液相色谱(面积归一法)检验原始记录

吕梁市质量技术监督检验测试所
液相色谱仪检定记录
No.JLHX007 受检单位仪器名称
型号/规格出厂编号
生产厂家测量范围
检定依据检定日期
主标准器名称量传时间
检定地址温度℃湿度 %RH 1.外观检查：
2.泵流量设定值误差及流量稳定性误差的检定
3.定性定量测量重复性的检定
4.柱温箱温度设定值误差及控温稳定性的检定
5.梯度准确度的检定
6.紫外-可见光检测器/二极管阵列检测器性能检定
7.荧光检测器性能检定
8.液相色谱柱性能测试记录
9.示差折光率检测器性能检定
检定结论：证书编号：
检定员：核验员：。

高效液相色谱法原始记录
表码：COSH/JL30-06 第 页 共 页
项目编号： 样品名称： 检测项目： 样品状态： 检测环境温度： ℃ 湿度： %RH 气压： kPa 检测日期： 年 月 日
检测依据： 检测仪器：LC-20AT 液相色谱仪 仪器编号：S2012039 1 仪器条件
色谱柱： ，波长 nm ，柱温： ℃，流量： mL/min 流动相： 。

2 标准曲线的绘制
检出限： µg/mL ，最低检出浓度： mg/m 3（以采集 L 空气样品计）
3样品处理： 4 计算方法：
5实验记录
V ：采样体积 L V 0：标准采样体积 L D ：解吸效率 %（见 ）
检测人： 年 月 日 复核人： 年 月 日
标物名称： 标物编号或批号： 生产厂家： （1）标准贮备液的配置过程：
（2）标准溶液的配置过程：
系列号 1
2
3
4
5
6
加入体积（ ） 浓度（ ）
曲线方程： ，相关性：R=
样品编号
图谱编号 浓度/含量
（ ）
C (mg/m 3)
样品编号
图谱编号 浓度/含量
（ ）
C (mg/m 3)
高效液相色谱法原始记录（续）
表码：COSH/JL30-06 第 页 共 页
检测人： 年 月 日 复核人： 年 月 日
样品编号
图谱编号 浓度/含量
（ ）
C (mg/m 3)
样品编号
图谱编号 浓度/含量
（ ）
C (mg/m 3)。

气相、液相色谱仪里常说的面积归一法、内标法、外标法等分别是什么意思？面积归一化法,以总面积为100%,计算纯度多用;外标法,需单独用标准品作成一标准曲线,用于分析供试品;内标法,除标准品外,还需引入一种合适的内标物,以标准品与内标物响应值的比值作标准曲线,求解供试品与内标物响应值的比值所对应的供试品的量.气相色谱准归一化法或相对归一化法以及该方法的应用条件定量测量时，可根据供试品的具体情况采用峰面积法或峰高法，测定杂质含量时须采用峰面积法。

1、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量(1)按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。

取一定量注入仪器，记录色谱图。

测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子：As／Cs校正因子（f）＝———————AR／CR式中 As—内标物质的峰面积或峰高； AR—对照品的峰面积或峰高；Cs—内标物质的浓度； CR—对照品的浓度。

再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量：Ax含量（C x）＝f×———————As内／Cs内式中 Ax—供试品（或其杂质）峰面积或峰高； C x—供试品（或其杂质）的浓度；As内—内标物质的峰面积或峰高； Cs内—内标物质的浓度；f—较正因子当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液，使用同一浓度的内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。

(2) 内标物质的选择① 内标物质应是样品中部含有的组分，否则会使峰重叠而无法准确测量内标物质的峰面积。

② 内标物质的保留时间应与待测成分接近，并达到完全分离，即分离度R>1.5。

③ 内标物质应是纯度符合要求的化合物，若非纯品，无干扰峰也可使用，已知含量的较蠢物质也可使用，但须扣除内标物质的重量。

面积归一法得出的结果可靠吗？一般都是用面积归一法给出含量结果。

事实上，不考虑其它分析结果，单从面积归一化法考虑，是无法判断样品确切的含量的。

如果合成的相关化合物结构比较类似，都有紫外吸收，其紫外吸收曲线比较一致，有一定的参考价值。

但一般情况下，其可靠性是很差的。

为了得到可靠的结果，可以在不同波长下看看其面积归一化法的结果，或许可以发现在230nm下占80%，在270nm占30%，相信那一个，那要比较不同化合物紫外吸收的最大波长及其摩尔吸收系数了。

如果存在大量无紫外吸收的物质，则紫外面积归一化的结果更不可信，有条件的用其它检测器分析比较一下。

另外，用紫外测定低紫外吸收的物质，当混了强紫外吸收的杂质时，可能会出现实际含量98%，而测得的结果只有10%。

所以在用紫外检测器得到面积归一化的含量结果时，要充分了解样品的特性，尤其是紫外吸收波长，结合实际情况，才能作出合理的判断。

既然面积归一法定量这么不可靠，那我们为什么还要用呢？因为作为一种测试手段，面积归一法还是能给出很多参考信息的：比如能看到你这里边最少有几个杂质；而对于纯的物质的判定，往往并不通过外标法或内标法测定（因仪器定量方法的误差在1－2%），而是采用面积归一化法结合其它测定结果。

具体如下：1 样品采用其它手段，确认主体是你所需的化学结构，例如采用NMR的氢谱和碳谱及其相关的二维谱，从谱图上基本看不到其它杂质峰。

有时，色谱因条件关系，无法分离，核磁可以提供一些判断。

2 在基本断定样品很纯条件下，用顶空色谱法测定残留溶剂，要求总量不大于0.1%。

因为这些溶剂无法用液相测定。

3 测定样品中游离的水分，一般要求小于0.2%（本身含结晶水的样品例外），在液相色谱中无法测定其含水量。

4 测定样品中灼烧残渣或灰分，一般要求小于0.1%（本身含金属或无机盐例外），在液相中无法测定无机盐类。

5 用离子色谱测定可能存在的一些小分子有机酸，如微量的甲酸不能用液相和气相检测。