临床标本的细菌学检验

临床微生物学检验的标本采集一、血液和骨髓细菌学检验标本的采集（一）适应症菌血症、败血症和感染性骨髓炎等感染菌的培养鉴定和药物敏感试验。

（二）病人准备1．凡怀疑菌血症和败血症的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用过抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，或在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。

2．应在病人发热期或寒颤时采集（三）标本采集1．血培养瓶领取：凭医嘱和检验申请单到检验科细菌室领取。

按照实际情况选择相应类型的血培养瓶：如灰色瓶盖为普通成人培养瓶；粉红色盖为儿童需氧菌培养瓶；紫色盖为厌氧菌培养瓶。

2．将患者信息录入相应的血培养瓶条码中，并在作好病人姓名、科别、床号等标识。

2．采集方法：严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液或骨髓后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀。

3．标本量：成人每次采血5~10ml，小儿采血3~5ml，骨髓2~3ml，采血量足够则阳性率高，反之阳性率减低。

（四）注意事项1．抽血、抽骨髓和接种时，须严格注意无菌操作，避免污染杂菌。

2．从抽血、抽骨髓到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固。

3．成人不明原因发热、怀疑血流细菌感染时宜在不同部位抽血2套，每套2瓶（需氧、厌氧各一瓶）。

4．怀疑伤寒、亚急性细菌性心内膜炎及布鲁氏菌病的病人等，一般一日抽血三次培养，必要时需追加次数。

（五）标本送检和保存1．标本采集后应及时送检，一般不超过1h送交细菌室。

2．送检过程中应注意防止培养瓶打破或其它潜在性污染可能。

二、痰液或下呼吸道分泌物细菌学检验标本的采集（一）适应症肺炎、肺气肿、支气管炎、鼻窦炎、肺结核等感染菌的培养鉴定、药物敏感试验和抗酸菌检查。

（二）病人准备1．尽量在未使用抗菌素前留取标本。

准备好无菌标本容器，贴上条码、标明标识。

2．住院病人应留取清晨起床第一口痰。

为减少正常菌群的污染，嘱患者早上起床后用清水或生理盐水漱口，不要刷牙，除去鼻咽分泌物。

（三）标本采集1．一般病人用力咳出气管深处或肺部痰液，留于无菌标本容器内。

临床细菌常规检验方法1.样本收集：通常采用微生物标本采集套装，如采血培养瓶、骨髓培养瓶、尿培养瓶、分泌物培养瓶等。

不同类型的标本要按照不同的采集方法进行采集，以确保样本的纯度和无污染。

2.样本处理：在获得样本后，要进行适当的处理，如血液样本要进行离心分离，分离出红细胞和血浆/血清。

尿液样本要进行离心去除悬浊物等。

3.细菌培养：将已处理的样本分别接种到含有适当培养基的培养皿中，并在适当温度和湿度下培养一段时间。

通常常规培养采用的培养基包括血浆琼脂、麦康凯琼脂等。

培养时间通常为24-48小时，特殊细菌可能需要更长的培养时间。

4.细菌鉴定：对培养出的菌落进行初步的形态学鉴定，如观察菌落形状、大小、颜色等。

然后进行革兰染色，观察细菌的形态特征，如是否革兰阳性或革兰阴性。

根据初步鉴定的结果，可以选择进一步的生化试验或分子生物学检测，如氧化/发酵试验、羟基酸钠试验、目标序列扩增等。

最终确定细菌的种类和特征。

5.药敏试验：对已鉴定出的细菌进行药敏试验，以确定细菌对各类抗生素的敏感性。

药敏试验通常采用纸片扩散法或肉汤稀释法，通过观察菌落的生长抑制区域大小来判断细菌对抗生素的敏感程度。

6.结果分析和报告：根据细菌培养和鉴定的结果以及药敏试验的结果，进行结果分析和判断。

最后将结果整理成报告，提供给临床医生参考，帮助临床医生做出正确的诊断和治疗决策。

总的来说，临床细菌常规检验方法包括了样本收集、样本处理、细菌培养、细菌鉴定、药敏试验等步骤。

这些步骤的顺序和方法都有一定的规范和标准，以确保检验结果的准确性和可靠性。

临床细菌常规检验在临床诊断和治疗中起着重要的作用，可以帮助医生选择合适的抗生素治疗方案，提高治疗效果。

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。

2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。

3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。

4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。

2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。

3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。

临床细菌学检验的质量控制流程质量控制流程一般包括以下几个步骤：1.建立标准操作规程（SOP）：制定一套标准的操作规程，包括标本收集、保存、转运和实验操作等所有环节的具体要求。

SOP规定了每个步骤的操作流程、使用的试剂和设备、结果解读标准等，确保操作的一致性和可比性。

2.样本质量控制：对于临床细菌学检验来说，样本的质量非常重要。

因此，在样本收集和保存过程中，需要注意避免污染和失真。

这包括正确的采样技术、合适的保存温度和时间，并且应该在检验之前对样本的质量进行评估。

例如，如果样本存放不当导致细菌死亡或浓度过低，就会影响检验结果的准确性。

3.质量控制品的使用：质量控制品是一种稳定、已知浓度的标准品，用来验证实验的准确性和可靠性。

通常，质控品会模拟常见的临床标本，包括阴性和阳性样本。

实验室需要每日使用质控品来验证设备、试剂和操作的稳定性。

如果质控品的结果在预定范围内，可以确保实验的准确性和可靠性。

4.内部质量控制：内部质量控制是实验室自行建立的用来监测日常实验质量的系统。

首先，需要确定一组常规检测指标，然后每天进行检测并记录结果。

通过比较每天的测试结果，可以确定实验室的日常变异范围，并及时发现异常结果。

如果结果超出了参考范围，实验室需要进行调查和纠正操作，以确保检验结果的准确性。

5.外部质量评估：外部质量评估是指实验室参加由独立机构组织的质量评估项目。

通常，这些项目会定期提供一批未知样本给实验室，实验室需要准确识别和报告这些样本，以评估实验室的准确性和可靠性。

外部质量评估可以帮助实验室发现潜在的问题，并与其他实验室进行比较，以改进实验室的操作和结果。

6.不断改进和学习：质量控制是一个持续的过程，实验室需要根据实验结果和外部质量评估的反馈不断改进和学习。

当出现偏差或问题时，实验室要及时纠正错误，并采取相应的措施，例如，重新培训操作员、更换设备或改进操作规程。

此外，实验室还应定期回顾和更新SOP，并参加培训活动，以保持对新技术和方法的了解和掌握。