4第四章半薄切片法和超薄切片法
- 格式:ppt
- 大小:4.09 MB
- 文档页数:33
详细讨论超薄切片法流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!超薄切片法的流程详解与注意事项超薄切片法,作为一种常见的科学研究和医学诊断技术,被广泛应用于生物学、病理学、材料科学等领域。
(4)刀槽及液面的调节超薄切片只有漂浮在水面上或其他合适的液面上才便于收集、伸展和捞取,为此在刀口背部装上一个小的水容器,通常称为“刀槽”。
通常用定制的硬塑料刀槽架或用一小段医用橡皮胶缠绕过刀背,紧紧地粘在玻璃上,橡皮胶的后下部分用融化的牙科用红腊密封,以防漏水。
注意橡皮胶的顶端不应高出刀刃。
切片前在刀槽内加入双蒸水,使切后的切片漂浮于液面上。
液面的调节一般先加稍过量的液体使之凸起,以保证浸湿刀刃。
然后在双筒解剖镜下用注射器或移液管慢慢吸去一部分液体,调整照明系统,当液面变成凹面、可见一反射光线的弧面,即为正确的液面。
从这一光亮的反射光可看到切出的片子。
在切片过程中由于液体蒸发,需加液以保证正确的液面。
(5)超薄切片切片时将夹着修好组织块的样品夹安装在切片机的样品臂上,刀台上装好玻璃刀,其高度要与刀台上的标准规等高,后斜角一般在3~5°,在显微镜下使样品块面的上下两条平行边与刀刃平行,如是梯形的应长边在下面。
调整好刀刃和组织块的距离,再在刀槽内注入适量的双蒸馏水。
将切速放在2~5mm/秒,调节控制切片厚度的电流表,即可切片。
当切片停止时,立即打开电吹风,冷却样品臂。
捞片后关掉电吹风又可重新切片,或更换新刀。
切片厚度的判断。
一般是利用反射光干涉色来判断切片的厚度,即从切片表面反射的光和从切片下面的水面的反射光发生干涉现象(见下表)。
当用白光时,从双筒显微镜下观察两种光线间的差别。
目前公认的树脂包埋切片厚度与干涉色的近似值紫色切片太厚,电子束不易穿过,故不适用于电镜观察用。
金黄色切片其分辨率也比较低。
目前一般认为银白色的切片是较理想的厚度,其分辨率可达2.5nm左右。
也有人喜欢采用金黄色切片,尤其在细胞化学、放射自显影中较适宜。
切片的展平和捞取。
在切削过程中,由于切片很薄,经挤压使切片发皱,甚至引起标本结构变形。
为此,常用沾有氯仿或二甲苯的滤纸小片移近刀槽液面,试剂挥发性蒸汽可使切片软化伸展。