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酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断日本血吸虫病的研究曹学华;李绪琼;黄天威;鲍行豪;李岩金【期刊名称】《浙江大学学报：医学版》【年(卷),期】1982(0)S1【摘要】本文系采用血吸虫可溶性虫卵抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测日本血吸虫粪便孵化阳性血清144份;痰检肺吸虫卵阳性血清27份;正常人血清127份。
当被检血清稀释为1:200时,选择阳性诊断标准为OD492nm≥0.4时,则144份阳性血清检出率为98.5％;27份肺吸虫阳性血清和127份正常人血清的交叉反应和假阳性分别为7.4％和2.4％。
如果将诊断标准定为≥0.6时,则血吸虫病人检出率为95.8％;【总页数】1页(P28-28)【关键词】酶联免疫吸附试验;血吸虫病;肺吸虫;正常人;裂体吸虫病;地方病;阳性血清;诊断血清;检出率;ELISA【作者】曹学华;李绪琼;黄天威;鲍行豪;李岩金【作者单位】浙江医科大学寄生虫学教研室;浙江省防疫站【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断牛日本血吸虫病的研究 [J], 沈杰;孙纪岚;方渭民;徐泉性;张美芬;周庆堂;冯德南2.血吸虫病酶联免疫吸附试验(ELISA)操作规范化的研究 [J], 张素娥;汤益;屠乐鸣3.双抗体夹心酶联免疫吸附试验(S-ELISA)检测血吸虫病人循环抗原的研究 [J], 刘韵娟;朱荫昌;许永良;何伟;华万全;管晓红;仇镇宁4.七种抗原用于酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断血吸虫病的效果比较 [J], 郑志国;占丽君;朱冠;屠乐鸣5.快速酶联免疫吸附试验诊断牛日本血吸虫病的研究 [J], 沈杰;郑韧坚;邱巧平;王爱华;林矫矫因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血吸虫病个案调查要点血吸虫病个案调查要点引言：血吸虫病是一种由寄生虫引起的传染病，主要存在于我国农村地区。
为了更好地了解血吸虫病的情况，进行个案调查是必要的。
本文将介绍血吸虫病个案调查的要点。
一、病例信息收集1. 个案基本信息：包括患者的姓名、性别、年龄、职业等。
2. 病史：了解患者是否有过血吸虫病史，以及曾经是否接受过治疗。
3. 环境暴露史：了解患者是否长期生活在血吸虫病流行地区，是否接触过可能污染的水源、土壤等。
4. 症状描述：详细了解患者的临床症状，如腹痛、腹泻、贫血等。
二、检查诊断1. 血液检查：进行血常规、血红蛋白测定、寄生虫卵检查等，以确定患者是否感染血吸虫。
2. 影像学检查：如B超、CT等，观察肝脏、肠道是否受到血吸虫感染的影响。
3. 免疫学检查：进行血吸虫抗原和抗体检测，以辅助诊断。
三、流行病学调查1. 调查患者所在地区的血吸虫病流行情况：了解该地区的疫情、发病率、传播途径等。
2. 调查患者的家庭成员和密切接触者是否有类似症状，以确定是否存在家庭聚集性感染。
四、治疗和预防1. 治疗方法：根据患者的病情，选择合适的治疗方案，如口服抗血吸虫药物、手术治疗等。
2. 预防措施：向患者和家属宣传血吸虫病的防治知识，如避免接触可能感染的水源、正确使用厕所等。
五、随访和观察1. 对患者进行随访观察，了解治疗效果和病情变化。
2. 定期复查：包括血常规、肝功能、寄生虫卵检查等，以判断病情是否稳定或复发。
结论：个案调查是了解血吸虫病疫情、指导治疗和预防的重要手段。
通过收集病例信息、检查诊断、流行病学调查、治疗和预防以及随访观察等步骤，可以全面了解血吸虫病的情况，为制定有效的防控措施提供依据。
同时，加强血吸虫病的宣传教育，提高公众的防护意识，对于减少血吸虫病的发病率和传播具有重要意义。
血吸虫病诊断方法及研究进展长期以来，血吸虫病诊断研究，一直是血吸虫病研究的重点之一，并连续被列为国家医药卫生科技七五、八五、九五、十五攻关项目，成为血吸虫病防治中的热门课题。
血吸虫病的诊断一般可以分为临床诊断和实验诊断。
前者主要依据病史和体症，虽有一定参考价值，但往往缺乏足够的依据，不易和其他疾病相区别，难以确诊病人。
因此，必须依赖实验诊断，实验诊断可分为病原学诊断、免疫学诊断及其他辅助诊断方法。
一、病原学诊断研究进展（一）病原学诊断的地位传统的病原学检查方法，有粪检和直肠镜检。
尼龙绢集卵法、水洗沉淀法及改良加藤氏法等粪检方法，依然是基层疫区常用并首选的诊断方法。
粪检或无治疗史者直检，为确诊血吸虫病人的最好依据。
只要在受检者粪便中或未经治疗的患者活体组织内发现了血吸虫卵，即可确诊为血吸虫病人，是确定感染的最直接、最可靠的指标。
自从1903年Kasai氏首次在病人粪便中找到血吸虫卵以来，粪便检查一直是确诊血吸虫病和考核疗效常用的方法。
粪便检查主要包括两大内容即检查虫卵和孵化毛蚴两种方法。
检查虫卵：尼龙筛集卵法、沉淀法、透明法、改良加藤氏法；毛蚴孵化法：三角烧瓶法、塑料杯顶管法。
由于新中国成立以来，党和政府高度重视血吸虫病的防治工作，我国血防取得举世瞩目的成绩，无论是从病人的感染率或是感染度方面都显著下降，病人粪便中虫卵数大大减少，同其他检查方法比较，粪检的阳性率较低，漏诊多，因而改进粪检方法，提高粪检质量就一直是查病工作中的一个重要课题。
事实上，粪检方法随着血防工作形势的发展，一直在不断的改进和提高，大量的现场查病工作也积累了丰富的经验。
此外，血吸虫并非肠道内寄生虫，故非所有的虫卵都能随便排出，在粪便中查到的虫卵仅占雌虫产卵数的16%。
在成虫排卵前期或者是非排卵期，就缺乏诊断价值，粪检也就失去了意义。
而在发病后期，肠壁组织纤维增生，肠壁增厚，虫卵不易穿透肠壁而造成粪便中虫卵数减少，粪检时不易获得阳性结果而导致漏检。
一组用于日本血吸虫病诊断的多肽组合物的初步研究刘宇【摘要】为了建立一种快速简便可用于日本血吸虫病抗体检测的磁珠多肤组合物-ELISA免疫诊断方法.利用蛋白质组学和生物信息学方法筛选日本血吸虫卵可溶性抗原和成虫抗原肤,制备磁珠多肽组合物结合ELISA进行血吸虫病诊断.实验表明,用磁珠多肤组合物-ELISA法诊断急性血吸虫病26例,慢性血吸虫病32例,敏感性分别为96.15%和93.75%;检测肝吸虫病12例,肺吸虫病15例,均为阴性.该方法具有较高的特异性和敏感性,是一种具有开发前景的血吸虫诊断方法.【期刊名称】《湖南理工学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(023)003【总页数】3页(P60-62)【关键词】磁珠多肤组合物;血吸虫病;免疫诊断【作者】刘宇【作者单位】湖南理工学院化学,化工学院,湖南,岳阳,414006【正文语种】中文【中图分类】R383.2+4日本血吸虫病是我国重点防控的寄生虫病之一. 在血吸虫病的防治中, 准确、及时、快速的诊断是进行有效防治的关键[1]. 病原学的诊断是血吸虫病诊断的确诊依据.但病原学诊断费时费力, 在群众中依从性差[2], 故在现实的诊断中, 一般将免疫诊断作为辅助诊断手段. 而目前免疫诊断主要采用血吸虫虫卵可溶性抗原作为检测抗原[3]. 但虫卵可溶性抗原的制备具有不均一性以及和其它寄生虫并交叉反应等问题.本研究从血吸虫虫卵和成虫可溶性抗原出发, 运用生物质谱技术鉴定虫卵可溶性抗原, 并对鉴定抗原进行生物信息学分析, 筛选日本血吸虫特有抗原序列进行多肽合成, 运用合成多肽作为检测抗原进行血吸虫病诊断, 获得高检测敏感性, 无交叉反应的检测方法.1.1.1 血清日本血吸虫虫卵(由湖南省血吸虫病防治所提供), 急性血吸虫病血清26, 慢性血吸虫病血清32份, 肝吸虫病血清12份, 肺吸虫病血清15份(由湖南省血吸虫病防治所提供), 健康人血清60份, 感染日本血吸虫小鼠血清50份, 正常小鼠血清50份.1.1.2 动物新西兰兔, 小鼠由中南大学实验动物中心提供.1.1.3 日本血吸虫感染阳性钉螺由湖南省血吸虫病防治研究所提供.1.1.4 主要试剂HRP-Protein A进口分装, TMB由上海华美生物工程公司提供, 磁珠和磁力架由长春博得生物工程有限公司提供, 丙烯酰胺, 双丙烯酰胺, 过硫酸铵为进口分装, TEMED由上海华美生物工程公司提供.1.2.1 日本血吸虫虫卵和成虫可溶性抗原收集成年新西兰兔10只, 用常规方法感染, 每只感染1000条日本血吸虫尾蚴, 于35天后处死白兔, 收集血清, 用Protein A agarose纯化抗体; 解剖取肝脏, 低速匀浆, 260目过滤, 收集虫卵; 取纯化虫卵0.2克,研磨, 生理盐水提取可溶性抗原, 冲洗门静脉, 收集成虫, 液氮研磨, 提取可溶性抗原, 将虫卵可溶性抗原和成虫可溶性抗原混合.1.2.2 可溶性抗原免疫亲和纯化纯化的抗体用PBS透析, 将纯化抗体固定到磁珠制备成免疫磁珠, 将免疫磁珠和可溶性抗原杂交, 收集沉淀, 洗脱, 收集抗原, 加上样缓冲液变性, SDS-PAGE分离. 1.2.3 可溶性抗原鉴定SDS-PAGE分离可溶性抗原蛋白条带切取, 洗涤脱色, Trypsin胶内酶解37℃酶解过夜, 回收酶解产物, ESI-MS/MS鉴定酶解产物, 数据库扫描, 确定抗原信息.1.2.4 抗原生物信息学分析选取坚定的抗原在生物信息学软件DNAstar上进行抗原分析, 选取高免疫原性抗原片段进行blastp分析, 选取高特异性抗原片段.1.2.5 抗原片段合成生物信息学分析获得的高免疫原性、高特异性抗原片段采用Fmoc法进行多肽固相合成, 合成的多肽片段用RP-HPLC纯化, MALDI-TOF鉴定, 确定合成多肽正确.1.2.6 单个多肽片段ELISA分析氨基磁珠500μL, 磁力作用下去上清, 加入5%的戊二醛溶液醛化1h,磁力作用下去上清, 洗涤磁珠; 取50mg合成多肽溶解在1000μL 0.01mol/L的PBS溶液中,pH7.4, 偶联1 h, 磁力作用下去上清, 洗涤3次;相同作用条件下取1%的BSA封闭1 h, 磁力作用下去上清, 洗涤3次, 即为磁珠多肽. 取血吸虫阳性兔血清标本20份, 阴性兔血清标本20份进行磁珠多肽评价, 取磁珠多肽10 μL, 磁力作用5min下去上清, 加50μL血清样品, 37℃温育30min, 磁力作用5min下去上清, 洗涤3次, 加入HRP-Protein A工作液50μL, 轻轻混匀, 37℃温育30min, 磁力作用下去上清, 加入50μL底物显色液, 37℃温育15 min, 加入150μL反应终止液, 磁力作用下10 min取上清, 酶标仪上测定OD值.1.2.7 磁珠多肽组合物-ELISA分析氨基磁珠5000μL, 磁力作用下去上清, 加入5%的戊二醛溶液醛化1h, 磁力作用下去上清, 洗涤磁珠; 取500mg按等质量比混合的合成多肽混合物溶解在1000μL0.01mol/L的PBS溶液中, pH7.4, 偶联1h, 磁力作用下去上清, 洗涤3次; 相同作用条件下取1%的BSA封闭1h, 磁力作用下去上清, 洗涤3次, 即为磁珠多肽组合物. 取血吸虫病急性患者血清26份, 慢性患者血清32份, 肝吸虫病患者血清12份, 肺吸虫病患者血清15份, 健康人血清60份, 进行ELISA分析, 分析方法同上.纯化的感染日本血吸虫阳性血清偶联至磁珠后与日本血吸虫虫卵和成虫可溶性抗原免疫亲和纯化, SDS-PAGE分离, 结果如图所示. 可溶性抗原免疫亲和纯化, SDS-PAGE分离, 酶解后进行数据库扫描, 获得结果见表1.虫卵可溶性蛋白经生物信息学分析获得抗原肽经固相多肽合成, RP-HPLC纯化, MALDI-TOF分析, 证实合成正确, 偶联至磁珠进行单个多肽磁珠-ELISA分析, 确定4个肽可用于进行ELISA分析, 20份阳性兔血清全部为阳性, 20份兔阴性血清全部为阴性, 说明4个多肽可用于进行血吸虫病检测, 将多肽组合物制备成磁珠多肽组合物进行ELISA检测, 检测结果见表2.检测血吸虫病病人血清中特异性抗体的方法是血吸虫病检测开展最早、使用最广泛的检测方法, 也是目前实验室研究最多的方法. 开展血吸虫病特异性抗体的检测, 主要是特异性抗原的制备. 目前市场上使用最多的是血吸虫虫卵可溶性抗原,用虫卵抗原作为俘获抗原, 敏感性高, 但特异性不强. 现在各实验室主要寻找特异性抗原并进行分子生物学表达来获得俘获抗原, 然而重组抗原难于获得高纯度抗原, 从而导致重组抗原在免疫分析时特异性较差[4]. 至今尚未找到一种既有高特异性和敏感性, 又容易表达获得的分子. 本实验运用蛋白质组学方法分析血吸虫虫卵和成虫抗原, 并对获得的抗原进行生物信息学分析, 获得多条具有高特异性和高免疫原性多肽片段, 并通过实验筛选获得可以作为俘获抗原的多肽组合物, 结合免疫磁珠技术, 获得的磁珠多肽组合物-ELISA方法完全可以进行血吸虫病检测.【相关文献】[1] 曾小军, 陈红根, 袁建华, 等. 快速胶体金免疫层析法的建立及其对血吸虫病的诊断效果[J]. 中国血吸虫病防治杂志, 2005, 17(1): 24～27[2] 沈健. 虫卵组分抗原ELISA诊断血吸虫病的临床价值[J]. 中国血吸虫病防治杂志, 2000,12(6):371～373[3] 朱明东, 洪玲娣, 卓敏敏, 等. 日本血吸虫虫卵分离方法的改进[J]. 中国血吸虫病防治杂志, 1998,10(3):170～171[4] Ham ilton JV, KlinertM , DoenhoffMJ. Diagnosis of schistosomiasis: antibody detection, with notes on parasitological and antigen detection methods [J]. Parasito logy, 1998, 117( supp l) : 41257。
血吸虫病诊断方法及研究进展血吸虫病是一种由吸虫寄生引起的人畜共患病，病原体是血吸虫。
其主要症状包括腹痛、腹泻、黄疸、肝脾大等，严重者可引起肝硬化、门静脉高压等并发症，严重影响人体健康。
因此，及早准确地诊断血吸虫病是预防和治疗该病的重要环节。
目前，血吸虫病的诊断主要依靠临床症状、实验室检测和影像学检查等手段。
临床症状：该病的临床表现较为典型，常见症状有腹痛、腹泻、贫血、肝脾大、皮肤瘙痒等。
医生可通过仔细询问病史和症状，结合体格检查对血吸虫病进行初步诊断。
实验室检测：主要包括粪便孵化法、血清学检测和分子生物学检测等。
粪便孵化法是目前常用的一种方法，其原理是将患者的粪便样本放置在一定时间内，观察是否存在血吸虫囊蚴。
血清学检测是通过检测患者血液中的抗原、抗体等来确定是否感染血吸虫。
分子生物学检测则是通过检测患者血液、粪便或尿液中的血吸虫DNA或RNA来确定感染状况。
影像学检查：主要包括超声检查和CT扫描等。
超声检查可以观察到肝脾、肝静脉、门静脉等器官的异常和病变情况，有助于判断血吸虫病的严重程度。
CT扫描可以更加清晰地观察到肝脾、肝静脉和门静脉的异常情况，对血吸虫病的诊断和临床管理具有重要作用。
除了上述常规诊断方法外，近年来的研究进展为血吸虫病的诊断提供了新的思路和技术手段。
基于体外诊断：研究人员通过检测患者血液或尿液中特定蛋白质或代谢产物的变化来诊断血吸虫病。
例如，检测患者尿液中特定血吸虫蛋白质的存在可以用于早期诊断血吸虫病。
此外，还有研究报道使用代谢组学技术，通过检测患者血液和尿液中的小分子代谢产物来诊断血吸虫病。
分子诊断：随着分子生物学技术的不断进步，研究人员利用PCR、实时荧光PCR、Next-generation sequencing等技术，可以在短时间内，高灵敏度和特异性地检测出血吸虫的DNA或RNA，从而进行血吸虫病的早期诊断和分类。
免疫诊断：近年来的研究表明，血吸虫特异性抗原或抗体可以用于血吸虫病的诊断。
血吸虫免疫学诊断方法
血吸虫病是一种由血吸虫寄生人体引起的疾病，主要分布在发展中国家的某些地区。
血吸虫的感染可引起严重的健康问题，如贫血、脏器损害和智力障碍等。
因此，及早诊断和治疗对于防止这种病的传播至关重要。
免疫学诊断方法是目前诊断血吸虫病的主要方法之一。
这些方法利用人体产生的免疫反应来检测感染血吸虫的存在。
常用的免疫学诊断方法包括：
1. 血清学检测：通过检测感染者血清中的抗体水平来诊断血吸虫病。
这种方法比较简单且成本较低，但存在一定的误诊率。
2. 抗原检测：通过检测血液、尿液或粪便样品中的血吸虫抗原来诊断血吸虫病。
这种方法比血清学检测更为准确，但也存在一定误诊率。
3. 细胞学检测：通过检测患者的血液、骨髓或淋巴结等样品中的寄生虫形态来诊断血吸虫病。
这种方法操作复杂且成本较高，但可以提供更为准确的诊断结果。
需要注意的是，不同地区的血吸虫免疫学诊断方法可能存在一定的差异，因此在进行检测时建议遵循当地的诊断指南。
同时，对于那些疑似感染血吸虫但免疫学诊断结果不确定的患者，采用多种诊断方法进行综合判断是非常必要的。
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免疫学方法联合检测血吸虫病的初步研究[摘要] 目的了解血吸虫病血清学检测方法的联合应用的效果，为制定防治对策提供科学依据。
方法选择46例慢性血吸虫病患者及42例健康人作为研究对象，采用间接血凝法（IHA）、金标渗滤法（DIGFA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测其抗原和抗体，了解3种方法的敏感性与特异性，以及3种方法不同组合的检出阳性差别。
结果IHA抗体检测敏感性为76.09%，特异性为95.24%；DIGFA抗体检测敏感性为69.57%，特异性为97.62%；ELISA循环抗原检测敏感性为32.61%，特异性为92.86%；任意2种方法阳性联合判定总的敏感性为65.22%，特异性为97.62%；3种方法同时阳性联合判定的敏感性为23.91%，特异性为100%。
结论血吸虫病血清学检测循环抗原敏感性和特异性较差；任意2种方法联合阳性判定总的敏感性与特异性与单独IHA、DIGFA相似，无实际意义；检测抗体的IHA、DIGFA和检测循环抗原的ELISA 3种方法联合阳性判定的敏感性与循环抗原ELISA相似，但特异性高，似与病原学诊断有相仿的意义，可在流行病学调查研究中结合运用。
自20世纪80年代以来，血吸虫病免疫诊断已逐渐整合到我国防治规划和防治工作中，对我国取得的血吸虫病防治进展，起了非常重要的作用[ 1]，但检测抗体的各种免疫学方法在现场应用的结果大多都显示假阳性较高[ 2]，而检测抗原的方法又因为免疫复合物在体内的变化大多敏感性和特异性较差，因此用检测抗原与抗体的方法对同一血清样品进行联合检测，以达到降低假阳性，提高特异性的目的，同时对宝贵的血清资源进行充分利用，以期得到更多的流行病学信息，为此，设计了下列试验。
1.材料与方法1.1试剂盒的选择选择目前现场应用最多最为成熟经典抗体法IHA（日本血吸虫抗体检测试剂盒，安徽安吉医药有限公司生产，批号20090420）、现场应用较为方便的金标渗滤法DIGFA（日本裂体吸虫Ab测试盒，深圳康百德生物科技有限公司生产，批号20100807）以及有疗效考核价值的循环抗原免疫酶法ELISA（血吸虫循环抗原（scAg）测定试剂盒，四川迈克生物科技股份有限公司生产，批号0810091）作为试验研究的组合方法。
1.2样本量的估计3种试剂盒的报道灵敏度和特异度均在90%以上[3-5]，故评价的所需样本量为40以上。
1.3分组选择病原学确诊的46名慢性血吸虫病患者为研究对象，采集治疗前血清；选择42名某单位职工（主要为临床后勤人员）体检时健康血清，排除血吸虫病感染史，且B超显示无血吸虫性肝损伤的作为对照。
病例平均年龄39.5岁（最大63岁，最小16岁），对照平均年龄36岁（最大60，最小25），经检验年龄分布差异无统计学意义（t=0.66，P>0.05）,病例与对照基本齐同。
1.4实验过程于2010-08开始实验，对采集的慢性血吸虫病患者血清及健康人血清样本重新编号，双盲法进行实验，详细操作方法均按试剂盒的说明书进行。
IHA以血清稀释度1：10作为本试剂盒的阳性参考值，被测血清阳性反应稀释度≥1：10判为阳性。
DIGFA以反应板中央出现“+”字红线为阳性。
ELISA采用酶标仪读取OD450nm 值，Cutoff值=0.12+阴性对照OD450nm均值，样本OD450nm≥Cutoff值为阳性。
1.5联合判定方式试验结果判定按试剂盒要求，每个样本可用3种方法检测出现3种结果，以出现2项以上阳性为阳性判定,即任意2种阳性为二联，3种方法同为阳性为三联，见表1。
2结果2.1联合判定与3种方法的检出效果比较试验结果表明IHA敏感度为76.09%，特异度为95.24%；DIGFA敏感度为69.57%，特异度为97.62%；ELISA敏感度为32.61%，特异度为92.86%；以IHA联合DIGFA共同阳性敏感度为60.87%，特异度为97.61；以IHA联合ELISA共同阳性敏感度为26.09%，特异度为100%；以DIGFA联合ELISA共同阳性敏感度为26.09%，特异度为100%；以出现两种阳性就作为阳性总的二联判断的敏感性为65.22%，特异度为97.62%；以3种方法同为阳性作为阳性的三联判断的敏感性为23.91%，特异度为100%，见表2。
2.2 联合判定与3种方法的一致性（符合度、相关性）及差异性分析用双阳联合判定的结果分别与3种方法相关性及差异性的分析，结果表明，双阳联合判定与3种方法均相关（χ2=16.95，P<0.01；χ2=26.35，P<0.01；χ2=4.51，P<0.01），与IHA、DIGFA的检出阳性没有区别（χ2=2.28；P>0.05；χ2=0.25，P>0.05），但与ELISA的检出阳性有区别（χ2=11.84，P<0.01），见表3。
用三阳联合判定的结果分别与3种方法相关性及差异性的分析，结果表明，三阳联合判定与3种方法均相关（χ2=5.82，P<0.01；χ2=4.57，P<0.05；χ2=25.98，P<0.01），与IHA、DIGFA的检出阳性有区别（χ2=17.05；P<0.01；χ2=19.05，P<0.01；），但与ELISA的检出阳性没有区别（χ2=2.25，P>0.05），见表4。
3 讨论血吸虫病免疫诊断方法具有较高的敏感性和特异性以及疫区群众的依从性较高等优点, 已为广大专业人员和疫区群众所接受, 并在对疫区化疗对象的大规模筛查和血清流行病学调查以及防治效果的评价等方面起到了极为重要的作用[1]。
经典的抗体检测方法敏感性和特异性尚好，但有效治疗后，感染者血清中的抗体可以长期存在，无法区分既往感染和现症感染，难以用抗体检测的一项指标判定当地血吸虫病的流行率。
且用单一的抗体检测指标确定化疗对象，势必造成大量治疗病人反复用药，增加社会经济负担，浪费医疗资源，也可能潜在的造成吡喹酮的耐药性。
国内对联合检测的研究不多，在血吸虫病诊断方面管晓虹[6]首先提出这个思想,谢红歌[7]等曾经使用3种免疫学方法联合诊断结核病，证实联合检测同时阳性比单独法检测低或相当，但特异性提高了。
余轶婧[8] 等曾尝试过循环抗原及血清抗体的联合检测诊断日本血吸虫病两项的联合，证实在检测粪检阳性血吸虫患者血清中, 循环抗原和血清抗体检测均存在漏检，因此采用联合检测具有互补价值。
谢朝梅[9] 、陈军虎[3]等曾做过3种血清学方法在血吸虫病重度流行区的检测效果比较，但多为平行检测等，蒋斌[10]等也曾做过联合检测，但仅是两种抗体检测的联合。
何伟[11] 也做过这方面的研究，证实在山丘型流行区粪检方法尤其是Kato-Katz 法漏检率较高，以其作为评价免疫诊断方法的标准似不合适。
而以DD IA、EL ISA 和CO PT 法检测同为阳性并且从未用过抗血吸虫药物者作为阳性者, 以3 法检测结果同为阴性者作为阴性者。
提出了3种同为阳性的联合判定方式，但他们所选择的3种均为检测抗体的方法，故设计了以循环抗原检测结合抗体检测的设计思路，在现有技术尚不能提高循环抗原敏感性的状态下，是否能先提高特异性作为短期目标，设想是在不增加现场查病的工作量的前提下，充分利用采集的血清样本，以及充分利用目前建立参比实验室条件，能够更准确的锁定化疗对象，提供有力的化疗依据，达到合理利用化疗药物，提高群众查病的依从性，有效锁定目标人群的目的，故试用了联合检测的方法。
联合检测, 理论上可提高检测的灵敏性或特异性, 增加检测结果的可行度。
根据概率的乘法原理，并联一般可提高灵敏度，串联可提高特异度，以诊断心肌梗死的3种酶CPK,SGOT,LDH 为例，其灵敏度分别为：96%，91%和78%；特异度分别为：57%，74%和91%。
没有一种是很特异的，如单独使用其中一种试验，则许多人将被误诊为心肌梗死。
如采用系列试验，即当3种酶测定都显示阳性才诊断为心肌梗死，此时灵敏度为68%，但特异度为99%，减少了误诊的机会[12]。
由此设计了血吸虫病的3项血清学检测技术的联合检测，采用2种抗体检测结合1种循环抗原检测的串联方法，在国内尚属首次，对联合判定的结果与各项单独判定的结果进行了统计学分析。
该研究发现，IHA及及金标的敏感性及特异性均没有研究人员及其他研究报告的高，由于病例数太少具体原因仍有待进一步分析。
而循环抗原ELISA检测试剂盒的敏感度和特异度均确实较差，敏感性仅32.61%，特异性仅92.86%，约登指数仅0.25，与常规试剂盒要求0.6的相差甚远，故达不到现场应用的要求，尤是特异度仅92.86%，即假阳性有7.2%左右，高于一般试剂盒要求的5%以下，故单独应用循环抗原试剂盒进行现场调查是不恰当的。
但若以循环抗原结果两项循环抗体同时进行联合判定，则特异性可达到100%，理论上可等同与粪检的特异性。
而以IHA、DIGFA分别结合ELISA联合检测的特异度也可达到100%，但考虑到单独3个方法均有假阳性存在，且IHA联合DIGFA的检测也存在假阳性，故认为抗体结合抗原的二联检测方法在现场工作中可以结合应用并加以验证。
经配对卡方检验，以双阳判定联立检测总检出阳性的结果与常规的IHA和DIGFA差不多，与IHA和DIGFA和ELISA均相关(χ2=16.95 P<0.01，χ2=26.35 P<0.01，χ2=4.51 ，P<0.05，)，但检出的阳性率和特异性与IHA和DIGFA没有统计学差别(χ2=2.28 P>0.05，χ2=0.25 P>0.05)，而与循环抗原ELISA检测有差别(χ2=11.84 P<0.01)，故若以3种方法联合检测但以双阳作为阳性判定似乎没有多大意义，若以三阳判定，检验结果仍与3种方法相关（χ2=5.82，P<0.01, χ2=4.57, P<0.05, χ2=25.98, P<0.01）,但检出阳性与IHA和DIGFA有区别（χ2=17.05，，P<0.01, χ2=19.05, P<0.05, ）但与循环抗原ELISA没有区别（χ2=2.25, P>0.05），检验效率与循环抗原相似，虽灵敏度低于各个单独的方法，但特异性可达100%，这是目前没有一种免疫学方法可以达到的。
王显红[13]等采用贝叶斯（Bayes）统计方法，利用2005年云南省洱源县现场调查资料，对2种方法（ELISA 和Kato-Katz）在流行区和非流行区的检测效果分别进行了评价：在流行区，ELISA 灵敏度较高（0．913，中位数，下同）而特异度较低（0．584），Kato－Katz 法灵敏度低（0．148）而特异度很高（0．994）。
