09第二章 第三节 杀菌剂的生物测定方法
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实验七杀菌剂生物活性测定方法――抑菌圈法一、实验目的掌握抑菌圈法测定杀菌剂的生物活性的方法及步骤。
二、实验原理本实验主要采用抑菌圈法来测定杀菌剂的生物活性。
抑菌圈法是利用杀菌剂在琼脂平板上产生的抑菌效果来对其生物活性进行测定的一种方法。
通常,将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上,使其均匀地分布在琼脂上。
然后,将含有细菌培养物的琼脂平板放入恒温箱中进行培养。
在培养一段时间后,观察平板上是否出现了抑菌圈,并测量抑菌圈的直径来评估杀菌剂的生物活性。
三、实验仪器和材料1.显微镜2.恒温箱3.滴定管或移液管4.琼脂平板5.细菌培养物6.杀菌剂溶液四、实验步骤1.准备琼脂平板。
将琼脂平板置于恒温箱中,加热至溶化状态后取出,待其稍微冷却后均匀地倒入培养皿中。
2.滴加杀菌剂溶液。
将杀菌剂溶液滴加到琼脂平板上,并用移液管在平板上转动,使杀菌剂均匀地分布在琼脂上。
3.检验杀菌剂效果。
取一定量的细菌培养物,将其在琼脂平板上均匀涂布。
4.培养细菌。
将含有细菌培养物的琼脂平板放入预先恒温箱中,设置合适的温度和培养时间。
5.观察抑菌圈。
在培养一段时间后,取出琼脂平板,用显微镜观察平板上是否出现了抑菌圈。
6.测量抑菌圈直径。
使用直尺或量角器等工具测量抑菌圈的直径,并记录结果。
五、实验注意事项1.操作时要注意无菌技术,以避免细菌污染。
2.滴加杀菌剂溶液时要均匀并轻柔,以保证杀菌剂能充分分散在琼脂平板上。
3.培养细菌时要控制好温度和培养时间,以确保细菌能够充分生长。
4.观察抑菌圈时要注意使用合适的放大倍数,以免错过细小的抑菌圈。
5.测量抑菌圈直径时要使用准确的测量工具,以获得准确的结果。
六、实验结果处理根据实验所得的抑菌圈直径数据,可以通过计算其平均值、标准差等统计指标来评估杀菌剂的生物活性。
较大的抑菌圈直径通常表示杀菌剂具有较强的抑菌效果,反之则表示其抑菌效果较弱。
可以将实验结果与已有的标准值进行比较,以判断杀菌剂的生物活性。
七、实验结果分析根据测得的抑菌圈直径结果,可以对杀菌剂的生物活性进行分析。
多菌灵对小麦赤霉病病菌菌丝生长的毒力测定一、实验目的:掌握生长速率法的基本操作二、实验基本原理:琼脂平板培养法是在融化的培养基中加入一定浓度的杀菌剂,制成含梯度浓度药剂药剂的培养基平面,再在平面上接种病原菌。
以病原菌生长速率为指标评价药剂的毒力。
病原菌生长速率通常采用在一定时间内病原菌生长的菌落直径大小(即扣除接入病原菌菌落直径)表示,也可用菌落达到一定直径所需时间表示。
在测定中一定要同时设置不加药剂和只加药剂配置时的溶剂和助剂的空白对照,用于在计算毒力时溶剂和助剂对结果的影响。
该方法尤其适合在琼脂培养基上能够沿水平方向有一定生长速率且菌落接近于圆形的病原真菌或者在液体培养基中能够迅速培养的病原细菌。
三、实验步骤1,菌碟制备:以小麦赤霉病菌作供试菌株,取灭菌培养皿一套,分别加入已融化的马铃薯培养基17ml制成平板。
取已经活化的小麦赤霉病病原菌菌种一支,在培养皿中央分别接入赤霉病病原菌,置于25C恒温箱内倒赔84h后,用内径为5mm的打孔器沿菌落外周处打一周,制成菌碟。
2,含梯度浓度药剂平板的制备(1)药剂浓度处理设置处理药剂浓度为 0、0.125、0.25、0.5、1和2ppm,每处理3个重复。
(2)制备药剂母液用分析天平称取0.01g多菌灵原药,先加入到1ml 0.1mol/L盐酸水溶液中,再加9ml灭菌水,摇匀,制成1000ppm的母液(3)制备对照平板用量筒分别量取50ml培养基均匀家去到3个灭菌的培养皿中,制成对照平板(4)制备药剂浓度梯度在灭菌的三角瓶中用移液器先加入180ul母液,再用量筒1量取90ml培养基加入到三角瓶中,摇匀,用已灭菌的量筒2量取45ml 摇匀然后加入到无菌培养皿中,制成2ppm的含药平板,并标注。
以此重复上述过程,制成1ppm、0.5ppm、0.25ppm、0.125ppm的含药培养基平板。
3,接菌、培养和结果调查用接种针分别在含药培养基平板中央接入菌碟(气生菌丝朝上),每皿一个菌碟,在25度恒温箱内倒置培养72h,采用十字交叉法测量每皿菌落的直径。
杀菌剂测定标准引言杀菌剂是一种用于防治病原菌和其他有害微生物的化学物质。
为了确保农产品安全和食品卫生,必须建立一系列的杀菌剂测定标准,以便监测和控制使用杀菌剂的数量和质量。
杀菌剂测定的重要性杀菌剂在农业生产中广泛应用,但过量或不适当的使用可能会对环境和人体健康造成危害。
因此,建立科学合理的杀菌剂测定标准非常重要。
食品安全杀菌剂残留在食品中可能对人体健康产生不良影响。
合理的杀菌剂测定标准能够确保食品的质量和安全,防止过量残留。
环境保护如果杀菌剂过量使用或使用不当,可能会导致土壤和水源污染,对生态环境产生危害。
通过建立测定标准,监测和控制杀菌剂的使用,可以减少对环境的负面影响。
农业可持续发展合理使用杀菌剂有助于农作物的健康生长和增产。
杀菌剂测定标准的制定可以帮助农民选择和正确使用合适的杀菌剂,提高农作物质量和农业生产效益。
杀菌剂测定标准的制定过程1. 收集相关信息为制定科学合理的杀菌剂测定标准,需要首先收集相关的科学研究和实践经验。
这些信息包括杀菌剂的毒理学特性、残留分析方法、最大残留限量等。
2. 确定测定方法根据收集到的信息,选择合适的测定方法对杀菌剂进行定量分析。
常用的测定方法包括色谱法、光谱法、质谱法等。
在选择方法时,需要考虑方法的准确性、灵敏度、重复性等因素。
3. 确定最大残留限量最大残留限量是指允许产品中残留的最高杀菌剂浓度。
确定最大残留限量需要综合考虑食品卫生、环境保护和农业生产等因素。
一般通过风险评估来确定最大残留限量的值。
4. 制定标准文件根据确定的测定方法和最大残留限量,制定详细的标准文件。
标准文件应包括测定方法的详细描述、结果解释方法、标准样品的准备方法等内容。
杀菌剂测定标准的应用1. 监测工具杀菌剂测定标准提供了监测工具,用于检测和监测食品中的杀菌剂残留情况。
这些监测工具可以帮助相关政府部门和机构监管农产品质量和安全。
2. 产品质量控制杀菌剂测定标准可以帮助生产企业控制产品的质量。