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菌落总数与大肠菌群检验原始记录
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乳酸菌与大肠菌群检测记录
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致病菌检验原始记录
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霉菌和酵母菌检验原始记录
菌落计数:
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主检日期校核日期。
创作编号:BG7531400019813488897SX
创作者:别如克*
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培养温度:28±1℃培养时间:年月日时--- 年月日时:
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创作编号:BG7531400019813488897SX
创作者:别如克*。
微生物检验原始记录检验项目:大肠菌群样品名称清香蒜生产单位使用仪器、设备、药品试剂及试验环境月桂基硫酸盐胰蛋白胨煌绿乳糖胆盐超净工作台恒温培养箱大肠菌群GB4789.3-2010操作过程:1、配制单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤100 mL,分别注入6个试管中约10mL(每个试管里有小倒管).配制双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤100mL,分别注入3个试管中约10mL(每个试管里有小倒管)。
2、配制0.85%生理盐水250mL,分别吸取9ml于2个试管中,量取225ml三角瓶中,并加数粒玻璃珠,将上述试管和三角瓶分别加塞用报纸包好,与已包好的吸管(1ml、10mL)一起高压灭菌(121℃ 20min)。
3、称取25克样品置于225mL已灭菌的生理盐水中,摇匀,制成10-1样品匀液。
吸取1ml10-1样品匀液注入盛有9mL稀释液(无菌生理盐水)试管中,摇匀,制成10-2样品匀液。
并吸取10-1样品匀液各10mL,注入3各双料试管中。
4、吸取10-2样品匀液各1mL分别注入三个单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤试管中,再吸取1 mL10-2样品匀液注入盛有9mL生理盐水的试管汇总,制成10-3样品匀液。
5、吸取10-3样品匀液各1mL,分别注入三个单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤试管中。
将上述试管于36±1℃的恒温培养箱内培养48h±2h,观察倒管内产气情况。
6、将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中。
置BGLB肉汤管于36±1℃培养48±2h。
记录所有BGLB肉汤管的产气管数。
10ml 1ml 0.1ml 0.01ml月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤煌绿乳糖胆盐肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤煌绿乳糖胆盐肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤煌绿乳糖胆盐肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤煌绿乳糖胆盐肉汤MPN/ml(g)〈300 0 0 0 0 0 0 0化验员:日期:。
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微生物限度检验原始记录R-ZL-126-01样品名称:规格:检验依据:批号:收验日期:年月日报告日期:年月日检验过程:1、细菌、霉菌及酵母菌计数采用常规法,取供试品10g(天平型号:编号:),加Ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(高压蒸汽灭菌器型号:编号:)至100ml,混匀,作为1:10的供试液。
取供试液1ml,置直径90mm无菌平皿(电热恒温干燥箱型号:编号:)中,注入15-20ml温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基(配制批号:)、玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(配制批号:)中,混匀,凝固,倒置培养(电热恒温培养箱型号:编号:);霉菌培养箱型号:编号:)。
每种培养基至少制备2个平板。
阴性对照试验:取试验用的稀释液1ml,置无菌平皿中,每种计数用的培养基各制备2个平板,均不得有菌生长。
细菌总数培养温度30-35℃培养时间72h 限度规定稀释倍数 10-1 10-2 10-3阴性对照结果报告平皿1平皿2平均菌落数霉菌、酵母菌数培养温度23-28℃培养时间120h 限度规定稀释倍数10-1 10-2 10-3阴性对照结果报告平皿1平皿2平均菌落数2、大肠埃希菌检验取胆盐乳糖培养基(配制批号:)(高压蒸汽灭菌器型号:编号:)3份,每份各100ml,1份加入供试液10ml(相当于供试品1g),1份加入对照菌液作为阳性对照,第3份加入与供试液等量的稀释剂作为阴性对照。
均培养24小时(电热恒温培养箱型号:编号:)。
阴性对照应无菌生长。
必要时可延长至48小时。
取上述培养物0.2ml,接种至含5mlMUG培养基(配制批号:)(高压蒸汽灭菌器型号:编号:)的试管内,培养,于24小时在366nm紫外光下观察,(也可在5小时时进行观察,若无荧光则需延长培养,24小时时再进行观察),同时用未接种的MUG培养基作本底对照。
若管内培养物呈现荧光,为MUG阳性;不呈现荧光,为MUG阴性。
观察后,沿培养基的管壁加入数滴靛基质试液,液面呈玫瑰红色,为靛基质阳性;呈试剂本色,为靛基质阴性。
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菌落计数:
培养温度:28±1℃培养时间:年月日时--- 年月日时
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样品名称:生产日期:样品规格:产品批号:抽样数量:
检测依据:□GB 4789.2-2010 □GB 4789.3-2010 □GB 4789.15-2010 使用仪器:天平□电热恒温培养箱□水浴箱□环境条件:室温℃
实验地点:无菌室检测日期:20 年月日~ 月日检测项目:□菌落总数、□大肠杆菌、□霉菌计数、□酵母计数、□霉菌和酵母计数
样品处理:1. □以无菌操作将检样25 注入225ml灭菌□磷酸盐缓冲液或□生理盐水或□蒸馏水中均质或混匀,□用灭菌吸管吸取检样1ml 注入9ml灭菌稀释液中充分振摇,做成1:10的均匀稀释样; 2. □用灭菌吸管吸取1:10稀释样1ml注入9ml灭菌稀释液中,混匀做成1:100稀释样;3. □同样方法做成10倍递增稀释样。
1.菌落总数2.大肠杆菌
接种2~3个稀释度各2的平皿,每皿1ml检样或稀释样,注入46℃
平板计数琼脂约15ml,凝固,℃培养h(时分~ 时分)。
选择接种3个稀释度
10
x
1
x
0.1
x
0.01
x
0.001
x
稀释度10-10-所选稀释
度平均值
空白
对照
稀释液
对照
乳糖胆盐发酵管经36℃h
(时分~ 时分)后产气管数
菌落数转种在伊红美蓝琼脂平板上36℃h,革兰氏蓝色发酵管经36℃h(时分~ 时分)后产气管数
计算
方法
所选稀释度的平均菌落数()X稀释倍数()=根据证实为大肠菌群阳性的管数,查大肠菌群(MPN)检索表,MPN值为=
3.霉菌和酵母计数
选择接种3个稀释度,平行接种2个平皿,每皿1ml检样或稀释样;注入46℃孟加拉红琼脂约15ml,凝固,26℃培养= d(/ : ~ / : );空白对照菌数灭菌水对照菌数=
稀释度10-10-所选稀释度平均值
□霉菌菌落数
计算方法所选稀释度平均菌落数()X稀释倍数()=
□霉菌菌落数
计算方法所选稀释度平均菌落数()X稀释倍数()=
检验菌落总数大肠菌群霉菌酵母
结果:cfu/ MPN/100 计数cfu/ 计数cfu/
检测者:审核者:。