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高效液相色谱法测定维生素C的含量【摘要】高效液相色谱法已经成为解决生命科学、医药学发展中各种难题的重要手段，在实验室中也广泛应用于物质的定性定量分析。
本实验中利用高效液相色谱法对维生素C进行定量分析，所采用的定量分析方法为外标法，通过做出标准溶液浓度与峰面积的标准曲线进而对样品中的维生素C进行定量检测。
【关键词】高效液相色谱法、维生素C、含量1、引言维生素 C（Vitamin C, Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。
Vc 在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。
人体内缺乏 Vc 时容易导致坏血病。
同时，由于 Vc 是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。
Vc 在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。
樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中 Vc 含量在 50-300 mg/100 g。
溶于流动相（mobile phase）中的各组分经过固定相时，由于与固定相（stationary phase）发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
高效液相色谱法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在经典液相色谱法的基础上，于 60 年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。
HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。
有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。
维生素C含量的测定(高效液相色谱法)1．原理试样中的抗坏血酸用溶解超声提取后，以离子对试剂为流淌相，经反相色谱柱分别，其中L(+)-抗坏血酸和D(+)-抗坏血酸挺直用配有紫外检测器的液相色谱仪(波长245nm)测定；试样中的L(+)-脱氢抗坏血酸经L-半胱氨酸溶液举行还原后，用紫外检测器(波长245nm)测定L(+)-抗坏血酸总量，或减去原样品中测得的L(+)-抗坏血酸含量而获得L(+)-脱氢抗坏血酸的含量。
以色谱峰的保留时光定性，外标法定量。
2．试剂与设备 (1)试剂偏磷酸(HPO3)n：含量(以HPO3计)≥38% ,(Na3PO4·12H2O),(KH2PO4) ,(H3PO4) ; 85%, (C3H7NO2S)：优级纯，(C19H42BrN)：色谱纯，(CH3OH)：色谱纯。
(2)试剂配制偏磷酸溶液(200g/L)：称取2008(精确至0.1g)偏磷酸，溶于水并稀释至1L，此溶液于4℃的环境下可保存一个月；偏磷酸溶液(20g/L)：量取50mL 200g/L偏磷酸溶液，用水稀释至500mL; 溶液(100g/L)：称取100g(精确至0.1g)，溶于水并稀释至1L, 溶液(40g/L)：称取4g ，溶于水并稀释至100mL，临用时配制。
(3)标准品L(+)-抗坏血酸标准品(C6H8O6)：纯度≥99%, D(+)-抗坏血酸(异抗坏血酸)标准品(C6H8O6)：纯度≥99%。
(4)标准溶液配制L(+)-抗坏血酸标准贮备溶液(1.000mg/mL)：精确称取L(+)-抗坏血酸标准品0.0lg(精确至0.01mg)，用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL。
该贮备液在2～8℃避光条件下可保存一周。
D(+)-抗坏血酸标准贮备溶液(1.000mg/mL )：精确称取D(+)-抗坏血酸标准品0.01g(精确至0.01mg)，用20g/L的偏磷酸溶液定容至10mL。
该贮备液在2～8℃避光条件下可保存一周。
紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量一、本文概述本文将详细阐述使用紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量的实验方法和过程。
紫外分光光度法是一种常用的化学分析方法，通过测量物质在特定波长下对紫外光的吸收程度，可以定量测定物质的含量。
该方法在化学、生物、医学等领域有着广泛的应用，尤其在药物分析领域中，对于确定药品中有效成分的含量具有重要的实用价值。
VC银翘片是一种常见的非处方药品，主要用于治疗感冒和其他上呼吸道感染。
其主要活性成分为维生素C，具有抗氧化、增强免疫力等多种药理作用。
因此，准确测定VC银翘片中维生素C的含量对于保证药品质量和疗效至关重要。
本文首先介绍了紫外分光光度法的基本原理和实验步骤，然后详细描述了实验过程，包括样品制备、波长选择、标准曲线绘制以及结果计算等。
通过实验结果的分析和讨论，验证了该方法的准确性和可靠性。
本文旨在为药品生产和质量控制提供一种有效的维生素C含量测定方法，同时也为相关领域的研究提供参考和借鉴。
二、紫外分光光度法原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光的吸收特性来测定物质含量的分析方法。
在紫外区，许多有机化合物和无机离子具有吸收紫外光的特性，其吸收程度与物质的浓度成正比。
因此，通过测量待测物质在特定波长下的吸光度，可以推算出该物质的浓度。
在测定VC银翘片中维生素C含量时，紫外分光光度法利用维生素C在紫外光区具有特定吸收波长的特性。
维生素C分子中的共轭双键结构使其对紫外光具有吸收能力，且吸收峰通常出现在约245nm处。
通过制备一系列已知浓度的维生素C标准溶液，并测量其在245nm波长下的吸光度，可以建立吸光度与维生素C浓度之间的标准曲线。
然后，对待测的VC银翘片提取液进行同样波长的吸光度测量，根据标准曲线即可计算出样品中维生素C的含量。
紫外分光光度法具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在药物分析、生物化学等领域得到广泛应用。
然而，该方法也受到一些限制，如对于颜色较深或浑浊的样品，可能需要进行前处理以消除干扰因素；对于某些在紫外区无吸收或吸收较弱的物质，该方法可能不适用。
高效液相色谱(HPLC)法测血清维生素C含量杨静;吴晓娜【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2007(022)005【摘要】目的建立更简便、快速、准确、灵敏的测定血清维生素C含量的方法,并对血清维生素C稳定性进行研究.方法血清样品经10%(v/v)偏磷酸溶液提取,旋涡混匀30 s,离心10 min(4 000 r/min,4℃)后,用带二极管阵列检测(DAD)的高效液相色谱(HPLC)仪对维生素C进行定性定量分析,流动相为100 mmnol/LKH2PO4,pH值为3.0,检测波长为243nm,流速为1 ml/min.用此方法测定不同处理和储存条件下的血清维生素C含量,比较其稳定性.结果在上述色谱条件下,血清中维生素C能得到良好分离,该方法的日内变异系数和日间变异系数分别为0.42%和2.11%;回收率范围为82%～88.5%;维生素C的最低检测限为0.05 μg/ml.在对血清维生素C稳定性的研究中,发现血清维生素C在放置过程中很容易被氧化降解,其偏磷酸提取液相对稳定,但在5 d后含量也开始明显下降,到第44 d后血清和提取液中维生素C含量均几乎完全消失.结论建立了高速、高效、高灵敏度的测定血清维生素C含量的HPLC法;血清维生素C在保存过程中极不稳定,获得样品后应立即测定,当无条件立即分析样品时,也应将样品用偏磷酸提取,并将提取液冷冻保存在-70℃,5 d以内分析完毕.【总页数】4页(P44-47)【作者】杨静;吴晓娜【作者单位】四川省人民医院检验科,成都,610041;四川省人民医院检验科,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】Q503;R917【相关文献】1.HPLC法测患者血清万古霉素和去甲万古霉素浓度 [J], 刘斌;童彤2.高效液相色谱法测血清中25-羟维生素D3 [J], 刘怡欣;赛娜;赵世晶;李紫薇;黄国伟3.反相高效液相色谱法安培检测器快速测定人血清中维生素C含量 [J], 卓海通;高允生4.高效液相色谱法测急性淋巴细胞白血病患儿血清甲氨蝶呤浓度 [J], 曹娟;欧阳伶;吴巧志;涂琼;熊友健5.用高效液相色谱(HPLC)法测定血清维生素C含量 [J], 吴晓娜;黄承钰;孙爱民;杨咏涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
维 C银翘片中马来酸氯苯那敏含量测定方法【摘要】目的：分析维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量的测定方法。
方法：采用药典法与直接超声法，比较马来酸氯苯那敏含量测定结果。
结果：药典法步骤繁琐，加样回收率为91.42%、含量115%；直接超声步骤简单，环境友好，其回加样收率为100.34%、含量131%；结论：直接超声法可有效测定维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量。
【关键词】维C银翘片；马来酸氯苯那敏；药典法维C银翘片为常用中成药物，处方成分是由山银花、荆芥、连翘、马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、维生素C等多种中西药组成。
马来酸氯苯那敏又名为扑尔敏，为抗组胺类药物，可通过对H1受体拮抗反应达到抗过敏效果，多数应用于皮肤黏膜过敏、打喷嚏、鼻炎、流鼻涕等感冒表现的治疗中[1]。
曾有学者的研究中指出，同时对维C银翘片与未C银翘胶囊两个品种进行检验，通过对马来酸氯苯那敏的含量测定发现，维C银翘胶囊批间差异小，且平行性佳；而维C银翘片批间差异较大，且平行性也差。
分析原因，维C银翘片与维C银翘虽处方相同，但检验方法却不同。
维C银翘片是按照《中国药典》2010年版一部的标准进行检验，维C银翘胶囊是按照局颁标准进行检验，前者方法样品处理过程极其复杂，步骤繁多；而局颁标准操作简单，直接超声处理便可。
同时，药典方法有机试剂用量较大，测定结果平行性差[2-3]。
为此，本次在优化色谱条件的基础之上，采取药典法与直接超声两种方式对维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量进行测定，现将结果汇总如下。
1仪器与试药Agilent 1200高效液相色谱仪（G1311A 四元泵、G1314B紫外可见检测器），岛津LC-20A型高效液相色谱仪（两个LG-20AT溶剂输送泵、SIL-20A自动进样器、SPD-M20A二极管阵列检测器）。
马来酸氯苯那敏对照品（中国食品药品检定研究院，批号100048-200607，含量为99.68%），维C银药片（市售产品，规格，每片含维生素C49.5mg，对乙酰氨基酚105mg，马来酸氯苯那敏1.05mg），1-庚烷硫磺酸钠（离子对高效液相色谱试剂，上海凌峰化学试剂有限公司）。
漳州师范学院材料化学论文一种退热解毒药—-－--维C银翘片系别:化学与环境科学系专业：化学教育班级：10化本２班学号：1006０12３3姓名：潘小健一种退热解毒的药-—－－银翘一．前言银翘是金银花与连翘配成的一种中成药。
金银花，为中药材和植物的统称。
植物金银花又名忍冬，为忍冬科多年生半常绿缠绕木质藤本植物。
“金银花"一名出自《本草纲目》，由于忍冬花初开为白色,后转为黄色，因此得名金银花。
药材金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属植物干燥花蕾或带初开的花。
.而连翘有抗菌、强心、利尿、镇吐等药理作用，常用连翘治疗急性风热感冒、痈肿疮毒、淋巴结结核、尿路感染等症，是银翘解毒冲剂等中药制剂的主要原料。
二者均为常用清热解毒中药,金银花清热解毒,偏于上半身之热;而连翘清热解毒,散结消肿,便于透达全身之热.二药配伍，清热解毒力量倍增，流通气血以消肿散结止痛，且银翘药对是临床上公认的常用有效药对。
银翘一词最早出现在《温病条辨》记载银翘散为“风淫于内，治以辛凉,佐以苦甘；热淫于内,治以咸寒，佐以甘苦之剂"。
方中连翘、金银花具芳香辟秽、辛凉解表的功效，为本方君药.薄荷、牛蒡子、荆芥、淡豆豉助银花、连翘解表散邪以为臣。
金银花具有利尿、抗菌消炎、清热解毒、消炎、杀菌、保肝利胆的功能。
全方组方为经典之作。
银翘散稍加煎煮即可，如长时间煎煮挥发油大量挥发，其药效大大降低。
银翘散是《温病条辨》中吴塘论治温病所创第一方.吴氏倡导用三焦辨证阐述温病发生、发展、传变规律和判断预后，主张立法处方紧扣病机.银翘散为温病初起,邪在上焦所设，并随证加减,衍生出多个变方.银翘散在《温病条辨》中的地位犹如桂枝汤之于《伤寒论》。
本制剂收载于中国药典２005 年版一部６02 页.金银花为制剂中的君药,是制剂中清热解毒功效的主药，绿原酸作为有机酸类是金银花中的主要活性成分，具有抗炎、抑菌、抗病毒作用。
在８0年代初期,国内对于申请制药的要求不如现在的严格，所以维Ｃ银翘片在研制成功以后,并没有进行反复的试验。
科技资讯2017 NO.20SCIENCE & TECHNOLOGY INFORMATION学 术 论 坛维C银翘片为2015年版中国药典收载的药品,由山银花、连翘、荆芥、牛蒡子、马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚和维生素C等13味组成,质量标准采用HPLC分别测定绿原酸、牛蒡苷、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏和维生素C五个成分。
该文拟建立HPLC同时测定对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏和维生素C三个成分含量,可为维C银翘片的生产控制和质量标准提高提供实验依据。
1 仪器与试药1.1 仪器依利特P200Ⅱ高效液相色谱仪(大连依利特分析仪器有限公司);B P211D型电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);SG3300HD型超声波清洗器(上海冠特超声仪器有限公司)。
1.2 试药对照品:对乙酰氨基酚(批号:100018-200408)、马来酸氯苯那敏(批号:10047-9904)、维生素C(批号:100425-201504)。
对照品物质均购自中国食品药品检定研究院。
试剂:乙腈为色谱纯,水为娃哈哈纯净水,其他试剂均为分析纯。
药品:维C银翘片制剂,取自广西纯正堂制药有限公司和广西花红药业股份有限公司。
2 方法与结果2.1 溶液的制备2.1.1 混合对照品溶液精密称取对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏和维生素C对照品适量,加0.5%焦亚硫酸氢钠溶液(用磷酸调节pH值至2.2)制成含对乙酰氨基酚80μg/mL、马来酸氯苯那敏40μg/mL和维生素C20μg/mL的混合溶液,即得。
2.1.2 供试品溶液取本品20片,除去包衣,精密称定,研细,取细粉0.1g,置50mL 量瓶中,加0.5%焦亚硫酸氢钠溶液(用磷酸调节pH值至2.2)稀释至刻度,超声处理10min(功率300W,频率40kHz),摇匀,滤过,精密吸取滤液1mL,置10mL量瓶中,加0.5%焦亚硫酸氢钠溶液(用磷酸调节pH值至2.2)稀释至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,备用。
