微生物实验专题

微生物学实验实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。

二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。

培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。

根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。

由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。

干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。

三、试剂与器材1.器材试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、培养基、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH度纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。

2.试剂牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂四、实验内容1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌五、关键步骤及注意事项1.要严格按配方配制。

2.调pH不要过头。

3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70ºC以下放物、取物。

4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。

5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。

六、思考题1.培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是无菌的?2.在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么?3.培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么?4.培养基的配制原则是什么?实验二土壤中微生物分离纯化培养一、实验目的掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术；了解不同的微生物菌落在斜面上、半固体培养基和液体培养基中的生长特征；进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术；掌握微生物培养方法。

实验1 培养基的配制和灭菌一、目的要求1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。

3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。

4.每2人一组，每人一份实验报告。

二、实验材料1.药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、1N HCl、1N NaOH2.设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。

3.材料：天平、药匙、电炉、pH 试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL 注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、移液器（1mL 0.2mL）、牛皮纸、线绳、标签等。

三、实验内容(一) 培养基的配制1．培养基的配制方法和步骤1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。

2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。

3)调pH 值：用1N NaOH 或1N HCl 调pH，用pH 试纸对照。

4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。

5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。

6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。

7)灭菌：在高压锅中， 115 °C 高温灭菌30min。

2．培养基的配制A.富集培养基（液体）：海水2216E 液体培养基（g/L）：蛋白胨5.0，酵母粉1.0，海水1L，pH 8.0。

取50mL 分装250mL 三角瓶后，8 层纱布封口，外包1层牛皮纸，121℃，高温灭菌20min。

B. 2216E 斜面（固体）：海水2216E 液体培养基中加入2%的琼脂粉，加热溶化琼脂，每支试管内。

加入3mL，121℃高温灭菌20min，灭菌后摆斜面。

C. 无菌生理盐水和保种液：生理盐水： NaCl 0.85% 蒸馏水配制。

每支试管加入5mL，盖上试管帽、包扎、121°C 高温灭菌20min。

保种液：生理盐水，加25%甘油D. 碳源优化培养基：以海水2216E 液体培养基（蛋白胨0.5%，酵母粉0.1%，磷酸铁0.01%，人工海水，pH7.6）为基础，碳源分别是：葡萄糖、蔗糖、甘油、柠檬酸钠、乳糖，每种碳源的添加量为1%。

一、实验方案
1. 实验现象与结果
2. 本实验的关键环节及改进措施
⑴、接种环的灭菌操作要到位:接种环使用前, 直接在酒精灯上烧灼灭菌, 把环和金属丝烧红即可。

接种环使用后, 先在火焰周围把环上标本烤干, 再烧灼灭菌, 以免标本汽化, 爆烈四溅, 污染环境。

金属杆快速通过火焰2－3次, 杀灭表面微生物。

⑵、划线技术要很娴熟,具体要求参照上图。

⑶、整个过程要严格防止实验中被污染,每个阶梯稀释换新的移液管,要等平板冷却后再倒置。

思考题
1.食品中微生物为何繁殖迅速、种类繁多？
2.食品被微生物污染后有哪些危害？
3、检样稀释时, 每个稀释度都要更换刻度吸管, 为什么？
1.答:因为食品中含有大量的淀粉、蛋白质、糖类、脂肪等有机物, 且无机盐含量相对较低, 食品中含有一定的水分, 并且食品包装后容易使内部升温, 这些都是很适合微生物(细菌、原虫、病毒)生长繁殖的情况, 因此食品中的微生物能够繁殖迅速且种类繁多。

所以很多食物要严格灭菌或者添加防腐剂、干燥剂、脱氧剂等, 或者真空包装。

2.答:⑴、降低食品的营养；
⑵、引起食品腐败变质；
⑶、引起呕吐、中毒或者某些疾病(如痢疾、腹泻、呼吸道感染等)和潜在性的慢性危
害等。

3.答: 每个稀释度都要更换刻度吸管可以在一定程度上保证不会沾有上一个稀释度得溶液, 且减少污染, 使浓度稀释得更加准确, 增加实验结果的准确性。

指导教师评语及评分:
签名: 年月日。

微生物实验设计-产蛋白酶菌株的筛选产蛋白酶菌株的筛选级分离一、实验原理自能够产生胞外蛋白酶的菌株在牛奶平板上生长后，其菌落周围可形成明显的蛋白水解圈，水解圈与菌落直径的比值，常被作为判断该菌株蛋白酶产生能力的初筛依据。

将腐烂的大豆浸泡液中的细菌接种在含有酪素的培养基上进行培养。

由于产蛋白酶菌株能在干酪素的培养基上形成无色透明圈，因此能将产蛋白菌株分离出来，分离出来的菌株经再次培养，就可获得纯种产蛋白酶的菌株。

二、实验器材1.菌种：从大豆浸泡液中获得2.培养基:(1)PDA斜面培养基：马铃薯200g，蔗糖20g,琼脂20g,水1000ml.马铃薯去皮，切成块，煮沸半小时后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补水至1000ml，121℃灭菌30min备用。

（2）干酪素琼脂培养基：干酪素4.0g，用20ml 0.1mol/L NaOH溶液溶解后再加20g琼脂，加蒸馏水煮沸加水至1000ml 121℃灭菌30min备用。

3.试剂：无菌水。

4.仪器：天平，电磁炉，烧杯，无菌试管，无菌培养皿，高压灭菌锅，锥形瓶，接种环，涂布棒，酒精灯，恒温培养箱。

三、实验步骤1.将腐烂的大豆放入无菌水中浸泡，制成细菌悬浮液。

2.用涂布棒蘸取菌液接种于PAD培养基中，26℃培养48h。

3.倒置于酪素琼脂培养基平板上，37℃培养24h。

4.挑取培养好的菌落接种于平板上，28℃培养48h。

5.观察各菌落周围形成的透明圈的情况。

6.选取透明圈较大的三个菌落分别接种在干酪素琼脂培养基上，28℃培养48h。

7.观察受否为单菌落，若为单菌落且有透明圈，则为纯种产蛋白酶菌株。

若有杂菌，则需要重复步骤6，直到培养出纯菌为止。

参考文献[1]代玉梅.蛋白酶高产菌株的筛选鉴定及酶学性质研究[D].青岛:青岛大学,2008.[2]黄志强,林白雪,谢联辉.产碱性蛋白酶海洋细菌的筛选与鉴定[J].福建农林大学学报:自然科学版,2006,35(4):416-420.。

微生物培养实验微生物是一类微小的生物体，存在于自然界的各个角落，包括土壤、水体、空气中等。

它们是地球上最早出现的生命形式之一，对维持生态平衡起到至关重要的作用。

为了研究微生物的特性和行为，科学家们常常进行微生物培养实验。

一、培养基的配制在微生物培养实验中，培养基是至关重要的。

培养基是提供微生物生长所需的营养物质的物质，可以分为固体培养基和液体培养基。

常用的培养基成分包括碳源、氮源、矿物质、维生素等。

不同的微生物种类对培养基的要求不同，因此科学家们需要精心设计和配制培养基，以符合特定微生物的生长需求。

二、微生物的分离与筛查在微生物培养实验中，科学家们常常需要从自然环境中分离并筛选出特定的微生物。

首先，他们会采集来自不同环境的样本，如土壤、水体或人体。

然后，通过将样本分离于不同培养基上，将微生物分离出来。

这些微生物会在培养基上形成孤立的菌落，科学家们可以通过观察不同菌落的形状、颜色和质地等特征，初步判断菌落中所包含的微生物种类。

接下来，科学家们会进一步进行细菌的筛查，以确定具体的微生物种类，并进行单菌培养。

三、微生物的单菌培养单菌培养是微生物培养实验的关键步骤之一。

在分离出的微生物菌落中，可能有多种不同的微生物共存。

为了获取纯净的微生物菌株，科学家们会将菌落进行分离培养。

具体方法是通过取极小的菌落，用铲子或接种针将其转移到新的培养基上，进行单独培养。

这样，菌落中的微生物会逐渐蔓延并形成纯净的单菌培养基。

这些单菌培养基可以用于后续的微生物特性研究。

四、微生物特性研究在获得纯净的单菌培养基之后，科学家们可以进行微生物的特性研究。

他们通常会观察微生物的生长速度、形态特征和代谢活性等指标。

同时，科学家们还会对微生物的抗性和致病性进行研究，以了解微生物对外界环境和生物体的影响。

这些研究有助于深入理解微生物的生物学过程，并为治疗疾病和环境保护提供重要参考。

五、应用领域微生物培养实验在各个领域中都有广泛的应用。

在医药领域中，科学家们通过培养和研究微生物，开发新的抗生素和药物来治疗疾病；在食品领域中，微生物培养实验可以应用于食品质量检测和菌种培养；在环境保护领域中，科学家们可以通过微生物培养实验来研究微生物对环境中污染物质贡献的分解能力和处理效果。

实验六微生物细胞大小的测定一、目的要求1.学会测微尺的使用和计算方法。

2.掌握酵母菌细胞大小测定的方法。

二、基本原理微生物细胞大小, 是微生物的形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。

由于菌体很小, 只能在显微镜下测量。

用来测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片。

一般将1mm等分为100格（或2mm等分为200格）,每格长度等于0．01mm（即106μm）。

是专用于校正目镜测微尺每格长度的。

目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片, 其中央刻有精确的刻度, 有等分50小格或100小格两种, 每5小格间有一长线相隔。

由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同, 目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同, 因此,目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小, 在使用前必须用镜台测微尺进行校正, 以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值, 然后才可用来测量微生物的大小。

三、器材枯草芽孢杆菌染色玻片标本, 目镜测微尺, 镜台测微尺, 显微镜, 擦镜纸, 香柏油等。

四、操作步骤1. 目镜测微尺的标定(1)放置目镜测微尺取出接目镜, 旋开接目镜透镜, 将目镜测微尺的刻度朝下放在接目镜筒内的隔板上（图Ⅳ-4, B）, 然后旋上接目透镜, 最后将此接目镜插入镜筒内（图Ⅳ-4, C）。

(2)放置镜台测微尺将镜台测微尺置于显微镜的载物台上, 使刻度面朝上。

(3)校正目镜测微尺先用低倍镜观察, 对准焦距, 当看清镜台测微尺后, 转动接目镜, 使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行, 移动推动器, 使目镜测微尺和镜台测微尺的某一区间的两对刻度线完全重合, 然后计数出两对重合线之间各自所占的格数（图Ⅳ-6）。

根据计数得到的目镜测微尺和镜台测微尺重合线之间各自所占的格数, 通过如下公式换算出目镜测微尺每小格所代表的实际长度。

目镜测微尺每小格长度（μm）=同法校正在高倍镜和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。

一、实验目的1. 学习微生物分离纯化的基本方法。

2. 掌握微生物形态观察和菌落特征鉴定技术。

3. 培养微生物实验操作技能，提高对微生物学基本知识的理解。

二、实验原理微生物分离与鉴定是微生物学实验中的基本操作。

通过分离纯化，可以获得单一菌株，便于进行后续研究。

微生物鉴定则是根据微生物的形态特征、生理生化特性等，确定其种类。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂、无菌水、无菌试管、接种环、酒精灯、显微镜等。

2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台等。

四、实验步骤1. 样品采集与处理（1）采集土壤样品，放入无菌试管中。

（2）用无菌水将土壤样品稀释10倍，制成土壤悬液。

2. 分离纯化（1）将土壤悬液取适量，涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上。

（2）将平板倒置放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。

（3）观察菌落生长情况，挑取单个菌落，进行纯化培养。

3. 形态观察与菌落特征鉴定（1）将纯化后的菌株涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，37℃培养24小时。

（2）观察菌落形态、颜色、大小、边缘等特征。

（3）将菌落置于显微镜下观察菌体形态。

4. 生理生化特性鉴定（1）根据菌落特征，选取疑似菌种进行生理生化试验。

（2）进行糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等。

（3）根据试验结果，确定菌种。

五、实验结果与分析1. 分离纯化经过多次挑取，成功分离出多个单菌落。

2. 形态观察与菌落特征鉴定观察发现，分离出的菌株菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，颜色为白色。

3. 生理生化特性鉴定经过糖发酵试验、氧化酶试验、甲基红试验等，确定分离出的菌株为乳酸菌。

六、实验总结本次实验成功分离纯化了土壤样品中的乳酸菌，并通过形态观察、菌落特征鉴定和生理生化特性鉴定，确定了其种类。

在实验过程中，掌握了微生物分离纯化的基本方法，提高了微生物实验操作技能，加深了对微生物学基本知识的理解。

七、注意事项1. 实验操作过程中，严格遵守无菌操作规程，避免污染。

微生物常用实验第一篇：细菌涂片染色实验细菌涂片染色实验是微生物学中最基本的实验之一。

通过染色方法，使细菌变得可见，便于观察形态、结构、数量等特征，有利于研究其生长、代谢、致病性等方面。

下面，我们来介绍细菌涂片染色实验的具体步骤：一、制备细菌涂片1.取出培养基上生长良好的细菌菌落，用不锈钢嵌片环沿中心点轻压一下。

2.将嵌片环中的菌落涂匀于无菌载玻片上，制备成直径约1厘米的薄片。

3.待载玻片上的细菌涂片晾干，并用火焰消毒。

二、涂片染色1.用火焰将铺有细菌涂片的玻片烤干。

2.将烤干的玻片浸入甲醇中，固定一分钟，再用水漱洗。

3.将玻片浸入碘酒中，固定一分钟，再用水漱洗。

4.将玻片浸入乙醇中，使背景颜色褪去，再用水漱洗。

5.将玻片浸入洋红染色液中，染色时间不超过1分钟。

6.用水冲洗干净，晾干后可以在显微镜下观察。

通过细菌涂片染色实验，我们可以直观地观察到细菌的形态、大小、聚集情况、颜色等，有助于鉴定细菌种类，并进一步深入研究其生物学特性。

第二篇：厌氧培养实验厌氧菌是一类生长需要在完全无氧条件下进行的微生物。

在许多疾病的发病机制中，厌氧菌都发挥着重要作用，因此，研究厌氧菌对于认识疾病的发病机制具有极其重要的意义。

下面，我们来介绍厌氧培养实验的具体步骤：一、制备厌氧培养基制备厌氧培养基是进行厌氧菌培养的关键。

具体操作步骤如下：1.准备培养基，并在其中加入培养菌株所需的配方和其他适宜的添加剂。

2.将培养基分装到无菌针筒或暗口瓶中。

3.在体积的一半至三分之二处加入去氧剂（一般为Thioglycolate或Dithiothreitol）。

二、厌氧细菌接种与培养1.准备厌氧细菌培养物的接种种子。

一般情况下，把生长适应在厌氧条件下的细菌进行分生处理来获得设计数量的细胞，并将其重新悬浮在与培养基相同的缓冲液中。

2.在无氧条件下接种厌氧菌，避免暴露于空气中。

可以通过使用瓶盖和橡胶塞的局部替代或全封闭气密容器的方法来实现无氧条件。

微生物的观察实验报告一、实验目的：通过实验观察不同环境中的微生物种类和数量变化，加深对微生物的认识。

二、实验材料：1. 酸奶样品；2. 纱布；3. 洗好的试管、镊子、移液管和一些培养基；4. 显微镜。

三、实验步骤：1. 酸奶样品制备取适量酸奶放入试管中，加入上清水，摇匀后静置，离心后倒掉上清水，沉淀物为酸奶样品。

2. 观察酸奶样品取一滴酸奶样品放在玻璃片上，加入一滴蒸馏水，用镊子将纱布盖在样品上，静置10分钟后在显微镜下观察。

3. 培养微生物将一部分酸奶样品加入培养基中，摇匀后装入试管中，进行悬浮液培养。

同时，从外部环境中取得样品，放入不同培养基中，进行接种培养。

4. 观察微生物在培养时间到达后，取出不同培养基中的微生物，放在玻璃片上，在显微镜下观察不同微生物种类和数量变化。

四、实验结果：经过观察，我们在酸奶样品中观察到了多种微生物，包括乳酸菌、酵母菌、链球菌、葡萄球菌等。

在环境样品中，我们还观察到了许多其他菌种，如大肠杆菌、肺炎球菌等。

五、实验结论：通过观察酸奶样品和外部环境样品中的微生物种类和数量变化，我们可以清晰地发现，微生物是一类非常广泛的生物，它们会根据环境的不同而发生着种类和数量的变化。

我们的生活环境中也存在许多微生物，这些微生物不仅仅是我们身体内的必需生物，还可以用于工业、农业等多个领域中。

六、实验思考在实验中，我们对不同环境中的微生物进行了观察，提高了我们对微生物的认识。

我们也发现，不同的环境对微生物的生长繁殖也有一定的影响，因此有必要采取相应的措施进行管理。

在我们的日常生活中，我们应采取科学的生活方式，保持环境的清洁卫生，从而减少微生物的滋生。

微生物学实验实验一实验室环境和人体表面微生物的检查实验二油镜的使用和细菌的简单染色实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色实验四微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定实验五培养基的配制与消毒灭菌实验六土壤微生物的分离纯化与鉴定实验七食品微生物检验 (一)细菌总数测定实验八食品微生物检验（二）大肠菌群数测定实验九大肠杆菌生长曲线的测定实验十IMViC与硫化氢试验实验一、实验室环境和人体表微生物的检查1.一、目的：1.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型；2.观察不同类型微生物的菌落形态特征；3.体会无菌操作的重要性。

2.二、原理：1.微生物无孔不入，无处不在。

2.微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。

（37 ℃倒置培养24 h）3.描述：菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等，以便检查环境中细菌的类?秃褪 俊?4.细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在，本实验重点观察细菌。

3.三、器材：1.培养基：营养琼脂平板（牛肉膏蛋白胨培养基）2.器具：无菌水、灭菌棉签、接种环（针）、酒精灯等。

4.四、步骤：1.标记。

组号/姓名、日期、样品来源。

2.接种。

3.倒置培养，37℃ 24 h4.观察结果。

5.五、结果6.样品来源菌落数菌落类型特征描写本实验室（流动空气30 min）1 大小形态干湿扁/隆透明度颜色边缘23接种室（不流动空气30min）洗手前洗手后头发屑指甲垢实验台门把1.六、思考题：1.人多的实验室与少人走动的实验室比较，平板上的菌落数和菌落类型有区别吗？试解释。

2.通过本实验，在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面，你有何体会？3.4.实验二油镜的使用和细菌的简单染色一、实验目的1、学习和掌握油镜的原理和使用技术。

2、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。

二、实验原理1．油镜使用原理：光镜的几种物镜中以油镜的放大倍数最大，尤其适用于微生物学研究。

微生物学实验报告实验名称：微生物生长曲线测定实验目的：通过测定微生物的生长曲线，了解微生物的生长规律和生长速率。

实验步骤：1. 准备培养基：根据实验需要选择合适的培养基，如大肠杆菌的培养基为LB培养基。

按照要求加入适量的培养基粉末到烧杯中，加入适量的蒸馏水溶解均匀。

2. 灭菌处理：将培养基倒入试管中，用塞子盖紧试管口，放入高压锅中进行高压灭菌处理，时间和温度根据不同的菌种和培养基选择。

3. 填充试管：将灭菌好的试管取出，用火焰燃烧灭菌的酒精灯瓶口；将培养基倒入试管中，约填充1/3试管高度。

4. 接种菌液：将待测菌种培养物挑捞一部分，移入培养基中，以避免杂菌的污染。

5. 标记试管：在试管上标明菌种名称和接种时间。

6. 培养条件：将接种好的试管放入恒温摇床中，控制温度和摇床的摇动速率，以提供合适的培养条件。

7. 观察记录：每隔一定时间间隔，取出试管，观察并记录微生物的生长情况，如菌落的大小、菌液的浑浊度等。

8. 绘制生长曲线：根据实际观察记录，绘制微生物的生长曲线图。

实验结果和讨论：根据观察和实际测定，可以得到微生物的生长曲线。

典型的微生物生长曲线包括潜伏期、指数期、平稳期和衰退期。

在潜伏期，微生物适应环境，准备生长，菌落数量和菌液浑浊度变化不大。

潜伏期的长度取决于微生物的生长速率和菌种类型。

在指数期，微生物开始快速增长，菌落数量呈指数增长，菌液浑浊度明显上升。

在平稳期，微生物的生长速率逐渐减缓，菌液浑浊度趋于稳定。

在衰退期，微生物的生长速率减缓，菌落数量开始减少，菌液逐渐变清。

通过绘制微生物的生长曲线，可以了解微生物的生长规律和生长速率。

这对于微生物学的研究和应用具有重要的指导意义。

实验结论：通过测定微生物的生长曲线，我们可以得到微生物的生长规律和生长速率。

不同微生物在不同的培养条件下生长曲线可能会有所差异，因此在实际应用中需要根据具体的情况进行调整和优化。

微生物的生长规律可以为微生物学的研究和应用提供理论依据。

实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒思考题1、培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是无菌的?2、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么?3、培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么?4、培养基的配制原则是什么?5、高压蒸汽灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽？6、灭菌完毕后,为什么要待压力降到0时才能打开排气阀,开盖取物？7、在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素？实验二、普通光学显微镜的使用思考题1、试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。

为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？2、什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？3、影响显微镜分辨率的因素有哪些？4、根据你的实验体会，谈谈应如何根据所观察微生物的大小，选择不同的物镜进行有效的观察。

实验三、革兰氏染色法思考题1、哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？2、进行革兰氏染色时，为什么特别强调菌龄不能太老，用老龄细菌染色会出现什么问题?3、革兰氏染色时，初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?4、不经过复染这一步，能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌？5、你认为制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节?6、为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?7、如果涂片未经热固定，将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长，又会怎样呢?实验四、显微镜直接计数法思考题根据你实验的体会，说明用血球计数板计数的误差主要来自哪些方面？应如何尽量减少误差，力求准确？实验五微生物接种技术思考题1、如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？请写出为什么高氏I号培养基和马丁氏培养基中要分别加入酚和链霉素？如果用牛肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性的细菌，你认为应如何做？2、试述如何在接种中，贯彻无菌操作的原则?3、以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。