ELISA方法检测含油食品中氟喹诺：酮类药物残留

氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展189氟喹诺酮药物残留的检测方法研究进展刘荣利韩宁娟李亮(西安培华学院医学院陕西西安710125)摘要：氟喹诺酮是一种人工合成的广谱抗生素，在防治动物及人类的感染性疾病中具有重要应用。

由于抗 生素药物的不合理使用，导致在动物源性食品中残留超标，长期食用将严重危害人体健康，因此，对于动物源 性食品中氟喹诺酮残留检测具有重要的意义。

有关氟喹诺酮残留的检测方法大致可分为微生物法、免疫法、色谱法和光谱法等。

关键词：氟喹诺酮药物检测方法研究进展中图分类号：S859文献标识码：A文章编号：1009-5349 (2017) 09-0189-02一、 前言氟喹诺酮（fluoroquinolones，F Q S)是一系列由人工合 成的含有4-喹诺酮母核结构，母核6位C上被氟取代的一 类广谱抗菌药物，抗菌作用强，对革兰氏阳性菌与阴性菌 均有作用。

具有吸收快，体内分布广，血药浓度高，血浆 半衰期长，合成简便，药品价格低廉等特点，常用于动物 及人感染性疾病的治疗。

F Q S药物在家畜、家禽的饲养中应用广泛，抗生素的 不合理使用，导致其在动物性食品中的残留超标，如果人 体长时间摄人该类食物，不仅会引起人体对F Q S药物产生 耐药性，而且药物残留通过食物对人的中枢神经系统，胃肠道等器官危害较大，严重威胁人类健康。

关于乳、肉制 品中F Q S抗生素的残留全球都有严格规定。

因此，对于动 物源性食品中F Q S药物残留检测具有重要的意义。

现将F Q S药物残留的检测方法进行综述。

二、FQS药物的检测方法(一） 微生物法微生物检测利用F Q S药物对微生物生理代谢的抑制作 用，进行F Q S药物残留的测定。

该方法经济方便，但灵敏 度和特异性较低，难以进行药物残留的准确定性定量分析，适用于大量样品的筛选，可对药物残留进行初步检测。

邢 应寿[|]等建立了环丙沙星、诺氟沙星、恩诺沙星三种药物 在肉鸡组织中残留的微生物检测法，结果发现24h后，环 丙沙星残留量较大。

鸡肉中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测方法的改进崔惠娟【摘要】对《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》进行改进,经试验验证,洗脱液改用含30％乙腈的流动相时,能提高方法的回收率.添加10μg/kg、100 μg/kg、200 μg/kg浓度水平时,测得的回收率为77.6％～95.2％,精密度＜10％,该方法检测环丙沙星的线性范围是5 ～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.7 μg/kg;达氟沙星的线性范围是1～40 μg/kg,检出限是0.11 μg/kg、定量限是3.4 μg/kg;恩诺沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是11.6 μg/kg;沙拉沙星的线性范围是5～200 μg/kg,检出限是0.5μg/kg、定量限是16.7μg/kg.说明改进后的方法能够满足鸡肉中氟喹诺酮类药物残留的检测.【期刊名称】《云南畜牧兽医》【年(卷),期】2017(000)002【总页数】3页(P17-19)【关键词】鸡肉;高效液相色谱法;氟喹诺酮类药物【作者】崔惠娟【作者单位】红河州动物疫病预防控制中心,云南蒙自 661199【正文语种】中文【中图分类】S859.84禽业科技氟喹诺酮类属化学合成抗菌药，因其抗菌谱广、抗菌活性高、毒副作用小、组织分布广等特点被广泛用于畜禽和水生动物疾病的防治[1]。

临床上常用的氟喹诺酮类药物主要有环丙沙星、恩诺沙星、达氟沙星、沙拉沙星等。

随着氟喹诺酮类药物的广泛应用，各类细菌对其产生的耐药率已达到60%～70%[2]。

目前，氟喹诺酮类药物的滥用及残留问题已经引起人们的广泛关注。

在动物性食品中，氟喹诺酮类药物残留检测方法主要有酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)等[3]。

目前，用HPLC法检测鸡肉产品中的氟喹诺酮类药物残留，主要用到的国家标准方法是《动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法》(农业部1025号公告-14-2008)[4]。

收稿日期:2008-08-27基金项目:吉林省科委基金资助项目(2000500) 作者简介:魏 东(1971-),男,助理研究员,硕士。

*通讯作者氟喹诺酮类药物残留免疫学检测方法的研究魏 东1,2,杨正涛1,李 颖1,郭昌明1,刘 辉1,张乃生1* (11吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062;21河北北方学院,河北张家口075000)摘要:以沙拉沙星(SAL X)为半抗原,牛血清白蛋白(BSA )偶联后免疫兔,获得对多种氟喹酮类(F QN S)药物有特异性的广谱性抗体。

以SA LX 与卵清白蛋白(O V A)的偶联物作包被原,建立并优化了间接竞争EL ISA 检测方法,对SAL X 最低检出限达191319L g/L ,且对诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星均有特异性识别,最低检测限分别是221646、261181和191054L g/L 。

结果表明,该抗体可用于多种氟喹诺酮类药物残留筛选检测。

关键词:氟喹诺酮;残留;检测;酶免疫分析方法中图分类号:S85917 文献标识码:A 文章编号:1005-4545(2009)12-1593-06Immunoassay method of detecting the residues of fluoroquinolonesWEN Dong 1,2,YA NG Zheng -tao 1,LI Ying 1,GU O Chang -m ing 1,LIU H ui 1,ZH ANG N a-i sheng 1*(1.College of A nimal S cience and Veterinary Med icine ,J ilin Univ er sity ,Changchun 130062,China;2.H ebei N or th Univ er sity ,Zhangj iakou,H ebei 075000,China)Abstract :Saraflox acin(SA LX )w as used as hapten coupling w ith bovine serum album in to generate broad spec-i ficity antibody ag ainst f luoro quinolones(FQ N S).Assay perfo rmance w as impro ved by use of a co ating ant igen,w hich co njuag ated betw een the SAL X and carr ier protein(OV A ).T y pical detection limits fo r SA LX w as 19.319L g /L.Dif -fer ent cro ss -reactions w ith the closely related F QN S,including NF LX ,CPL X and EF LX ,w ere det ected with the de -tectio n limits of 22.646,26.181and 19.054L g /L ,respect ively.T he r esult indicated that the antibody developed in this study w as pr act icable to screen the r esidues of F QN S. Key words :f luor oquinolones(FQ N S);residue;detectio n;ELI SA *Cor r esp onding author氟喹诺酮类(fluoro quinolones,FQNS 或FQS)药物是一类广谱高效抗菌药,几乎适用于临床常用的各种细菌感染性疾病,但其在动物源食品中的残留引起的危害也极大,可引起人体各系统不良反应、/三致0、中毒、过敏瓜及耐药性等一系列问题[1],其对人类造成的潜在危害是长久的,一些国家、地区或组织对FQNS 的最高残留限量(M RL)都做了规定,因此,建立一种高效、快速、灵敏度高的检测方法对FQNS 残留进行检测与监控,是当前FQNS 残留研究的主要趋势。

氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物是一类广泛应用于人类及动物医药领域的抗菌药物，包括诸如氟苯尼考、氟哌酸、氟氧氟嗪等。

在兽药的使用中，为了保证食品中不残留过多的药物，国家制定了一系列的标准和方法来检测氟喹诺酮类药物的残留。

国标是指国家发布的关于特定物品或行为的规范和标准，是行业内进行质量控制和监督的重要依据。

对于氟喹诺酮类药物残留检测而言，国标主要涉及以下几个方面的内容：1. 检测方法：国标要求制定适用于氟喹诺酮类药物残留检测的方法，包括样品的采集、处理、提取、分离和定量等方面的技术要求。

这些方法通常采用高效液相色谱仪（HPLC）或质谱仪（MS）等仪器设备进行分析，以确保准确度和可靠性。

2. 检测限值：国标规定了氟喹诺酮类药物在食品中的残留限值，即食品中允许存在的最大药物残留浓度。

这些限值根据食品的种类、人们对该食品的摄入量以及药物的毒性等因素来确定，旨在保证食品的安全性和合规性。

3. 样品类型：国标规定了适用于氟喹诺酮类药物残留检测的样品类型，包括肉类、乳制品、水产品、蔬菜等。

针对不同的样品类型，可能需要不同的样品处理和预处理方法，以确保药物残留的有效提取和准确测定。

4. 检测设备和操作要求：国标还规定了氟喹诺酮类药物残留检测所需的设备和操作要求，包括仪器的性能指标、试剂的选择和使用、流程的标准化等。

这些要求有助于确保检测结果的准确性和可比性。

氟喹诺酮类药物残留的检测国标的制定和执行，对保障食品安全、合规经营和消费者权益具有重要意义。

遵循国标的要求进行药物残留检测，可以有效监控食品中的氟喹诺酮类药物残留情况，减少潜在的食品安全风险，保障公众健康。

同时，对于相关行业从业人员而言，了解并遵守国标的要求也是履行职责、提升专业素养的必要条件。

酶标抗原直接竞争ELISA检测食品中氟喹诺酮类药物多残留樊晓博;谢兰心
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2015(036)024
【摘要】固相包被恩诺沙星抗体,辣根过氧化物酶标记的抗原与标准品(或样品)中氟喹诺酮药物竞争结合抗体,建立了高效、高灵敏的氟喹诺酮药物直接竞争酶联免疫吸附分析检测方法.优化反应条件后,得到方法的IC50为2.04 μg/L,灵敏度为0.15 μg/L,线性范围0.3～15 μg/L;方法可以检测12种氟喹诺酮药物,在生乳、鸡肉、鱼肉和虾肉4种样品中12种药物的回收率为70％～121.5％.
【总页数】5页(P265-269)
【作者】樊晓博;谢兰心
【作者单位】渭南职业技术学院渭南市农产品食品检验检测研究中心,陕西渭南714000;渭南职业技术学院渭南市农产品食品检验检测研究中心,陕西渭南 714000【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.对直接酶标HBV DNA探针检测乙肝患者血清中HBV DNA方法的改进 [J], 佟惠春;李冬田
2.动物性食品中氟喹诺酮类药物多残留检测研究进展 [J], 李新朋;姜金庆;钱爱东;丁菡;李艺
3.直接竞争ELISA法快速检测动物源性食品中磺胺嘧啶残留 [J], 刘百红;熊宁;王喜
亮;石德时;李晓云;彭大鹏;毕丁仁
4.直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留 [J], 刘卫华;沙芳芳;李润磊;王鑫伟;王向红
5.玉米赤霉醇酶标抗原的制备及其直接和间接竞争ELISA检测方法的建立与比较[J], 刘媛;刘贤进;余向阳;张存政;张晓;刘蓉蓉;龚振明
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ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2011(032)010【摘要】建立宠物食品及油炸食品中4种氟喹诺酮类药物(诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星)ELISA检测方法,采用氟喹诺酮类检测试剂盒,样品用乙腈-NaOH(84+16)溶液提取,再用二氯甲烷反提取目标物.并根据日常检测中积累的一些经验,对宠物食品及油炸食品中的杂质和脂类物质进行适当的去除,取得了满意的结果.检测波长450 nm,回收率平均为90.95％,相对标准偏差小于6.07％.该方法快速,操作简单,灵敏度高,特异性强,检测限可达0.03 mg/kg,能够满足欧盟及日本、美国等地区和国家氟喹诺酮类药物筛选检测的要求.【总页数】3页(P122-124)【作者】于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛【作者单位】潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041;潍坊出入境检验检疫局,山东潍坊261041【正文语种】中文【相关文献】1.SPE-HPLC检测动物源性食品中3种氟喹诺酮类药物残留 [J], 池永红;云雅光2.对食品中氟喹诺酮类药物残留色谱检测方法的思考 [J], 岳鹏;王安3.动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留色谱\r质谱检测技术研究进展 [J], 郭亚文;卜晓娜;刘楚君;王雅娟;赵霞;王波;谢恺舟4.动物性食品中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱检测方法的研究进展 [J], 焦安祥; 袁瑷金; 崔凌峰; 司闯; 舒利贤; 许翔翀5.动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留的色谱质谱检测技术 [J], 杨彩梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

动物性⾷品中氟喹诺酮类药物残留检测⽅法的研究进展
动物性⾷品中氟喹诺酮类药物残留检测⽅法的研究进展
张家⽲1，孟婷2，周作红1，管远红2，洪伟鸣2，刘莉2，王永娟2，左伟勇2
【摘要】摘要：动物性产品中存在多种氟喹诺酮类药物残留，不仅危害动物健康，且影响⼈类的动物性⾷品安全。

作者就氟喹诺酮类药物残留问题及其检测⽅法（如微⽣物法、理化检测法、免疫分析法等）进⾏了简要综述，并进⾏了合理的展望，以期为今后研究和开发氟喹诺酮类药物残留检测⽅法提供参考。

【期刊名称】中国畜牧兽医
【年(卷),期】2014(041)005
【总页数】5
【关键词】氟喹诺酮类药物；残留；研究进展
随着经济的发展、⼈民⽣活⽔平的不断提⾼，在⽇常⾷物中，⼈们对于⾁、蛋、奶及相关加⼯的副⾷品数量要求越来越多，质量要求也越来越⾼。

兽药在保证动物性⾷品的供应⽅⾯发挥着巨⼤作⽤，⽽氟喹诺酮类（fluoroquinolones，FQs）药物具有抗菌谱⼴、抗菌作⽤强、体内分布⼴泛、组织药物浓度⾼、蛋⽩结合率低、使⽤⽅便及价格低廉等特点，20余年来已成为发展最快的化学合成抗菌药物，在临床上⼴泛⽤于动物各种感染性疾病的治疗，保障动物性⾷品供应，发挥着不可替代的作⽤。

但FQs药物残留问题也随之⽽来，威胁着⼈体的健康。

作者就FQs药物残留问题及其检测⽅法进⾏简要综述。

1 兽药残留问题
⾷品安全对⼈类⽣命健康⾄关重要，早在1955年⽇内⽡举⾏的联合国会议上，联合国粮⾷及农业组织（FAO）和世界卫⽣组织（WHO）提出成⽴⼀个委员会。

氟喹诺酮类药物多残留间接竞争ELISA检测方法的建立姜金庆;杨雪峰;王自良;常新耀;王三虎;刘兴友【摘要】为建立同时检测多种氟喹诺酮药物的免疫学分析方法,本研究以碳二亚胺(EDC)二步法合成环丙沙星人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立氟喹诺酮类药物多残留检测方法.标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.2 ng/mL～376 ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为8 ng/mL,检测限(LOD)为0.1 ng/mL;抗体对恩诺沙星、诺氟沙星和培氟沙星均能特异性识别,IC50值分别为7.3 ng/mL、10.6ng/mL、和13.2 ng/mL;标准品稀释液中NaOH和甲醇的最高容忍度分别为10％和30％；牛奶基质中添加5 ng/mL、20 ng/mL和50 ng/mL的标准品,环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星和培氟沙星的回收率分别为93％～108％、96％～110％、92.5％～104％和93％～102％.%To develop a multidetermination immunoassay for fluoroquinolone (FQs) residues, an indirect competitive ELISA was developed with the polyclonal antibody against ciprofloxacin (CPFX pAb) produced from rabbits which immunized with FQs conjugated BSA. This method was sensitive and had a linear detection range from 0.2 ng/mL to 376 ng/mL (R2=0.943), with IC50 and LOD values of 8 ng/mL and 0.1 ng/mL. The antibody exhibited high sensitivity to FQs, and the IC50 values to enrofloxacin, norfloxacin and pefloxacin were 7.3 ng/mL, 10.6ng/mL, and 13.2 ng/mL, respectively. The optimized detecting condition indicated that the concentrations of NaOH and methanol in dilute solution was less than 10% and 30%. When the ciprofloxacin, enrofloxacin, norfloxacin and pefloxacin in milk were at highest concentrations of 5ng/mL, 20 ng/mL and 50 ng/mL, the recoveries were ranged from 93% to 108%, 96% to 110%, 92.5% to 104%, and 93% to 102%, respectively.【期刊名称】《中国预防兽医学报》【年(卷),期】2011(033)011【总页数】6页(P887-892)【关键词】环丙沙星;多克隆抗体;间接竞争ELISA;氟喹诺酮药物;多残留检测【作者】姜金庆;杨雪峰;王自良;常新耀;王三虎;刘兴友【作者单位】河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心,河南新乡453003;河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心,河南新乡453003;河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003;动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心,河南新乡453003;动物疫病和残留物防控河南省高校工程技术研究中心,河南新乡453003【正文语种】中文【中图分类】S859.79氟喹诺酮类(Fluoroquinolones，FQs)药物包括环丙沙星(CPFX)、恩诺沙星、诺氟沙星和培氟沙星等，它们是在喹诺酮环结构的6位引入氟、7位引入哌嗪环而产生的一类衍生物，仅在1位、7位取代基不同。

氟喹诺酮类药物多残留酶联免疫检测方法的建立李新朋;姜金庆;钱爱东;王自良;范国英;单晓峰;康元环;李艺【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2014(000)023【摘要】【目的】氟喹诺酮类药物（FQs）在畜牧业中广泛用于预防和治疗细菌性疾病，不合理使用导致在动物性食品中残留，严重危害消费者健康，其检测受到世界各国重视。

制备抗多种FQs单克隆抗体（mAbs），建立间接竞争 ELISA （icELISA）检测方法，为动物性食品中 FQs 多残留检测奠定基础。

【方法】环丙沙星（CPFX）羧基上引入氨基丁酸后为半抗原（CPFX-A），质谱鉴定；分别用碳二亚胺法（DDC）和混合酸干法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成免疫原（CPFX-A-BSA）和包被原（CPFX-A-OVA），紫外和红外光谱鉴定是否偶联成功；CPFX-A-BSA 免疫Balb/c小鼠，间接ELISA和icELISA方法测定多抗血清效价和敏感性，选取抗血清效价高和敏感性好的鼠用于细胞融合；NS0细胞和脾细胞按1﹕5比例在PEG-1500作用下融合，筛选抗FQs杂交瘤细胞株，并进行效价、亚型、敏感性和交叉反应率鉴定；体内诱生腹水法制备 mAb，液体石蜡作为诱导剂，每只鼠注射108个杂交瘤细胞；选敏感性和广谱特异性好的腹水mAb，建立icELISA标准曲线，对icELISA检测方法优化，在鸡肉中添加10种FQs进行测定，将测定结果与HPLC法比较，用SPSS 17.0软件进行显著差异性分析。

【结果】半抗原改造和人工抗原合成成功；3只鼠血清效价均达到1﹕1.28×104以上，2号鼠血清效价最高（1﹕2.56×104），且IC50值最低（12.92 ng·mL-1），选择2号鼠作为细胞融合用鼠；4次亚克隆筛选并鉴定后获得3株敏感广谱特异的杂交瘤细胞，分别命名为2H5、3D11、4F4，细胞上清效价分别为1﹕1600、1﹕1600和1﹕800，腹水效价分别为1﹕1.6×106、1﹕8.2×105和1﹕8.2×105；icELISA方法的包被原浓度为1μg·mL-1，5%猪阴性血清4℃包被过夜，单抗1﹕40000稀释，山羊抗鼠酶标二抗（GaMIgG-HRP）1﹕8000稀释；反应温度均为37℃，标准品与单抗同时加入反应15 min，洗板后加二抗反应25 min；显色10 min，2H5细胞株腹水敏感性和广谱特异性最好，2H5的线性回归方程为y=-28.022x+56.219，R2=0.9782，对10种FQs的IC50值分别为环丙沙星（CPFX）1.67 ng·mL-1、诺氟沙星（NOR）1.82 ng·mL-1、培氟沙星（PEF）1.97 ng·mL-1、恩诺沙星（ENR）1.54 ng·mL-1、单诺沙星（DAN）2.79 ng·mL-1、洛美沙星（LOM）3.38 ng·mL-1、氧氟沙星（OFL）5.50 ng·mL-1、麻保沙星（MAR）4.40 ng·mL-1、沙拉沙星（SAR）11.76 ng·mL-1、二氟沙星（DIF）13.60 ng·mL-1，与10种FQs的交叉反应率为12.3%—108.4%，与非 FQs交叉反应率均低于0.01%，对10种FQs的检测限（LODs）为0.09 ng·mL-1—0.64 ng·mL-1。

用ELISA方法检测鸡蛋氟喹诺酮类药物残留的研究刘欢欢;于学辉;彭莉;岳秀英;杨松沛;刘内生【期刊名称】《西南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2008(034)006【摘要】针对鸡蛋中喹诺酮类药物的残留,采用间接竞争ELISA方法建立了检测手段.样品经提取净化后,以氟喹诺酮类药物多残留试剂盒为基础,建立了鸡蛋中喹诺酮类药物残留的检测方法.结果显示,在5～50ìg/kg浓度范围内的平均添加回收率在70%以上,批内变异系数在10%以内,批间变异系数在15%以内,检测限为5ìg/kg,低于国家规定的喹诺酮类药物在鸡蛋中的残留限,建立了一种快速的对鸡蛋中喹诺酮类药物残留的检测方法,能满足目前基层初筛工作的实际需要.【总页数】4页(P1182-1185)【作者】刘欢欢;于学辉;彭莉;岳秀英;杨松沛;刘内生【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;四川省兽药监察所,四川成都610041;四川省兽药监察所,四川成都610041;四川省兽药监察所,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】S859.84【相关文献】1.超高效液相色谱法检测鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留 [J], 孙思;王安波;杨梅;汪俭;刘文峰2.ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留 [J], 于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛3.鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量检测方法研究 [J], 李丹;张玉洁;仲锋;汪霞4.鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的危害及检测技术应用 [J], 李永盼5.高效液相色谱-串联质谱法检测鸡蛋中的氟喹诺酮类药物残留 [J], 穆小婷;宋佳;胡克科;别又才;陈智标因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猪尿中氟喹诺酮类药物残留的ELISA 检测作者：陈浩洪体玉来源：《科学与技术》 2019年第1期摘要：利用氟喹诺酮类残留酶联免疫检测试剂盒，测定猪尿中氟喹诺酮类药物的残留量。

研究了猪尿样品本底颜色，蛋白含量以及样品离心对测定结果的影响，获得猪尿样品中氟喹诺酮类药物残留检测的前处理方法，并通过加标回收实验及猪尿样品特异性实验对实验方法进行了确定。

关键词：氟喹诺酮类药物；残留；酶联免疫；猪尿氟喹诺酮类（Fluoroquinolones，FQNS）药物是近二十年来快速发展起来的一类高效抗菌药。

具有抗菌谱广，高药效，低毒性，穿透组织能力强等优点，能有效抑制细菌DNA螺旋酶的合成[1]，因此近年来在兽医临床诊疗和水产养殖中作为一种不可多得的高效抗感染类药物得到广泛应用。

在大量用于预防、治疗和促进个体生长的同时，这类药物的残留问题也引起了国内外有关方面的高度关注，其残留的危害性除了对人类的直接毒副作用和潜在致癌作用外主要报道为该类药物容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而不利于该类药物对人类相关疾病的治疗作用[2]。

在美国目前FQNS在食品动物中是禁止使用的，为保障食品安全，我国FQNS残留也已经列为动物性食品的一个重点风险监测项目，并制定了严格的相关限量标准。

广西检验检疫局按照国家质检总局的部署，针对供港澳活猪的兽药残留监管做了大量卓有成效的工作，制定了详细的工作方案，并将供港猪猪尿兽药残留作为日常监测的主要内容，其中FQNS是主要监测项目之一。

目前，FQNS残留主要的检测方法有：微生物法、液相色谱法（LC）、高效液相色谱法（HPLC）、薄层色谱法、液相色谱-质谱联用法（LC-MS）、免疫分析法、高效毛细管电泳法（HPCE）等[3-5]。

这些方法虽各有优点，但也存在样品前处理比较复杂，操作过程繁琐，时间长，所需仪器要求高等不足，对于畜牧部门的大批量检测并不适用，而间接竞争ELISA方法具有较高的灵敏度，较强的特异性，样品测定前处理简单，操作过程只需50分钟，简单快速，能最大程度减少工作量，适合大批量样品的筛选，尤其便于基层实验室推广应用。

超高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留杨卫军;李曼;曹秀梅;林艳青【摘要】本研究建立了检测鸡肉中氟喹诺酮类药物的超高效液相色谱分析方法,样品采用磷酸盐缓冲溶液提取,提取液经Bond Elut C18固相萃取柱富集净化,在荧光检测器下进行定性与定量分析.结果表明,该方法对4种氟喹诺酮类药物在0.000 2～ 0.5 g/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(r2)均大于0.999 8,在3个添加水平范围内的回收率为67.6％～97.1％,相对标准偏差为3.1％～5.4％,方法检出限为3 g/kg,定量限为10 g/kg.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2016(000)004【总页数】5页(P8-12)【关键词】超高效液相色谱法;氟喹诺酮类;鸡肉;残留【作者】杨卫军;李曼;曹秀梅;林艳青【作者单位】河北省秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛066000;河北省秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛066000;河北省秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛066000;河北省秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心,河北秦皇岛066000【正文语种】中文【中图分类】S859.84氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQs）是感染性疾病的治疗药物，但由于其具有促进动物生长、改善动物产品品质、降低动物发病率及死亡率等作用，常被作为饲料添加剂用于饲料中[1-4]。

该类药物的滥用以及使用后未严格实行休药期制度，常常导致其在动物性食品中的残留超标。

农业部235号公告规定了鸡肉中达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的最高残留限量分别为200、100和10μg/ kg。

人们如果长期食用残留超标的动物性食品，就会对人体造成一系列不同程度的毒副作用，如对人体的中枢神经系统及心血管系统造成不良反应，甚至致癌[5-8]。

目前，鸡肉中氟喹诺酮类药物残留检测采用高效液相色谱法，该方法检测耗时长，检测效率低。

氟喹诺酮类抗生素的检测方法及检测试剂一、氟喹诺酮类抗生素的检测方法1、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是检测氟喹诺酮类抗生素的常用方法之一。

它基于化合物在流动相和固定相之间的分配差异来实现分离和检测。

HPLC 具有高分辨率、高灵敏度和准确性的特点。

在检测过程中，样品经过提取、净化和浓缩等预处理步骤后，注入高效液相色谱仪。

通过选择合适的色谱柱、流动相组成和检测波长，可以实现对不同氟喹诺酮类抗生素的有效分离和定量分析。

2、液相色谱质谱联用法（LCMS/MS）液相色谱质谱联用法结合了液相色谱的分离能力和质谱的高选择性和高灵敏度。

这种方法可以同时检测多种氟喹诺酮类抗生素，并且能够对其结构进行确证。

在 LCMS/MS 中，样品经过液相色谱分离后，进入质谱仪进行离子化和质量分析。

通过监测特定的离子对，可以实现对目标化合物的精准定量。

3、酶联免疫吸附测定法（ELISA）ELISA 是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法。

针对氟喹诺酮类抗生素制备特异性抗体，然后将样品与抗体和酶标记的抗原进行竞争结合反应。

通过测定酶反应产物的吸光度，可以间接定量样品中氟喹诺酮类抗生素的含量。

ELISA 具有操作简便、快速、成本低的优点，适用于大量样品的初步筛查。

4、毛细管电泳法（CE）毛细管电泳法利用在电场作用下离子的迁移速度差异来分离化合物。

它具有高效、快速、样品用量少等优点。

对于氟喹诺酮类抗生素的检测，CE 可以通过选择合适的缓冲液体系和检测条件，实现对目标化合物的分离和检测。

5、微生物检测法微生物检测法基于抗生素对微生物生长的抑制作用。

常用的有琼脂扩散法和肉汤稀释法。

在琼脂扩散法中，将含有待测样品的滤纸片放置在接种了敏感菌株的琼脂平板上，观察抑菌圈的大小来判断抗生素的存在和浓度。

肉汤稀释法则是通过测定能抑制微生物生长的最低抗生素浓度来定量。

二、氟喹诺酮类抗生素的检测试剂1、标准品标准品是检测中的重要试剂，用于建立标准曲线和进行定量分析。

16 2015, V ol.36, No.24 食品科学※安全检测酶标抗原直接竞争ELISA 检测食品中氟喹诺酮类药物多残留樊晓博，谢兰心（渭南职业技术学院，渭南市农产品食品检验检测研究中心，陕西 渭南 714000）摘 要：固相包被恩诺沙星抗体，辣根过氧化物酶标记的抗原与标准品（或样品）中氟喹诺酮药物竞争结合抗体，建立了高效、高灵敏的氟喹诺酮药物直接竞争酶联免疫吸附分析检测方法。

优化反应条件后，得到方法的IC 50为2.04 μg /L ，灵敏度为0.15 μg /L ，线性范围0.3～15 μg /L ；方法可以检测12 种氟喹诺酮药物，在生乳、鸡肉、鱼肉和虾肉4 种样品中12 种药物的回收率为70%～121.5%。

关键词：氟喹诺酮；酶标抗原；多残留检测；直接竞争酶联免疫吸附分析Direct Competitive ELISA with HRP-Labeled Antigen for Multiresidue Determination ofFluoroquinolones in Animal-Derived FoodFAN Xiaobo, XIE Lanxin(Weinan Testing and Inspection and Research Center of Agricultural Products and Food,Weinan Vocational and Technical College, Weinan 714000, China)Abstract: In this study, a rapid and high sensitive direct competitive enzyme-linked immunoassay (dc-ELISA) method based on antigen labeled by horseradish peroxidase (HRP) was established and successfully applied to detect fluoroquinolones (FQs) in animal-derived food. In the direct competitive assay, monoclonal antibody was bound to the surface of a microtiter plate, and the standards (or the sample) competed with antigen for the antibody binding sites. Under optimized assay conditions, the IC 50 of dc-ELISA was 2.04 μg /L, the limit of detection was 0.15 μg /L, and the linear range was 0.3–15 μg /L. This method could detect 12 kinds of FQs with recoveries from milk, chicken, fish and shrimp in the range from 70% to 121.5%. Key words: fluoroquinolones; horseradish peroxidase (HRP)-labeled antigen; multiresidue determination;direct competitive ELISA (dc-ELISA)中图分类号：TS207.3 文献标志码：A 文章编号：doi:10.7506/spkx1002-6630-201524001收稿日期：2015-03-02基金项目：渭南职业技术学院青年科研基金项目（WZYQ201405）作者简介：樊晓博（1984—），女，讲师，硕士，研究方向为食品快速检测技术。