复合酶解法提取长春碱的新工艺
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长春碱理化性质、提取分离、药理活性及制剂综述摘要:综述从天然植物长春花中提取、分离、纯化抗肿瘤药长春碱的方法,同时介绍相关长春碱的药理活性、临床应用与制剂概况,以为工业生产及科学研究提供一定的借鉴作用。
关键词:长春碱;提取;分离;药理活性;制剂;临床应用长春花为夹竹桃科植物长春花的全草,性凉,味微苦,具有平肝、抗癌、解毒的功效,可用于治疗高血压、恶性肿瘤、疮疡等。
迄今已从中分离出100余种生物碱,其中以长春新碱和长春碱最为临床研究和应用。
兹将长春碱的药学研究进展综述如下。
1提取[1]长春碱的研究历史已久,故而提取方法较多,经典常见的是溶剂提取法(醇类溶剂提取法、脂性有机溶剂提取法、酸水提取法),随着有机合成、细胞工程、发酵过程、生物技术的等科学技术的进步,又逐步发展出超声波提取法,化学合成法、生物技术法、组织培养、细胞工程、发酵工程、遗传转化工程、化学诱变。
近期还有匀浆法提取长春花中长春碱[2]。
2 分离[1]对长春碱硫酸盐的分离常用薄层色谱法,柱色谱法、高效逆流色谱法等。
薄层色谱法的分离量太少,常用来研究少量的样品制备或筛选柱色谱流动相,不适合于大生产;柱色谱法分为一次过柱、两次过柱和多次过柱,前者是目前大规模生产的方法,缺点是产品纯度不够高。
后两者者所得产品纯度较高,但步骤烦琐、收率低,而且制备量也很少,也不适于扩大制备;高效逆流色谱法可将长春碱和杂质完全分离3 鉴定[1]薄层扫描法(TLCS)、薄层-紫外分光光度法(TLC-UV)、高效液相色谱(HPLC)法、高效液相色谱法-电喷雾-质谱(HPLC-ESI-MS)法等。
TLCS分离效果好,可分离出可快速、灵敏地测定的含量;TLC-UV操作简单,不需特殊仪器设备,加之方法精密度也较好,适合普遍使用;HPLC-ESI-MS 法与常用的检测手段相比,提取物的离子流色谱不需精制即可将上述生物碱分离,具有简单、快速等优点,为从复杂植物材料中检测特殊化合物提供了一种理想方法。
酶解法提取长春花中长春碱、长春质碱、文多林 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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酶解法提取长春花中长春碱、长春质碱、文多林 【摘要】目的研究纤维素酶法提取长春花中长春碱、长春质碱和文多林的最佳工艺。
方法采用HPLC法测定长春碱、长春质碱和文多林的含量,通过单因素实验考察酶解温度、pH、酶解时间、加酶量、浸提倍数对长春碱、长春质碱和文多林提取率的影响。
结果实验得出纤维素酶解长春花的最佳工艺为:温度40℃,pH 1.5,时间12 h,浸提倍数20,加酶量2 mg/g长春花。
结论酶解法较酸水浸提法更有利于长春碱、长春质碱、文多林的提取。
【关键词】长春花; 长春碱; 长春质碱; 文多林; 纤维素酶 Abstract:ObjectiveTo study the optimal enzymatic extraction of vinblastine, catharanthine and vindoline from Catharanthus roseus (Linnaeus) G. Don.MethodsHPLC method was used to determine the contents of vinblastine, catharanthine and vindoline from C. roseus.Five factors were studied during enzymatic extraction of cellulase.ResultsThe optimal enzymatic extraction of cellulase was determined as follows: enzyme 2 mg for 1 g material, Ph1.5, buffer to raw material ratio 20, temperature 40℃, and enzymolysis time 12 hours.ConclusionCompared with the traditional acidic water extraction, the enzymolysis method can increase the extraction yield of effective components from C. roseus. Key words:Catharanthus roseus; Vinblastine; Catharanthine; Vindoline; Enzymatic cellulose 长春花Catharanthus roseus (Linnaeus) G. Don是夹竹桃科(Apocynaceae)长春花属(Catharanthus roseus G. Don)一种重要的药用植物。
长春碱、长春新碱提取分离方法研究
李浩;李一澍;卢国杰
【期刊名称】《应用化工》
【年(卷),期】2008(37)9
【摘要】研究了长春碱、长春新碱的提取及分离工艺,探讨了提取剂、提取方法、提取时间、料液比对长春碱、长春新碱提取率的影响,并用LSA-21型树脂进行分离纯化.实验表明,最佳工艺条件为:以苯为溶剂,超声强化15 min(功率1 000 W),按料液比1:6.5提取1次,用LSA-21型大孔吸附树脂吸附,以80%乙醇为洗脱剂,洗脱速度3 mL/min,长春碱、长春新碱的提取率分别为78.4%,62.2%,纯度分别为88.2%,85.8%.
【总页数】4页(P993-995,998)
【作者】李浩;李一澍;卢国杰
【作者单位】西藏民族学院,信控系,陕西,咸阳,712082;长安大学,环境科学与工程学院,陕西,西安,710054;长安大学,环境科学与工程学院,陕西,西安,710054
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
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祖元刚
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第24卷 第4期2010年 11月山 东 轻 工 业 学 院 学 报J OURNAL OF SHANDONGI NST I TUTE OF L I GHTI NDUSTRY V o.l 24 N o .4N ov . 2010收稿日期:2010 10 11作者简介:周玮玲(1980 ),女,山东省海阳市人,硕士,山东轻工业学院讲师,研究方向:精细化工.文章编号:1004 4280(2010)04 0049 06长春碱的提取与纯化研究周玮玲(山东轻工业学院,山东济南250353)摘要:利用溶剂法提取长春碱,并通过柱色谱法进一步纯化长春碱,采用正交试验法优化其工艺,通过紫外分光光度法检测其相对含量,结果显示利用溶剂法提取的长春花生物碱含量高,效果好。
关键词:长春碱;提取;纯化;柱色谱法中图分类号:Q 946188 文献标识码:AStudies on the extraction and purificati on of Vi nblastineZ HOU W ei ling(Schoo l of Chem ical Eng i neeri ng ,Shandong Institute o f L igh t Industry ,Jinan 250353,Ch i na)Abst ract :V i n b l a sti n e w as ex tracted fro m atharanthus r oseus and f u rther purified by o lu m nhro m atography .O rt h ogonal test w as e m ployed to opti m ize the extracti o n process .The content o f vinblasti n e in theex traction w as deter m i n ed w ith u ltrav i o let spectrophoto m e try ,The resu lts sho w that solvent m ethod is effic i e n,t the content of ex tracting vinblasti n e fro m atharanthus roseus is h i g h and the effect is good.K ey w ords :v i n blastine ;ex tracti o n;purificati o n ;o lu m nhro m atography0 引言长春碱(v inblastine)是从长春花中提取的一种二聚吲哚类生物碱。
[19]中华人民共和国国家知识产权局[12]发明专利申请公开说明书[11]公开号CN 1534038A[43]公开日2004年10月6日[21]申请号200410013558.X [22]申请日2004.02.18[21]申请号200410013558.X[71]申请人东北林业大学地址150040黑龙江省哈尔滨市动力区和兴路26号共同申请人祖元刚[72]发明人祖元刚 罗猛 牟璠松 付玉杰 赵文灏祖柏实 李庆勇 [51]Int.CI 7C07D 519/04// ( C07D519/04,417:00,417:00)权利要求书 2 页 说明书 4 页[54]发明名称一种长春碱的高效生产方法[57]摘要一种长春碱高效生产方法,它是将长春花去除杂质后与醇或酸醇提取溶剂混合经匀浆固液萃取、空化混悬固液萃取、过滤、提取液浓缩、浓缩液调pH值、过滤、空化混悬液液萃取、浓缩、纯化后得到长春碱成品。
本发明取代了传统的物料干法粉碎、加热提取或机械搅拌萃取及逆流萃取等方法,具有方法流程简单,溶剂使用量少,生产周期短,耗能少,无污染,易操作等特点。
长春碱得率为0.07~0.12‰,纯度在98%以上。
200410013558.X权 利 要 求 书第1/2页 1、一种长春碱高效生产方法,其特征在于:长春花除杂质后与醇或酸醇提取溶剂混合经匀浆固液萃取、空化混悬固液萃取、过滤、提取液浓缩、浓缩液调pH值、过滤、空化混悬液液萃取、浓缩、纯化后得到长春碱成品。
2、按照权利要求1所述的长春碱高效生产方法,其特征在于:所述的长春花是指含水率在20~85%的长春花,它包括以下三种情况:(1)新采集的长春花的嫩茎叶,其含水率在50~85%。
(2)经过人工晾晒1~3天或自然风干1~5天的长春花,其含水率在20~60%。
(3)经过提取溶剂浸泡12~48小时后的干长春花,其含水率在30~70%。
3、按照权利要求1所述的长春碱高效生产方法,其特征在于:所述的提取溶剂为50~70%7醇与1~10%酒石酸或1~10%硫酸的混合提取溶剂。
专利名称:一种长春碱和长春新碱的纯化方法
专利类型:发明专利
发明人:祖元刚,杨磊,罗猛,祖柏实,李庆勇,付玉杰,刘莉娜,牟璠松,田浩,赵文灏,王俐,施晓光,王磊
申请号:CN200510010177.0
申请日:20050713
公开号:CN1724539A
公开日:
20060125
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:一种长春碱和长春新碱的纯化方法,它是将长春花粗提物经酰化反应后调pH=6-10,再经波长为210-390nm,照射剂量为5-20w/m的紫外光照射10-45分钟,然后用连续重结晶法分离,得到纯度≥98%的长春碱,再将重结晶所用的母液减压浓缩,将浓缩品经柱层析纯化,并分段收集,得到长春碱、长春新碱;或是将长春花粗提物经酰化反应后,用柱层析法分离,得到长春碱、长春新碱。
本操作工艺实用、方便,能耗少,安全可靠,生产成本低,得率高,适合于较大规模的工业化生产。
申请人:东北林业大学,祖元刚
地址:150040 黑龙江省哈尔滨市动力区和兴路26号
国籍:CN
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利用真菌发酵生产长春新碱工艺技术
长春新碱(Vincristine, Oncovin,VCR)是一种双吲哚型生物碱。
夹竹桃科植物长春花中提取出的生物碱,因抗肿瘤作用良好,目前其制剂作为临床抗肿瘤药物。
五十年代末,发现长春碱和长春新碱具有抗肿瘤活性,尤其对白血病具显著疗效。
此后,从长春花不同部位分离出100多种生物碱,但这些 生物碱在植物体内含量低,且植物生长缓慢,资源短缺,限制了抗癌药物的进一步开发。
人们又转而进行植物组培研究〕,但植物组培成本高,生产难度大,有效成分含量低,也未能成功应用于生产。
由于植物真菌对植物某些药效成分的形成有重要影响,甚至会产生和其寄主相同或相似的生理活性成分,而且真菌易于培养,可以通过育种手段和控制培养条件等措施来大幅度提高其有效成分的含量,并便于组织工业化生产。
故利用微生物生产抗癌成分前景十分广阔。
本工艺技经指标:
(1)生产菌:5g/L, 发酵培养周期7天
(2)生产成本每公斤20万,市场售价每公斤100万,供不应求。
(3)检验标准见《中国药典》。
(4)成品包装以克为单位铝簿包装或者以克为单位按青霉素的成品包装。
(5)设备为普通发酵提取设备。