BRM-SJS大鼠长期毒性试验(精)

急性毒性试验佚名试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。

一、啮齿类动物单次给药的毒性试验（一）试验条件1．动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。

选用其他动物应说明原因。

年龄一般为7-9周龄。

同批试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%。

实验前至少驯养观察1周，记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。

2．饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。

若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。

应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。

3．受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。

（二）试验方法：由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。

1．伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。

2．最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。

3．最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。

4．单次口服固定剂量方法（Fixed-dose procedure）。

选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。

实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。

如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。

根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。

二、动物本试验选用两种动物大鼠和狗,均购自锦州医学院实验动物中心。

经过一周检疫和适应 ,选择一般状况良好的动物用于试验。

分组时称量体重 ,雄性大鼠重1 2 2.7 士 2 9.5 g,雌性大鼠重 13 6.8 土 2 6.7 g ;雄狗重1 0.8 土 2.7 k g,雌狗重9.9 士 2.6kg。

试验方法1.分组鉴于急性毒性试验的给药量超过了限度试验的剂量(小白鼠注射给药超过0.2 g/100 k g), 可考虑只设一个剂量组。

另外,文献报告一次静脉给药的最大容量,大鼠和狗分别为0.l m l/10g 和20 m l / 只因此,本试验确定设二个剂量组:低剂量相当于上述最大容量(大鼠为10m l / k g,狗为l.7 m l / k g),高剂量则根据予试验的结果再扩大5、7倍(大鼠为4 5 m l/ k g,狗为1 3 m l / k g)。

为了比较,同时设生理盐水对照组(大鼠一次静注4 5m l / k g,狗为13 m 】/ kg )。

分组时将雌雄大鼠和狗按体重分层,再随机分配。

大鼠每组雌雄各1 0 只,狗为各2只。

2 给药方法连续2 8 天,每天一次,按规定剂量给动物静注复方甘油注射液。

注射速度1 5 ~ 2 0m l /mi n。

注射部位,大鼠取尾静脉,狗取后肢小隐静脉。

3 观察与检查3.1 一般症状观察、体重和进食量测定每天午前、午后两次仔细观察动物的外形、活动有无异常。

每周一次测定动物体重和进食量。

3.2血液学及血液生化检查试验开始前一天及连续.给药 1 4、2 8天后,各对动物进行一次检查.血液学指标为:红细胞计数、血红蛋白、白细胞总数及分类、血小板计数。

血液生化指标有:谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、尿素氮及血清钠。

采血方法,大鼠,头两次以钳取眼球法,末次以断头法取血,狗则三次都是从后肢小隐静脉取血。

每次采血前须让动物断绝饮食8 小时,目的减轻药物对血液稀释的影响。

3.3 心电图检查试验前后给每只狗各做一次心电图( l导联) 检查。

长期毒性试验操作规程1.目的：观察连续重复给予受试物对动物所产生的毒性反应，首先出现的症状和严重程度，毒副反应的靶器官及其恢复和发展情况。

确定无毒反应剂量，为拟定人用安全剂量提供参考。

2. 动物和材料：2.1动物一类新药首选Beagle犬和猴类，应写明供应单位。

根据试验周期的长短，一般选择性成熟青年动物为受试动物。

二、三、四类新药要求放松一些，但要根据实际情况选择合适的实验动物。

实验前大动物应检测心电，并做血液学和血液生化学分析，指标在正常范围内的动物，方可作为受试动物。

小动物分组方式通常采用随机分组，雌雄各半。

大动物通常每组动物4-6只，雌（无孕）雄各半，随机分组。

2.2 受试物和实验室3.试验方法3.1 剂量和分组3.1.1 一般设2-3个剂量组，一类新药应设三个剂量组和一个对照组。

剂量一般用g（或mg）/kg或单位/kg表示。

低剂量组略高于临床试验人用日最高剂量或按体表面积折算的动物药效学有效剂量。

低剂量组不应出现毒性反应。

高剂量组原则上应产生明显或严重的毒性反应或个别动物死亡。

在高、低两个剂量之间按等比关系再设置一个中剂量。

3.1.2 对照组不给受试物仅给等容量的溶媒或赋形剂。

如这些成分可能有毒性时，应另设一组对照组。

限度试验：如果经小鼠急性毒性口服给药剂量大于5g/kg或注射给药剂量大于2g/kg仍不出现毒性反应和死亡或仅个别动物有毒性反应时，可考虑只作一个高于临床拟用剂量50倍的剂量。

3.2 给药途径与方法3.2.1 给药应与临床用药途径一致。

3.2.2 口服药途径每天于喂食前定时给予。

若将受试物混在饲料、水中给予，每动物应分笼饲养，并采取严格有效措施，以保证每只动物按量在一定时限内服完。

3.2.3 经静脉、肌肉或皮下途径，其注射部位可于四肢或臀部等处交替进行。

3.2.4 受试物最好是每周7天连续给予，如试验周期在90天以上，可考虑每周给药6天，每天定时给药。

每周可根据体重情况调整给药量，按等容量不等浓度配制药物。

大鼠的长期毒性试验1. 目的：观察连续给予受试动物后由于积蓄而对机体产生的毒性反应及其严重程度，提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性，确定无毒性反应剂量，为人用安全剂量提供参考。

试验条件：2动物：应写明动物的品系，生产单位及生产合格证号，等级，周龄，性别，体重，一般选用动物品系有Wistar、SD、或其他品系的远交系动物。

应根据试验期的长短选用不同周龄的大鼠，试验期在3个月内宜用6～8周龄大鼠，超过三个月者宜用5～6周龄大鼠。

试验开始时，体重差异应不超过平均体重的20%。

实验动物应雌雄分笼饲养，每笼不宜超过5只动物，所有动物试验前至少观察一周，并记录食量和体重等基础数字。

试验报告中应写明饲料供应单位及生产合格证，若用自己配置的饲料，应提供配方及成分含量的检测报告；应写明饲养动物实验室的合格证(未获得合格证者也应注明)及等级。

受试物：应写明受试物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配置方法。

受试物可以是临床试验制剂。

如受试物制剂的体积较大，以不含赋形剂的制剂，如中药浸膏为宜。

固态制剂灌胃给药，可选择适当的溶媒溶解，或研磨成细粉后用1%左右羧甲基纤维素钠(或10%阿拉伯明胶)制成混悬液，但应注意临用前需要摇匀。

避免混悬不匀引起计量误差。

长期毒性试验给药周期较长，固体制剂在配成溶液或混悬液后，冰箱放置，短期内用完，一面受试药物活性降低。

3试验方法：①受试物剂量：一般设三个剂量组和一个对照组。

给受试物剂量单位一般用mg/kg、或g/kg表示。

高剂量组：应使动物产生明显的或严重的毒性反应，或个别动物死亡。

中剂量组：应相当或高于药效学试验的高剂量，应使动物产生轻微的或中等程度的毒性。

低剂量组：略高于整体动物的有效剂量，在此剂量下动物应不出现毒性反应，属基本安全剂量。

对照组：不给收拾药物仅给等容量的溶媒或赋形剂，若所用溶媒或赋形剂可能有毒时，另加一组空白对照。

如果急性毒性试验结果毒性很低，测不出LD50，也未见明显毒性反应，可设高、低两个剂量，高剂量一般为拟用于临床剂量50倍以上(有困难时，可适当减少剂量，最低不能低于临床剂量30倍)并应高于药效学试验的高剂量。

毒理学中的长期慢性毒性检测方法毒理学中长期慢性毒性检测方法与探究毒理学是一门旨在研究生命体系中各种化学物质对人类、动物和环境的毒性影响的科学。

在现代人类社会中，人们对各种化学物质的使用越来越频繁，因此对于化学物质的毒性和安全性评估也越来越重要。

而长期慢性毒性检测方法是毒理学研究中不可或缺的一部分。

长期慢性毒性检测方法是对于某一化学物质在动物体内慢性毒性的影响进行评估的方法。

它通过持续给予试验动物某一特定剂量的化学物质来探究其潜在的负面影响。

这种评估需要持续数周至数年的时间，因此其费用和时间成本相对较高。

然而，长期慢性毒性检测方法仍然是毒理学研究中重要的一环。

对于长期慢性毒性检测方法的评估，常用的试验动物有老鼠、大鼠、兔子、狗等。

在一项长期慢性毒性检测实验中，动物要长期接受被测化学物质的暴露，并且要定期采集血样、尿样、组织样本等进行分析。

基于这些分析的结果，可以对被测化学物质在动物体内的影响进行详细的评估和分析。

在长期慢性毒性检测方法的实施中，建立合适的试验方案和得出合适的结论非常重要。

试验方案需要考虑到被测化学物质在动物体内的生物学运作规律，动物对被测化学物质的吸收、代谢和排泄规律等，同时还需要考虑到不同个体之间的生理差异。

得出的结论需要综合考虑所有的实验结果，包括毒性效应、剂量效应、时间效应等多方面信息。

此外，当进行长期慢性毒性检测方法时，还需要注意对于动物的福利问题。

这不仅是出于道德敏感性的考虑，同时也要考虑到动物的健康状况对于实验结果的影响。

因此，在长期慢性毒性检测方法的实施中，需要对于试验动物进行定期的健康检查和妥善的饮食安排。

在现代毒理学研究中，长期慢性毒性检测方法被广泛应用于评估各种化学物质的毒性和安全性。

与其他较短时间的毒性实验相比，长期慢性毒性检测方法可以更加全面地评估某种化学物质的短期和长期效应。

同时，该方法可以探究某种化学物质在不同种类和不同组织中可能发挥不同的毒性效应。

总之，长期慢性毒性检测方法在现代毒理学研究中发挥着重要的作用。

大鼠长期毒性试验质量控制探讨许迪;孔利佳;杜佐华;周顺长;叶明霞;熊美云【摘要】大鼠长期毒性试验是费时长、参加人员多、消耗财力和物质大、操作繁琐复杂而又经不起重复的一个高难度研究工作,对其进行质量控制显得尤为重要.主要包括试验开始前的试验设计质量控制、试验过程中的全程质量控制和试验结束后的资料整理和实验报告质量控制.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2010(020)001【总页数】4页(P61-63,69)【关键词】长期毒性试验;质量控制;大鼠【作者】许迪;孔利佳;杜佐华;周顺长;叶明霞;熊美云【作者单位】华中科技大学同济医学院实验动物学部,武汉430030;华中科技大学同济医学院实验动物学部,武汉430030;华中科技大学同济医学院药理学系,武汉430030;华中科技大学同济医学院实验动物学部,武汉430030;华中科技大学同济医学院实验动物学部,武汉430030;华中科技大学同济医学院实验动物学部,武汉430030【正文语种】中文【中图分类】R-332长期毒性试验可以观察连续反复给药时，实验动物出现的毒性反应、剂量与毒性效应的关系、主要毒性靶器官、毒性反应的性质和程度、毒性反应是否可逆等；还可观察在连续反复给药时，动物的耐受量、无毒反应剂量、毒性反应剂量及安全范围；并可了解毒性产生时间、达峰时间、持续时间及可能反复产生毒性反应的时间，有无迟发性毒性反应、有无蓄积毒性或耐受性等［1］。

这充分说明长期毒性试验在临床前安全性评价中的重要地位，对于新药研究成功与否起举足轻重的作用。

长期毒性试验是临床前毒性评价的主要内容，是新药审评重点内容之一，是能否过渡到临床试用的主要依据。

另外，它为临床安全用药的剂量设计提供参考依据，为临床毒副反应的监护及生理生化指标检测提供依据。

因此，必须对长期毒性试验进行质量控制。

主要包括试验开始前的试验设计质量控制、试验过程中的全程质量控制和试验结束后的资料整理和实验报告质量控制。