值=阴性对照平均OD值×2.1 结果判断:待测样品孔OD值大于或等于判断值为阳性;
小于判断值为阴性。 注:阴性对照OD值小于0.05按0.05计算,
大于0.05按实际OD值计算判断值。
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注意事项:
1. 试剂及待测标本使用前应平衡至室温,并将试剂混匀, 弃去1~2滴垂直滴加;
2. 严格按照操作程序依次加样,以保证实验结果准确性; 3. 应尽量避免孔中有气泡,以免所测得OD值不准确。
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思考题:
1.免疫标记技术有哪些?各有何特点?。 2.ELISA操作过程中应注意哪些问题?
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2009级医疗专科复习题
一、名词解释2.5*8,共20分
免疫、抗原、抗原决定基(表位)、异嗜性抗原、白细胞分 化抗原、TD-Ag、 TI-Ag、抗体、免疫球蛋白、单(多)克 隆抗体、补体、经典途径、旁路途径、细胞因子、IL、IFN、 CSF、TNF、MHC、MHC限制性、TCR、BCR、模式识别 受体(PRR)、抗原提呈细胞( APC)、适应性免疫应答、 免疫耐受、免疫调节、超敏反应、人工主动免疫、人工被动 免疫、计划免疫 注:红色标记为要求掌握英文
实验原理:
酶联免疫吸附试验(ELISA)是将抗原、抗体的特异性反应与酶对底 物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术,可用于检测体 液中微量的特异性抗体或抗原。首先,抗原、抗体的特异性反应在一种 固相载体表面-聚苯乙烯微量反应板孔中进行,通过洗涤去除多余的游 离反应物;然后加入酶标记的抗体或酶标记的抗抗体,从而形成抗体- 抗原-酶标抗体复合物(双抗体夹心法)或抗原-抗体-抗抗体复合物 (间接法);此时加入酶底物和显色剂,在酶催化底物后,液体呈现显 色反应。液体显色的强弱与复合物中待测抗原或抗体的量呈正比,借此 可检测待测抗原或抗体的有无及含量。