绿脓杆菌

绿脓杆菌病绿脓杆菌病是由铜绿假单胞菌引起化脓性炎症和败血症的一种人兽共患病。

病原：铜绿假单胞菌又称绿脓杆菌，属假单胞菌科、假单胞菌属成员。

革兰氏染色阴性，为中等大小杆菌，有鞭毛，能运动。

本菌是专性需氧菌，对外界环境的抵抗力较强，在潮湿处能长期存活，对干燥、紫外线有较强抵抗力。

绿脓杆菌对青霉素、链霉素、红霉素、新霉素等抗生素有天然的抗药性，也易在使用抗生素后发生获得耐药性。

流行病学：绿脓杆菌广泛存在于自然界，无论土壤、水、动植物、空气和环境中都存在。

易感动物也十分广，几乎所有动物在一定条件下都可感染发病。

本病的传播途径也多种多样，主要是通过消化道、下呼吸道或创伤接触感染。

多呈散在发生。

临床症状：猴绿脓杆菌多数由外伤感染引起，而饲养环境污秽不洁、消毒不彻底则是诱发本病的重要原因。

临床表现为体温升高到39.5℃以上，呈稽留热型。

精神沉郁，不愿活动，初厌食后拒食。

稍后出现咳嗽，流鼻液，眼结膜炎有分泌物，呼吸迫促。

继而体况消瘦，呼吸困难，脱毛，腹泻，血尿。

病程1-2周，多转归败血症死亡。

病理变化：主要病变在肺、肝、肾。

肝脏肿大，有坏死灶和出血点。

肺水肿，有出血点、斑，呈暗紫色实变。

气管、支气管黏膜出血，有多量泡沫性液体。

肾脏出血，有坏死灶。

肺门淋巴结、肝门淋巴结和肠系膜淋巴结出血、肿大，肠粘膜出血。

防治措施：预防本病的关键是认真做好日常的饲养管理，维护和提高机体的抗病力；改善环境卫生、消毒工作；在治疗上，应注意早发现、早分离菌、早做药敏试验，在隔离条件下用大剂量敏感药物进行治疗。

联合用药的治疗效果比较理想。

消瘦，皮肤有针尖大红色小点，全身皮屑，肺脏肿胀呈暗红色与白色相间呈花斑样。

镜检肺脏以间质多核巨细胞肺炎为主，伴有细菌感染科引起小叶性肺炎。

预防接种疫苗麻疹疫苗与预防该病的首要措施。

沙门氏菌病又称副伤寒，是由沙门氏菌属细菌引起各种动物疾病的总称，是一种以败血症、肠炎为特征的人兽共患病。

健康动物的带菌现象普遍存在，在动物抵抗力降低、应激因素干扰下潜藏在肠道、淋巴组织和胆囊内的病菌活化而发生内源性感染，并连续通过易感动物致使毒力增强而扩大传染。

绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌简介及其感染处理流程袁小娟【绿脓杆菌概述】绿脓杆菌（铜绿假单胞菌Pseudomona saeruginosa）是假单胞菌属的代表菌种，在琼脂平板上能产生蓝绿色绿脓素，感染伤口时形成绿色脓液。

是一种致病力较低但抗药性强的杆菌。

本菌为无荚膜、无芽胞、能运动的革兰氏阴性菌，形态不一，成对排列或短链状，为专性需氧菌，最适宜生长温度为37℃，致病性绿脓杆菌在42℃时仍能生长，据此可与荧光假单胞菌等进行鉴别，本菌生长对营养要求不高。

绿脓杆菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生存，对紫外线不敏感，湿热55℃1小时才被杀灭。

绿脓杆菌感染常在医院内发生，医院内多种设备及器械上均曾分离到本菌，通过各种途径传播给病人、病人与病人的接触也为传播途径之一。

除院内感染外，绿脓杆菌还可引起与医院环境无关的感染，近年来对此已有更多的认识，它已成为足穿刺感染、心内膜炎、滥用药物所致的骨髓炎、眼部感染、新生儿感染性外耳炎、游泳池等引起的皮肤病等的主要病原菌，亦是战伤感染的常见致病菌。

绿脓杆菌为条件致病菌，完整皮肤是天然屏障，活力较高的毒素亦不能引起病变，正常健康人血清中含有调理素及补体，可协助中性粒细胞和单核细胞-巨噬细胞吞噬及杀灭绿脓杆菌，故亦不易致病；但如改变或损伤宿主正常防御机制，如皮肤粘膜破损、留置导尿管、气管切开插管，或免疫机制缺损如粒细胞缺乏、低蛋白血症、各种肿瘤患者、应用激素或抗生素的患者，在医院环境中常可从带菌发展为感染。

烧伤焦痂下，婴儿和儿童的皮肤、脐带和肠道，老年人的泌尿道，常常是绿脓杆菌败血症的原发灶或入侵门户。

绿脓杆菌广泛存在于自然界，通过多种途径在医院内传播,为医院内感染的重要病原菌之一。

[鲍曼不动杆菌（Ab）概述]鲍曼不动杆菌是条件致病菌，是医院感染的重要病原菌，在医院中分布广且长期存活。

近年来的感染在增多，且其耐药性日益严重，已引起临床和微生物学者的严重关注。

Ab主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等。

绿脓杆菌绿脓杆菌（p.aeruginosa）一种致病力较低但抗药性强的杆菌。

广泛存在于自然界，是伤口感染较常见的一种细菌。

能引起化脓性病变。

脓汁呈绿色，故名绿脓杆菌（p.aeruginosa）属假单胞菌属(pseudomonas)，广泛分布于自然界及正常人皮肤、肠道和呼吸道，是临床上较常见的条件致病菌之一。

大小为1.5～3.0×0.5～0.8um，g-杆菌。

菌体一端一般有一根鞭毛，运动活泼。

无芽胞，米液型菌株有多糖荚膜或糖萼，具有抗吞噬作用。

在普通培养基上生长良好，专性需氧。

菌落形态不一，多数直径2～3mm，边缘不剂齐，扁平湿润。

在血琼脂平板上形成透明溶血环。

液体培养呈混浊生长，并有菌膜形成。

绿脓杆菌能产生两种水溶性色素：一种是绿脓素，为蓝绿色的吩嗪类分合物，无荧光性，具有抗菌作用。

另一种为荧光素，呈绿色。

绿脓素只有绿脓杆菌产生，故有诊断意义。

但广泛使用有效抗生素后筛选出的变异株常丧失其合成能力。

分解蛋白质能力甚强，而发酵糖类能力较低，分解葡萄糖，产酸不产气，不分解甘露醇、乳糖及蔗糖，能液化明胶。

分解尿素，不形成吲哚，氧化酶试验阳性，可利用枸椽酸盐。

绿脓杆菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。

o抗原含有内毒素和原内毒素蛋白质两种成份。

原内毒素蛋白质是一种高分子、低毒性，免疫原性强的保护性抗原，不仅存在于不同血清型绿脓杆菌中，而且广泛存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等g-细菌中，是一种良好的交叉保护抗原。

绿脓杆菌能产生多种与毒力有关的物质，如内毒素、外毒素a、弹性蛋白酶、胶原酶、胰肽酶等，其中以外毒素a最为重要。

绿脓杆菌外毒素a为一种热不稳定的单链多肽，分子量约66，000，经甲醛或戊二醛处理可脱毒为类毒素，并被特异性抗毒素中和。

毒性强，注入动物后，主要靶器官肝脏可出现细胞肿胀、脂肪变性及坏死；其他脏器病变有肺出血和肾脏坏死。

外毒素a机理与白喉毒素有些类似，即最终使核糖体上延长因子2（ef～2）失活，抑制宿主细胞的蛋白质合成，但具体过程不同。

关于绿脓杆菌感染的原因,关于绿脓杆菌感染的相关知识。

【概述】绿脓杆菌在自然界广泛分布，对人类而言，属条件致病菌。

长期应用激素、免疫抑制剂、肿瘤化疗、放射治疗等导致患者免疫功能低下，以及手术后或某些治疗操作后(气管切开、保留导尿管等)的患者易罹患本菌感染，故亦为医院内感染的重要病原菌之一。

【病因】绿脓杆菌(铜绿假单胞菌Pseudomona saeruginosa)是假单胞菌属的代表菌种，在琼脂平板上能产生蓝绿色绿脓素，感染伤口时形成绿色脓液。

本菌为无荚膜、无芽胞、能运动的革兰氏阴性菌，形态不一，成对排列或短链状，为专性需氧菌，最适宜生长温度为37℃，致病性绿脓杆菌在42℃时仍能生长，据此可与荧光假单胞菌等进行鉴别，本菌生长对营养要求不高。

菌体O抗原有两种成分，一为内毒素蛋白，是一种保护性抗原，另一为酯多糖，具有特异性，根据其结构可将绿脓杆菌分成12个血清型，此外还可利用噬菌体或绿脓杆菌素分型。

绿脓杆菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生存，对紫外线不敏感，湿热55℃1小时才被杀灭。

【流行特征】正常人皮肤，尤其潮湿部位如腋下、会阴部及耳道内，呼吸道和肠道均有该菌存在，但分离率较低。

绿脓杆菌感染常在医院内发生，医院内多种设备及器械上均曾分离到本菌，通过各种途径传播给病人、病人与病人的接触也为传播途径之一。

除院内感染外，绿脓杆菌还可引起与医院环境无关的感染，近年来对此已有更多的认识，它已成为足穿刺感染、心内膜炎、滥用药物所致的骨髓炎、眼部感染、新生儿感染性外耳炎、游泳池等引起的皮肤病等的主要病原菌，亦是战伤感染的常见致病菌。

【发病机制】造成局部或全身疾病过程。

动物模型表明给动物注射外毒素A后可出现肝细胞坏死、肺出血、肾坏死及休克等，如注射外毒素A抗体则对绿脓杆菌感染有保护作用。

绿脓杆菌尚能产生蛋白酶，有外毒素A及弹性蛋白酶同时存在时则毒力最大；胞外酶S是绿脓杆菌所产生的一种不同于外毒素A的ADP-核糖转移酶，可促进绿脓杆菌的侵袭扩散，感染产此酶的绿脓杆菌患者，可有肝功能损伤而出现黄疸。

一、实验目的1. 学习绿脓杆菌的分离与培养方法。

2. 掌握绿脓杆菌的形态观察和特征鉴定。

3. 了解绿脓杆菌的生物学特性。

二、实验原理绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa），又称铜绿假单胞菌，是一种革兰氏阴性杆菌，具有运动性、形成芽孢和荚膜等特点。

绿脓杆菌广泛存在于自然界，如土壤、水、空气等，是一种条件致病菌，可引起多种感染。

本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法分离绿脓杆菌，通过显微镜观察其形态和运动性，并对其进行革兰氏染色、氧化酶试验等鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：绿脓杆菌标准菌株、土壤样品、营养肉汤、营养琼脂、生理盐水、无菌棉签、无菌镊子、无菌移液器、无菌试管、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、显微镜、接种环、接种针等。

2. 试剂：革兰氏染液、氧化酶试剂、无菌生理盐水等。

四、实验方法1. 绿脓杆菌的分离（1）取土壤样品10g，放入100ml无菌生理盐水中，振荡混匀，制成10^-1稀释液。

（2）取10^-1稀释液1ml，加入9ml无菌生理盐水中，制成10^-2稀释液。

（3）取10^-2稀释液0.1ml，涂布于营养琼脂平板上，用接种环划线。

（4）将平板倒置，放入37℃恒温培养箱中培养24小时。

2. 绿脓杆菌的鉴定（1）观察分离得到的菌落，挑选典型菌落，用接种环挑取少量菌体，进行革兰氏染色。

（2）在显微镜下观察菌体形态，记录结果。

（3）进行氧化酶试验，观察菌体是否产生颜色变化。

五、实验结果与分析1. 绿脓杆菌的分离经过培养，营养琼脂平板上出现典型的绿色菌落，符合绿脓杆菌的特征。

2. 绿脓杆菌的鉴定（1）革兰氏染色：菌体呈革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆，无芽孢，无荚膜。

（2）氧化酶试验：菌体产生颜色变化，说明具有氧化酶活性。

根据实验结果，分离得到的菌落符合绿脓杆菌的特征，可初步判断为绿脓杆菌。

六、实验结论通过本次实验，我们成功分离和鉴定了绿脓杆菌。

实验过程中，我们掌握了绿脓杆菌的分离、培养和鉴定方法，了解了绿脓杆菌的生物学特性，为后续研究绿脓杆菌的致病机制和防治提供了基础。

绿脓杆菌检测方法一、基本原理绿脓杆菌是革兰氏阴性杆菌，具有产生绿色色素和氧化酶等生化实验特征，因此，可利用选择性培养基培养、菌体检验和生化试验进行鉴定。

二、主要设备和材料包温培养箱、显微镜三、培养基和试剂NAC液体培养基、NAC琼脂平血、普通营养琼脂平血、糖发酵培养基、尿素培养基、西蒙氏柠檬酸盐培养基、硝酸盐培养基、营养明胶、氧化酶试剂。

四、检测程序NAC液体培养基37C24h有绿色色素和菌膜室温放置至72h有绿色色素和菌膜产生无绿色色素、有菌膜氧化酶试验革兰氏染色镜检报告革兰染色镜检生化试验半固体动力试验氧化酶试验42C 生长试验五、操作步骤1.采样采取回盲部内容物、粪便或病灶组织、分泌物。

2.分离培养将已接种的NAC液体培养基置37C包温培养箱中培养24h 后观察生长情况，对未产生绿色色素者转种丁NAC琼脂平也，37C包温培养24h。

3.鉴定3.1生长特性及菌落特征绿浓杆菌在NAC液体培养基中均匀浑浊生长、有菌膜、大部分菌株可在培养液上半部形成绿色色素;在NAC琼脂平也上形成扁平，边缘不齐呈锯齿状，23mm的菌落，大部分菌落可产生绿色色素而致使培养基呈绿色，部分菌株需延长培养时间方可产生色素。

3.2菌体特征革兰阴性杆菌，菌体长短不一。

3.3氧化酶试验阳性被检菌为革兰阴性杆菌，氧化酶阳性及产生绿色色素，可报告检出绿脓杆菌。

3.4生化试验对不产生绿色色素的菌应做如下鉴定，见表1。

表1绿脓杆菌的主要生化特性葡萄糖木糖乳糖蔗糖枸椽酸盐尿素明胶液化靛基质硫化氢硝酸盐还原产气+一+/一+一一+：阳性；一：阴性；+/-：多数菌株阳性3.5半固体动力试验阳性3.642C生长试验阳性4.结果报告凡符合上述各项检测结果者做出阳性报告，不符合者做出阴性报告。