康为世纪 CW0503高纯度质粒大提试剂盒
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高纯度质粒小提试剂盒 Pure Mini Plasmid Kit(目录号:HS0103)产品包装试剂盒成分 50 preps Buffer P1 15 ml Buffer P2 15 ml Buffer P3 20 ml Buffer PD 30 ml RNase A(10 mg/ml)150 ul Buffer PW 60 ml Buffer EB 10 ml Spin Columns PA 50个 Collection Tubes (2 ml)50个(注意:使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀,2 ~ 8℃保存)保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。
若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。
加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存,可稳定保存6个月。
产品简介本试剂盒用于高纯度质粒DNA 的小量制备与纯化。
菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜(Spin Columns PA )吸附。
通过去蛋白液(Buffer PD )和漂洗液(Buffer PW )的清洗可去除蛋白及其他杂质,在低盐、高pH 条件下洗脱,最后得到高纯度的质粒DNA 。
北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug的高纯度质粒DNA,可在30 min之内完成提取任务。
所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR、测序、低敏感细胞株的转染等各种常规分子生物学操作。
产品特点1. 快速:步骤少,操作简便,节约时间。
2. 简便:离心吸附柱不需要预平衡,漂洗液Buffer PW 和去蛋白液Buffer PD不需要另加乙醇,即开即用。
PurePlasmid Maxi Kit高纯度质粒大提试剂盒Version06302010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0503 CW0503ANumber of preps. 10 2Buffer P1 100 ml 25 mlBuffer P2 100 ml 25 mlBuffer P3 100 ml 25 mlBuffer EB 30 ml 10 mlRNase A(10 mg/ml) 1 ml 250 μlFliter 10 2Collection Tube(50ml) 10 2Protocol 1 1II 保存条件该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年,更长的保存时间可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A可室温(15-25℃)保存,长时间保存置于2-8℃,加入RNase A后的Buffer P1置于2-8℃保存,可以稳定保存半年。
III 产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过独特的缓冲系统和异丙醇沉淀方法,可快速获得大量高纯度的质粒DNA。
由本试剂盒所得质粒可直接用于转染细胞,DNA测序,PCR,体外转录,转化细菌,内切酶消化等。
IV 注意事项1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入),混匀,置于2–8℃保存。
2.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
3.注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer P3,使用后应立即盖紧盖子。
4.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
V 需要客户自备的试剂1.异丙醇2.5M NaCl溶液Ⅵ 操作步骤1.取100ml (根据培养菌体的浓度选择合适的量,低拷贝推荐用200ml)过夜培养的菌液,加入离心管中,10,000 rpm(~11,500×g )离心3 分钟收集细菌,尽量吸弃上清。
PurePlasmid Midi Kit高纯度质粒中提试剂盒Version 04282010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0502CW0502ANumber of preps. 50 6Buffer P1 30 ml 5 mlBuffer P2 30 ml 5 mlBuffer N3 40 ml 5 mlBuffer PB 30 ml 5 mlBuffer PW(concentrate) 15 ml 2 mlBuffer EB 15 ml 1 mlRNase A(10mg/ml ) 600 μl 100μlSpin Column CL 50 6Collection Tube(2ml) 50 6Protocol 1 1II 保存条件该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年,更长的保存时间可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNaseA可室温(15-25℃)保存,更长时间保存置于2-8℃,加入RNaseA后的Buffer P1置于2-8℃保存,可以稳定保存半年。
III 产品简介本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过新型离心吸附柱在高盐浓度下高效、专一结合溶液中的DNA,提取率达85%–90%。
本试剂盒提取的质粒纯度高,质量稳定,最大限度的去除杂质蛋白和细菌中其它有机化合物的污染,一次可处理5-15ml菌液。
所得质粒可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。
IV 注意事项1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入),混匀,置于2–8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
3.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer N3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://PhasePrep EndoFree Maxi Kit大型/大量质粒提取试剂盒目录号:PL1401适用范围:适用于大量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存20次(PL1401)RNaseA(10mg/ml)-20℃ 1.3ml溶液P1 4℃130ml溶液P2 室温100 ml溶液PⅢ室温110 ml杂质清除剂A 室温 3 ml杂质清除剂B 室温30 ml内毒素清除剂-20℃10 ml本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。
储存事项:1.第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100μg /ml)置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会混杂有微量RNA 残留,在溶液P1中补加RNase A即可。
2.内毒素清除剂在4℃可保存一个月,如果要长期保存,建议保存在-20℃!3.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。
纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。
纯化后期过程均在1.5ml 小离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。
本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://Plasmid Maxi Kit质粒大量快速提取试剂盒目录号:PL11试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存10次(PL1101)RNaseA(10mg/ml)-20℃750µl溶液P1 4℃77 ml溶液P2 室温77 ml溶液N3 室温77 ml漂洗液WB 室温25 ml X 2第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温20 ml吸附柱DC 室温10个收集管(50ml)室温10个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100μg/ml)置于4℃保存。
如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有微量RNA残留,在溶液P1中补加RNase A即可。
2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。
克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
快速、方便,从150-300ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-1.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
产品简介本试剂盒采用独特的硅胶模吸附技术,高效专一地结合质粒DNA。
同时采用特殊的溶液P4和过滤器CS1,可有效的出去内毒素、蛋白质杂志;整个提取过程仅需1h,方便快捷。
使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和细胞转染多种细胞等试验。
推荐每次菌液使用量:高拷贝质粒推荐使用量为100ml,得率一般在500-1500μg左右;低拷贝质粒推荐使用量为200ml,得率一般在200-600μg左右。
注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1.溶液P1在使用前先加入RNase A (将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液PW中加入无水乙醇。
3.使用前先检查平衡液BL,溶液P2和P4是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
4.注意不要直接接触溶液P2和P4,使用后应立即盖紧盖子。
5.使用过滤器时请将推柄小心缓慢地从过滤管中抽出,避免滤膜因压力而松动。
6.提取的质粒量与细菌培养浓度,质粒拷贝数等因素有关。
如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P4的用量;洗脱缓冲液推荐在65-70℃水浴中预热,可以适当延长吸附和洗脱时间,以提高提取效率。
7.实验前使用平衡液BL处理吸附柱,可以最大限度激活硅基质膜,提高得率。
8.用平衡液处理过的柱子最好立即使用,放置时间过长会影响使用效果。
质粒DNA 浓度及纯度检测得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。
纯化的质粒DNA OD260/OD280通常在1.8-2.0左右,可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的实验中。
操作步骤:1.柱平衡步骤:向吸附柱CP6中(吸附柱放入50ml收集管中)加入2.5ml的平衡液BL,8000rpm(~8228×g)离心2min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
SurePlant DNA Kit复杂植物基因组提取试剂盒Version 04272010‐2.1I 组分说明Catalog no. CW0555 CW0555ANumber of preps 50 6Buffer GF1 40 ml 5 mlBuffer GF2 18 ml 3 mlBuffer GF3(concentrate)30 ml 5 mlBuffer GW(concentrate)17 ml 3.4 mlBuffer GE 24 ml 2 mlRNase A (100mg/ml) 220 μl 30 μlSpin Column DM 50 6Shredder Spin Column 50 6Collection Tube(2ml) 100 12Protocol 1 1II 保存条件自收到之日起,该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年。
单独包装的RNase A可室温(15-25℃)保存,更长时间保存请置于2-8℃。
III 产品简介本试剂盒适用于从多种植物的组织中提取基因组DNA,特别适用于多酚、多糖含量高的植物组织。
该试剂盒采用可以特异性结合DNA的吸附柱和独特的缓冲液系统,单独配置的Shredder Spin Column可最大限度去除植物组织中的多糖、多酚等杂质。
提取的基因组DNA片段大,可吸附最大为40kb的DNA、纯度高,质量稳定可靠,可用于各种分子生物学常规试验,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、分子标记等实验。
IV 注意事项1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA 片段较小且提取量也下降。
2.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下进行离心。
3.若Buffer GF1,Buffer GF2中有沉淀,可在65℃水浴中溶解,摇匀后使用。
4.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明预先在Buffer GF3和Buffer GW中加入无水乙醇。
技术支持:010‐58851919‐616 订购:010‐58851919‐618 Email:ask@5.所使用的植物样本不超过100mg湿重,20mg干重。
Version 110910920102010PurePlasmid 96Kit 高纯96质粒提取质粒提取试剂盒试剂盒Cat Cat..N o.CW CW05060506保存:保存:Buffer Buffer P1P1(加入(加入RNaseA RNaseA)):2-8℃其他组分:室温组分说明Cat.No.CW0506CW0506A Number of preps4×961×96Buffer P1120ml 30ml Buffer P2120ml 30ml Buffer N3160ml 40ml Buffer PB250ml 60ml Buffer PW(concentrate)3×40ml 30ml Buffer EB 60ml 10ml RNaseA(10mg/ml) 1.2ml 300μl Filter 96Plate 4×961×96Bind 96Plate 4×961×96Collection Plate16×964×96Tape Pad 205Protocol11产品简介本试剂盒应用膜吸附技术纯化高质量的质粒DNA。
可以最大限度去除蛋白及其它杂质,从而保证提取的质粒纯度更高。
96孔板可从小体积细菌培养液中提取质粒、粘粒、BACs 等。
优化流程,可通过手动或自动化操作。
提取质粒可应用于测序、限制性酶切、PCR 和转化等其它下游实验。
注意事项1.Buffer P1使用前请先加入RNaseA(将试剂盒提供的RNaseA 全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW(concentrate)中加入无水乙醇。
3.使用前先检查Buffer P2和Buffer N3是否出现浑浊,如有浑浊现象,可置于37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
4.提取质粒得率与细菌的培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
北京索莱宝科技有限公司质粒大提试剂盒说明书货号:D1110规格:10次保存:常温保存,复检期一年。
试剂盒内容:RNaseA(10mg/ml)1ml溶液Ⅰ60ml溶液Ⅱ60ml溶液Ⅲ80ml漂洗液2×15ml洗脱液30ml吸附柱10个收集管(50ml)20个说明书1份产品说明:本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。
离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物,一般从50-100ml大肠杆菌LB培养液中,可快速提取200-300μg高纯度高拷贝的质粒DNA,提取率达85-90%。
使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。
溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的RNaseA全部加入),混匀,置于2-8℃保存。
如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤:第1页共3页1.收集50-100ml过夜培养的菌液11000rpm离心10分钟,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。
2.向留有菌体沉淀的离心管中加入5ml溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3.向离心管中加入5ml溶液Ⅱ,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。
注意:①翻转一定要温和,以免污染细菌基因组DNA。
②作用时间不要超过5分钟,以免质粒受到破坏。
4.向离心管中加入7ml溶液Ⅲ,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀(如菌液过多,可在此步放置5分钟,以尽可能的降解RNA)。
11000rpm离心10分钟,用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中,注意尽量不要吸出沉淀。
PurePlasmid Maxi Kit
高纯度质粒大提试剂盒
Version06302010‐2.1
I 组分说明
Catalog no. CW0503 CW0503A
Number of preps. 10 2
Buffer P1 100 ml 25 ml
Buffer P2 100 ml 25 ml
Buffer P3 100 ml 25 ml
Buffer EB 30 ml 10 ml
RNase A(10 mg/ml) 1 ml 250 μl
Fliter 10 2
Collection Tube(50ml) 10 2
Protocol 1 1
II 保存条件
该试剂盒室温干燥条件下(15-25℃)可保存一年,更长的保存时间可置于2-8℃。
若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
单独包装的RNase A可室温(15-25℃)保存,长时间保存置于2-8℃,加入RNase A后的Buffer P1置于2-8℃保存,可以稳定保存半年。
III 产品简介
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,通过独特的缓冲系统和异丙醇沉淀方法,可快速获得大量高纯度的质粒DNA。
由本试剂盒所得质粒可直接用于转染细胞,DNA测序,PCR,体外转录,转化细菌,内切酶消化等。
IV 注意事项
1.Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入),混匀,置于2–8℃保存。
2.使用前请先检查Buffer P2 和Buffer P3 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。
3.注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer P3,使用后应立即盖紧盖子。
4.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
V 需要客户自备的试剂
1.异丙醇
2.5M NaCl溶液
Ⅵ 操作步骤
1.取100ml (根据培养菌体的浓度选择合适的量,低拷贝推荐用200ml)过夜培养的菌液,加入离心管中,10,000 rpm
(~11,500×g )离心3 分钟收集细菌,尽量吸弃上清。
注意:质粒拷贝数较低或>10kb时,可以通过二次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中,同时后续所加试剂Buffer P1、P2及P3的量需加倍。
2.向留有菌体沉淀的离心管中加入10 ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器或涡旋振荡器充分混
匀,悬浮细菌沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,使提取量和纯度偏低
3.向离心管中加入10 ml BufferP2,温和地上下颠倒混匀6-8 次,使菌体充分裂解,室温放置5 分钟。
注意:不要剧烈震荡,以免造成所提质粒中基因组DNA污染。
如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
4.向离心管中加入10 ml Buffer P3,立即温和地上下颠倒混匀6–8 次,此时出现白色絮状沉淀,然后室温放置10分钟
左右,10,000 rpm (~11,500×g )离心5-10 分钟。
注意:Buffer P3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5.将上清全部倒入Fliter 中,8,000 rpm (~6,200×g )离心3-5分钟,滤液收集在Collection Tube中。
6.向滤液中加入0.35 倍滤液体积的异丙醇和0.5倍异丙醇体积的5M NaCl,上下颠倒充分混匀。
注意:加入异丙醇过多容易导致RNA 污染
7.4℃,10,000 rpm (~11,500×g )离心30 分钟,小心弃上清,注意不要丢掉沉淀。
8.向管中加入6ml 70%乙醇充分洗涤沉淀,4℃ 10,000 rpm (~11,500×g )离心10分钟,小心弃上清,注意不要丢掉沉
淀。
9.重复步骤8。
10.室温干燥10-20 分钟,加入1-1.5ml Buffer EB, 充分溶解沉淀。
DNA 产物应-20℃保存。