下载文档原格式
固相萃取-液相色谱串联质谱法测定牛肉中多种磺胺类药物残留量贾彩霞，周洁如，朱洪希，吴 旦（常州检验检测标准认证研究院，江苏常州 213000）摘 要：目的：建立牛肉中多种磺胺类药物残留量的检测方法。
方法：处理均质后的牛肉，用乙酸乙酯提取出目标物，用HLB小柱净化，氮吹，复溶。
以0.1%的甲酸甲醇与0.1%的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，经T3色谱柱进行分离，采用离子源为电喷雾离子源，扫描方式为正离子扫描，检测模式为多反应监测，外标法定量。
结果：18种磺胺在2～200 ng·mL-1线性关系良好（r＞0.996），方法的检出限为2 μg·kg-1，定量限为10 μg·kg-1，加标回收率为64.87%～105.00%，相对标准偏差为1.6%～6.8%。
结论：本方法灵敏、准确，适用于牛肉中18种磺胺类药物的检测。
关键词：固相萃取；高效液相色谱-串联质谱；磺胺类药物；牛肉Determination of Sulfonamide Residues in Beef by Solid Phase Extraction-Liquid Chromatography-Tandem MassSpectrometryJIA Caixia, ZHOU Jieru, ZHU Hongxi, WU Dan(Changzhou Institute of Inspection and Testing Standards Certification, Changzhou 213000, China) Abstract: Objective: To establish a method for the determination of sulfonamides residues in beef. Method: The homogenized beef was treated, the target was extracted with ethyl acetate, purified by HLB column, nitrogen blowing, and redissolved. 0.1% formic acid methanol and 0.1% formic acid aqueous solution were used as mobile phase for gradient elution, and separated by T3 column. Ion source was used as electrospray ion source, scanning mode was positive ion scan, detection mode was multi-reaction monitoring, and quantitative method was external standard method. Result: The internal linear relationship of 18 sulfonamides was good (r＞0.996) in the range of 2～200 ng·mL-1. The limits of detection and quantification were 2 μg·kg-1 and 10 μg·kg-1. The recoveries were 64.87%～105.00% and the relative standard deviations were 1.6%～6.8%. Conclusion: The method is sensitive, accurate and suitable for the detection of 18 sulfonamides in beef.Keywords: solid phase extraction; high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamides; beef兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质残留[1]。
固相萃取-高效液相法测定黄酒中多酚徐秋月;周志磊;毛健;岳翠益;李志威【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2018(37)10【摘要】为了寻找一种更高效、富集能力更强,更具有针对性的前处理方式,解决黄酒多酚测定时存在的杂质多、目标物含量低、定量不准确的问题,采用固相萃取小柱对黄酒进行前处理,就流动相条件、固相萃取小柱类型、洗脱剂类型、洗脱剂体积等因素对9种多酚的回收率影响做了评价比较,并运用该方法对不同甜型的绍兴黄酒中多酚质量浓度进行精确测定,结果表明:采用Poly-Sery HLB SPE小柱,甲醇为洗脱剂,洗脱体积为3倍上样体积时9种多酚回收率最高,均在87.3％～103.8％之间,相对标准偏差小于3.2％.不同甜型的绍兴黄酒中多酚以儿茶素和丁香酸为主,干型黄酒、半干型黄酒中多酚质量浓度低于甜型黄酒和半甜型黄酒.该方法具有快速、简便、准确的优点,可用于黄酒等酒类的多酚测定.【总页数】7页(P1021-1027)【作者】徐秋月;周志磊;毛健;岳翠益;李志威【作者单位】粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;食品安全与营养协同创新中心,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品生物技术研究所(如皋),江苏如皋226500;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;食品安全与营养协同创新中心,江南大学,江苏无锡214122;国家黄酒工程技术研究中心,浙江绍兴312000;江南大学食品生物技术研究所(如皋),江苏如皋226500;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;食品安全与营养协同创新中心,江南大学,江苏无锡214122;国家黄酒工程技术研究中心,浙江绍兴312000;江南大学食品生物技术研究所(如皋),江苏如皋226500;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;食品安全与营养协同创新中心,江南大学,江苏无锡214122;国家黄酒工程技术研究中心,浙江绍兴312000;江南大学食品生物技术研究所(如皋),江苏如皋226500;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122;江南大学食品学院,江苏无锡214122;食品安全与营养协同创新中心,江南大学,江苏无锡214122;国家黄酒工程技术研究中心,浙江绍兴312000;江南大学食品生物技术研究所(如皋),江苏如皋226500【正文语种】中文【中图分类】TS262.4【相关文献】1.固相萃取-高效液相法测定芝麻油中苯并（a）芘 [J], 蒋珍菊;王雁;杨巧2.固相萃取-高效液相法测定蔬菜中6种磺胺类药物 [J], 刘雪;余晟;韦彩云;王玲玲3.分子印迹固相萃取超高效液相荧光法测定螺类中多环芳烃 [J], 胡园;郑伊诺;陆荣茂;许凯伦;曾国权;黄建东;潘齐存4.固相萃取-高效液相法测定炒货食品及坚果制品中的多种抗氧化剂 [J], 夏春;赵成仕;臧爱香5.固相萃取-高效液相法测定植物样品中除草剂类农药残留量 [J], 孔维巍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄酒中氨基甲酸乙酯和尿素的处理工艺黄酒一直是中国文化中的重要组成部分，而黄酒的生产工艺就是中国酿酒文化的重要代表之一。
在黄酒的生产过程中，氨基甲酸乙酯和尿素是两种常见的副产品，它们的处理工艺直接关系到生产环境的卫生和水质的污染问题。
因此，黄酒生产企业应该对氨基甲酸乙酯和尿素的处理工艺进行全面的分析。
一、氨基甲酸乙酯的处理工艺氨基甲酸乙酯是黄酒发酵过程中产生的一种有机化合物，它含有极强的氨臭味和腐蚀性，如果直接排放到环境中，将会给周围环境带来很大的污染。
因此，处理氨基甲酸乙酯成为黄酒生产企业中迫切需要解决的问题之一。
首先，氨基甲酸乙酯的处理需要先对其进行分离，一般情况下有两种方式，一是在黄酒发酵过程中不将其产生，二是通过分离提取的方式，将其分离出来。
后者大多采用分离漏斗、蒸馏塔、水解反应和浓缩等多步骤组成的方式处理，在处理过程中可以减少违反环保标准的废水排放和二次污染物的产生，从而达到清洁生产的目的。
除了以上的常规处理方式外，还可以采用生物处理的方式，利用某些细菌和真菌的特殊代谢机制，将有机物分解成较为简单的化合物，达到减少有害物质的目的，同时在处理过程中还可以减少对环境的影响，实现绿色环保。
二、尿素的处理工艺尿素是黄酒生产过程中产生的另一种副产品，它含有较高的氮元素，是一种优质的肥料。
尿素处理的方式需要考虑到其除氮之外其他的化学成分和含量，以及是否能够对生产企业带来较大的经济收益等问题。
一般处理方式分为三种，一种是直接将其运输到化工企业进行进一步处理，另一种是利用超滤等技术对尿素进行分离，分离出来的氮元素可以用于洒在土地上以作为肥料使用。
此外，还可以通过细菌的作用，将尿素转化成较为简单的氨气以及甲烷，从而减少对环境的污染。
三、总结黄酒生产企业需要对氨基甲酸乙酯和尿素的处理工艺进行全面的考虑，以达到减轻对环境的影响，减少废水排放和产生的二次污染物的目的，同时充分利用氨基甲酸乙酯和尿素的特性，为企业带来更多的经济效益。
固相萃取-高效液相色谱法快速测定食品中7种合成着色剂马桂娟;汤丽华;朱捷;马雪梅【摘要】采用固相萃取-高效液相色谱法测定食品中7种合成着色剂(柠檬黄、苋菜红、日落黄、胭脂红、诱惑红、亮蓝、赤藓红).样品经无水乙醇:氨水:水(7:2:1)提取后,固相萃取柱净化,浓缩后采用Diamonsil C18色谱柱分离,外标法定量.结果表明,在1.0～50.0 mg/L范围内,各合成着色剂的浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数(r)在0.99997～0.99999,各目标化合物回收率84.3％～100.1％,相对标准偏差(RSD)0.86％～3.56％.该方法简单、快捷、满足检测要求,可用于快速测定各类食品中7种合成着色剂的含量.【期刊名称】《食品安全导刊》【年(卷),期】2017(000)036【总页数】2页(P53-54)【关键词】高效液相色谱法;合成着色剂;快速【作者】马桂娟;汤丽华;朱捷;马雪梅【作者单位】宁夏回族自治区食品检测中心;宁夏回族自治区食品检测中心;宁夏回族自治区食品检测中心;宁夏回族自治区食品检测中心【正文语种】中文食用合成着色剂以改善食品色泽，刺激人们的感官，增加食欲为目的，在日常生活中应用范围日益广泛，是现代食品工业中装点食品的重要添加剂[1]。
然而，随着科学技术的发展，人们发现人工合成色素多含有苯环、萘等化学合成物质，长期食用会对人体细胞结构产生损害[2]。
合成着色剂的使用范围和限量在世界各国都有严格的规定。
为保证食品质量安全，必须严格控制合成着色剂的添加和使用。
本文采用固相萃取与高效液相色谱仪相结合的方法，建立起一套操作简单、快速准确测定不同食品中合成着色剂的方法。
1 材料与方法1.1 材料与仪器果蔬汁饮料、火腿肠、枸杞果糕，均为市售；柠檬黄GBW(E)100001a、苋菜红GBW(E)100002、日落黄GBW(E):100003a、胭脂红GBW(E)100004a、亮蓝GBW(E)100005a、诱惑红GBW(E)1001647、赤藓红GBW(E)100163，均购自国家标准物质中心；甲醇、无水乙醇，均购自天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱纯；氨水，购自国药集团化学试剂有限公司，分析纯；乙酸铵、柠檬酸，均购自德国SIGMA公司，纯度大于98%；固相萃取柱Cleant PWAX-SPE，购自博纳艾杰尔科技公司。
黄酒中氨基甲酸乙酯形成、控制及检测方法的研究发布时间：2023-03-15T02:32:04.678Z 来源：《科技潮》2023年1期作者：邵胜男[导读] 在氨甲酰磷酸合成酶作用下，酵母发酵过程中产生的CO2、ATP和胺反应可生成氨甲酰磷酸。
浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司浙江绍兴 312000摘要：氨基甲酸乙酯（EthylCarbamate，EC）俗称尿烷，是一种无色无味结晶或是白色粉末。
该物质广泛的存在于人们的生活中，人们会通过面包、酸牛奶、苹果酒、清酒、葡萄酒等食品摄取。
黄酒中含有氨基甲酸乙酯.目前，各国对酒中的EC最高限量已做出相应的规定，各组织对饮品酒中的氨基甲酸乙酯进行广泛研究，但我国对黄酒中EC含量未制定相应的标准，因此本文对EC生产中控制措施及检测方法做简要阐述。
关键词：黄酒，氨基甲酸乙酯，机理，控制措施一、形成机理1.1氨甲酰磷酸和乙醇反应在氨甲酰磷酸合成酶作用下，酵母发酵过程中产生的CO2、ATP和胺反应可生成氨甲酰磷酸。
氨甲酰磷酸再与乙醇反应可形成EC。
反应式：H2NCO2PO3H2+C2H5OH→H2NCO2C2H5+H3PO4黄酒酿造过程中酵母或苹果酸-乳酸菌（Malolacticbacteria，MLB）发酵会产生中间代谢产物氨基甲酰磷酸，但其含量甚微，所以黄酒中EC并非主要由该反应生成。
1.2尿素和乙醇反应乙醇和尿素反应产成黄酒中90%氨基甲酸乙酯。
反应式：H2NCONH2+C2H5OH→H2NCO2C2H5+NH3黄酒中尿素的来源主要有2方面：酿造黄酒的原料、水和辅料会带入尿素；但主要的尿素还是由酵母发酵过程中代谢产生的。
黄酒酿制过程中，在酵母菌细胞内精氨酸可被由基因CAR1编码的精氨酸酶催化分解为尿素和鸟氨酸，而作为产物之一的尿素可以被分泌到酵母细胞外的酒液环境中，也可以被进一步降解为氨和CO2，但必须有基因DUR1，2编码的尿素酰氨分解酶催化该降解途径才能完成。
蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法练顺才;周韩玲;李杨华;廖勤俭【摘要】A method for detecting ethyl carbamate in distilled liquor had been developed. Firstly, alcohol in liquor samples was removed by vacu-um distillation, then acetonitrile and 0.1 % formic acid used as mobile phase, and liquor samples were separated by C18 column HPLC, electro-spray positive ion mode was selected, and [M+H]+ 90.055 was used as the quantitative ion for the detection. The experimental results showed that, ethyl carbamate was linear within the con centration range of 10~ 500 μg/L, its correlation coefficient was above 0.999, the precision was 6.4 %, and the recovery rate was between 86 % and 117 %. HPLC-MS for the detection of ethyl carbamate in distilled liquor had the advantages includ-ing simple operation, short detection time, high sensitivity, and precise detecting results etc.%建立一种适用于蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的检测方法。
固相萃取-超高效液相色谱法测定黄酒中的有机酸王琳;陈双;徐岩【摘要】确定了氨基酸/多肽和色素是黄酒有机酸色谱分析的主要干扰因素,筛选了对干扰因素有较强去除能力的固相萃取(SPE)小柱.建立了固相萃取-超高效液相色谱法(SPE-UPLC)快速测定黄酒中7种主要有机酸的方法.黄酒样品采用流动相稀释,经活化后的SCX-SPE小柱净化处理,并使用ACQUITY UPLC HSS T3柱对黄酒中的7种主要有机酸进行分离检测.流动相为20 mmol/L NaH2PO4(pH 2.7),流速为0.25 mL/min,检测波长为210 nm.结果表明,该方法可在5 min内实现7种有机酸的完全分离,各有机酸在0.100 ～ 37 456.000 mg/L范围内线性相关性良好,回归方程的线性相关系数均在0.999 3以上,7种有机酸的加标回收率为94.96％～105.08％,相对标准偏差(RSD)为0.43％～ 1.79％ (n =5).该方法具有净化步骤简单,准确性高的特点.采用该检测方法对传统型黄酒(n=12)和清爽型黄酒(n=6)有机酸含量比较发现,传统型黄酒总酸含量显著(P＜0.05)高于清爽型黄酒,且这种差异是由于酒石酸、苹果酸和乳酸含量的显著差异(P＜0.05)造成的.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2016(042)010【总页数】7页(P142-148)【关键词】超高效液相;固相萃取;有机酸;传统型黄酒;清爽型黄酒【作者】王琳;陈双;徐岩【作者单位】江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,工业生物技术教育部重点实验室,生物工程学院酿酒微生物与酶技术研究室,江苏无锡,214122;江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,工业生物技术教育部重点实验室,生物工程学院酿酒微生物与酶技术研究室,江苏无锡,214122;江南大学,食品科学与技术国家重点实验室,工业生物技术教育部重点实验室,生物工程学院酿酒微生物与酶技术研究室,江苏无锡,214122【正文语种】中文黄酒是我国民族特色酒精饮料，具有酒度低、营养丰富、风味独特的特点，深受我国人民的喜爱，是国家政策重点扶持的传统产业。
柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的18种氨基酸诸葛庆;李博斌;周牡艳;葛乐勇【摘要】采用茚三酮柱后衍生,高效液相色谱法测定了青稞黄酒中的18种氨基酸.结果表明,18种氨基酸回收率为95.1 %～102.5 %,相关系数0.9962～0.9999,检出限0.25～4.00 μmol/L.在所分析的4种青稞黄酒样品中,氨基酸含量为456.10～760.18 mg/L.青稞黄酒中的呈味氨基酸以甜味氨基酸和涩味氨基酸为主,占76 %以上.【期刊名称】《酿酒科技》【年(卷),期】2010(000)006【总页数】3页(P94-96)【关键词】分析检测;柱后衍生;高效液相色谱法;氨基酸;青稞黄酒【作者】诸葛庆;李博斌;周牡艳;葛乐勇【作者单位】国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071;国家黄酒产品质量监督检验中心,浙江,绍兴,312071【正文语种】中文【中图分类】TS261.7;TS262.4;O657.72青稞也叫元麦、淮麦、米麦、米大麦,是大麦的一种特殊类型,因其内外颖壳分离,籽粒裸露,故称裸大麦，青稞主要分布在我国西藏、青海等地高海拔高寒地区[1-2]。
青稞富含蛋白质、碳水化合物，并含有较丰富的矿物质及维生素，是一种很好的酿酒原料,青稞黄酒是以青稞为原料，采用黄酒酿造工艺酿制而成的发酵酒，其酒度低，营养价值丰富，富含多种氨基酸[3-4]。
氨基酸不仅是青稞黄酒的主要营养成分之一，也是酒的风味物质或风味物质的前驱物质，对酒的风味有着重要的贡献[5]，因此，准确测定青稞黄酒中氨基酸的含量对研究黄酒的营养价值和风味及对酒质的控制都具有极其重要的意义。
常用的氨基酸分析方法有离子交换色谱法[6]、氨基酸自动分析仪法[7]、高效液相色谱法[8]、液质联用法[9]。
考虑到成本及一机多用，本研究采用柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的氨基酸，其原理是氨基酸经钠离子交换柱分离后与茚三酮反应，在570 nm进行测定。
酿酒科技2012年第1期（总第211期）·LIQUOR －MAKING SCIENCE ＆TECHNOLOGY 2012No ．1(Tol ．211)固相萃取-高效液相色谱法测定黄酒中氨基甲酸乙酯基金项目：浙江省质量技术监督系统科技项目（20080237）；浙江省黄酒技术产业与装备重点实验室项目（2009Z10007）。
收稿日期：2011－12－07作者简介：诸葛庆(1978－)，女，工程师，硕士，主要从事食品检验研究。
通讯作者：李博斌，教授级高级工程师，国家黄酒中心技术负责人。
优先数字出版时间：2011-12-19；地址：/kcms/detail/52.1051.TS.20111219.1424.002.html 。
诸葛庆，李博斌，江涛，寿谦，葛乐勇，曾红艳(国家黄酒产品质量监督检验中心，浙江绍兴312071)摘要：建立一种反相高效液相色谱法测定黄酒中氨基甲酸乙酯的方法。
样品经固相萃取柱净化后衍生,采用反相C 18色谱柱XB -C 18(4.6mm ×250mm,5μm),以乙腈-0.02moL/L 乙酸钠水溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为1mL/min ；设定荧光检测器中激发波长为233nm,发射波长为600nm,对黄酒中的氨基甲酸乙酯进行检测。
结果表明，在50.0～250.0μg/L 添加量范围内，平均回收率为92.9%，相对标准偏差为4.5%（n=6）。
方法的检出限为10μg/L ，线性范围为100～1500μg/L （R=0.9995），测定结果与标准气相色谱-质谱法基本相同。
所建立的方法可以作为黄酒中氨基甲酸乙酯的检测方法。
关键词：分析方法；高效液相色谱法；黄酒；氨基甲酸乙酯；固相萃取中图分类号：TS262.4；O657.72；TS261.4文献标识码：A文章编号：1001－9286（2012）01－0112－04Determination of Ethyl Carbamate in Yellow Rice Wineby Solid-phase Extraction Coupled with HPLCZHUGE Qing,LI Bobin,JIANG Tao,SHOU Qian,GE Leyong and ZENG hongyan(National Center for Quality Supervision &Testing of Rice Wine ,Shaoxing,Zhejiang 312071,China)Abstract :A reverse phase HPLC method for the determination of ethyl carbamate in yellow rice wine had been developed.Wine samples were firstly pretreated by solid-phase extraction ，ethyl carbamate was separated on a XB-C 18(4.6mm ×250mm ，5μm)by using gradient elution (acetonitrile and 0.02moL/L sodium acetate as the mobile phase)at a flow rate of 1mL/min and detected by a fluorescence detector (λex=233nm,λem=600nm).At the spike levels of 50.0，100.0and 250.0μg/L,the average recovery for ethyl carbamate was 92.9%with RSD as 4.5%(n =6),the detection limit was 10μg/L,and the linear range was from 100～1500μg/L （R=0.9995.The determination results by this method were almost the same as those by GCMS.Therefore,this method could be use to determine ethyl carbamate in yellow rice wine.Key words ：analytic methods;HPLC ；yellow rice wine;ethyl carbamate ；solid -phase extraction大多数发酵饮料中存在含量为μg/kg 级的氨基甲酸乙酯(简称EC)。
早在1943年，EC 被证实是一种致癌物质。
1985年，加拿大首次规定了葡萄酒、白兰地和威士忌中EC 的限量值[1]。
自2002年以来，EC 已经成为世界卫生组织重点监控物质之一。
黄酒作为中国传统的发酵酒，由于受多方面因素的限制，目前我国仍没有制定黄酒中EC 的限量标准，有关黄酒中EC 含量检测的研究也非常少，因此有必要建立一种适合黄酒中EC 的检测方法。
测定EC 的方法主要有气相色谱法(GC)[2]、气相色谱-质谱联用法(GC -MS)[3-6]、高效液相色谱法(HPLC)[7-8]和液相色谱-串联质谱法(HPLC -MS -MS)[9]。
GC -MS 和HPLC -MS -MS 检出限低，但是使用MS 作为检测器，会提高检测成本，一般实验室条件难以达到；HPLC 因为具有柱效好、灵敏度高、重复性好、应用范围广等优点，已成为现代分析技术的重要手段之一。
钟其顶[10]等采用直接衍生进样分析对黄酒中EC 的HPLC 测定进行了研究。
本实验根据黄酒基质复杂，EC 含量低且高低不均的特点，拟结合固相萃取后衍生化反应、HPLC -FLD 测定黄酒中EC 的含量，以期使黄酒通过净化浓缩处理，减少干扰，降低对色谱系统的污染，提高检测灵敏度。
1材料与方法1.1材料与试剂黄酒：市购。
乙腈(色谱纯)，Merck 公司；占顿醇(99%)，Sigma 公司；EC 标准品(99%),Sigma 公司；乙酸钠、盐酸、二氯甲112DOI:10.13746/j.njkj.2012.01.014烷、丙酮、乙醚、正己烷、乙酸乙酯和甲苯均为分析纯。
1.2主要仪器设备美国Agilent公司1100系列高效液相色谱仪(HPLC),配有在线脱气机、四元梯度泵、自动进样器、荧光检测器及Agilent1100化学工作站；Milli-Q纯水器，美国密理博公司；旋转蒸发仪，瑞士步琦有限公司。
固相萃取柱（50mL，CHEMELUT，使用前不需活化）,美国Varian公司。
色谱柱：ZORBAX Extend-C18(4.6mm×250mm，5μm)；Gemini C18(4.6mm×250mm，5μm)；XB-C18 (4.6mm×250mm，5μm)；LP-C18(4.6mm×250mm，5μm)。
1.3色谱条件色谱分离柱：XB-C18(4.6mm×250mm，5μm)；保护柱：Analytical KJO-4282（4.0mm×2.0mm）；流动相：A(乙腈)；B（0.02moL/L乙酸钠水溶液,调pH7.2），梯度洗脱条件见表1；检测波长：激发波长233nm，发射波长600nm；流速：1mL/min；进样量：20μL；柱温：30℃。
1.4衍生试剂及标准溶液的配制衍生试剂：称取0.099g占顿醇于25mL的容量瓶中，用乙腈定容，配制成0.02moL/L的占顿醇溶液。
EC标准储备液：准确称取0.1mg EC标准品于100mL容量瓶中，用超纯水溶解并定容。
EC工作液：取1mL EC标准储备液于100mL的容量瓶中，用水定容，其浓度为10mg/L。
再用乙腈与0.02moL/L乙酸钠混合溶液(体积比为75∶25)分别稀释至1500μg/L、1000μg/L、750μg/L、500μg/L、200μg/L 和100μg/L。
1.5试样处理1.5.1试样净化浓缩准确吸取20mL的黄酒样品，上样至CHEMELUT 小柱上，静止吸附30min，以2×20mL正己烷淋洗，弃去淋洗液；再用5×30mL丙酮∶二氯甲烷（1∶9）洗脱目标化合物，收集洗脱液；浓缩后以乙腈与0.02moL/L乙酸钠混合溶液（体积比为75∶25）定容至5m L，用0.45μm的有机滤膜过滤，备用。
1.5.2样品衍生取100μL的占顿醇衍生试剂于棕色进样瓶中，加入500μL浓缩滤液，接着加入50μL1.5moL/L的盐酸溶液，混匀，暗处反应5min，进样分析。
2结果与分析2.1样品前处理条件的优化使用固相萃取柱提取黄酒中的EC时，吸附时间、淋洗溶剂的种类及洗脱溶剂的种类和比例是影响提取率的主要因素。
本试验通过比较EC添加浓度为100μg/L时不同条件下的回收率，以此确定最佳前处理条件。
2.1.1吸附时间的优化黄酒样品被上样到固相萃取小柱后，比较静止吸附时间不同时EC的回收率，研究吸附时间对目标分析物EC提取率的影响，以此确定最佳吸附时间，结果见表2。
通过表2数据分析可以看出，在吸附时间为30min 时，提取效果最好。
2.1.2淋洗溶剂的选择在黄酒样品被吸附后，使用弱极性溶剂进行淋洗，使黄酒中的焦糖色、糖分等杂质能被有效洗去，而目标分析物EC仍然保留在固相萃取柱上。
试验中分别选取正己烷、乙酸乙酯、甲苯作为淋洗溶剂，通过对比找出最合适的淋洗溶剂，结果见表3。
从表3数据分析得知，使用正己烷作为淋洗溶剂时，目标化合物EC被保留在固相萃取柱上，回收率达到最优，因此本研究选用正己烷作为淋洗溶剂。
2.1.3洗脱溶剂的优化2.1.3.1洗脱溶剂种类的选择在确定淋洗溶剂后，固定前面优化的条件，根据EC 的特性，选取二氯甲烷、乙醚、乙醚∶二氯甲烷（1∶9）、丙酮∶二氯甲烷（1∶9）4种溶剂作为洗脱溶剂，研究洗脱溶剂种类对洗脱效果的影响，结果见表4。
从表4结果可知，使用丙酮∶二氯甲烷（1∶9）作为洗脱溶剂，能得到很好的洗脱效果，此时EC的回收率高达99.9%。
2.1.3.2洗脱溶剂比例的优化!!" ## $诸葛庆，李博斌，江涛，寿谦，葛乐勇，曾红艳·固相萃取-高效液相色谱法测定黄酒中氨基甲酸乙酯113酿酒科技2012年第1期（总第211期）·LIQUOR－MAKING SCIENCE＆TECHNOLOGY2012No．1(Tol．211)! " #" $%&’ $ $$ $ !确定最佳洗脱溶剂后，对于洗脱溶剂的组成比例进行优化。
