂表２㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长性能的影响Ｔａｂｌｅ２㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００初始体重ＩＢＷ／ｇ７．１５ʃ０．００７．１６ʃ０．０１７．１０ʃ０．１０７．１５ʃ０．００７．１６ʃ０．０１终末体重ＦＢＷ／ｇ２２．００ʃ０．７２ａ２３．２４ʃ０．８１ｂｃ２２．７４ʃ０．５５ａｂ２３．８６ʃ０．６４ｃ２４．３９ʃ０．７２ｃ存活率ＳＲ／％９８．００ʃ２．００９８．６７ʃ２．３１９８．６７ʃ２．３１９６．６７ʃ３．０５９６．６７ʃ４．１６增重率ＷＧＲ／％２０７．５８ʃ１０．２５ａ２２４．６３ʃ１１．０９ｂｃ２２０．９４ʃ５．３８ｂｃ２３３．４４ʃ９．０３ｃ２４０．６４ʃ１０．３４ｃ饲料系数ＦＣＲ１．８３ʃ０．０５ｄ１．６７ʃ０．０５ｂｃ１．６８ʃ０．１１ｂｃ１．５８ʃ０．０６ａｂ１．５１ʃ０．０４ａ蛋白质效率ＰＥＲ／％１．６１ʃ０．１７ａ２．１１ʃ０．１３ｂｃ１．９８ʃ０．０７ｂ２．２５ʃ０．２３ｂｃ２．４２ʃ０．３８ｃ㊀㊀同行数据肩标不同字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），相同或无字母表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）㊂下表同㊂㊀㊀Ｖａｌｕｅｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｒｏｗｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｗｉｔｈｔｈｅｓａｍｅｏｒｎｏｌｅｔｔｅｒｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｍｅａｎｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅａｓｂｅｌｏｗ．表３㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼肠道消化酶活性的影响Ｔａｂｌｅ３㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｄｉｇｅｓｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｉｎｉｎｔｅｓｔｉｎｅｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００脂肪酶Ｌｉｐａｓｅ／（Ｕ／ｇｐｒｏｔ）２０．８９ʃ１．４５ａ２４．０５ʃ３．５９ｂ２３．３８ʃ４．６２ｂ２０．７２ʃ２．４２ａ２０．４２ʃ０．４０ａ胰蛋白酶Ｔｒｙｐｓｉｎ／（Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ）１４２８．３３ʃ７８．９３ａ２０９５．５７ʃ７０．３１ｂ１８９６．８２ʃ２２３．７３ｂ１５８５．７９ʃ１０５．２４ａ１３４８．７６ʃ１１３．３３ａ淀粉酶Ａｍｙｌａｓｅ／（Ｕ／ｍｇｐｒｏｔ）０．４２ʃ０．０８ｂ０．３７ʃ０．０７ａｂ０．３６ʃ０．０４ａｂ０．３３ʃ０．０２ａ０．３２ʃ０．０１ａ表４㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼血清生化指标的影响Ｔａｂｌｅ４㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎｓｅｒｕｍｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｉｎｄｅｘｅｓｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００总蛋白ＴＰ／（ｇ／Ｌ）７．２６ʃ１．１４ａｂ７．１８ʃ１．１６ａｂ７．９６ʃ０．６２ｂ６．８６ʃ０．５５ａ７．６９ʃ０．９５ａｂ葡萄糖ＧＬＵ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）６．５４ʃ１．２４ａ６．１５ʃ０．８１ａ６．２５ʃ１．０３ａ８．６４ʃ０．４１ｂ７．６２ʃ２．８０ａｂ尿素氮ＵＮ／（ｍｏｌ／Ｌ）１．０６ʃ０．２８ａ１．７６ʃ０．１０ｂ１．６３ʃ０．０６ｂ１．６６ʃ０．１７ｂ１．６２ʃ０．１６ｂ胆固醇ＣＨＯ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．２３ʃ０．４１ｂ１．０１ʃ０．０５ａｂ０．５５ʃ０．０４ａ１．１９ʃ０．５６ｂ１．０９ʃ０．２２ａｂ甘油三酯ＴＧ／（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．２５ʃ０．２１ｂ０．９９ʃ０．２１ａ０．９６ʃ０．１４ａ０．８８ʃ０．１１ａ１．００ʃ０．２７ａ谷草转氨酶ＧＯＴ／（Ｕ／Ｌ）８．９８ʃ１．２１ａ９．３２ʃ１．５０ａｂ１０．０６ʃ１．７１ａｂ１０．７７ʃ１．６３ｂ１０．２１ʃ１．１６ｂ谷丙转氨酶ＧＰＴ／（Ｕ／Ｌ）１．９３ʃ０．３６ｂ１．９３ʃ０．０７ｂ１．００ʃ０．１７ａ２．１３ʃ０．４０ｂ３．０６ʃ０．６９ｃ２．４㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼血清免疫指标的影响㊀㊀由表５可知，０．５０％组草鱼幼鱼血清溶菌酶活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），当饲料中谷氨酰胺添加量高于０．５０％时，使血清溶菌酶活性㊁补体４含量显著下降（Ｐ＜０．０５），皮质醇含量显著升高（Ｐ＜０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽对血清补体３含量无显著影响（Ｐ＞０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽有使血清谷胱甘肽含量㊁总抗氧化力有升高的趋势，其中０．２５％㊁０．５０％和０．７５％组谷胱甘肽含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），各添加组总抗氧化能力显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）㊂２．５㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼肠道形态的影响㊀㊀图１显示，与对照组相比，饲料中添加谷氨酰胺二肽促进了肠道绒毛的发育，绒毛密度增加，且黏膜厚度和杯状细胞数量有所升高㊂㊀㊀由表６可知，饲料中添加谷氨酰胺二肽有使草鱼幼鱼肠道绒毛高度上升的趋势，但组间差异５８６３㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷不显著（Ｐ＞０．０５）㊂饲料中添加谷氨酰胺二肽显著影响了肠道黏膜厚度㊁隐窝深度及杯状细胞数量，与对照组相比，０．５０％组隐窝深度显著降低，肠道杯状细胞数量显著升高（Ｐ＜０．０５），超过０．５０％的添加量使得肠道黏膜厚度显著升高（Ｐ＜０．０５）㊂表５㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼血清免疫指标的影响Ｔａｂ．５㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎｓｅｒｕｍｉｍｍｕｎｅｉｎｄｅｘｅｓｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００溶菌酶ＬＺＭ／（μｇ／ｍＬ）２．２９ʃ０．３９ａ２．２１ʃ０．２２ａ２．７６ʃ０．２１ｂ２．２９ʃ０．３７ａ２．１８ʃ０．３２ａ补体３Ｃ３／（ｇ／Ｌ）０．４８ʃ０．０９０．４２ʃ０．０５０．４１ʃ０．０４０．４１ʃ０．０８０．４０ʃ０．０８补体４Ｃ４／（ｇ／Ｌ）０．４２ʃ０．０８ｂ０．３７ʃ０．０７ａｂ０．３６ʃ０．０４ａｂ０．３３ʃ０．０２ａ０．３２ʃ０．０１ａ谷胱甘肽ＧＳＨ／（ｍｇ／Ｌ）２７．７９ʃ２．９６ａ３７．５３ʃ４．０５ｂ５４．２５ʃ１６．２５ｃ３７．９６ʃ８．５８ｂ３６．４９ʃ８．５６ｂ总抗氧化能力Ｔ⁃ＡＯＣ／（Ｕ／ｍＬ）５．２１ʃ１．０３ａ７．７６ʃ０．６４ｂ８．２５ʃ１．９３ｂ９．０２ʃ１．１０ｂ７．６５ʃ１．６９ｂ皮质醇ＣＯＲ／（ｎｇ／Ｌ）３．６８ʃ０．０２ａ３．７２ʃ０．０１ａｂ３．７２ʃ０．０２ａｂ３．７４ʃ０．０１ｂ３．７７ʃ０．０５ｂ㊀㊀Ａ：对照组ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（１００ˑ）；Ｂ：０．２５％组０．２５％ｇｒｏｕｐ（１００ˑ）；Ｃ：０．５０％组０．５０％ｇｒｏｕｐ（１００ˑ）；Ｄ：０．７５％组０．７５％ｇｒｏｕｐ（１００ˑ）；Ｅ：１．００％组１．００％ｇｒｏｕｐ（１００ˑ）；Ｆ：对照组ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（４００ˑ）；Ｇ：０．５０％组０．５０％ｇｒｏｕｐ（４００ˑ）㊂ＶＨ：绒毛高度ｖｉｌｌｕｓｈｅｉｇｈｔ；ＣＤ：隐窝深度ｃｒｙｐｔｄｅｐｔｈ；ＭＴ：黏膜厚度ｍｕｃｏｓａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ；ＧＱ：杯状细胞ｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌ㊂图１㊀谷氨酰胺二肽对草鱼中肠道组织结构的影响Ｆｉｇ．１㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎｍｉｄｇｕｔｔｉｓｓｕｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ表６㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼中肠形态指标的影响Ｔａｂｌｅ６㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｏｎｍｉｄ⁃ｉｎｔｅｓｔｉｎｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｉｎｄｅｘｅｓｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ（ｎ＝３）项目Ｉｔｅｍｓ谷氨酰胺二肽添加量Ｇｌｙ⁃Ｇｌｕｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ／％００．２５０．５００．７５１．００绒毛高度Ｖｉｌｌｕｓｈｅｉｇｈｔ／μｍ３５０．６０ʃ３５．３４３６２．５０ʃ３３．５５３６７．４３ʃ３１．９５４０７．３０ʃ１０．６７３６８．３６ʃ２９．５７隐窝深度Ｃｒｙｐｔｄｅｐｔｈ／μｍ２５７．１０ʃ３０．３０ｂ２７４．２３ʃ２５．２５ｂｃ１９９．４３ʃ３８．４７ａ３０１．０６ʃ２４．６５ｃ２７９．６７ʃ１７．１０ｂｃ黏膜厚度Ｍｕｃｏｓａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ／μｍ３７３．５６ʃ３６．６０ａ３６２．１０ʃ３９．３５ａ３９５．００ʃ３１．０９ａｂ４４５．２０ʃ２６．４４ｂ４３３．９０ʃ２０．５５ｂ杯状细胞数量Ｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｑｕａｎｔｉｔｙ／个６．００ʃ１．００ａ５．３３ʃ０．５７ａ１１．００ʃ２．６４ｂ７．００ʃ１．００ａ１１．００ʃ２．６４ｂ６８６３８期吴桐强等：谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响３㊀讨㊀论３．１㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长以及肠道消化酶活性的影响㊀㊀研究认为，谷氨酰胺二肽被动物摄入后在体内能迅速水解释放出谷氨酰胺［７］，而谷氨酰胺是动物体内的非必需氨基酸，能促进肠道对氨基酸和蛋白质的吸收，促进机体蛋白质的合成［８－９］㊂本试验结果表明，饲料中添加谷氨酰胺二肽能够显著提高草鱼幼鱼的增重率㊁蛋白质效率和降低饲料系数㊂与在建鲤（ＣｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏｖａｒＪｉａｎ）［１０］㊁镜鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏｖａｒ．ｓｐｅｃｕｌａｒｉｓ）［５］㊁军曹鱼（Ｒａｃｈｙｃｅｎｔｒｏｎｃａｎａｄｕｍ）［１１］㊁哲罗鱼（Ｈｕｃｈｏｔａｉｍｅｎ）［１２］的结果相似㊂此前本研究团队对谷氨酰胺添加效果的研究中发现，当饲料中谷氨酰胺的添加量超过０．６０％时，生长效果呈显著下降趋势［１３］，与本试验的１．００％组促生长效果不一致㊂其主要原因是谷氨酰胺易形成对机体有害的焦谷氨酸和氨，从而降低其对生长性能的促进作用，而谷氨酰胺生成的谷氨酰胺二肽既可避免谷氨酰胺单体的缺点又具有促进水产动物免疫㊁抗氧化等生理功能［１４］㊂㊀㊀鱼类消化酶活性受摄食㊁食物的生化组成以及其他因素的影响［１］㊂在本试验中，草鱼幼鱼肠道胰蛋白酶和脂肪酶活性随饲料中谷氨酰胺二肽添加量的升高呈先升高后降低的趋势，同时在谷氨酰胺二肽添加量超过０．５０％后，淀粉酶活性显著下降㊂这表明适量的谷氨酰胺二肽能促进草鱼幼鱼对于蛋白质和脂肪的消化，但过高的谷氨酰胺二肽可能会加重肠道的负担，影响消化酶的分泌［１５］㊂这一结果与镜鲤［５］㊁哲罗鱼［６］等研究结果相似㊂３．２㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼血清生化指标的影响㊀㊀血清总蛋白与尿素氮是反映机体对于蛋白质吸收代谢的重要指标［１６］㊂本试验结果表明，各添加组草鱼幼鱼血清尿素氮含量差异不显著，但均高于对照组，推测可能是饲料中添加谷氨酰胺二肽加强了鱼体对蛋白质的代谢，使得血清尿素氮含量维持在比较高的水平，并且从总蛋白含量的变化趋势来看，在添加量为０．５０％时总蛋白含量最高，表明适量的谷氨酰胺二肽在一定程度上促进了草鱼幼鱼体内蛋白质合成代谢㊂谷氨酰胺作为生糖氨基酸，能够参与糖异生作用生成葡萄糖㊂本试验表明，饲料中添加０．２５％ ０．５０％的谷氨酰胺二肽对血清葡萄糖含量无显著影响，但随着谷氨酰胺二肽添加量的提高，其血清葡萄糖含量显著升高，其原因可能与谷氨酰胺二肽通过三羧酸循环参与草鱼幼鱼肝脏糖异生作用有关㊂血清甘油三酯和胆固醇能够反映出机体对脂类代谢状况，其含量的升高说明机体脂质代谢出现紊乱，肝功能受损［１７］㊂本试验结果表明，饲料中添加谷氨酰胺二肽降低了血清甘油三酯和胆固醇含量，适量的谷氨酰胺二肽（０．２５％ ０．５０％）使得血清谷丙转氨酶活性呈下降趋势，但饲料中高含量的谷氨酰胺二肽导致血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性显著升高，这说明适量的谷氨酰胺二肽有助于草鱼幼鱼机体脂质代谢和肝功能，但过量添加会加重肝脏负荷，可能对肝脏造成损伤㊂３．３㊀谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼免疫和肠道健康的影响㊀㊀谷氨酰胺是鱼类强有效的免疫增强剂，能够促进白细胞呼吸爆发活力㊁吞噬活力和增殖［１８］，并且谷氨酰胺能够通过合成一氧化氮和多胺来刺激超氧阴离子的产生［１９］，对鱼类的非特异性免疫具有重要意义㊂溶菌酶和补体是鱼体内重要的非特异性免疫防御因子，是一种重要的杀菌溶菌物质［２０］，皮质醇属于糖皮质激素，由肾上腺分泌，是评价是否应激的重要指标［１３］㊂本试验中，饲料中添加０．５０％谷氨酰胺二肽，使得草鱼幼鱼血清溶菌酶活性显著高于对照组，但饲料中谷氨酰胺二肽的添加量超过０．５０％后，草鱼幼鱼血清溶菌酶活性和补体４含量显著下降，血清皮质醇含量显著升高㊂这说明适量的谷氨酰胺二肽能够激活溶菌酶活性，提高草鱼幼鱼免疫力，但过高的谷氨酰胺二肽可能会造成鱼体出现应激，使机体免疫抑制［１０］，出现免疫力下降，不利于草鱼幼鱼健康生长㊂谷胱甘肽在机体抗氧化防御中起着至关重要的作用㊂在本试验，饲料中添加谷氨酰胺二肽能够显著提高草鱼幼鱼血清中谷胱甘肽含量㊁总抗氧化能力㊂这表明谷氨酰胺二肽能够提高草鱼幼鱼抗氧化能力㊂这一结果与断奶仔猪［２１］㊁建鲤［１０］相似㊂㊀㊀鱼体健康是建立在自身内脏器官健康㊁组织结构和功能完整的基础上的㊂鱼类肠道不仅是重要的消化和吸收器官，同时还具有免疫㊁内分泌以７８６３㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷及新陈代谢的功能［２２］㊂肠道绒毛高度㊁隐窝深度㊁黏膜厚度是衡量肠道消化吸收的重要指标［２３］，肠道上皮中的杯状细胞主要功能是分泌黏液，在一定程度上可以间接反映黏液层的状况，对于判断机体肠道黏膜屏障的完整性具有重要意义［２４］㊂在本试验条件下，饲料中添加０．５０％谷氨酰胺二肽以后，能够促进草鱼幼鱼肠道黏膜厚度㊁杯状细胞数量增加㊂这一结果与对日本对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｊａ⁃ｐｏｎｉｃｕｓ）［２］的研究结果类似㊂这说明草鱼幼鱼在摄入饲料中的谷氨酰胺二肽后，机体可通过增加肠道黏膜厚度来提高对于营养物质的消化吸收能力以及促进杯状细胞的分泌保证肠道黏膜屏障的完整㊂隐窝深度上升会造成鱼类肠内膜面积变小，降低鱼类对营养物质的消化吸收能力［２５］㊂在本试验中添加０．５０％的谷氨酰胺二肽后，使得草鱼肠隐窝深度显著降低，这一结果表明，草鱼幼鱼饲料中谷氨酰胺二肽添加量为０．５０％，有利于草鱼幼鱼对于营养物质的消化吸收㊂４㊀结㊀论㊀㊀饲料中适量添加谷氨酰胺二肽可提高草鱼幼鱼营养物质代谢㊁提高免疫力以及促进肠道发育，进而促进草鱼幼鱼健康生长㊂综合而言，饲料中谷氨酰胺二肽最适添加量为０．５０％㊂参考文献：［１］㊀ＨＡＮＹＺ，ＫＯＳＨＩＯＳ，ＪＩＡＮＧＺＱ，ｅｔａｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔａｒｙｔａｕｒｉｎｅａｎｄｇｌｕｔａｍｉｎｅｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒ⁃ｆｏｒｍａｎｃｅ，ｂｌｏｏｄｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔａｔｕｓｏｆＪａｐａｎｅｓｅｆｌｏｕｎｄｅｒＰａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓｏｌｉｖａｃｅｕｓ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌ⁃ｔｕｒｅ，２０１４，４３４：３４８－３５４．［２］㊀叶均安，王冰心，孙红霞，等．谷氨酰胺二肽对日本对虾血清生化指标㊁肝胰腺细胞凋亡及肠黏膜形态的影响［Ｊ］．海洋与湖沼，２００９，４０（３）：３４７－３５２．［３］㊀贺光祖．谷氨酰胺二肽对猪肠上皮细胞更新和蛋白质代谢的调控研究［Ｄ］．硕士学位论文．长沙：湖南农业大学，２０１５．［４］㊀ＪＩＡＮＧＪＷ，ＲＥＮＺＧ，ＣＨＥＮＬＹ，ｅｔａｌ．Ｅｎｔｅｒａｌｓｕｐ⁃ｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｗｉｔｈｇｌｙｃｙｌ⁃ｇｌｕｔａｍｉｎｅｉｍｐｒｏｖｅｓｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｂａｒｒｉｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎａｆｔｅｒｌｉｖｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙ＆ＰａｎｃｒｅａｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２０１１，１０（４）：３８０－３８５．［５］㊀朱青．谷氨酰胺二肽对镜鲤生长㊁肠道发育及非特异性免疫的影响［Ｄ］．硕士学位论文．哈尔滨：东北农业大学，２０１０［６］㊀徐奇友，王常安，许红，等．饲料中添加谷氨酰胺二肽对哲罗鱼仔鱼肠道抗氧化活性及消化吸收能力的影响［Ｊ］．中国水产科学，２０１０，１７（２）：３５１－３５６［７］㊀李幼生，黎介寿．谷氨酰胺二肽的研究进展［Ｊ］．中华胃肠外科杂志，２００２，５（３）：２３２－２３３．［８］㊀ＨｅＪ，ＦＥＮＧＧＤ，ＡＯＸ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＬ⁃ｇｌｕｔａｍｉｎｅｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｂｉｌｉｔｙ，ｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｇｅｎｅｓｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｈｅａｌｔｈｉｎｗｅａｎ⁃ｌｉｎｇｐｉｇｓ［Ｊ］．ＬｉｖｅｓｔｏｃｋＳｃｉｅｎｃｅ，２０１６，１８９：１０２－１０９．［９］㊀李源，温安祥，骆美琳．谷氨酰胺促泥鳅生长机理的初步研究［Ｊ］．饲料工业，２０１４，３５（２）：３７－４３．［１０］㊀芦红梅．谷氨酰胺二肽对建鲤生长㊁免疫和抗应激的影响［Ｄ］．硕士学位论文．长春：吉林农业大学，２０１１．［１１］㊀丁兆坤，李伟峰，黄金华，等．丙氨酰－谷氨酰胺和维生素Ｅ对军曹鱼的影响［Ｊ］．水产科学，２０１７，３６（４）：３９５－４０２．［１２］㊀徐奇友，王常安，许红，等．丙氨酰－谷氨酰胺对哲罗鱼仔鱼生长和抗氧化能力的影响［Ｊ］．动物营养学报，２００９，２１（６）：１０１２－１０１７．［１３］㊀刘庄鹏．谷氨酰胺㊁谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长及生理生化指标的影响［Ｄ］．硕士学位论文．长沙：湖南农业大学，２０１５．［１４］㊀周荣艳，彭健，等．谷氨酰胺及其二肽与动物肠道营养免疫［Ｊ］．饲料研究，２００５（７）：５３－５６．［１５］㊀ＤＡＳＫＭ，ＴＲＩＰＡＴＨＩＳＤ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｄｉｇｅｓ⁃ｔｉｖｅｅｎｚｙｍｅｓｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐ，Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌａ（Ｖａｌ．）［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，１９９１，９２：２１－３２．［１６］㊀赵红霞．饲料中添加谷胱甘肽对草鱼生长性能㊁血清生化指标和体组成的影响［Ｃ］／／２００７年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编．中国水产学会：中国水产学会，２００７：１．［１７］㊀何杰，吴代武，叶元土，等．饲料组胺水平对黄颡鱼生长性能㊁血清生化指标和胃肠道黏膜结构的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１８，３０（７）：２５８１－２５９３．［１８］㊀雷五长，李锦，孙颖，等．谷氨酰胺在体内和体外试验中对鲤免疫力影响的研究［Ｊ］．天津农学院学报，２０１６，２３（３）：３５－３８，４２．［１９］㊀程镇燕，李建，雷五长，等．谷氨酰胺对点带石斑鱼免疫细胞免疫力的影响［Ｊ］．水产科学，２０１４，３３（１０）：６０６－６１０．［２０］㊀ＳＡＵＲＡＢＨＳ，ＳＡＨＯＯＰＫ．Ｌｙｓｏｚｙｍｅ：ａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｄｅｆｅｎｃｅｍｏｌｅｃｕｌｅｏｆｆｉｓｈｉｎｎａｔｅｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．ＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１０，３９（３）：２２３－２３９．［２１］㊀张军民，王连递，高振川，等．日粮添加谷氨酰胺对早期断奶仔猪抗氧化能力的影响［Ｊ］．畜牧兽医学报，２００２，３３（２）：１０５－１０９．［２２］㊀米海峰，孙瑞健，张璐，等．鱼类肠道健康研究进展［Ｊ］．中国饲料，２０１５（１５）：１９－２２．［２３］㊀张敏，邹晓庭，孙雅丽．外源性谷氨酰胺对艾维茵肉仔鸡生长性能和小肠发育的影响［Ｊ］．中国畜牧杂志，２００９，４５（９）：３２－３６．［２４］㊀邢潇，宋如昕，王兰，等．急性冷胁迫对中华鳖幼鳖肠道黏膜组织的影响［Ｊ］．水生生物学报，２０１９，４３８８６３８期吴桐强等：谷氨酰胺二肽对草鱼幼鱼生长㊁血清生化㊁免疫指标及肠道组织结构的影响（１）：１０２－１０８．［２５］㊀姚浪群，萨仁娜，佟建明，等．安普霉素对仔猪肠道微生物及肠壁组织结构的影响［Ｊ］．畜牧兽医学报，２００３，３４（３）：２５０－２５７．∗Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｄｅｑｕａｌｌｙ∗∗Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒｓ：ＨＵＹｉ，ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｈｕｙｉ７４０３２２＠１６３．ｃｏｍ；ＬＩＵＺｈｅｎ，ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ，Ｅ⁃ｍａｉｌ：２５３０００８５＠ｑｑ．ｃｏｍ（责任编辑㊀陈㊀鑫）ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＧｌｕｔａｍｉｎｅＤｉｐｅｐｔｉｄｅＯｎＧｒｏｗｔｈ，ＳｅｒｕｍＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＩｍｍｕｎｉｔｙＩｎｄｅｘｅｓａｎｄＩｎｔｅｓｔｉｎａｌＭｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆＪｕｖｅｎｉｌｅＧｒａｓｓＣａｒｐ（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）ＷＵＴｏｎｇｑｉａｎｇ１，２㊀ＺＨＯＮＧＬｅｉ１，２∗㊀ＬＩＵＺｈｕａｎｇｐｅｎｇ１，２㊀ＨＵＹｉ１，２∗∗㊀ＬＩＵＺｈｅｎ２，３∗∗㊀ＬＵＳｈｕａｎｇｑｉｎｇ２，３（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒｆｏｒＥｆｆｉｃｉｅｎｔａｎｄＨｅａｌｔｈＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓｉｎＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈａｎｇｄｅ４１５０００，Ｃｈｉｎａ；３．ＨｕｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｏｆＡｑｕａｔｉｃＡｎｉｍａｌｓ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｈａｎｇｓｈａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００２２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅａｉｍｏｆｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅ（Ｇｌｙ⁃Ｇｌｎ）ｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈ，ｓｅｒｕｍｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｉｍｍｕｎｉｔｙｉｎｄｅｘｅｓａｎｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ．Ａｔｏｔａｌｏｆ７５０ｆｉｓｈｗｉｔｈａｎａｖｅｒａｇｅｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔｏｆ（７．１６ʃ０．１０）ｇｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｎｄｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ５ｇｒｏｕｐｓｗｉｔｈ３ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓｐｅｒｇｒｏｕｐａｎｄ５０ｆｉｓｈｐｅｒｒｅｐｌｉｃａｔｅ．Ｆｉｓｈｗｅｒｅｆｅｄｄｉｅｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ０（ｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ）ａｎｄ０．２５％，０．５０％，０．７５％ａｎｄ１．００％ｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｆｅｅｄｉｎｇｔｅｓｔｌａｓｔｅｄｆｏｒ８ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｓ：１）ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｇａｉｎｒａｔｅａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄｔｈｅｆｅｅｄｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５）ｉｎｔｈｅｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓ．Ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆ０．２５％ａｎｄ０．５０％ｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｓｉｇｎｉｆｉ⁃ｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｌｉｐａｓｅａｎｄｔｒｙｐｓｉｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（Ｐ＜０．０５）．２）Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｓｅｒ⁃ｕｍｇｌｕｃｏｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎ０．７５％ｇｒｏｕｐｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｔｈｅｓｅｒｕｍｕｒｅａｎｉｔｒｏｇｅｎｃｏｎｔｅｎｔｉｎｅａｃｈｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｉｎｔｈｅｆｅｅｄｍａｄｅｔｈｅｓｅｒｕｍｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅａｎｄｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｏｎｔｅｎｔｓｄｅｃｒｅａｓｅ，ａｎｄｔｈｅｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｃｏｎｔｅｎｔｉｎ０．５０％ｇｒｏｕｐｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｓｅｒｕｍｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｅａｃｈｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｇｌｕｔａｍｉｃｏｘａｌａｃｅｔｉｃｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅａｎｄａｌａｎｉｎｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｈｅｎｔｈｅｄｏｓａｇｅｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎ０．５０％（Ｐ＜０．０５）．３）Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｓｅｒｕｍｌｙｓｏｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ０．５０％ｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５）．Ｓｅｒｕｍｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ４ｃｏｎｔｅｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎ０．７５％ａｎｄ１．００％ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅｔｈｅｃｏｒｔｉｓｏｌｃｏｎｔｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｓｅｒｕｍｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｔｏｔａｌａｎｔｉｏｘｉ⁃ｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｅａｃｈｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．４）Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｃｒｙｐｔｄｅｐｔｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄｉｎ０．５％ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｕｃｏｓａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｈｅ０．７５％ａｎｄ１．００％ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｇｏｂｌｅｔｃｅｌｌｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎ⁃ｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｈｅ０．５０％ａｎｄ１．００％ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｉｎｓｕｍｍａｒｙ，ｔｈｅａｄｄｉｔｉｏｎｏｆ０．５０％ｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅｔｏｔｈｅｆｅｅｄｃａｎｐｒｏｍｏｔｅｎｕｔｒｉｅｎｔｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，ｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐｊｕｖｅｎｉｌｅｓ，ｔｈｅｒｅｂｙｐｒｏ⁃ｍｏｔｉｎｇｇｒｏｗｔｈ．［ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０１９，３１（８）：３６８２⁃３６８９］Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｇｌｕｔａｍｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｅ；ｊｕｖｅｎｉｌｅｇｒａｓｓｃａｒｐ；ｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ；ｉｍｍｕｎｉｔｙ；ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ９８６３。

谷氨酰胺对幼鲟鱼血清、肝胰脏生化指标及体成分的影响朱青;许红;徐奇友;王长安;孙大江【摘要】选用315尾初始体重(22.38±0.18g)的杂交鲟幼鱼,随机分为7组,每组3个重复,每个重复15尾.Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组为试验组,分别饲喂在基础日粮中添加0.3%,0.6%,0.9%,1.2%,1.5%的谷氨酰胺(Gln)及1.0%的丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)日粮,观察Gln对杂交鲟血清、肝胰脏生化指标及体成分的影响.结果显示:与对照组相比,各试验组血清总蛋白和球蛋白含量显著升高(P<0.05),但白蛋白含量无显著变化;各组的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶及碱性磷酸酶活性差异不显著;添加Gln和Ala-Gln对肝胰脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶和碱性磷酸酶活性无显著影响;各试验组全鱼粗蛋白质含量升高,其中Ⅴ、Ⅵ和Ⅶ组显著升高(P<0.05);各组的粗水分、粗脂肪和灰分含量差异不显著.结果表明,日粮中添加一定量的Gln能够显著促进鲤鱼幼鱼营养代谢,提高全鱼蛋白质含量.【期刊名称】《水产学杂志》【年(卷),期】2010(023)002【总页数】5页(P16-20)【关键词】谷氨酰胺;杂交鲟;生化指标;体成分【作者】朱青;许红;徐奇友;王长安;孙大江【作者单位】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070;东北农业大学动物科技学院,黑龙江,哈尔滨,150030;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江,哈尔滨,150070【正文语种】中文【中图分类】Q955条件性必需氨基酸-谷氨酰胺(glutamine，Gln)是动物体内含量最丰富的游离氨基酸，它是组织间氮运输载体，是核苷酸和其它氨基酸合成前体，是快速分化细胞的主要能源物质，并参与机体内谷胱甘肽的合成[1-5]。

动物营养学报2012，24(3)：406410C hi nes e J our nal of A ni m a l N ut ri t i ondoi：10．3969／j．i ss n．1006-267x．2012．03．003谷氨酰胺对水生动物免疫的影响及机理许友卿李伟峰丁兆坤‘(广西大学水产科学研究所，南宁530004)摘要：本文主要围绕谷氨酰胺对水生动物免疫的影响及机理进行综述，旨在促进谷氨酰胺在水生动物上的研究及科学应用。

关键词：谷氨酰胺；免疫；机理；水生动物中图分类号：$963文献标识码：A文章编号：1006-267X(2012)03-0406-05在应激、受伤、疾病等状态下，机体对谷氨酰胺(gl ut am i ne，G i n)的需要量大大提高，而自身合成不能满足需要，必须添加外源G i n【l J。

因此，G i n 是机体发生应激、受伤、疾病时的条件必需氨基酸旧J。

具有O t一酮戊二酸碳架结构的G i n可通过体细胞三羧酸循环(t r i carboxyf i c aci d cyc l e，T C A)氧化供能，同时它又是核苷酸、谷氨酸和谷胱甘肽(gl ut a t hi one，G SH)生物合成的前体∞-4]。

G i n还能减少促炎症细胞因子的表达，改善肠道屏障功能，改进免疫细胞功能，提高应激反应能力[5】。

在机体中，尤其是血浆中，G i n是最丰富的游离d一氨基酸旧J，也是免疫细胞和肠道黏膜细胞的重要燃料和代谢前体…，具有促进肠道黏膜修复、淋巴细胞增殖、巨噬细胞分裂和分化的作用，在调节免疫功能方面具有重要意义¨1。

目前，对于G i n的研究主要集中在人和陆生动物上，在水生动物上的研究较少。

随着海洋科学和水产养殖业的发展，加强G i n在水生动物上的应用研究是历史使然。

因此，本文将围绕G i n 对水生动物免疫的影响及机理进行综述，旨在促进G i n在水生动物上的研究及科学应用。

泥鳅中的生物活性分子及其药理作用钦传光,黄开勋,徐辉碧(华中科技大学药学研究所,湖北武汉430074)摘要:泥鳅具有重要的营养保健作用和临床药用价值,对多种疾病确有疗效。

综述了泥鳅中生物活性分子及其药理作用的研究进展。

关键词:泥鳅;凝集素;抗菌肽;超氧化物歧化酶;牛磺酸;多糖;生物活性中图分类号:R282文献标识码:A文章编号:1005-1678(2002)01-0047-02Bioactive molecules in the loach and their pharmacological actionsQIN Chuan-guang,HUANG Ka-i xun,XU Hu-i bi(Pharmaceutical Research Institute,Huazhong University o f Science and Technology,Wuhan430074,China)泥鳅(M isgurnus anguillicaudatus Cantor)系鳅科动物,肉或全体入药,收载于5中药大辞典6[1]。

其主要功效为补脾益气、滋阴壮阳、清热解毒、祛湿邪,治消渴、水肿黄疸、痢疾、阳痿等症。

民间常用其黏液治痈肿、中耳炎,用活泥鳅捣碎外敷治疗乳癌、骨髓炎等,疗效显著。

近代用于治疗传染性肝炎和消渴病[2,3]。

食则味道鲜美,营养丰富[4-6]目前关于泥鳅药用的有效成分(或部位)以及用现代方法对泥鳅进行炮制加工和药理观察的探讨较少。

本文就最近有关泥鳅中的生物活性分子及其药理作用的研究进展作一综述,为进一步研究泥鳅的药效基础和保健功能提供参考。

1凝集素泥鳅的黏液提取物能凝聚包括人(A型、B型和AB型)、兔、羊等在内的各种哺乳动物的血红细胞,但不与人类O型血红细胞反应。

在加热和极端pH值的条件下,泥鳅黏液提取物的血细胞凝集活性会遭到破坏,该活性对Ca2+的存在是非依赖性的。

交叉吸附实验表明泥鳅黏液提取物中可能含有非血型专一性的凝集素。

谷氨酰胺转胺酶（TG酶）的催化机理及对鱼糜凝胶特性的影响摘要：TGase由于可以催化蛋白质分子之间的交联，而被广泛应用于鱼糜凝胶的改善和重组肉等食品中。

本文总结了TGase的催化剂机理是催化酰基转移反应、交联反应、脱氨基化反应以及分解谷氨酸胺的反应。

探讨TGase凝胶化温度、作用时间以及添加量对鱼糜凝胶特性和品质产生显著的影响，并对TGase的未发展方向提出展望。

关键词：谷氨酰胺转胺酶转酰基反应鱼糜凝胶 TGase添加量 TGase作用温度与时间谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase，E.C.2.3.2.13)简称TGase，是一种具有改善蛋白质组织，风味及货架期等功能性质的生物酶。

根据来源不同，一般把TGase 分为组织谷氨酰胺转氨酶(TissueTransglutaminase，tTG)和微生物谷氨酰胺转氨酶(Microbial Transglutaminase，MTG)。

1957年Clark等人[1]为了描述在豚鼠肝脏中观察到的转酰胺基作用，由此提出了转谷氨酰胺酶一词。

早期的研究主要集中在动物组织中的谷氨酰胺转胺酶，而在1989年Audo等从轮枝酶链菌中分离得到TGase之后，TG酶在大规模发酵生产和食品工业的应用研究迅速发展起来[2]。

TG酶一种球状单体蛋白、亲水性高、对热稳定，活性一般为22.6U/mg，等电点为8.9，分子量为38KDa，可以催化酰基转移反应。

通过催化蛋白质分子内或分子间发生交联、蛋白质和氨基酸之间连接、以及蛋白质分子内谷氨酰胺酰胺基的水解，使蛋白质形成凝胶，改善蛋白制品的弹性、粘合性、保水性，并通过引入赖氨酸而提高了蛋白质的营养效价。

大多数转谷氨酰胺酶需要Ca2+参与，但微生物TGase不需要Ca2+激活[2]。

通过快速原子轰击质子技术及对多肽链片段的降解, 对微生物菌株中TGase 的结构进行分析, 发现该酶的一级结构由331个氨基酸残基组成，二级结构中α-螺旋占21%，β-折叠占31%[3]。

2021 Vol.40 No.4• 6 • Serial No.350China BrewingForum and Summary微生物谷氨酰胺转氨酶的来源与生物工程技术研究进展张秀江吧权淑静向凌云刘 丽解复红冯 菲胡 虹®(1.河南省科学院生物研究所有限责任公司3河南郑州450008; 2.河南省工业酶工程技术研究中心3河南 郑州450008)摘 要:微生物谷氨酰胺转氨酶(MTGase )是一种通过异肽键来催化蛋白质或多肽链之间的酰基发生转移反应的重要酶制剂，在食品、生物 、化 品、纺织 广泛的应 。

该 MTGase 的 外研究现，MTGase 基因、MTGase 工程 的构建和表达，以及MTGase 的分子改造技术研究进展，并对生物工程技术应用于MTGase 的产品生产进行了展望，为高效和低成本MT ­Gase 的产品开发及应的思路和 。

关键词:微生物谷氨酰胺转氨酶;克隆表达;工程菌株x 分子改造中图分类号：Q814.4文章编号：0254—5071 (2021)04—0006—05doi:10.11882j.issn.0254—5071.2021.04.002引文格式:张秀江,权淑静，向凌云，•微生物谷氨酰胺转氨酶的来源与生物工程技术研究进展［J ］•中国酿造,2021,40(4):6-10.Research progress on the source of microbial transglutaminase and bioengineering technologyZHANG Xiujiang 1'2, QUAN Shujing 1^, XIANG Lingyun 1^, LIU Li^ XIE Fuhong 1^, FENG Fei 1，2, HU Hong 1^*收稿日期：2020-08-19修回日期：2020-11-27基金项目:河南省科学院科技开放合作项目(200905004)作者简介:张秀江(1963-)，男,研究员，本科，研究方向为生物酶制剂｝*通讯作者:胡 虹(1985-)，女,助理研究员，硕士，研究方向为功能微生物｝([.Institute of B iology Co., Ltd., Henan Academy of S cience, Zhengzhou 450008, China;2.Henan Engineering Technology Research Center of I ndustrial Enzymes, Zhengzhou 450008, China)Abstract ： Microbial transglutaminase (MTGase) is an important enzyme that catalyzes the acyl transfer reaction between proteins or polypeptide chains bydifferent peptide bonds, which has a wide application prospect in food, biomedicine, cosmetics, textile and other fields. In this paper, the research status ofMTGase at home and abroad, MTGase gene, the construction and expression of MTGase engineering strain, and the research progress of molecular modification technology of MTGase were reviewed, and the application of bioengineering technology in MTGase production was prospected. It provided new ideas and methods for the development and application of efficient and low-cost MTGase products.Key words ： microbial transglutaminase ; cloning and expression; engineering strain; molecular modification谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase , TGase )在动物、植 物和微生物的机体组织中广泛存在，能够催化肽链的谷氨酰胺残基中的了-E 酰胺基和酰基受体发生转酰基反应，促 使蛋白质或多肽之间发生共价交联［1］，改善蛋白质的溶解性、乳化性、弹性、稳定性和凝胶强度，实现不同质地和不同风味的蛋白食品生产孔根据来源不同分为两类，来源于动植 物组织的称为组织谷氨酰胺转氨酶(tissue transglutaminase ，TTGase )，来源于微生物发酵制备的称为微生物谷氨酰胺转氨酶(microbial transglutaminase ，MTGase )。

谷氨酰胺对黄颡鱼幼鱼抗氧化能力和非特异性免疫力的影响张杰;陈海敏;周歧存;朱芳周【摘要】A 10-week feeding trial was conducted to investigate the effects of dietary glutamine ( Gln) on an-tioxidant capacity and non-specific immunity of juvenile yellow catfish ( Pelteoobagrus fulvidraco) .A total of 240 juvenile yellow catfish with an average body weight of ( 2.49 ±0.04) g were randomly divided into 4 groups with 3 replicates per group, and 20 fish in each replicate.The fish in those groups were fed 4 iso-nitrog-enous and iso-energetic diets with the Gln additions of 0 ( control) , 0.1%,0.2%and 0.4%, respectively.The results showed that fish fed the diet containing 0.2%Gln could significantly improve the contents of total pro-tein ( TP) , globulin ( GLOB) , triglyceride ( TG) , high-density lipoprotein ( HDL) and low-density lipopro-tein ( LDL ) in serum ( P<0.05 ) .No significant differences in the activities of alanine aminotransferase ( ALT) , aspertate aminotransferase ( AST) and alkaline phosphatase ( ALP) in serum among groups ( P>0.05) .However, fish fed the diet containing 0.1%Gln could significantly improve the activities of catalase ( CAT ) , glutathione peroxidase ( GSH-Px ) in liver and superoxide dismutase ( SOD ) , GSH-Px in muscle ( P<0.05) .Phagocytosis index of macrophages from head-kidney showed an increasing trend with the dietary Gln addition increasing, and 0.2%and 0.4%groups were significantly higher than control group ( P<0.05) , but no significant difference was found between 0.2%and 0.4%groups ( P>0.05) .The results indicate that di-etadding 0.1%to 0.2%Gln can improve the antioxidant capacity and non-specific immunity of juvenile yellow catfish.%本试验旨在研究谷氨酰胺对黄颡鱼幼鱼抗氧化能力及非特异性免疫力的影响。