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天根 一步法逆转录PCR试剂盒说明书

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天根切胶回收说明书

天根切胶回收说明书

天根切胶回收说明书
天根切胶回收试剂盒说明书
一、产品简介
天根切胶回收试剂盒是一种高效的DNA片段回收试剂盒，能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段。

该试剂盒采用独特的吸附技术，能够有效地去除凝胶中的杂质，纯化DNA片段。

回收的DNA片段可用于后续的克隆、测序、PCR等实验。

二、产品特点
1. 高效回收：能够从凝胶中快速、准确地回收目的DNA片段，回收率高达90%以上。

2. 纯度高：能够有效去除凝胶中的杂质，纯化DNA片段，提高后续实验的准确性和可靠性。

3. 操作简便：采用独特的吸附技术，无需使用有机溶剂，简化了操作步骤。

4. 稳定性好：试剂盒中的成分稳定，便于长期保存和使用。

三、使用方法
1. 准备凝胶和电泳缓冲液：将凝胶和电泳缓冲液按照要求准备妥当。

2. 切胶：按照实验要求将凝胶切成适当大小的胶块。

3. 洗涤：将切好的胶块放入离心管中，加入适量的洗涤液，充分混匀，洗涤去除凝胶中的杂质。

4. 吸附：将洗涤后的胶块放入吸附柱中，按照说明书要求进行吸附操作。

5. 洗脱：将吸附后的DNA片段进行洗脱，收集洗脱液。

6. 检测：对回收的DNA片段进行检测，如琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测。

四、注意事项
1. 使用前请仔细阅读本说明书，确保按照说明书要求正确操作。

2. 本试剂盒仅供实验室使用，请勿用于食品、药品等领域。

3. 使用过程中请注意安全，避免直接接触眼睛、皮肤和衣物等。

如不慎接触到皮肤或眼睛，请立即用清水冲洗，并及时就医。

4. 本试剂盒中的试剂和耗材均为一次性使用，用后请及时处理废弃物。

一步法RT-PCR试剂盒使用说明书

一步法RT-PCR试剂盒使用说明书

一步法RT-PCR 检测试剂盒 (一步法RT-PCR 扩增试剂盒)(目录号HS0612-2)产品包装保存条件-20℃产品简介本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验研制，逆转录和PCR 在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。

本试剂盒包括全新高效逆转录酶、快速热启动DNA 聚合酶，同时包含适用于逆转录和PCR 扩增的反应缓冲液和实验中所必需的反应组分。

经过重组表达的SuperRT 逆转录酶RNase H 活性缺失，减少了逆转录反应中RNA 的降解，更容易获得全长的cDNA 。

该逆转酶逆转录效率高，可对少量 RNA 模板进行良好的逆转录反应。

SuperRT 逆转录酶与RNA 亲合性高，能通读GC 含量高，二级结构复杂的RNA 模板，获得高产量的cDNA 。

PCR 反应使用的DNA 聚合酶具有扩增效率高、延伸速度快的优良性能。

独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。

使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录和PCR 扩增反应。

使用本试剂盒扩增得到的目的产物3′端附有一个″A ″碱基，可直接用于T/A 克隆。

北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 效率高，可以高效转录GC含量高，二级结构复杂的RNA模板。

2. 耐热性及稳定性强。

3. 操作简单迅速,最大限度的避免污染。

4. 独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。

使用方法1）一般PCR实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为20 ~ 30秒，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

2）延伸时间根据所扩增的片段大小设定，本产品中所包含的DNA Polymerase的扩增效率为1 kb/30s。

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。

1一步法荧光定量反转录PCR试剂盒

1一步法荧光定量反转录PCR试剂盒
适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高 GC 含量或具有复杂二级结构的 RNA 模板。
注意事项：
●当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液（M aster M ix；其中 包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等），然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确， 减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。 ●使用Enzyme M ix和TRUEscript RTase时，分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含 有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。 ●2×qRT-PCR M ix内含Sybr Green I，保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。 ●为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。 ●不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。 ●只能使用特异性引物，不能使用 Oligo(dT) 和 Random Primer 进行反应。
TUREscript One Step qRT-PCR Kit
包 装 量：
目录编号 154101 154102
包装单位 25次 50次
使用说明书
组成
2×qRT-PCR M ix(Contains Sybr Green) Enzyme M ix (Contains HotM aster DNA Polymerase and RNasin) TRUEscript RTase
反应体系（50 μl）：
注意：2×qRT-PCR Buffer 低温时可能有结晶析出，应手心加热或者涡旋振荡恢复融解后使用。短期使用可放 4℃ 冰箱。

takara反转录试剂盒说明书

takara反转录试剂盒说明书

Code No. RR047A 研究用PrimeScript™RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ● Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8●制品说明为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。

为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。

但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。

在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。

而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。

Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。

同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。

使用本制品合成的cDNA适用于SYBR® Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR Premix Ex Taq™ II（Tli RNaseH Plus）（Code No. RR820Q/A/B）、Probe qPCR Mix（Code No. RR391S/A/B）组合使用。

天根染料1 FP401-miRcute_mi 说明书

天根染料1 FP401-miRcute_mi 说明书

miRNA 第一链 cDNA
-
-
-
注：
ddH2O
至 50 µl
至 20 µl
-
1. miRNA 第一链 cDNA 的加入量不要超过 real time PCR 体积 1/10。 2.对于特殊的检测体系中，高含量的 cDNA 模板易导致非特异性扩增，根据所 检测 miRNA 的丰度适当的稀释 cDNA（10 倍或者 100 倍）。
法。 3. 试剂盒中提供的下游引物的 Tm 值为 65℃，设计上游引物的 Tm 值要尽量保
证在 65℃左右。 4. 若按照原则 2 的方式直接设计的引物其 Tm 值过低，可以在引物的 5’端添加
几个碱基（最好为 G 或 C 碱基）；也可以在 3’端添加 1 个或几个 A 碱基；或 者 5’端和 3’端同时修饰。 5. 若按照原则 2 的方式直接设计的引物其 Tm 值过高，可以在引物的 5’或 3’端 去掉几个碱基。
注：该试剂盒须与 miRcute miRNA cDNA 第一链合成试剂盒（KR201）配套 使用
需自备的试剂：
1. 分子生物学实验级别的水（无核酸酶） 2. PCR 上游引物（Forward primer）
Forward Primer 设计原则：
1. 遵循引物设计的最普遍原则。 2. 以成熟的 miRNA 序列为基础，将 U 替换成 T，这是最基础和最简单的设计方
内容 起始模板变性 PCR 循环中模板变性
退火 延伸
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
版本号: QP110124
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. Order: 010-59822688 Technical: 010-59822661/2665 Toll-free: 800-810-2177

takara反转录试剂盒说明书

takara反转录试剂盒说明书

takara反转录试剂盒说明书说明书一、产品简介takara反转录试剂盒是一种高效、可靠的反转录试剂盒，适用于转录RNA为cDNA的实验操作。

本试剂盒由takara公司制造，经过严格的质量控制，确保产品的稳定性和可靠性。

二、试剂盒组成本试剂盒包含以下组分：1. 反转录酶：高效反转录酶，能在广泛的实验条件下进行反转录反应。

2. 基质：提供反应所需的核酸和其他辅助物质。

3. 标记物：用于标记反转录产物的荧光染料或放射性同位素。

4. 缓冲液：维持试剂盒中酶的活性，调节反应条件的缓冲体系。

5. 控制样品：用于检验试剂盒的反应效果和稳定性。

三、实验操作1. 准备工作在进行实验前，请准备所需的实验仪器和试剂，确保实验环境的清洁和无菌，避免污染对实验结果的影响。

2. RNA提取使用适当的方法提取目标RNA样本，并在提取过程中避免RNA的降解。

3. 反转录反应将提取的RNA样本与反转录试剂盒中的反转录酶、基质和缓冲液按推荐比例混合，并在适当的温度下进行反应。

反应时间根据样本的RNA含量和实验要求确定。

4. 停止反应通过停止反应来终止反转录反应，一般使用热敏感性酶来达到这个目的。

5. 产物处理反转录产物可以直接用于下游实验，如实时定量PCR、聚合酶链式反应等，也可以进行储存和后续处理。

四、实验结果解读根据试剂盒的使用目的和实验设计，对反转录产物进行相应的分析和解读。

常见的分析方法有凝胶电泳、实时定量PCR和测序等。

根据实验结果，可以得到RNA的表达情况、差异表达基因等相关信息。

五、注意事项1. 试剂保存：请按照试剂盒上的说明保存试剂，避免暴露在高温、冻融循环和光照等不利条件下。

2. 操作规范：请按照本说明书中提供的实验操作步骤进行操作，避免实验误差对结果的影响。

3. 质量控制：在每次实验中，请使用合适的阳性和阴性对照样品，以确保实验结果的准确性和可靠性。

4. 废弃物处理：请将使用过的试剂和实验废弃物按照相关规定进行处理，避免对环境造成污染。

BioRT逆转录扩增（RT-PCR）试剂盒说明书（一步法）

BioRT逆转录扩增（RT-PCR）试剂盒说明书（一步法）

b、按以下条件进行PCR反应94℃3m i n94℃30s25-35循环***37℃-65℃**30s72℃****45s-7min72℃5min注：*RT产物可增加至5μl 。

**退火温度根据引物Tm值调整，一般为Tm-5℃。

Control引物退火温度为55℃。

*** 当实验样品RNA特别稀少时，可将循环数增加至40-45循环。

**** 延伸时间根据PCR产物大小确定，一般1kb/min 。

Control引物延伸时间45s。

c、反应结束后，取3-5 μl PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，确认PCR反应产物。

如果此PCR产物需用于以后实验，应将PCR产物冷冻保存。

RNA control反应时，退火温度55度，30个循环，扩增片段大小为500bp。

使用提示1. RNA模板可以采用总RNA或mRNA，建议使用Biozol(BSC51M1)制备高质量RNA；2. RT实验应避免RNase污染，可采用以下措施：1）因人的皮肤表面和唾液都有RNase，因此实验中应戴一次性手套和口罩；2） RT实验应使用专门的仪器和耗材，建议在专门区域操作RNA；3） RT实验相关耗材应使用干热灭菌（180℃，60分钟）或用0.1％ DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时后在121℃高压灭菌30分钟；3. AMV逆转录酶，DNA聚合酶和RNase抑制剂在取用之前应离心后再吸取，吸取时动作要慢，使用后应尽快放回-20℃；4. dNTP应避免反复冻融以免失效；5. 引物的选择可根据具体情况，Oligo-dT适用于具有PolyA尾的RNA(一般是真核生物的mRNA)，Random Hexamer Primer适用于所有RNA(包括mRNA,rRNA,tRNA等)，尤其适用于有复杂二级结构的RNA，特异性引物适用于已知模板序列的RNA；6. PCR反应中MgCl2浓度可依据不同条件进行调整，当目的片段长度大于2kb时，我们建议增加MgCl2浓度，以0.5mM间隔梯度增加。

Takara说明书

Takara说明书

Code No. RR047A 研究用PrimeScript TM RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ●Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8●制品说明为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。

为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。

但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。

在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。

而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。

PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。

Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。

同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA 合成的全过程。

使用本制品合成的cDNA适用于SYBR® Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR®Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）、Premix Ex Taq（Probe qPCR）等定量试剂组合使用。

SYBR一步法荧光定量PCR试剂盒使用说明书

SYBR一步法荧光定量PCR试剂盒使用说明书

一步法实时RTPCR 检测试剂盒（SYBR 一步法荧光定量PCR 试剂盒）(目录号HS0614)产品包装保存条件-20℃避光保存。

产品简介本产品是一步法Real-Time qRT-PCR 专用试剂盒。

所含的SYBR Green I 荧光染料可以与所有的双链DNA 相结合，使该产品可以用于多种不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。

使用本产品进行Real Time qRT-PCR 反应，逆转录和定量PCR 在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。

本试剂盒中包含全新高效逆转录酶，具有与RNA 高亲和性的特点，能通读GC 含量高、二级结构复杂的RNA 模板；所包含的经化学修饰的热启动DNA 聚合酶最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物的产生，极大提高了荧光定量PCR 反应的精确性；所包含的缓冲系统使以上两种酶同时发挥最大的功效，提高效率。

所含的ROX 染料调节PCR 反应过程中管与管之间的加样误差，适用于以ROX 作为校正染料的所有荧光定量PCR 仪。

北京厚生博泰科技有限公司 Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 反转录和PCR在一个反应管中完成，方便快捷，最大限度的避免污染。

2. 与RNA具有高亲和性，能通读GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。

3. 热启动酶有效抑制非特异性扩增，极大提高了荧光定量PCR反应的精确性。

产品应用基因表达分析；拷贝数分析。

使用方法1. 将RNA 模板、引物、2×UltraSYBR One Step RT-qPCR Buffe（r With ROX）、SuperEnzyme Mix 和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。

2. PCR 反应体系：•注意：通常引物浓度以0.2 uM可以得到较好结果，可以终浓度0.1 ~ 0.5 uM作为设定范围的参考。

RevertAid 逆转录试剂盒说明书

RevertAid 逆转录试剂盒说明书
! Prepare the following reaction mixture in a tube on ice: template RNA*: total RNA 0.1-5µg + or poly(A) RNA 10ng-0.5µg or specific RNA 0.01pg - 0.5µg primer: oligo(dT)18 primer (0.5µg/µl) 1µl or random hexamer primer (0.2µg/µl) 1µl or sequence-specific primer 15–20pmol DEPC-treated water to 12µl Mix gently and spin down for 3-5sec. in a microcentrifuge. " Incubate the mixture at 70°C for 5min, chill on ice and collect drops by brief centrifugation. # Place the tube on ice and add the following components in the indicated order: 5x reaction buffer 4µl RiboLock™ Ribonuclease Inhibitor (20u/µl) 1µl 10mM dNTP mix 2µl Mix gently and collect drops by brief centrifugation. $ Incubate at 37°C for 5min (at 25°C for 5min if random hexamer primer is used).
Kit is designed for preparation of full-length first strand cDNA from RNA templates. The RevertAid™ first strand cDNA synthesis kit relies on a genetically engineered version of the Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase (RevertAid™ M-MuLV RT) with low RNase H activity. This allows the synthesis of full-length cDNA from long templates (up to 13 kb). RevertAid™ M-MuLV RT synthesizes first strand cDNA at sites determined by the type of primer used: • random hexamer primer: at non-specific points along an RNA template. In this case, all RNA’s in a population are templates for cDNA synthesis. • oligo(dT)18 : at the 3’-end of poly(A)+ mRNA. In this case, only mRNA’s with 3’-poly(A) tails are templates for cDNA synthesis. • sequence specific primer: at a primer-binding site. First strand cDNA synthesized with this system can be used as a template in the polymerase chain reaction (PCR)*. As the reaction conditions of cDNA synthesis and PCR are compatible, cDNA reaction mixture can be added directly to a PCR mixture. The first strand cDNA synthesized can also be used as a template for second strand synthesis. Radiolabeled DNA can be used as a probe in hybridization experiments. 1.1 kb RNA with 3’-poly(A) tail is provided 3

Foregene RT EasyTM I 说明书

Foregene RT EasyTM I 说明书

RT Easy TM IMaster Premix for first-strand cDNA synthesisCat.No.RT-01011/01012Fast and highly sensitive reverse transcription system for generating first-strand cDNA using pg-level RNAFor research use only Store at-20℃目录产品介绍 (3)产品特点 (3)试剂盒应用 (3)产品质量控制 (4)试剂盒内容 (4)运输及储存条件 (4)试剂盒组分信息 (5)注意事项 (5)RT Mix耐受性 (6)●酒精耐受性分析 (6)●胍盐耐受性分析 (6)操作前准备事项 (7)逆转录引物用量 (7)RNA模板用量 (7)实验材料和设备 (7)自备试剂 (8)安全性 (8)操作指南 (9)操作示意图 (10)问题分析指南 (11)本公司的2×RT Easy TM Mix合成第一链cDNA的温度高达50℃，有利于复杂二级结构RNA模板进行逆转录反应。

实验室纯化获得的RNA常有酒精及胍盐残留，对大多数逆转录酶有很强的抑制性，导致逆转录效果不理想或逆转录效率低。

福际2×RT Easy TM Mix对酒精和胍盐显示出极高的耐受性，对RNA样品中酒精的最高耐受为45%，胍盐的最高耐受为750mM。

即使不纯的RNA也可用福际2×RT Mix进行逆转录反应。

独特的反应体系,使得RT反应更加简便、快捷、高效，25min即可完成第一链cDNA的合成。

此产品可与Foregene公司的荧光定量产品Real Time PCR Easy TM配合使用，能获得高质量的实验结果。

产品特点◆高效的逆转录体系，只需25min即可完成第一链cDNA的合成。

◆高灵敏的逆转录体系，pg级别的模板也可以得到高质量的cDNA。

5×One Step RT Mix使用说明

5×One Step RT Mix使用说明

增得到大量DNA片段，扩增得到的目的产物3’末端含有一个A碱基，可直接用于T/A克隆。
反应条件：
反转录：50℃ 20 分钟；
变 性：95℃ 3 分钟；
变 性：95℃ 10~20 秒； 退 火: 5 伸：72℃ 10~60 秒。
保 温：72℃ 5min
的模板添加量。
产物检测：
反应结束后取 5 µl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行电泳检测结果。
质量控制：
1、 功能检测：RT PCR 的敏感性、特异性、可重复性；
2、 无外源核酸酶活性，无外源内切、外切核酸酶污染。
技术说明：

1、 该体系常用 50℃进行反转录反应，可以在 45℃~60℃范围内进行反转录温度优化； 根据反应特征不同，可以在 10~30 分钟内对反转录时间进行优化； 2、 该体系所用的反转录酶是在 MMLV 基础上进行了基因改造，去除了 RNaseH 活性，使 其具有更高的温度耐受性和反转录温度，对 RNA 复杂结构模板具有更高的反转录效率； 3、 该体系具有更好的体系稳定性和适用性，非常适合于病毒、组织等样本提取 RNA 复杂模板的检测。
启动酶，采用优化配方的专用 Buffer，具有更高的反转录和 PCR 扩增效率，适合于低浓度
RNA 模板的高灵敏度扩增。
试剂原理：
One Step RT Premix 首先采用反转录酶以RNA为模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA
为模板，经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复，在短时间内扩
5×One Step RT Mix 使用说明

货号：T2240
规格：50T
保存：-20℃保存长期保存，使用前应混匀，避免反复冻融。
产品内容：

反转录试剂盒说明书

反转录试剂盒说明书

行业文档TaKaRa Code：DRR014APrimeScript™ RT-PCR Kit(50次量)目录内容页码●制品说明 1●制品内容 1●保 存 2●原 理 2●试剂盒特点 3●RNA样品制备 3●使用注意 4●反转录引物的选择 5●实验操作 5●实验例 7 ●Q&A8●制品说明PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应）是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。

虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA 后，PCR法便可应用于RNA的解析了。

迄今为止，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。

PrimeScript™ RT-PCR Kit是具有良好的延伸性能与高扩增效率的2 Step RT-PCR试剂盒。

反转录反应使用了TaKaRa独自开发的新型反转录酶PrimeScript™ RTase；PCR反应使用了扩增性能良好的Hot Start 型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq TM HS。

本试剂盒具有以下优点：1.进行高效的RT-PCR扩增。

2.在标准的RNA反转录反应温度（42℃）下，便可使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸，可以避免RNA在高温条件下的降解。

3.能有效抑制非特异性的PCR扩增。

4.使用本试剂盒扩增得到的目的产物3′端附有一个A碱基，可以直接克隆于T-Vector中。

本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需的全部试剂。

●制品内容（50次量*1）1.PrimeScript™ RTase（for 2 Step）2.5×PrimeScript™ Buffer3.RNase Inhibitor（40 U/μl）4.dNTP Mixture（10 mM each）5.Oligo dT Primer（2.5 μM）6.Random 6 mers（20 μM）7.TaKaRa Ex Taq TM HS（5 U/μl）8.10×PCR BufferⅡ9.Control F-1 Primer*2（20 μM）10.Control R-1 Primer*3（20 μM）11.Positive Control RNA（2×105 copies/μl）12. RNase Free dH2O25 μl 200 μl 25 μl 150 μl 50 μl 50 μl 25 μl 250 μl 10 μl 10 μl 20 μl 1 ml*1 反转录反应20 μl 、PCR反应50 μl体系时可使用50次。

天根 一步法逆转录PCR试剂盒说明书

天根 一步法逆转录PCR试剂盒说明书

通用型一步法RT-PCR试剂盒说明书前言本试剂盒适用于对各种动、植物、病毒RNA进行PCR 检测。

用户可根据被分析基因，配合一对引物，或同时采用Taqman 荧光探针，先将提取的RNA反转录(reverse transcription).成cDNA，再经过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术对特异性片段进行扩增，进行电泳或实时荧光分析。

一步法RT-PCR可使RT及PCR过程在单管中完成，比分开进行RT及PCR更方便。

由于不需要在RT完成后打开反应管，尽可能地避免了样品间的相互污染。

规格20人份适用仪器适用于各种普通PCR仪器和实时荧光PCR仪器。

试剂盒组成试剂准备根据下表配制反应液：振荡混匀后，按每管 40 μl(可根据需要调整)分装，备用。

PCR扩增将均一化后的RNA提取样本10 μl加入各反应管，混匀、离心后，置普通PCR仪器或实时荧光PCR仪器上进行扩增及实时检测。

结果判断扩增产物可直接进行电泳检测；实时荧光检测可根据相应仪器的配套软件进行结果分析。

保存及有效期-20℃保存，有效期为6个月。

注意事项1. 开始检测前请仔细阅读本说明书全文。

2. 整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增（荧光检测）应分区进行以避免污染。

3. 操作人员应戴口罩，经常更换一次性手套，以避免RNA酶的污染；实验中所用器具均应经过除RNA酶处理。

4. 试剂盒组成中的试剂使用前应充分融化并混匀。

5. 进行实时荧光分析时，应使用透光性能较好的一次性薄壁离心管；.荧光探针应避光保存，加入缓冲液中后，应尽快进行扩增。

6. 注意适当处理检测中遗留的样品、扩增产物及可能被污染的试剂。

生产企业：上海蓝创生物科技发展有限公司。

abclonal的pcr逆转录的说明书

abclonal的pcr逆转录的说明书

abclonal的pcr逆转录的说明书Abclonal 是一家提供各种生命科学试剂和服务的公司，其中包括逆转录PCR（RT-PCR）试剂。

RT-PCR 是一种将RNA转化为DNA的过程，常用于检测和量化特定RNA的表达。

以下是一份Abclonal RT-PCR 试剂的使用说明书的大致内容。

一、实验目的本实验的目的是使用 Abclonal 的 RT-PCR 试剂，逆转录特定 RNA，以便进行后续的定量或定性分析。

二、实验原理逆转录PCR (RT-PCR) 是一种用于检测和量化特定RNA分子的技术。

首先，使用逆转录酶将RNA分子转化为cDNA。

然后，使用PCR技术扩增cDNA，以便进行后续分析。

Abclonal 的RT-PCR 试剂盒包含所有必要的酶和引物，以方便用户进行此实验。

三、所需材料1. Abclonal RT-PCR 试剂盒2. 逆转录酶 (如 M-MLV 或 SuperScript III)3. 随机引物或特异性引物4. RNA样品5. 热稳定DNA聚合酶 (如 Taq DNA 聚合酶)6. dNTPs (脱氧核苷酸)7. 缓冲液和稳定剂8. 离心管和移液器9. 离心机和PCR仪（如果需要）四、操作步骤1. 准备RNA样品：将RNA样品按照标准方法进行分离和纯化。

确保RNA 的质量和浓度适合后续的逆转录和PCR反应。

2. 逆转录：将RNA、缓冲液、dNTPs、随机引物和逆转录酶混合在一个离心管中。

按照试剂盒说明书的指示进行逆转录反应。

3. PCR扩增：将逆转录产物、PCR缓冲液、dNTPs、特异性引物和热稳定DNA聚合酶混合在一个离心管中。

按照试剂盒说明书的指示进行PCR反应。

4. 分析结果：对PCR产物进行电泳、荧光检测或其它适当的分析方法，以确定目标RNA的表达水平。

五、注意事项1. 请遵循所有试剂盒和酶的操作说明，以确保实验的准确性和安全性。

2. 在处理RNA时，要特别注意防止其降解和污染。

天根 快速定点突变试剂盒说明书

天根 快速定点突变试剂盒说明书
l primers (5 μM, each) FDM competent cells
KM101 （20 rxn）
30 μl 200 μl 20 μl 40 μl 80 μl 20×50 μl
储存条件
收到本产品后， 请立即将FDM competent cells置于-70℃条件下保存，试剂盒其他组分 置于-20℃条件下保存。感受态细胞可在-70℃条件下保存3个月，试剂盒其他组分可在-20℃ 条件下保存1年。
50 μl 体系 2 μl 4 μl 10 μl 1.5 μl
至50 μl
终浓度 0.2 ng/μl 400 nM
1× 0.075 U/μl
－
4、将实验组及对照组按照如下PCR反应程序进行PCR反应。
PCR反应程序： 注：下表中PCR程序按照对照组实验条件设置，客户可根据自身实验进行相应调整。
阶段 预变性
■ PCR、RT-PCR系列 ■ 核酸DNA、RNA分离纯化系列 ■ DNA分子量标准 ■ 克隆载体、感受态细胞 ■ 细胞生物学产品 ■ 蛋白分子量标准 ■ 蛋白质染色、检测及定量相关产品
版本号: KM131204
Order: 010-59822688 Toll-free: 800-990-6057 /400-810-6057 TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD
PCR反应
补充延伸
循环 1×
18×
1×
温度 95℃ 94℃ 55℃ 68℃ 68℃
时间 2 min 20 sec 10 sec 2.5 min 5 min
二、质粒模板的消化
1、按照下表所述配制酶切体系： 组成成分
PCR产物 Dpn I restriction enzyme （20 U/μl） Total Volume 2、充分混匀后，将上述酶切体系于37℃条件下消化1 h。

东盛生物 RT-PCR Kit（逆转录试剂盒） 说明书

东盛生物 RT-PCR Kit（逆转录试剂盒） 说明书

0.6 μl RNasin , M-MLV ； 按下列条件进行反转录反应 42℃ 温浴 60 min（随即引物 37℃ 温浴 60 min） ； 5 终止反应 70℃ 温浴 5 min 终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃ 保存。 6 用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50 μl ，取 2-5 μl 进行 PCR 扩增反应。
20 次逆转录反应，R1012 可进行 100 次逆转
录反应（20 μl 标准 PCR 反应体系，每次使用 M-MLV 1 μl）。
M-MLV 储存液 20 mM Tris-HCl (pH 7.5) 200 mM NaCl 0.1 mM EDTA 1 mபைடு நூலகம் DTT 0.01% NP-40 50% glycerol 5xfirst-strand buffer 成分 250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25 ℃) 375 mM KCl 15 mM MgCl2 50 mM DTT 保存条件 各组分均-20℃保存，避免反复冻融。
●
在逆转录反应中经常加入 RNase 抑制剂以增加 cDNA 合成的长度和产量。RNase 抑制剂要在第一链合成反应中，在缓冲
液和还原剂（如 DTT）存在的条件下加入，因为 cDNA 合成前的过程会使抑制剂变性，从而释放结合的可以降解 RNA 的 RNase。蛋白 RNase 抑制剂仅防止 RNase A，B，C 对 RNA 的降解，并不能防止皮肤上的 RNase，因此尽管使用了这些抑 制剂，也要小心不要从手指上引入 RNase。
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------广州东盛生物科技有限公司 电话：020-87791356 传真：020-87791381 网址：

takara反转录试剂盒说明书

takara反转录试剂盒说明书

takara反转录试剂盒说明书Takara反转录试剂盒是一种用于研究RNA分子的试剂盒。

该试剂盒可以用于DNA的反转录，将RNA转录成DNA，并进行后续的PCR扩增。

反转录试剂盒在生命科学领域中起着非常重要的作用，因此在使用过程中需仔细阅读说明书并按照说明书进行操作。

一、试剂盒组成Takara反转录试剂盒主要包含以下拉玛：1.反转录酶：外源的M-MLV反转录酶，具有高度的反转录活性和优异的扩增效率等优良特性。

2.反转录缓冲液：针对反转录酶的酶切优化反转录缓冲液。

3.引物：随机9mers引物，适用于多种RNA逆转录的应用。

4.对照RNA：In Vitro转录的任意序列的RNA，用于反转录和后续PCR扩增反应的质控。

二、试剂盒使用方法1. RNA提取：在使用Takara反转录试剂盒之前，需要从样品中提取RNA。

2. 反转录反应：将RNA测序专用随机引物、针对反转录酶的反转录缓冲液、反转录酶和RNA样品混合，进行逆转录反应。

3. PCR扩增：反转录完成后，可以利用PCR扩增技术对转录所得DNA进行扩增，完成DNA序列的检测和分析。

三、试剂盒注意事项1. 避免多次冻融。

为保证试剂的稳定性，反转录试剂盒必须储存于-20℃及以下的冰箱中，避免多次冻融。

2. 操作时需佩戴手套。

操作时需佩戴手套，尽量避免手汗或皮脂的污染，影响试剂盒的效率和准确性。

3. 注意反转录缓冲液的稀释量。

反转录缓冲液的稀释量会影响反转录效果，因此需要按照说明书进行操作，精准稀释。

4. 注意反转录酶的用量。

不同反转录酶的最优用量不同，需要根据实验需要按照说明书或文献进行调整。

5. 确认对照RNA引物的扩增效果。

在进行PCR扩增前，需要先进行对照RNA引物的扩增，以确认反转录反应的正确性，避免因为反应偏差而引起的实验结果的偏差。

4. 根据实验需要进行调整。

反转录试剂盒虽然具有大量的优良特性，但是实验环境和实验条件的不同，会对反转录试剂盒的效果产生较大的影响，因此需要根据实验需要进行调整。

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通用型一步法RT-PCR试剂盒说明书
前言
本试剂盒适用于对各种动、植物、病毒RNA进行PCR 检测。

用户可根据被分析基因，配合一对引物，或同时采用Taqman 荧光探针，先将提取的RNA反转录(reverse transcription).成cDNA，再经过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)技术对特异性片段进行扩增，进行电泳或实时荧光分析。

一步法RT-PCR可使RT及PCR过程在单管中完成，比分开进行RT及PCR更方便。

由于不需要在RT完成后打开反应管，尽可能地避免了样品间的相互污染。

规格
20人份
适用仪器
适用于各种普通PCR仪器和实时荧光PCR仪器。

试剂盒组成
试剂准备
根据下表配制反应液：
振荡混匀后，按每管 40 μl(可根据需要调整)分装，备用。

PCR扩增
将均一化后的RNA提取样本10 μl加入各反应管，混匀、离心后，置普通PCR仪器或实时荧光PCR仪器上进行扩增
及实时检测。

结果判断
扩增产物可直接进行电泳检测；实时荧光检测可根据相应仪器的配套软件进行结果分析。

保存及有效期
-20℃保存，有效期为6个月。

注意事项
1. 开始检测前请仔细阅读本说明书全文。

2. 整个检测过程中，反应体系的配制、样本处理及加样、PCR扩增（荧光检测）应分区进行以避免污染。

3. 操作人员应戴口罩，经常更换一次性手套，以避免RNA酶的污染；实验中所用器具均应经过除RNA酶处理。

4. 试剂盒组成中的试剂使用前应充分融化并混匀。

5. 进行实时荧光分析时，应使用透光性能较好的一次性薄壁离心管；.荧光探针应避光保存，加入缓冲液中后，应尽快进行扩增。

6. 注意适当处理检测中遗留的样品、扩增产物及可能被污染的试剂。

生产企业：
上海蓝创生物科技发展有限公司。