实验报告：蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定

实验3 蟾蜍坐骨神经干电生理实验【摘要】目的运用电生理实验技术测定蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位和其中Ａ类纤维冲动的传导速度，并观察机械损伤、药物对神经兴奋和传导的影响。

方法采用RM6240微机生物信号处理系统，通过电生理的方法来测定蛙坐骨神经干的单相、双相动作电位的电位和时程以及其中Ａ类纤维冲动的传导速度。

并采用夹伤神经和加不同药物等处理措施，记录一定刺激强度下坐骨神经动作电位的大小变化，从而分析坐骨神经干动作电位的影响因素及机制。

结果动作电位的传导速度为31.76±3.63 m/s，阈刺激强度为0.28±0.03 V，最大刺激强度为1.21±0.36 V。

中枢端引导动作电位正相和负相振幅分别为3.15±1.87mV和 2.11±1.46mV，末梢端引导动作电位正负相振幅分别为7.04±2.01 mV和 3.89±1.46 mV，与中枢端引导时的动作电位振幅比有显著性差异（p<0.01）；夹伤神经干后，动作电位振幅为8.49±2.48 mV，时程为 1.73±0.40 ms，与末梢端引导时正相波时程比有显著性差异（p=0.002<0.01）。

引导电极间距离分别等于10mm、20mm和30mm时，动作电位正相振幅：A110为 7.07±1.87 mV，A120为 9.57±3.08 mV，A130为 9.75±3.33 mV，负相振幅：A210为 3.87±1.19 mV， A220为 5.35±2.23 mV，A230为 4.44±2.39 mV，A120、A130分别与A110比均有显著性差异（p<0.05），A220与A210比有显著性差异（p<0.05），A230与A210以及A220与A230比没有显著性差异（p>0.05）。

生理实验报告!蟾蜍坐骨神经干动作电位的引导、传导速度和兴奋不应期的测定【实验目的】1. 观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，加深理解兴奋传导的概念，理解可兴奋性在兴奋过程中的变化过程;2. 进一步掌握坐骨神经—腓神经标本的制备方法与引导动作电位的方法;3. 进一步熟悉实验室里仪器设备的操作。

【实验原理】1. 神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。

当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时的水平。

神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经复合动作单位。

如果将两个引导电极置于神经干表面时(双极引导)，动作电位将先后通过两个引导电极，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位;2. 神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。

测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。

在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度;3. 神经与肌肉等可兴奋组织的兴奋性在一次兴奋过程中可发生一系列变化，及绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，组织的兴奋性才可恢复。

为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可用双刺激法检查刺激引起的兴奋阙值和电位变化，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。

【实验对象】蟾蜍【实验器材】蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液(林格液)等。

【实验步骤】制备蟾蜍坐骨神经-腓神经标本，并放入神经屏蔽盒内;(一)双相动作电位1.打开BL-410?实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位引导?记录出双相动作电位;2.由小到大改变刺激强度，记录阈强度和最大刺激强度;3.观察双相动作电位波形，测量最适刺激强度时的潜伏期、时程和波幅; (二)引导出最大刺激强度时的动作电位波形1.BL-410仪器操作:实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位传导速度测定?输入两电极之间的距离分别用潜伏期法和潜峰法测量其传导速度;2.潜伏期法:测量第一个通道动作电位潜伏期的时间(t)，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离(S)，屏幕右上角显示传导速度和根据速度的公式计算传导速度:v=S/t;3.潜峰法:测量两个通道电位的动作电位的波峰间的时间差，为(t2-t1),测量并输入两对引导电极间的距离为(S2-S1),屏幕右上角显示传导速度和用公式计算传导速度:v=(S2-S1)/(t2-t1)。

4神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定西安交通大学医学院教案, 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。

, 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。

, 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。

, 复习讲解神经干动作电位和神经纤维动作电位的区别、神经干动作电位形成的过程及神经干兴奋传导速度的测定原理等。

, 制备坐骨神经—腓神经标本。

, 引导单、双相动作电位及测定兴奋传导速度。

, 神经干双相动作电位的形成机制。

, 兴奋传导速度的测定原理。

【】1. 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。

2. 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。

3. 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。

【】动作电位是神经细胞兴奋的客观标志，当神经纤维或神经干受到有效刺激时，必然会产生可传导的动作电位，也称为神经冲动。

由于神经干动作电位是许多单根神经纤维动作电位的复合，所以它的特征不同于单根神经纤维的动作电位。

本实验采用离体细胞外记录法，记录神经干兴奋时两个记录电极之间的电位变化。

动作电位可沿神经纤维进行双向传导，其传导速度取决于纤维直径、内阻、有无髓鞘等因素。

通过测定动作电位传导的距离和时间，可算出动作电位在神经纤维上的传导速度。

【】1. 动物蛙或蟾蜍。

2. 试剂和药品任氏液3. 装置和器材计算机、蛙类手术器械、神经屏蔽盒、直尺、圆规、培养皿。

【】1. 神经干动作电位的引导1）制备坐骨神经-腓神经标本制备方法与制备坐骨神经-腓肠肌标本基本相同，只是当把坐骨神经游离至膝关节后，在腓肠肌一侧继续分离腓神经至足趾，用线结扎，并在结扎线远端剪断。

将制备好的坐骨神经-腓神经标本浸入盛有任氏液的培养皿内备用。

2）将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。

将神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周端置于记录电极侧。

3）进入BL-410生物信号采集、处理系统，单击菜单栏中实验项目，在肌肉、神经实验中选择神经干动作电位的引导。

实验名称：蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的测定实验目的：1. 确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的临界值和最大值。

2. 测定蟾蜍坐骨神经干CAP的传导速度。

3. 确定蟾蜍坐骨神经干CAP的不应期（相对不应期和绝对不应期）。

实验材料：1. 实验动物：蟾蜍（Bufo bufo gargarizans）2. 实验器材：生物信号采集系统RM6240，刺激电极，记录电极，接地电极，标本盒，手术器械，剪刀，镊子，刀片，生理盐水，酒精棉球等。

实验方法：1. 蟾蜍坐骨神经标本的制作：- 双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经。

- 游离大腿肌肉之间的坐骨神经干及其下行到小腿的两个分支：胫神经和腓神经。

- 三段结扎，剪去无关分支后离体。

- 注意保持神经湿润。

2. 神经标本的连接：- 将神经搭于标本盒内，保证神经与电极充分接触。

- 中枢端接触刺激电极S1和S2，外周端接触记录电极R1-R2，之间接触接地电极。

3. 刺激输出线的连接：- 刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极S1和S2。

- 插头接生物信号采集系统RM6240的刺激输出插口。

4. 信号输入线的连接：- 信号输入倒显得红色和绿色夹子分别连接记录电极（绿色夹子在前，引导出正向波形，即出现的第一个波峰向上）。

- 黑色夹子连接接地电极，插头接通道1。

5. 实验步骤：- 设置刺激参数：刺激频率、刺激强度、时间间隔等。

- 记录蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的波形。

- 逐渐增加刺激强度，观察CAP波形的变化。

- 确定CAP的临界值和最大值。

- 逐渐增加刺激强度，观察CAP传导速度的变化。

- 确定CAP的传导速度。

- 逐渐增加刺激强度，观察CAP不应期的变化。

- 确定CAP的相对不应期和绝对不应期。

实验结果：1. CAP临界值和最大值：- 当刺激强度为1.0 mA时，CAP的临界值为0.6 mV。

- 当刺激强度为1.5 mA时，CAP的最大值为1.2 mV。

蟾蜍坐骨神经干动作电位的引导、传导速度和兴奋性不应期的测定一、实验目的1、熟悉仪器设备的操作。

2、掌握神经干动作电位的引导及传导速度的测定方法。

3、测定神经干不应期，理解可兴奋组织的兴奋性在兴奋过程中的变化过程。

二、实验原理1、将两个引导电极置于神经干表面时，动作电位将先后通过两个电极引导处，可记录到电位偏转波形。

2、在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，可计算出兴奋的传导速度。

3、神经与肌肉等可兴奋组织的兴奋性在一次兴奋过程中可发生一系列变化，即绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。

可先给一个条件刺激以引起兴奋，然后再用另一检验性刺激在前一兴奋的不同时相给予刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作程度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。

三、实验对象：蟾蜍。

四、实验器材：蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏夜等。

五、实验步骤1、制备蟾蜍坐骨神经干标本（1）脊髓捣毁法处死蟾蜍，剪除躯干上部和内脏，注意勿损伤到坐骨神经，仅留下下后肢、骶骨、脊柱和坐骨神经。

（2）剥皮：握住脊柱断面（不要触碰神经），剥掉蟾蜍的皮肤。

（3）游离坐骨神经：沿脊柱一侧用玻璃探针分离坐骨神经，将其结扎并剪断。

再将坐骨神经大腿部分从坐骨神经沟中游离出来，将坐骨神经一直游离到腘窝处。

（4）游离腓神经，在此过程中动作要轻，切勿损伤神经。

2、仪器连接。

3、实验观察。

六、实验结果1、测量阈值。

能引起动作电位的最小刺激强度，称为刺激的阈值。

由实验统计可知，该坐骨神经干的阈值为0.300V，但是，该图中的波形不是怎么稳定，这可能与实验样本制作的质量有关。

2、（1）（2）（3）（4）图（1）为潜峰法测得的神经干动作电位的传导速度，两个通道的动作电位波峰的时间差为t2-t1=0.6ms，两对引导电极间的距离为S2-S1=1.8cm.屏幕上显示的传导速度为28.3m/s，利用公式计算的传导速度v=（S2-S1）/(t2-t1)=30m/s.图（2）为双相动作电位图。

神经干双向动作电位的引导传导速度及不应期的测定组员：陈良鹏肖瑶伍思静袁果曼罗冰清实验目的：观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，掌握坐骨神经制备方法与引导动作电位的方法，理解与刺激和最大刺激强度的概念测定潜伏期时程和波幅，学会通过潜伏期法和潜峰法测定神经冲动的传导速度，通过测定神经干不应期理解兴奋性在兴奋过程中的变化过程。

实验对象：蟾蜍实验药品和器材:蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。

实验原理：1、神经动作电位是神经兴奋的客观标志。

当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息电位；当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。

神经干兴奋过程所发生的膜电位变化称神经复合动作电位。

如果将两个引导电极置于神经干表面时（双极引导），动作电位将先后通过两个引导电极处，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位。

2、神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。

测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。

在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度。

3、神经与肌肉等可兴奋组织兴奋性在一次兴奋过程中可发生系列变化，即绝对不应期相对不应期超常期和低常期，组织的兴奋性才逐渐恢复。

为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可先给一个条件刺激以引起神经兴奋，然后再用另一检验性刺激，检查神经对检验性刺激反应的兴奋阈值以及所引起的动作电位（AP)幅度，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。

在本次实验中，主要观察的是不应期的变化，而非整个兴奋性的周期性变化。

实验对象：蟾蜍实验步骤及方法:1.坐骨神经—腓神经标本的制备。

2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。

3.仪器连接。

4.BL-410的操作。

实验内容：1、刺激坐骨神经时诱发产生的动作电位由在最适刺激强度时动作电位原图上进行区间测量可知，潜伏期为0.32ms，时程t1为 1.92ms ，波幅为11.08mV。

蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定【实验目的】:1. 熟悉两栖类动物的手术实验操作2. 学习制备蟾蜍坐骨神经干标本3. 掌握测定神经干动作电位传导速度的方法4. 掌握兴奋性不应期的测定方法【实验对象】: 蟾蜍【实验结果】:1.潜伏期概念: 潜伏期是指从刺激开始到神经干产生动作电位前伪迹所用的一段时间. 如图1，潜伏期为0.64ms.2.时程概念: 时程是指从神经干产生动作电位到恢复原状的一段时间。

如图2，时程为2.02ms.3.幅值概念: 幅值是指从波峰到波谷的数值。

如图3可知: 幅值=6.48-(-4.96)=11.44mv.4．神经干动作电位的传导速度潜伏期是指从刺激开始到神经干产生动作电位前伪迹所用的一段时间.故一通路的潜伏期t=0.58ms.做实验时记录的输入刺激的电极到第一个引导电极间的距离s=0.8cm. 所以传导速度v=s/t=13.79m/s.5．总不应期概念：总不应期是指当两个刺激的间隔逐渐缩短时，第二个刺激引起的动作电位的幅度刚好开始降低时，两个刺激的间隔时间即为总不应期，如图5，总不应期t1=19.00ms.6。

绝对不应期概念：绝对不应期是指在组织受到刺激发生兴奋后的一个较短的时间内，无论给予多么强大的刺激，都不能产生新的兴奋的时期。

如图6，即为绝对不应期t2=1.00ms.7。

相对不应期概念：相对不应期是指，在绝对不应期之后，神经干所产生的动作电位有所恢复，用较强的刺激可使神经干产生新的兴奋，这一时期即为相对不应期。

所以，相对不应期=总不应期—绝对不应期，即，相对不应期t3=19.00—1.00=18.00ms.。

蟾蜍的解剖与观察生命科学院张茜 111070094一、实验目的意义两栖动物绝大多数都是对人类有益的，例如消灭害虫、作药用资源等等。

蟾蜍作为医学、生理学重要的实验动物则使用更为广泛。

通过观察两栖类外形、皮肤、消化、呼吸、泄殖和循环等系统，了解两栖动物z 在生理学、药理学、毒理学等实验中常用组的准确取材。

重点：了解在摄食方式、营养、呼吸、排泄、生殖及血液循环器官系统的形态特征。

难点：理解两栖动物了解两栖动物由水生发展到陆地生活的各个器官结构与功能的适应性。

二、实验对象的获得与麻醉获得途径主要是由野外捕获或从特种养殖场购买(如牛蛙养殖场)。

抓取方法: 抓住其后腿，有经验者也可抓住其身体或借助一块布来抓，因蛙体表粘滑且蟾蜍体表有毒液分泌。

麻醉：两栖类皮肤有渗透性，放入含麻醉剂的溶液中就很容易麻醉。

0.1％的甲磺酸—三卡因(ms—222)水溶液在几分钟内即可麻醉动物，所需时间因身体大小而异。

也可用呼吸性麻醉剂，将蛙或蟾蜍放进玻璃罩或标本瓶内，同时放人浸有乙醚的棉花，几分钟后，即可发生作用。

三、实验操作与观察(一)外形观察将活蛙(或蟾蜍)静伏于解剖盘内，观察蛙(蟾蜍)的身体，可区分为头部、躯干和四肢三部分。

1．头部头：呈扁等腰三角形。

眼睛：在头两侧，稍向背部突出，有上下眼睑。

瞬膜：在下眼睑的内侧，为一半透明的薄膜，该膜向上延展可覆盖眼球。

外鼻孔：两眼的前方，近于头的前端的一对小孔内鼻孔：拉开下颌，在口腔顶壁的前端有一小孔鼻膜：在外鼻孔外缘的一对瓣状膜口：头端腹面有一很大的横裂鼓膜：眼后有一明显的褐色而稍下凹的圆形膜，是中耳腔与外界接触的地方。

蟾蜍的鼓膜较小，不明显耳后腺：蟾蜍鼓膜后上方有一对椭圆形的隆起，是由若干毒腺集合而成的，故又叫毒腺。

在受到压挤时，可分泌出一种乳白色的粘稠液，经加工之后即为中药“蟾酥”舌：在下颌前端内侧着生一柔软粘滑的舌，折向口腔内部，用镊子轻轻将舌拉出展平，可以看到蟾蜍的舌尖钝圆状。

山东大学人体机能学实验报告【实验名称】蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度和兴奋性不应期的测定【实验目的】加深理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。

熟悉仪器设备的操作。

【实验对象】蟾蜍【实验药品和器材】蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液等。

【实验步骤及方法】（详见书P57.P58）1.坐骨神经—腓神经标本的制备。

2.将标本放入神经屏蔽盒，（注意刺激电极端为神经干的中枢端）。

3.仪器连接。

4.BL-410的操作。

【实验结果】1.神经干动作电位的引导2.坐骨神经干动作电位传导速度V=(S2-S1)/(t2-t1)实验测得两对引导电极之间的距离为1.6cm，两个通道的动作电位波峰间的时间差为0.60ms。

计算得到传导速度V=26.7m/s3.二次刺激在兴奋周期之后相对不应期受到二次刺激绝对不应期受到二次刺激二次刺激没有出现相应的动作电位。

【实验结论】实验测得两对引导电极之间的距离为1.6cm，两个通道的动作电位波峰间的时间差为0.60ms。

计算得到传导速度V=26.7m/s【讨论与分析】1.神经干不能太干也不能太湿，剥离完整后在任氏液体中稳定15分钟左右，取出用滤纸吸干周围的任氏液。

2.神经干放置在引导电极上时，尽量拉直，不能使它下垂或斜向放置，以免影响神经干长度测量准确性。

3.神经干要尽可能长，两个引导电极之间的距离越远，测量的传导速度就越准确。

一、实验目的要求1．学习蟾蜍坐骨神经干标本的制备方法。

2．观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生的基本原理。

二、实验原理1、神经干受到有效刺激后，可以产生动作电位，在另一端可以引导出双相的动作电位，如果在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。

2、坐骨神经干是以由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。

复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。

一、蟾蜍坐骨神‎经干动作电‎位引导及传‎导速度测定‎实验目的：加强理解兴‎奋传导的概‎念，掌握测定神‎经干动作电‎位传导速度‎的方法。

熟悉仪器设‎备的操作。

实验原理：通过测出示‎波器上动作‎电位传导的‎距离和传导‎所需的时间‎，计算传导速‎度。

1.潜伏期法：测量第一个‎通道动作电‎位潜伏期的‎时间t，输入刺激电‎极到第一个‎引导电极间‎的距离s，v=s/t。

2.潜峰法：测量两个通‎道的动作电‎位波峰间的‎时间差和两‎对引导电极‎间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。

实验步骤：1.制备坐骨神‎经-腓神经标本‎，放入神经屏‎蔽盒。

2.连接仪器，引导动作电‎位波形。

3.剪裁编辑图‎形，计算传导速‎度。

实验结果：1.图形2.计算S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1. 当刺激端和‎记录端离得‎较远时，引导的复合‎动作电位波‎形会发生什‎么改变，为什么？2.用什么方法‎可使复合动‎作电位传导‎速度的测量‎更准确？实验结论：神经干动作‎电位的传导‎速度为33‎m/s.二、兴奋性不应‎期的测定实验目的：了解测定不‎应期的方法‎和原理，并加深对兴‎奋性在兴奋‎过程中的变‎化过程的理‎解。

实验原理：神经纤维受‎到适宜刺激‎后，产生兴奋，即动作电位‎。

一次兴奋产‎生后，必须经绝对‎不应期、相对不应期‎、超常期等变‎化后，兴奋性才能‎恢复。

本实验通过‎生物电放大‎器引导并记‎录神经干复‎合动作电位‎，验证和测量‎动作电位的‎不应期。

先给一个条‎件刺激，再用另一个‎检验刺激在‎兴奋的不同‎时期给予刺‎激，检查兴奋未‎阈值及所引‎起动作电位‎的幅度。

实验步骤：1．制备坐骨神‎经-腓神经标本‎，并浸在任氏‎液中约5分‎钟，待其兴奋性‎稳定后实验‎。

2.连接仪器，设置实验参‎数，观察并测量‎神经干的不‎应期。

实验结果：（见图）分析讨论：1.为什么要先‎引导神经纤‎维的单向复‎合动作电位‎，然后再测量‎其兴奋性的‎不应期？2.神经干不应‎期与单根神‎经纤维的不‎应期有何不‎同？实验结论：兴奋性的不‎应期包括绝‎对不应期、相对不应期‎、超常期、低常期。

蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制作以及神经动作电位观察及传导速度测定一：实验目的1、掌握蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法2、掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备3、掌握测定神经动作电位传导速度的原理与方法二：实验材料1、材料：蟾蜍2、器材：常用手术器械（毁髓针、手术镊、手术剪、骨钳、玻璃分针、图钉、蛙板、不锈钢盘）、污物缸、信号采集处理系统、神经屏蔽盒3、试剂：任氏液三：实验方法与步骤1、蟾蜍的双毁髓一只手握住蟾蜍，拇指按住其背部，食指压住其头部；另一只手捏住其嘴部将其头部上下轻轻扳动，找到第一道折痕，其中部即为枕骨大孔，用毁髓针垂直插入枕骨大孔；然后将针尖向前刺入颅腔并搅动以捣毁脑组织，此时的蛙为单毁髓动物；再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方与脊柱平行刺入椎管，捣毁脊髓，彻底捣毁脊髓时可看到蟾蜍的后肢突然蹬直而后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。

注意：a、若毁髓后蟾蜍的四肢肌肉紧张或活动自如，需重新毁髓；b、操作要快、准，且操作过程中不要挤压到蟾蜍的耳后腺，避免其分泌蟾酥。

2、坐骨神经-腓肠肌标本的制作（1）剥离后肢标本。

将蟾蜍背面向上置于蛙板上，用手术镊轻轻提起两前肢间的背部皮肤，用手术剪横向环形剪开皮肤，将蟾蜍身体下半部的皮肤剥离。

将蟾蜍剖腹，内脏向头部方向掀起，用骨钳在其第三节脊椎骨处剪断脊柱，然后用手术剪剪断相连的肌肉组织。

（2）分离两后肢。

用左手托起标本，拇指和食指固定住两后肢的肌肉，右手持骨钳剪断耻骨，手术剪剪开肌肉连接；纵向剪开脊柱使两后肢完全分离。

一只放入任氏液中备用，另一只用于继续下一步操作。

注意：在分离两后肢时需谨慎，不要使剪刀偏离中线太远以免损伤神经。

（3）分离坐骨神经。

将后置的脊柱端腹面向上，趾端想外侧翻转，使其足底向上，用图钉将其固定在蛙板上。

用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经。

股部沿肱二头肌和半膜肌之间的裂缝找到坐骨神经，用镊子和手术剪仔细去除半膜肌和肱二头肌，使神经暴露出来。

用玻璃分针轻轻挑起神经，自前向后剪断支配腓肠肌之外的分支，并去除神经上的其它组织。

一、蟾蜍坐骨神经‎干动作电位引‎导及传导速度‎测定实验目的：加强理解兴奋‎传导的概念，掌握测定神经‎干动作电位传‎导速度的方法‎。

熟悉仪器设备‎的操作。

实验原理：通过测出示波‎器上动作电位‎传导的距离和‎传导所需的时‎间，计算传导速度‎。

1.潜伏期法：测量第一个通‎道动作电位潜‎伏期的时间t‎，输入刺激电极‎到第一个引导‎电极间的距离‎s，v=s/t。

2.潜峰法：测量两个通道‎的动作电位波‎峰间的时间差‎和两对引导电‎极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。

实验步骤：1.制备坐骨神经‎-腓神经标本，放入神经屏蔽‎盒。

2.连接仪器，引导动作电位‎波形。

3.剪裁编辑图形‎，计算传导速度‎。

实验结果：1.图形2.计算S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1. 当刺激端和记‎录端离得较远‎时，引导的复合动‎作电位波形会‎发生什么改变‎，为什么？2.用什么方法可‎使复合动作电‎位传导速度的‎测量更准确？实验结论：神经干动作电‎位的传导速度‎为33m/s.二、兴奋性不应期‎的测定实验目的：了解测定不应‎期的方法和原‎理，并加深对兴奋‎性在兴奋过程‎中的变化过程‎的理解。

实验原理：神经纤维受到‎适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。

一次兴奋产生‎后，必须经绝对不‎应期、相对不应期、超常期等变化‎后，兴奋性才能恢‎复。

本实验通过生‎物电放大器引‎导并记录神经‎干复合动作电‎位，验证和测量动‎作电位的不应‎期。

先给一个条件‎刺激，再用另一个检‎验刺激在兴奋‎的不同时期给‎予刺激，检查兴奋未阈‎值及所引起动‎作电位的幅度‎。

实验步骤：1．制备坐骨神经‎-腓神经标本，并浸在任氏液‎中约5分钟，待其兴奋性稳‎定后实验。

2.连接仪器，设置实验参数‎，观察并测量神‎经干的不应期‎。

实验结果：（见图）分析讨论：1.为什么要先引‎导神经纤维的‎单向复合动作‎电位，然后再测量其‎兴奋性的不应‎期？2.神经干不应期‎与单根神经纤‎维的不应期有‎何不同？实验结论：兴奋性的不应‎期包括绝对不‎应期、相对不应期、超常期、低常期。

一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。

熟悉仪器设备的操作。

实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度。

1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离s，v=s/t。

2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v=(s2-s1)/(t2-t1)。

实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。

2.连接仪器，引导动作电位波形。

3.剪裁编辑图形，计算传导速度。

实验结果：1.图形2.计算S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s分析讨论：1. 当刺激端和记录端离得较远时，引导的复合动作电位波形会发生什么改变，为什么？2.用什么方法可使复合动作电位传导速度的测量更准确？实验结论：神经干动作电位的传导速度为33m/s.二、兴奋性不应期的测定实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。

实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。

一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。

本实验通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位，验证和测量动作电位的不应期。

先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查兴奋未阈值及所引起动作电位的幅度。

实验步骤：1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中约5分钟，待其兴奋性稳定后实验。

2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。

实验结果：（见图）分析讨论：1.为什么要先引导神经纤维的单向复合动作电位，然后再测量其兴奋性的不应期？2.神经干不应期与单根神经纤维的不应期有何不同？实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。

一、实验目的1. 了解和掌握蛙坐骨神经干动作电位的引导方法。

2. 观察坐骨神经干动作电位的波形特征。

3. 学习并掌握动作电位传导速度的测定方法。

4. 了解神经兴奋传导的基本原理。

二、实验原理动作电位是神经细胞膜在受到刺激时产生的一种短暂而迅速的电位变化。

通过在神经干表面放置电极，可以记录到神经干动作电位的变化。

动作电位的传导速度可以通过测量神经干长度和兴奋传导时间来计算。

三、实验材料1. 实验对象：蛙或蟾蜍2. 实验器材：微机生物信号采集处理系统、蛙类坐骨神经腓肠肌标本制备手术器械和药品1套、神经标本屏蔽盒、滤纸片、棉球、10% KCl溶液。

3. 实验药品：任氏液，2%普鲁卡因。

四、实验步骤1. 制备神经标本：将蛙或蟾蜍处死，用剪刀剪开背部皮肤，暴露坐骨神经，用手术剪分离出坐骨神经。

2. 连接电极：将两个电极分别放置在坐骨神经的远端和近端，确保电极与神经良好接触。

3. 设置信号采集系统：将电极连接到微机生物信号采集处理系统，设置好采样参数。

4. 给予刺激：用10% KCl溶液滴在近端电极上，给予神经刺激。

5. 观察并记录：观察微机屏幕上的波形，记录动作电位的波形特征。

6. 测定传导速度：测量神经干长度和兴奋传导时间，计算动作电位传导速度。

五、实验结果1. 动作电位波形：观察到的动作电位波形呈双相，先出现一个正向波峰，然后出现一个负向波峰。

2. 传导速度：根据实验数据计算得出动作电位传导速度约为15.2 m/s。

六、实验讨论1. 动作电位的产生和传导是神经细胞功能的基础。

通过本实验，我们了解了动作电位的引导方法，并观察到了其波形特征。

2. 动作电位传导速度的测定有助于了解神经系统的功能状态。

在本实验中，我们成功测定了动作电位传导速度，为后续研究提供了基础数据。

3. 实验过程中，我们发现动作电位波形呈现双相，这可能与神经干中不同类型的神经纤维有关。

在神经干中，存在不同传导速度和兴奋阈值的神经纤维，它们产生的动作电位叠加在一起，形成了复合动作电位。

一、实验目的1. 理解神经传导速度的概念及其影响因素；2. 掌握神经传导速度的测试方法；3. 分析实验结果，探讨影响神经传导速度的因素。

二、实验原理神经传导速度是指神经纤维在单位时间内传导动作电位的能力。

神经传导速度受多种因素影响，如神经纤维的直径、髓鞘厚度、神经纤维类型等。

本实验通过测量蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度，了解神经传导速度的影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、剪刀、镊子、电极、示波器等；2. 实验仪器：生物信号采集系统、电脑、分析软件等。

四、实验步骤1. 准备实验材料：将蟾蜍处死，取出坐骨神经，置于任氏液中浸泡；2. 制备神经标本：用剪刀将坐骨神经剪成长约5cm的神经干，两端固定在电极夹上；3. 连接实验仪器：将电极夹与生物信号采集系统连接，再将采集系统与电脑连接；4. 调节实验参数：打开电脑上的分析软件，设置实验参数，如采样频率、时间等；5. 测量神经传导速度：在神经标本的一端施加刺激，记录另一端动作电位出现的时间，计算传导速度；6. 重复实验：重复上述步骤，至少进行3次实验，以确保实验结果的准确性；7. 分析实验结果：比较不同条件下神经传导速度的差异，分析影响神经传导速度的因素。

五、实验结果与分析1. 实验结果：在室温25℃、湿度60%的条件下，蟾蜍坐骨神经干动作电位传导速度平均为（±标准差）80.5m/s（±3.2m/s）；2. 结果分析：（1）神经纤维直径：神经纤维直径越大，神经传导速度越快。

本实验中，蟾蜍坐骨神经干直径约为0.5mm，传导速度较快；（2）髓鞘厚度：髓鞘具有绝缘作用，可以减少神经纤维间的干扰，提高神经传导速度。

本实验中，蟾蜍坐骨神经干髓鞘较厚，有利于提高传导速度；（3）神经纤维类型：有髓神经纤维的传导速度比无髓神经纤维快。

本实验中，蟾蜍坐骨神经干为有髓神经纤维，传导速度较快；（4）温度：温度对神经传导速度有显著影响。

神经干动作电位的引导及神经兴奋传导速度的测定【实验目的】1. 引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。

2. 学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。

3. 学习和掌握蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法。

【实验原理】动作电位是神经细胞兴奋的客观标志，当神经纤维或神经干受到有效刺激时，必然会产生可传导的动作电位，也称为神经冲动。

由于神经干动作电位是许多单根神经纤维动作电位的复合，所以它的特征不同于单根神经纤维的动作电位。

本实验采用离体细胞外记录法，记录神经干兴奋时不同位置记录电极之间的电位变化。

动作电位可沿神经纤维进行双向传导，其传导速度取决于纤维直径、内阻、有无髓鞘等因素。

通过测定动作电位传导的距离和时间，可算出动作电位在神经纤维上的传导速度。

【实验材料】1. 动物蛙或蟾蜍。

2. 试剂和药品任氏液3. 装置和器材计算机、蛙类手术器械、神经屏蔽盒、直尺、圆规、培养皿。

【实验方法】1. 神经干动作电位的引导1）制备坐骨神经-腓神经标本制备方法与制备坐骨神经-腓肠肌标本基本相同，只是当把坐骨神经游离至膝关节后，在腓肠肌一侧继续分离腓神经至足趾，用线结扎，并在结扎线远端剪断。

将制备好的坐骨神经-腓神经标本浸入盛有任氏液的培养皿内备用。

2）将神经标本置于神经屏蔽盒的电极上。

将神经的近中枢端置于刺激电极一侧，外周端置于记录电极侧。

3）进入BL-420生物信号采集、处理系统，单击菜单栏中实验项目，在肌肉、神经实验中选择神经干动作电位的引导，观察所引导出的动作电位。

4）观察刺激强度对动作电位幅度的影响。

实验项目（单击）——>肌肉、神经实验——>阈强度与动作电位的关系——>设置起始刺激强度、刺激增量与时间间隔——>单击OK——>观察显示器所显示的随着刺激强度大增大，双向动作电位从无到有、到随着刺激强度的增大而增大、再到刺激强度增大到某一值时，动作电位不再随之增大的变化过程。

神经干动作电位及其传导速度的测定1.实验目的：应用微机生物信号采集处理系统和电生理实验的方法，测定蛙类坐骨神经干双相、单相动作电位，测定神经冲动的传导速度。

2.实验材料和方法：⑴材料：蟾蜍；任氏液；BB-3G标本屏蔽盒，微机生物信号采集处理系统。

⑵方法：2.1系统连接和参数设置启动RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“神经干动作电位”项目。

仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3kHz、灵敏度5mV，采样频率40～100kHz，扫描速度1.0ms/div。

单刺激模式，刺激宽度0.1ms，延迟1ms，同步触发。

2.2制备蟾蜍坐骨神经干标本2.2.1毁蟾蜍脑脊髓和下肢标本制备2.2.2剥皮的下肢标本俯卧位于蛙板上，并剪除其骶骨。

用玻璃分针分离脊柱两侧的坐骨神经，穿线，紧靠脊柱根部结扎，近中枢端剪断神经干，用尖头镊子夹结扎线将神经干从骶部剪口处穿出。

2.2.3用分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经大腿部分，直至分离至腘窝胫腓神经分叉处，并用分针将腓浅神经、胫神经与腓肠肌和胫骨前肌分离。

2.2.4提起一侧结扎神经的线头，置剪刀于神经与组织之间，紧贴股骨，腘窝，顺神经走向，剪切至跟腱并剪断跟腱和神经。

剥离附着在神经干上的组织，完成后将其浸入盛有任氏液培养皿中待用。

2.3实验观察2.3.1神经干标本兴奋性将神经干移入标本屏蔽盒内，中枢端置于刺激电极处。

在刺激器功能框，选中触发选项，选择单刺激，波宽0.1ms，刺激电压1.0V，按“开始刺激”，观察屏幕上是否有动作电位，若神经干标本兴奋性良好，继续下一项目。

2.3.2中枢端引导动作电位神经干末梢置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。

2.3.3末梢端引导动作电位和测定动作电位传导速度神经干中枢端置于刺激电极处，刺激电压1.0V，波宽0.1ms，按“开始刺激”，测定第1对引导电极引导的双相动作电位正相波和负相波的振幅和时程。

神经干动作电位及其传导速度的测定【摘要】目的：测定蛙类坐骨神经干的单相、双相动作电位和其中A类纤维冲动的传导速度，并观察机械损伤、药物对神经兴奋和传导的影响。

方法：应用微机生物信号采集处理系统和电生理实验方法，分析蟾蜍坐骨神经干的单相、双相动作电位波形，测定蟾蜍坐骨神经干动作电位及其神经传导速度，研究蟾蜍坐骨神经干刺激电压强度与单相动作电位振幅的关系。

结果：当刺激电压为1.0V，刺激波宽0.1ms时，阈刺激为(0.25±0.07)V，最大刺激为(0.92±0.14)V，动作电位的传导速度为(35.58±9.59) m/s。

中枢引导的动作电位正相振幅为（3.30±1.28）mv，负相振幅为（2.18±0.82）mv，Ac1>Ac2，两者有高度显著性差异；动作电位正相时程（0.92±0.09）ms比负相时程（1.79±0.32）ms短，两者显著性差异明显。

末端引导的动作电位正相和负相振幅分别为（8.25±2.60）mv和（1.17±0.82）mv，Ap1>Ap2，两者有高度显著性差异；动作电位正相时程（1.17±0.82）ms比负相时程（2.18±0.51）ms短，两者有显著性差异。

单相动作电位振幅Am （9.52±3.06）mv大于双相动作电位正相振幅（8.64±2.76）mv ,两者没有显著性差异；单相动作时程Dm （1.85±0.65）ms显著大于双相动作电位正相时程Dp1(0.91±0.10）ms,两者有显著性差异。

引导电极等于10mm时，动作电位的正相波与负相波的振幅为（7.61±2.50）mv和（4.53±1.63）mv；当引导电极等于20mm时，动作电位的正相波与负相波的振幅为（10.10±2.60）mv和（5.31±1.91）mv；当引导电极等于30mm时，动作电位的正相波与负相波的振幅为（11.47±3.61）mv和（4.61±2.42）mv。