胶体金试纸条检测技术
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胶体金试纸条半定量的原理胶体金试纸条是一种半定量的检测工具,它通过特殊的反应机制检测到目标物质的存在而实现定量化。
该试纸条主要由胶体金颗粒和特定的前体分子构成。
胶体金颗粒作为试纸条的核心组成部分,具有很高的表面活性和生物相容性。
这种颗粒的尺寸约为20到50纳米,具有很好的光学性质。
它们吸收和散射光线的能力非常强,所以在水溶液中能够造成很强的表面等离子共振效应。
当胶体金颗粒受到环境信号激发时,形成的电场会产生强烈的局部热效应和极化效应,从而引起表面等离子共振的出现。
这种表面等离子共振现象能够改变胶体金颜色的强度和色调。
胶体金颜色的变化是胶体金试纸条半定量原理的基础。
当前体分子接触到胶体金颗粒时,它们会与胶体金颗粒表面上的裸露离子成键。
这些前体分子能够在水中游离和沉淀,其浓度随环境信号的增加而变化。
当前体分子沉积在接触面上时,胶体金颜色的强度和色调就会相应发生变化。
胶体金试纸条的半定量原理也利用了金纳米粒子表面修饰的性质。
金纳米粒子表面修饰能够改变金纳米粒子的SERS特性,从而实现目标物质的检测。
这种修饰的方法包括吸附、共价键合、离子交换等。
胶体金试纸条的半定量原理还利用了金纳米粒子表面积的大小和相对稳态。
这些属性能够影响金纳米颗粒和前体分子之间的化学反应。
通过测量目标物质与金纳米颗粒之间的交互作用,就能够获得目标物质的数量信息。
总之,胶体金试纸条的半定量原理是通过利用胶体金颗粒、特定前体分子、金纳米颗粒表面修饰的特性,并结合虚函数的原理,使很低浓度的样品向成常见的视检品的化合物浓度转化。
这种检测方法广泛应用于生物医学、环境监测和食品安全检测等领域。
胶体金层析法
胶体金层析法(Colloidal Gold Lateral Flow Assay)是一种常见的免疫层析检测技术,也被称为“快速测试纸条”或“快速诊断试纸条”。
这种技术被广泛用于医学诊断、食品安全检测、环境监测等领域。
下面是胶体金层析法的基本原理和步骤:
原理:
1.抗原-抗体反应:根据抗原和抗体之间的特异性结合原理,将被检测的分
子(如蛋白质、病毒抗原等)与特异性抗体结合。
2.胶体金标记:抗体或抗原被标记上胶体金颗粒,使其呈现颜色。
3.层析效应:在试纸条上形成的吸附带将试剂中的标记复合物隔离出来,
通过毛细管作用,使其沿着试纸条上的纵向扩散。
步骤:
1.取得待检样本(如血液、尿液、食品提取物等)。
2.将待检样本加入试剂盒中,与试剂中的抗体或抗原相结合。
3.混合物通过毛细管效应在试纸条上扩散。
4.当待检样本中存在目标分子时,会与试纸条上的抗体或抗原结合,形成可
见的标记复合物。
5.标记复合物在试纸条上的特定区域显示出色带,从而进行目标物的定性或
半定量检测。
这种技术具有简单、快速、便携、成本低等优点,在诊断和快速检测中应用广泛。
例如,它被用于临床诊断、药物滥用检测、感染病原体检测(如流感、艾滋病毒等)以及食品安全检测等领域。
绒毛膜促性腺激素(HCG)胶体金试纸条诊断实验摘要:目的:掌握胶体金试纸条诊断技术的原理,使用方法及结果的判定;掌握绒毛膜促性腺激素(HCG)胶体金试剂盒的制作技术。
胶体金是氯金酸(HAuC14)的水溶胶,利用HAuCl4在还原剂(柠檬酸钠)的作用下,聚合成特定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,故称胶体金。
本实验所用到的双抗夹心法是胶体金检测平台最常用的检测方法,主要用于检测比较大的生物分子及颗粒性抗原。
关键词:胶体金绒毛膜促性腺激素(HCG)免疫金胶体金试剂盒双抗夹心法绒毛膜促性腺激素(HCG)是胎盘合体滋养层细胞所分泌的一种糖蛋白激素,胎盘绒毛膜的合体滋养层产生。
其主要功能就是刺激黄体,有利于雌激素和黄体酮持续分泌,以促进子宫蜕膜的形成,使胎盘生长成熟。
HCG结构中包括α、β两个亚基,α-亚单位为垂体前叶激素所共有,β链为其独有,β亚基被用来制备特异性抗体测定血中的HCG,专用名为β-HCG。
胶体金快速诊断技术具有简捷快速,结果易于判定,特异性好等特点。
该技术操作简单,一般只要5-10min 就会出结果,阴、阳性呈色很明显,肉眼很容易判断。
该技术大多用单克隆抗体标记,具有很好的特异性。
胶体金试纸条诊断是采用胶体金免疫层析技术研制而成,该技术是90年代初在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术,最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等检测。
双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体,一个抗体用胶体金标记并固定在结合垫上,另一个抗体固定在NC膜的检测线(T线)上。
另外,还需要准备能与金标抗体(即胶体金标记抗体)特异结合的二抗并固定于NC膜的控制线(C线)上。
1.仪器和材料1.1可编程切条机切条机是将试纸板快速切割成一定宽度的单份试纸,适合各类不同规格试纸的研发与生产。
其最大的特点是一根一根切下来,可以随时终止并更改宽度。
胶体金试纸条:竞争抑制法与夹心法实验过程详解1.胶体金试剂条竞争抑制法加样品时反应过程胶体金试纸条检测多抗原决定簇的抗原通常采用夹心法原理建立免疫胶体金试纸条。
如果检测小分子半抗原时,采用常规的夹心法原理就无法建立,通常采用竞争抑制法。
以下是竞争抑制法原理建立的免疫胶体金试纸条的工作过程:A. 胶体金试剂条,紫色区域为抗体与胶体金复合物吸附的胶体金垫。
B. 在样品垫处加样,样品中的抗原就会向胶体金垫处移动(扩散)下图为胶体金垫中的胶体金吸附有抗体(示意图)样品中的抗原或半抗原就会与吸附有抗体的胶体金(免疫胶体金)结合,夹心法胶体金试纸条中,胶体金中吸附的针对某一种抗原决定簇的抗体(Ab1),免疫胶体金为Ab1吸附到胶体金上,即Ab1-Au ,由于胶体金为红紫色,故而肉眼可见紫红色物质吸附至胶体垫。
在竞争抑制法胶体金试纸条中,T 线事先已经吸附着半抗原与另外一个载体蛋白复合物(与免疫所用的载体蛋白不同),由于该 复合物是无色的,当样品中没有半抗原时,NC 膜上T 线就会与胶体金上的抗体结合,从而显示红紫色的,当遇上样品半抗原,该 半抗原就会与吸附抗体的胶体金结合,形成半抗原:抗体1胶体金复合物,在T 线处的半抗原与载体的复合物,就无法再与Ab1-胶体金,再反应,形成复合物,由于胶体金是红紫色的,故而样品中有半抗原存在时,T 线就不会显示红 紫色。
如果样品中没有对映的抗原,则T 线就形成载体蛋白2-半抗原:抗体1-胶体金 复合物,从而显示红紫色。
上图中三角形代表半抗原左图为T 线中吸附的是半抗原-载体蛋白复合物捕获Ab1-胶体金复合物,从而在T 线显示红紫色条带。
其中的兰色方框表示载体蛋白,三角形表示半抗原,当吸附在胶体金上的抗体,没有结合半抗原时,就能结合到T 线上,反之,当吸附在胶体金上的抗体被半抗原结合后,就无法再与T 线上的半抗原-载体蛋白复合物结合。
注意,T 线上的载体蛋白是无色的,因而T 线没有结合胶体鑫时就是无色的,上述兰色方框,只是用来代表载体蛋白,并不表示载体蛋白是蓝色的。
竞争法(小分子物质检测)胶体金试纸原理-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述竞争法(小分子物质检测)胶体金试纸原理是一种基于胶体金试纸的检测方法,旨在通过竞争法测定样品中的小分子物质含量。
胶体金试纸是一种简单、快速、便携且经济的检测工具,广泛应用于各个领域。
竞争法是一种常见的定量分析方法,通过测定样品中小分子物质与特定抗体(或核酸探针)之间的竞争关系,来间接测定样品中小分子物质的含量。
胶体金试纸是竞争法中常用的检测平台。
它的工作原理基于胶体金颗粒的表面增强效应和颜色变化。
当胶体金颗粒与特定抗体结合形成复合物时,由于表面增强效应的存在,胶体金颗粒会呈现出明显的红色。
而当样品中的小分子物质存在时,它会竞争与特定抗体结合,导致胶体金颗粒与抗体的结合减弱,进而使试纸上的颜色变浅或消失。
小分子物质检测在许多领域具有重要意义。
在医学领域,小分子物质的检测可以用于疾病的诊断和治疗监测。
例如,血液中的可溶性肿瘤标志物的检测可以帮助早期发现和监测肿瘤的进展情况。
在食品安全领域,小分子物质的检测可以用于检测食品中的有害物质残留,保障公众的饮食安全。
此外,小分子物质的检测还在环境监测、化工工业等领域具有广泛应用。
本文旨在探讨竞争法(小分子物质检测)胶体金试纸原理及其在各个领域中的应用前景。
首先,我们将介绍胶体金试纸的基本原理,包括胶体金颗粒的制备、特定抗体的修饰和胶体金试纸的构建。
然后,我们将阐述小分子物质检测在不同领域的重要性,并重点讨论其在医学和食品安全领域的应用案例。
最后,我们将展望胶体金试纸在竞争法中的潜在应用前景,并提出未来发展的方向。
通过研究竞争法(小分子物质检测)胶体金试纸原理及其应用,我们可以更好地了解这种检测方法在不同领域的潜力,为其在实际应用中的推广提供理论依据和科学支持。
同时,我们也可以进一步探索和提出更加高效、灵敏和可靠的小分子物质检测技术,为人们的生活带来更多便利和安全。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以如下所示:1.2 文章结构本文将按照以下结构进行讨论和分析:第一部分,引言。
胶体金试纸条原理胶体金试纸条(Colloidal Gold Test Strip)是一种简单、快速、准确的免疫学检测方法,广泛应用于生物医学研究、医学诊断、环境监测、食品安全等领域。
本文主要介绍胶体金试纸条的原理、制备及应用。
一、原理胶体金试纸条原理是基于金纳米颗粒与抗原或抗体的特异性结合作用。
金纳米颗粒在特定条件下呈现紫红色,具有很强的表面等离子体共振吸收波长。
当金纳米颗粒与特异抗原或抗体结合时,其颜色由紫红色变为红色或蓝色,颜色的变化与特异性结合反应形成的复合物的形态、数量有关,可以通过肉眼直接观察到。
二、制备制备胶体金试纸条需要先制备金纳米颗粒溶液,然后将其涂在滤纸或其他纸张上,并固定相应的抗原或抗体作为检测指针。
具体步骤如下:1. 制备金纳米颗粒溶液制备金纳米颗粒溶液的方法有多种,其中较为简单的方法是还原法。
将1 mL的氯金酸钠(10 mM)加入50 mL的去离子水中,搅拌均匀。
将10 mL的氢氟酸(1 mM)加入到氯金酸钠溶液中,并在室温下搅拌1分钟。
加入150 µL的氢氨水(10 mM),搅拌后黄色溶液转变为红紫色,表示金纳米颗粒合成成功。
2. 准备检测纸条将金纳米颗粒溶液用滴管或其他方法均匀地涂在滤纸或其他纸张上,并干燥20分钟。
随后,用荧光素偶联抗体或其他特异性指示剂涂抹到纸条上作为检测指针。
三、应用胶体金试纸条可以用于检测各种生物分子,例如细菌、病毒、抗体、癌细胞、DNA、RNA等,以及药物和毒性物质。
其应用领域包括:1. 生物医学研究胶体金试纸条可以用于研究基因检测、蛋白质检测、药物筛选等领域。
2. 医学诊断胶体金试纸条可以用于一些快速筛查、诊断疾病的场合,比如检测患者的生物样本中是否有某种病原菌,或者病人是否感染某种病毒等。
3. 环境监测胶体金试纸条可以用于监测环境中的各种有害物质,如重金属、农药、酸雨等。
4. 食品安全胶体金试纸条可以检测食品中添加的国家规定禁止使用的物质,如兽药、农药等。
胶体金免疫层析试纸条原理胶体金免疫层析试纸条(Colloidal Gold Immunochromatographic Strip)是一种通过胶体金纳米颗粒与抗体互作用检测特定生物标志物的生物分析方法。
胶体金免疫层析试纸条是一种基于抗体与抗原特异性结合的快速检测试剂,具有简单、快速、灵敏、特异性和便携等优点。
胶体金免疫层析试纸条的原理是利用胶体金纳米颗粒的特性与生物分子相互作用,完成快速检测分析。
试剂条通常由三个部分组成:采样孔、检测膜和吸收纸。
其中检测膜是由贴在聚丙烯酸纤维膜上的抗体分子组成。
检测过程中,样品通常在采样孔处进入试剂条,并沿着检测膜滤过。
样品中的目标分子与膜上的抗体分子结合,并形成膜上的免疫复合物。
在此过程中,胶体金纳米颗粒被添加进样品中。
这些胶体金纳米颗粒上载有反向包被(reverse electrophoretic coating),使胶体金纳米颗粒呈负电荷状态,防止颗粒之间发生不可逆聚集作用。
在测试区和控制区之间的吸收纸层包括了大量的胶体金纳米颗粒。
当测试完成时,样品和胶体金纳米颗粒将被移动到吸收纸层,并进一步与该层的各种化学试剂和物质反应。
控制区内的抗体分子能够与胶体金纳米颗粒发生特异性结合,从而产生红色的线条。
胶体金免疫层析试纸条是一种快速、可视化的生物分析方法,通过免疫反应,通过控制区和测试区之间可见免疫反应条带的形成,快速检测并定性或半定量特定生物标志物。
胶体金免疫层析试纸条的应用范围较广,主要应用于临床检测、环境监测和食品安全等领域。
在临床检测方面,胶体金免疫层析试纸条被广泛应用于诊断感染性疾病,如肺炎、流行性感冒、艾滋病和病毒性肝炎等。
胶体金免疫层析试纸条还可被用于检测肿瘤标志物。
在环境监测方面,胶体金免疫层析试纸条可被用于检测重金属、农药残留、水质监测和气体污染等。
在食品安全方面,胶体金免疫层析试纸条可被应用于检测食品中的防腐剂、色素、激素和有毒污染物等。
胶体金免疫层析试纸条具有多种优势。
胶体金试纸条原理
胶体金试纸条是一种常用于快速检测的生物化学试剂,其原理基于胶体金颗粒
的特性和生物分子的相互作用。
胶体金试纸条广泛应用于临床诊断、食品安全检测、环境监测等领域,具有快速、简便、灵敏度高等优点,因此备受青睐。
胶体金试纸条的原理主要包括胶体金颗粒的性质和生物分子的特异性识别。
首先,胶体金颗粒是一种纳米级的颗粒,具有良好的分散性和稳定性,呈现出红色或紫色的特征。
其表面具有丰富的活性基团,可以与生物分子发生特异性相互作用。
其次,生物分子如抗原、抗体、核酸等在特定条件下与胶体金颗粒发生特异性结合,形成复合物。
这种复合物具有特殊的光学性质,使得胶体金试纸条在特定波长下呈现出明显的颜色变化。
胶体金试纸条的使用过程相对简单,通常包括样品加载、试剂反应和结果读取
三个步骤。
首先,将待检样品加载到试纸条上,样品中的生物分子与试纸条上固定的生物分子结合,形成复合物。
其次,试纸条上的胶体金颗粒与复合物发生特异性作用,导致颜色的变化。
最后,通过肉眼或便携式读取设备观察试纸条的颜色变化,根据颜色深浅或出现的条纹数目判断样品中目标生物分子的含量或存在与否。
胶体金试纸条的原理基于胶体金颗粒的特性和生物分子的相互作用,其在生物
化学检测中具有广泛的应用前景。
随着纳米技术和生物技术的不断发展,胶体金试纸条将更加智能化、便携化,为人们的生活和健康保驾护航。
胶体金法试纸最低检测限测试方法近年来,胶体金法试纸在医学、生物学和环境领域得到了广泛的应用,其快速、灵敏的特点使其成为一种重要的检测手段。
然而,胶体金法试纸的最低检测限测试方法对于其准确性和可靠性至关重要。
本文将从深度和广度的角度探讨胶体金法试纸最低检测限测试方法,以便读者更全面地了解这一主题。
1. 胶体金法试纸的基本原理让我们简要回顾一下胶体金法试纸的基本原理。
胶体金法试纸是利用胶体金颗粒与特定生物分子或化学物质发生反应,在试纸上产生可见信号的一种快速检测方法。
其原理是基于胶体金颗粒在特定条件下的聚集现象,从而产生颜色变化或光学信号,用以表示被检测物质的存在或浓度。
2. 胶体金法试纸最低检测限的重要性胶体金法试纸的最低检测限是指能够准确检测出被测物质的最低浓度。
低检测限意味着试纸在较低浓度下仍能产生可靠的检测结果,这对于医学诊断、环境监测等领域具有重要意义。
确立准确、可靠的最低检测限测试方法对于胶体金法试纸的应用至关重要。
3. 最低检测限测试方法的步骤在进行胶体金法试纸最低检测限测试时,通常包括以下步骤:1) 准备标准溶液:首先需要准备一系列不同浓度的标准溶液,以确定被测物质的最低检测限。
2) 进行试验:将标准溶液分别添加到胶体金法试纸上,观察并记录产生的信号。
3) 分析数据:根据试验结果,利用统计学方法或曲线拟合等手段确定最低检测限。
4. 方法的改进和优化为了获得更准确、可靠的最低检测限,研究者们还不断改进和优化测试方法。
可以采用增强信号的方法,如表面增强拉曼光谱技术,来提高试纸的灵敏度;或者利用微流控技术,实现自动化的样品处理和检测,从而减少测试误差。
5. 个人观点和理解在我看来,胶体金法试纸最低检测限测试方法的不断完善和优化将对其在医学诊断、环境监测等领域的应用产生重大影响。
通过确立准确、可靠的最低检测限测试方法,胶体金法试纸将能够更准确地检测出微量的生物分子或化学物质,为相关领域的研究和应用带来新的机遇和突破。
胶体金试纸条的原理
胶体金试纸条是一种常用的生化试剂,用于检测样品中是否存在特定
的蛋白质或其他生物分子。
其原理基于胶体金颗粒的表面等离子共振
现象和特定生物分子与抗体之间的特异性结合。
胶体金颗粒是一种纳米级别的颗粒,具有很强的表面等离子共振吸收
能力。
当胶体金颗粒悬浮在溶液中时,其表面会产生一种特殊的光学
现象,即表面等离子共振峰。
这个峰位于可见光谱范围内,通常为
520-550nm。
在制备胶体金试纸条时,会将含有特定抗体的溶液喷洒在试纸条上。
当样品涂抹到试纸条上时,如果其中含有与该抗体相应的生物分子,
则这些分子会与抗体发生特异性结合。
这种结合会导致胶体金颗粒聚
集和沉淀,并且会使表面等离子共振峰发生变化。
通过观察试纸条上出现的颜色变化可以判断样品中是否存在目标分子。
如果样品中含有目标分子,则试纸条上的颜色会发生明显的变化,通
常为红色或紫色。
这是因为胶体金颗粒聚集后会散射和吸收不同波长
的光线,导致表面等离子共振峰发生位移和变宽,从而改变了胶体金
颗粒的颜色。
总之,胶体金试纸条的原理基于特定抗体与生物分子之间的特异性结合以及胶体金颗粒表面等离子共振现象。
通过观察试纸条上出现的颜色变化可以判断样品中是否存在目标分子。
该试剂具有操作简便、快速、灵敏度高等优点,在医学、环境监测、食品安全等领域得到广泛应用。
胶体金试纸条的原理与应用序言胶体金试纸条(Colloidal Gold Test Strip)是一种常见的分析测试工具,广泛应用于医药、生物学和食品安全等领域。
本文将介绍胶体金试纸条的原理和应用,并探讨其在不同领域中的重要作用。
原理胶体金试纸条的工作原理基于胶体金的特性。
胶体金是一种微小颗粒的金纳米材料,其表面具有高度活性的金属,可以与其他物质发生特异性反应。
试纸条由纸基、样品添加区、胶体金反应区和结果显示区组成。
1. 样品添加区试纸条的样品添加区是用于添加待检测样品的部分。
待检测样品可以是液体、固体或气体等。
样品添加区通常被设计成一片可打开或可撕开的口袋,以方便样品的添加。
2. 胶体金反应区胶体金反应区是胶体金溶液固定在试纸条上的部分。
胶体金溶液通常含有一种或多种特定的抗原或抗体。
当样品中存在与胶体金溶液中的抗原或抗体相匹配的物质时,它们会发生特异性反应,形成可见的颜色变化。
3. 结果显示区试纸条的结果显示区用于显示试纸的测试结果。
根据胶体金反应区的变化,结果显示区的颜色将发生明显的变化。
一般情况下,结果显示区采用可视化标记,例如“阳性”和“阴性”来表示样品是否存在目标物质。
应用胶体金试纸条广泛应用于医药、生物学和食品安全等领域,具有以下几个重要的应用:1. 医药领域在医药领域,胶体金试纸条常用于疾病的快速诊断。
例如,针对某些感染性疾病或传染病,通过检测患者体液中的疾病特异性标志物,可以快速确定是否患有该疾病,如病毒感染、肿瘤标记物等。
同时,胶体金试纸条还可以用于监测生命体征,例如尿液分析和妊娠检测等。
2. 生物学研究胶体金试纸条在生物学研究中也有重要应用。
通过将特定的抗体固定在胶体金反应区,可以检测样本中存在的特定蛋白质或其他生物分子。
这种快速、简便的测试方法被广泛用于临床诊断和实验室研究中。
3. 食品安全胶体金试纸条在食品安全领域的应用也非常普遍。
通过检测食品中的有害物质或污染源,可以帮助确保食品的安全性。
胶体金试纸法的原理应用1. 原理胶体金试纸法是一种常用的分析技术,其基本原理是利用胶体金颗粒在特定条件下与待检测物质发生反应产生可见的颜色变化。
胶体金是纳米级的金颗粒,具有较高的比表面积和活性。
在试纸中,胶体金颗粒呈现红棕色的溶液,并与特定的生物分子或化学物质发生相互作用。
当试纸与待检测物质接触时,若待检测物质存在,会发生特定的反应,导致胶体金颗粒的聚集或散射现象发生改变。
这种改变会引起可见的颜色变化,例如由红棕色变为红色或蓝色。
通过观察颜色变化的程度和时间,可以确定待检测物质的存在与浓度。
2. 应用胶体金试纸法的原理应用广泛,以下列举了一些常见的应用领域:2.1 医学诊断胶体金试纸法在医学诊断中得到广泛应用。
例如,在一些快速诊断试剂盒中,可以使用胶体金试纸法来检测特定的生物分子指标,如病原体的抗原或抗体,以帮助医生快速诊断疾病。
这种检测方法简单、迅速,可在短时间内提供初步诊断结果。
2.2 食品安全检测胶体金试纸法在食品安全检测中也有重要应用。
通过胶体金试纸法可以检测食品中的有害物质,如重金属离子、农药残留等。
这种检测方法灵敏度高、操作简便,适用于大规模的食品安全监测。
2.3 环境监测胶体金试纸法在环境监测中发挥着重要作用。
例如,可以使用胶体金试纸法来检测水中的特定污染物,如重金属离子、有机物污染物等。
这种检测方法可快速获得水质的初步评估结果,有助于保护和改善环境质量。
2.4 生物学研究胶体金试纸法在生物学研究中也得到广泛应用。
例如,可以使用胶体金试纸法来检测细胞中特定的生物分子,如蛋白质、核酸等。
这种检测方法可以帮助研究人员了解细胞内分子的表达和分布情况,从而深入探究生物学的相关问题。
3. 优点和局限性胶体金试纸法具有一些优点和局限性,具体如下:3.1 优点•简单易行:胶体金试纸法不需要复杂的仪器设备和样品处理步骤,操作简单易行,适用于非专业人员使用。
•快速结果:胶体金试纸法可以在很短的时间内提供初步的检测结果,有助于快速做出判断。