丙肝诊断与治疗(1)

2019年华医网继续教育答案-241-肝病的临床管理与
治疗新思路探讨
备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项
(一)肝硬化肝性脑病诊疗指南解读
1、利福昔明对C型HE有一定治疗作用，（）mg/d，口服，每日2~4次
A、100-500
B、500-800
C、800-1200[正确答案]
D、1000-1800
E、1500-2500
2、肝硬化肝性脑病的发生机制以（）为核心，炎性介质及多种毒性物质共同作用导致脑功能紊乱
A、肝损伤
B、氨中毒[正确答案]
C、低钠血症
D、高血钾
E、炎症反应
3、哪个类型的HE发生在急性肝功能衰竭基础上，其重要特征是脑水肿和颅内高压（）
A、A型[正确答案]
B、B型
C、C型
D、D型
E、E型
4、哪个类型的HE发生于慢性肝损伤及肝硬化等肝病基础上（）
A、A型
B、B型
C、C型[正确答案]。

80Chin J I“ab Didgn,January.2()19,Vol23・M).1参考文献：[1]吴朝贵，底伟.CDFI超声诊断膀胱癌的价值探讨[J].中国超声医学杂志,2015,31(05):473.[2]游涛•许荣.膀胱癌的超声诊断价值[J].包头医学院学报.2016,32(10):74.[3]张秀红.二维超声+彩色多普勒血流显像用于膀胱肿瘤的诊断价值IJ1蚌埠医学院学报,2016.41(12):1668.[4]范玉华•张凌，钟世强.-:维彩色多普勒血流显像超声对膀胱肿瘤的诊断价值[J].分子影像学杂志,2014,37(04):229.[5]刘红权•陈艳.膀胱不同部位肿瘤的多层CT及多普勒超声检出率比较[J].中国CT和MRI杂志.2017,15(06):117.[6]叶青盛.膀胱三维超声影像重建与膀胱肿瘤超声治疗的探索研究[D].北京协和医学院.2016.[7]张宇•黄基正，曾宁•等.三维超声断层成像在膀胱肿瘤的诊断及其术前分期的临床应用[J].实用医技杂志,2018,25(03)：242.[8]于一飞.超声及CT对膀胱肿瘤诊断价值研究[D].上海交通大学,2014.[9]于企•尹东梅.膀胱肿瘤的超声诊断及临床效果分析[J].中国医药指南・2014,12(08)：127.[10]刘新颖.一：•维腔内超声诊断膀胱肿瘤的价值[A].浙江省医学会超声医学分会.2015年浙江省超声医学学术年会论文汇编[C].浙江省医学会超声医学分会.2015:1.(收稿日期:2018-03-10)文章编号：1007-4287(2019)01-0080-03丙型肝炎病毒相关性冷球蛋白血症肾损害1例并文献复习汝琳"，王悦b,刘杨"，孙伟霞I•牛俊奇⑴(吉林大学第一医院a.肝胆胰内科・b.肾病科•吉林长春130021)1临床资料患者，男，29岁，主因“发现尿蛋白阳性1年余，血肌酹升髙1天”入院。

医务人员丙肝防治知识调查问卷一、一般项目1.医院级别：①一级；②二级；③三级；2.科室: ；从事本职工作年限：年；3.性别: ①男；②女；4.年龄: 岁5.学历:①高中(中专)及以下；②大专；③本科；④硕士及以上；6.职业:①医生;②护士;③实验室技术人员;④管理人员;⑤工勤人员;⑥其他.7.职称:①初级；②中级；③副高级；④高级；8.接诊丙肝病例数量: 人／每日;(或人／每周；或人／每月)②不知道；二、丙肝防治知识1.丙肝是由什么引起的?①细菌；②DNA病毒；③RNA病毒；④其他；⑤不知道;2.丙肝的传播途径（可多选）①血液传播；②呼吸道传播；③性传播；④母婴传播；⑤消化道传播3.丙肝和乙肝可以互相转化吗？①可以；②不可以；③不知道4.艾滋病病毒感染者，经性传播感染丙肝的机率更高？①是；②否；③不知道5.丙肝传播的主要危险因素有（可多选）①医源性感染，如不安全注射、输血／血制品等；②共用餐具；③共用针具注射吸毒；④非医源性感染，如穿耳孔、纹身等；⑤不洁性行为；⑥其他（请注明）6.丙肝的将点（可多选）①大多数病人症状明显；②易发展为慢性；③可发展为肝硬化、肝癌；④能治愈7.目前是否可以通过接种丙肝疫苗预防感染？①可以；②不可以；③不知道8.感染丙肝后多长时间在外周血可检测到HCV-RNA？①1-3周；②4-6周；③不知道9.确诊为丙肝的实验室检测依据为:①抗-HCV阳性；②HCV-RNA阳性;③不知道；10.丙肝的诊断分类中，最重要的诊断依据为：①血清抗-HCV阳性；②血清ＨCV-RNA阳性；③临床表现；④不知道；11.慢性丙肝是指感染丙肝病毒持续几个月以上？①３个月；②６个月；⑤12个月；④不知道；12.丙肝可治愈吗？①可以；②只能缓解，不能治愈；⑤不知道；13.丙肝的法定报告时限是：①即时；②12小时；③24小时；④48小时；⑤其它（请注明）14.最近１年内是否接受过丙肝相关的培训？①是（次）；②否15.对于丙型肝炎的筛查（可多选）；①建议对所有HCV高感染率人群提供HCV抗体检测服务；②建议对所有HCV抗体检测阳性者进行RNA检测；③建议对有HCV暴露史或危险行为的人群提供HCV抗体检测服务；④建议无需对所有HCV抗体检测阳性者进行RNA检测，抗-HCV阳性即可确诊为丙肝病例；16.防止医务人员发生丙肝院内感染的防护措施有（可多选）：①加强防护知识宣教；②使用公共毛巾；③避免锐利器械刺伤；④使用保护屏障，如戴口罩、手套，穿隔离衣等；⑤接种丙肝疫苗；⑥其它（请注明）17.医务人员发生丙肝职业暴露后，应采取的措施为（可多选）：①立即局部伤口处理，并及时上报；②24小时内进行HCV-RNA感染监测，如为阴性即可排除感染；③确诊感染HCV后尽早联合聚乙二醇干扰素及利己韦林抗病毒治疗；④其它（请注明）18.医务人员在预防血源性疾病的感染中，应遵循安全注射的原则（可多选）：①严格遵守无菌操作原则；②尽可能使用单剂量注射用药品；③多位患者可以共用注射针、套管针和静脉输液系统等；④其它（请注明）19.您检查过自己的丙肝抗体吗？①检查过，结果阳性；②检查过，结果阴性；③没检查过，觉得没必要；④没检查过，觉得费用贵；⑤虽然觉得应该测，但一直没机会。

传染病学2一、选择题A1型题（每题2分，共40分）1.下列疾病，目前尚没应用主动免疫的是（） [单选题] *A.结核病B.天花C.脊髓灰质炎D.疟疾(正确答案)E.麻疹2.一位发热患者，24小时体温相差超过1℃，但最低点未达正常。

这位患者的热型应该是（） [单选题] *A.稽留热B.弛张热(正确答案)C.间歇热D.回归热E.马鞍热3.急性传染病的发生、发展和转归，通常分为（） [单选题] *A.潜伏期、前驱期、症状明显期、恢复期(正确答案)B.前驱期、发热期、出疹期、恢复期C.体温上升期、极期、体温下降期D.初期、极期、恢复期E.早期、中期、晚期4.流行性乙型脑炎中，最常见的感染类型为（） [单选题] *A.隐性感染(正确答案)B.病原携带状态C.潜伏性感染D.显性感染E.病原体被清除5.接种下列哪种制剂无法获得主动免疫（） [单选题] *A.活疫苗B.灭活疫苗C.抗毒素(正确答案)D.类毒素E.菌苗6.菌痢引起全身毒血症的主要因素是（） [单选题] *A.菌群B.内毒素(正确答案)C.外毒素D.机体免疫E.细菌数量7.能抑制甲型流感病毒的药物是（） [单选题] *A.万古霉素B.氟康唑C.氧氟沙星D.红霉素E.金刚烷胺(正确答案)8.疟疾的发作具有周期性，其间歇期的长短取决于（） [单选题] *A.侵入的子孢子数量B.子孢子在肝细胞内发育的时间C.裂殖体在红细胞内发育的时间(正确答案)D.机体免疫力强弱E.疟原虫毒力强弱9. 拉米夫定的主要作用是（） [单选题] *A.降低ALTB.促进肝细胞再生C.促进HBeAg转换D. 抑制HBV-DNA复制(正确答案)E.减少病毒变异10.关于传染病的治疗，下述哪项是错误的（） [单选题] *A.有些中药具有抗微生物作用B.干扰素是一种抗病毒药物C.传染病的病原疗法即抗生素疗法(正确答案)D.针灸可以治疗某些疾病的后遗症E.治疗方案必须个体化11.伤寒杆菌的主要致病因素为（） [单选题] *A.外毒素B.肠毒素C.内毒素(正确答案)D.H抗原E.O抗原12.疟疾是由下述哪种虫媒叮咬传播疟原虫引起的寄生虫病（） [单选题] *A.蜱B.伊蚊C.库蚊D.按蚊(正确答案)E.白蛉13.以下属于广谱的抗病毒药物的是（） [单选题] *A.利巴韦林(正确答案)B.奥司他韦C.阿昔洛韦D.更昔洛韦E.恩替卡韦14.艾滋病的高危人群不包括（） [单选题] *A.同性恋和异性恋者B.经常输血和血制品者C.静脉药瘾者D.同HIV感染者共同进餐者(正确答案)E.性乱交者15.根据我国传染病防治法及其细则规定，以下属于强制管理的传染病是（） [单选题] *A.艾滋病B.鼠疫(正确答案)C.狂犬病D.疟疾E.麻风病16.在霍乱的发病机制中，起主要作用的是（） [单选题] *A.侵袭力B.霍乱毒素(正确答案)C.内毒素D.神经毒素E.CAMP17.被带有HBsAg阳性血污染的针头刺破手指时，最重要的措施为（） [单选题] *A.过氧乙酸泡手B.局部擦碘酒消毒C.肌肉注射乙型肝炎疫苗D.肌肉注射乙型肝炎免疫球蛋白(正确答案)E.肌肉注射丙种球蛋白18.有关重型肝炎的概念，哪一项正确的（） [单选题] *A.重型肝炎发生率约占全部肝炎病例的5%～10%B.急性重型肝炎的病程不超过10天C.急性重型肝炎和亚急性型肝炎的主要区别，是亚急性重型肝炎肝性脑病出现较早，常发生在病程早期D.慢性重型肝炎是指重型肝炎的临床表现持续6个月以上者E.在甲型至戊型肝炎病毒中，我国以乙型肝炎病毒感染所致重型肝炎最常见(正确答案)19.下面哪一项不是戊型肝炎的特点（） [单选题] *A.通过污染食物和水传播B.发生在妊娠妇女中病死率高C.是成人急性肝炎的主要原因D.需抗病毒治疗，病死率高(正确答案)E.黄疸比甲型肝炎严重20.艾滋病病死率高，平均存活期（） [单选题] *A.12～18个月(正确答案)B.30～36个月C.3～6个月D.20～30个月E.36～48个月A2型题（每题2分，共6分）21.患者，男，40岁。

2019年丙肝网络州（市）级专家考核.试卷单位：_________ 科室：________ 姓名：__________ 一般情况性别：①男②女年龄：周岁文化程度：①高中/中专及以下②大专③本科④硕士及以上职称：①初级②中级③副高级④正高级科室：工作年限：年一、单选题（每题5分，共12题）1. 丙肝是由什么引起的？（ B ）A、细菌B、病毒C、其它（请注明）2. 丙肝可以治愈吗？（ A ）A、可以B、只能缓解，不能治愈C、不知道3. 丙肝临床诊断病例分急、慢性两期，正确吗？（ B ）A、正确B、不正确C、不知道4. 目前是否可以通过接种丙肝疫苗预防感染？（ B ）A、可以B、不可以C、不知道5. 确诊丙肝唯一可靠的实验室检测依据为（ B ）A、抗-HCV阳性B、HCV-RNA阳性C、不知道6.对符合报告并已上报的临床诊断病例，由于医院进行核酸检测需要一段时间，1周以后实验室回报：HCV-RNA（4.28E+6）参考值：<1.0E+3 IU/ML，对于该病例我们应该怎么做？（ C ）A、不需要处理B、与疫情管理人员联系，马上删除病例C、及时联系原填卡临床医生填写订正卡片，将该病例订正为确证病例，并根据病程、临床表现或影像学检查进行分期7.对符合报告并已上报的临床诊断病例，由于医院进行核酸检测需要一段时间，1周以后实验室回报：HCV-RNA（未检出）参考值：<1.0E+3 IU/ML，对于该病例我们应该怎么做？（ C ）A、不需要处理B、与疫情管理人员联系，马上删除病例C、及时联系原填卡临床医生填写订正卡片，将该病例订正为其他疾病8. 慢性丙肝是指感染丙肝病毒持续几个月以上？（ B ）A、3个月B、6个月C、12个月D、不知道9. 某患者就诊时发现抗-HCV（+），感染科医生会诊后发现，该患者既往无丙肝诊疗史。

征求患者意见后行核酸检测，结果示：HCV-RNA（1.68E+5）参考值：<1.0E+3 IU/ML，该病例是否需要报告疫情？（ A ）A、需要B、不需要C、不知道10.目前治疗丙肝国内规范有效的方法是：（ C ）A、保肝、降酶治疗B、中医治疗C、干扰素+利巴韦林D、不知道11. 丙肝的法定报告时限是：（ C ）A、即时B、12小时C、24小时D、48小时12. 有关丙型肝炎下列哪项是正确的: （ D ）A、HCV只能通过输血传播B、血清抗HCV是有保护性抗体C、丙型肝炎临床表现明显D、慢性丙型肝炎的发生率很高E、急性丙型肝炎时不应使用干扰素抗病毒治疗二、多选题（每题4分，共5题）1. 丙肝的传播途径为（可多选）：√□血液传播□呼吸道传播√□性传播√□母婴传播□消化道传播2. 丙肝传播的主要危险因素有（可多选）：√□医源性感染，如不安全注射、输血/血制品等□共用餐具√□共用针具注射吸毒√□非医源性感染，如穿耳孔、纹身等□其它（请注明）3. 丙肝的特点（可多选）：□大多数病人症状明显√□易发展为慢性√□可发展为肝硬化、肝癌□其它（请注明）4. 急性丙肝的临床表现为（可多选）：√□病程在6 个月以内√□全身乏力□出现肝病面容、肝掌、蜘蛛痣√□食欲减退、恶心□其它（请注明）5. 丙型肝炎病毒下列哪项叙述正确？√□为单股正链RNA病毒□可应用血源疫苗免疫以预防感染√□血清中可检测出病毒RNA√□绝大多数为血源性传播三、判断题（正确请打“√”，错误请打“×”）（每题2分，共10题）1、只要HCV-Ab阳性就需要抗病毒治疗。

门诊特殊疾病（十八种病）――诊断标准省直医保门诊十四种特殊疾病诊断标准一、重症冠心病诊断范围界定在以下四型：1、心绞痛型冠心病2、心肌梗死型冠心病3、缺血性心肌病型冠心病4猝死型冠心病。

（一）心绞痛型冠心病1、有典型症状和体征。

（心绞痛严重程度分级3.4级，但仅供参考）2、典型心电图或（排除其他因素的）心肌酶学改变。

3、冠脉造影：单支狭窄程度≥70%（左主干≥50%）；或两支以上狭窄均50%。

4、多层螺旋CT提示有明确冠状动脉狭窄。

具备1+2基本条件再加3或4任何一项符合诊断标准。

（二）陈旧心肌梗死（见后单列）（三）缺血性心肌病型冠心病1、心脏扩大（排除其他疾病所致的心脏扩大，对有高血压、心绞痛病史者应重点考虑）。

2、心力衰竭3、4级。

3、心律失常（比较明显的心律失常，如出现短阵室速，24小时室早≥5000个）。

1+2+3符合诊断标准。

（四）猝死型心脏病有发病的确切证据，经抢救存活者。

二、陈旧性心肌梗死1、具有典型急性心梗病史（心电图、酶学改变等）。

2、急性心梗后8周内仍见陈旧心梗心电图。

3、放射核素检查显示梗死后斑痕。

4、冠脉造影，见三支冠脉中任何一支完全阻塞。

（具备1+2基本条件，再加3或4任何一项符合诊断标准。

）三、风心病1、心脏彩超诊断。

2、典型临床症状体征，心功能3级。

（联合瓣膜病或单个瓣口中等程度的狭窄及关闭不全）。

1+2符合诊断标准。

四、高血压合并症原则界定在按原发性高血压危险度的分层，属极高危险组。

（1）血压水平（持续）3级（收缩压≥180mmhg/,舒张压≥110mmhg/。

（2）高血压的1～2级伴靶器官损害。

要求：靶器官损害：心脏疾病（左心室肥大，心绞痛、心肌梗死，即往接受冠状动脉旁路手术、心力衰竭）；脑血管疾病（脑卒中或短暂性脑缺血发作、脑梗塞的头部CT检查结果）；肾脏疾病（蛋白尿或血肌酶升高）；周围动脉疾病；高血压视网膜病变（≥3级）。

具备上述任何一条均符合诊断标准。

五、肺原性心脏病原则界定在肺、心功能代偿期（包括缓解期）。

丙肝的症状及治疗丙型病毒性肝炎是由丙肝病毒（HCV）所引起，是通过输血或血制品、血透析、单采血浆还输血球、肾移植、静脉注射毒品、性传播、母婴传播等传染引起的。

丙肝分布较广，更容易演变为慢性、肝硬化和肝癌。

在预防丙肝的措施上，筛选献血员是重要一环，凡血中抗-HCV阳性或HCVRNA阳性均不能作为献血员。

临床症状（一）潜伏期丙型肝炎2周—6月，平均40天。

临床表现（二）临床经过1、急性肝炎各型病毒均可引起。

丙型肝炎超过50%转慢性。

（1）急性黄疸型肝炎：临床经过的阶段性较为明显，可分为三期，总病程2—4个月。

黄疸前期：丙型肝炎起病相对较缓，仅少数有发热。

少数患者以头痛、发热、四肢酸痛等症状为主，类似感冒。

此期主要症状有全身乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、腹胀、肝区痛、尿色加深等，肝功能改变主要为ALT升高。

本期持续1—21天，平均5—7天。

黄疸期：自觉症状好转，发热消退，尿黄加深，巩膜和皮肤出现黄疸，1—3周内黄疸达到高峰。

部分患者可有一过性粪色变浅、皮肤瘙痒、心动徐缓等梗阻性黄疸表现。

肝大、质软、边缘锐利，有压痛及叩痛。

部分病例有轻度脾大。

肝功能检查ALT和胆红素升高，尿胆红素阳性。

本期持续2—6周围。

恢复期：症状逐渐消失，黄疸消退，肝、脾回缩，肝功能逐渐恢复正常。

本期持续2周至4个月，平均1个月。

（2）急性无黄疸型肝炎：除无黄疸外，其他临床表现与黄疸型相似。

相比之下，黄疸型起病较缓慢，症状较轻，主要为全身乏力，食欲下降，恶心、腹胀，肝区痛，肝大，有轻压痛及叩痛等。

恢复较快，病程大多在3个月内。

有些病例无明显症状，易被忽视。

实际上无黄疸型发病率远高于黄疸型。

急性丙型肝炎的临床表现一般较轻，多无明显症状或症状很轻，无黄疸型占2/3之上。

多数病例无发热，血清ALT呈轻中度升高即使是急性黄疸型病例，血清总胆红素一般不超过52umol/L。

2、慢性肝炎急性肝炎病程超过半年，或原有乙型、丙型、丁型肝炎或HBsAg携带史而因同一病原再次出现肝炎症状、体征及肝功能异常者。

Journal of China-Japan Friendship Hospital,2020Feb,Vol.34,No.1中日友好医院学报2020年第34卷第1期51阈值法与二阶求导法应用于HCV-RNA荧光定量PCR的精密度比较杨辉，马亮*，丛笑，刘倩，于洋（中日友好医院检验科，北京100029）以聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）为基础的核酸检测方法特异、敏感，在病原微生物诊断领域应用极广【7。

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）RNA 定量检测适用于HCV现症感染的确认、抗病毒治疗前基线病毒载量分析以及抗病毒治疗过程中、治疗结束后的应答评估他耳。

丙型肝炎治疗过程中的监测与方案调整，在不同程度上依赖HCV RNA定量结果的稳定性。

我国临床使用的HCV RNA定量法，针对同一批扩增曲线采用不同的分析方法对定量结果影响的研究很少。

在实际操作中，阈值法与二阶求导法容易混淆使用。

为了解阈值法与二阶求导法对HCV-RNA定量（外标法）精密度的影响，我们利用临床样本通过Light Cycler480n检测系统对2种分析法进行了比较。

1资料和方法1.1样本来源6例HCV阳性的RNA样本，来自中日友好医院2018年11-12月医嘱为HCV-RNA检测的临床样本。

核对采血管，溶血、乳糜、黄疸者未纳入分析。

留样当日提取核酸，-20兀冻存备用。

1.2试剂与仪器HCV-RNA提取与扩增试剂盒购自中山大学达安公司,Smart32核酸提取仪购自中山大学达安公司,LightCy-cler480U核酸扩增仪购自瑞士罗氏公司。

1.3方法HCV-RNA提取和扩增检测按厂家说明书进行（为减少影响因素，未添加内参模板）。

PCR反应体系50山,其中含酶扩增液30|il,核酸上样量20以。

PCR循环参数：UNG 酶50乞处理15min,95兀预变性15min,94T：变性10s,55无延伸45s,共反应45个循环，每个循环延伸时读取荧光信号，定量标准品分析使用外标法。

公卫相关法律法规及传染病、食源性疾病等诊断上报知识培训考核试题一、单选题（每题2分，共44分）1、医疗机构应当实行传染病（）制度。

A. 预检、分诊(正确答案)B. 分诊、消毒C. 预检、隔离D.消毒、隔离2、医疗卫生机构和有关单位发生或者可能发生传染病暴发、流行的，应当在（）内向所在地县级人民政府卫生行政主管部门报告。

A.1小时B.2小时(正确答案)C.12小时D.24小时3、对传染病采取做法错误的是（）。

A.早发现、早报告B.早隔离、早治疗C.切断传播途径D.隐瞒信息(正确答案)4、下列不是乙类传染病中采取中华人民共和国传染病防治法所称甲类传染病的预防、控制措施的是（）A.传染性非典型肺炎B.炭疽中的肺炭疽C.人感染高致病性禽流感D.霍乱(正确答案)5、下列各项中，属于乙类传染病的是（）A.艾滋病、手足口病B.包虫病、梅毒C.疟疾、包虫病D.狂犬病、麻疹(正确答案)6、下列传染病病例分类不能勾选急慢性的是（）A.梅毒(正确答案)B.乙肝C.确诊丙肝D.血吸虫7、下列传染病分型可分为4类的是（）A.炭疽B.病毒性肝炎C.梅毒D.肺结核(正确答案)8、下列哪种情况不属于紧急状态下疫情报告（）A.发现甲类传染病及按甲类管理的乙类传染病(传染性非典型肺炎、脊髓灰质炎、肺炭疽)病人、病原携带者和疑似病人B.某种传染病就诊人数突然减少时(正确答案)C.发现历史上未曾出现或本地罕见的传染病D.急性传染病病例死亡时9、传染病报告实行（）.A. 首诊医生负责制(正确答案)B. 门诊医生负责制C. 住院医生负责制D. 上级急诊负责制10、下列哪项不是传染病的分类（）.A. 甲类B. 乙类C. 丙类D. 丁类(正确答案)11.乙肝传染病报告卡附卡，需要确定HBsAg阳性时间是否超过（）个月。

A. 3B. 6(正确答案)C. 9D. 1212.丙肝临床诊断病例的诊断依据不包括（）。

A.有流行病学史B.肝功能异常C.血清抗-HCV阳性D.丙肝病毒RNA阳性(正确答案)13.肺结核进行传染病报告时，其传染病病种的分类不包括（）。

丙肝患者诊断标准
一、慢性丙型肝炎的诊断。

诊断依据：HCV感染超过6个月，或发病日期不明、无肝炎史，但肝脏组织病理学检查符合慢性肝炎，或根据症状、体征、实验室及影像学检查结果综合分析，亦可诊断。

二、急性丙型肝炎的诊断。

全身乏力、食欲减退、恶心和右季肋部疼痛等，少数伴低热，轻度肝肿大，部分患者可出现脾肿大，少数患者可出现黄疸。

部分患者无明显症状，表现为隐匿性感染;实验室检查：ALT多呈轻度和中度升高，抗-HCV和HCV RNA阳性。

HCV RNA常在ALT恢复正常前转阴，但也有ALT恢复正常而HCV RNA持续阳性者。

自然杀伤细胞与丙型肝炎病毒感染的Huh7．5细胞体外共培养后的功能变化胡姚;张婷;叶颖子;王晓红;俞蕙【摘要】目的：探讨体外丙型肝炎病毒（ HCV）感染对NK细胞功能产生的影响及其可能的机制。

方法利用质粒JC1-Flag2体外转录得到的HCV感染性颗粒（HCVcc）以MOI4.8感染Huh7.5细胞（Huh7.5-HCVcc），与健康人外周血分离得到的NK细胞进行共培养。

与Huh7.5-HCVcc细胞共培养前后，采用ELISA法和MTT比色法分别检测NK分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-10的水平和细胞杀伤活性，以评估HCV感染对NK细胞功能的影响。

结果与MOI4.8的Huh7.5-HCVcc细胞共培养，NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α和IL-10水平受到抑制，其中IFN-γ在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P<0.001）、12 h（P<0.001）受到显著抑制，TNF-α在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P<0.001）、12 h（P=0.001）受到显著抑制，IL-10在共培养6 h（P<0.001）、9 h（P=0.006）受到显著抑制；且NK细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-10的功能均在共培养6 h受到的抑制效应最大，平均抑制率分别为24.1％、20.7％和24.3％。

NK 细胞杀伤活性在共培养6 h（ P=0.023）受到抑制，平均抑制率为16.6％。

结论在体外与MOI4.8的Huh7.5-HCVcc细胞共培养，NK细胞分泌细胞因子（IFN-γ、TNF-α和IL-10）和细胞杀伤功能均受到抑制，且在不同时间点受到的抑制程度不同，提示NK细胞在HCV感染的不同阶段可能起到不同的作用。

%ObjectiveThe numbers,subsets and function of natural killer( NK)cells altered in chronic hepatitis C virus ( HCV)infected patients which indicating its association with chronic HCV infection,but the exact mechanisms remain unclear. To explore the functional effect of HCV infection on NK cells invitro and the possible mechanism behind it. Methods Human hepatoma Huh7. 5 cells were transfected with genomic RNA from cell culture adapted JC1 genotype 2a HCV strain( Huh7. 5-HCVcc)and co-cultured with NK cells isolated from whole peripheral blood of concentrated healthy donors. The functional effect of HCV infection on NK cells was assessed by testing cytokine-secreting and cytotoxicity before and after co-culture. Results When co-cultrued with Huh7. 5-HCV of MOI 4. 8,the levels of IFN-γ,TNF-α and IL-10 secreted by NK cells were inhibited. The inhibition of secreting IFN-γwas specially significant at 6(P<0. 001),9(P<0. 001)and 12(P=0. 001)hours co-cultured with Huh7.5-HCV. The inhibition of secreting TNF-α was specially significant 6 h(P <0.001),9 h(P <0.001)and 12 h(P =0.001)after co-cultured with Huh7. 5-HCVcc. And the significant inhibition of secreting IL-10 appeared at 6 h(P<0. 001)and 9 h(P=0. 006)after co-cultured with Huh7. 5-HCVcc. The strongest cytokine-secreting inhibition appeared 6 h after co-cultured with Huh7. 5-HCVcc,the inhibition rate was 24. 1%,20. 7% and 24. 3%,respectively. The cytotoxicity decreased significantly 6 h after co-cultured with Huh7. 5-HCVcc(P=0. 023),and the average inhibition rate was 16. 6%. Conclusion When in vitro cocultrued with Huh7. 5-HCVcc of MOI 4. 8,the NK cells functions of IFN-γ,TNF-αand IL-10 cytokine-secreting and cytotoxicity were inhibited. The degree of inhibition was different at different time points,which indicated that NK cells may act differently during HCV infection.【期刊名称】《中国循证儿科杂志》【年(卷),期】2016(011)004【总页数】5页(P290-294)【关键词】自然杀伤细胞;丙型肝炎病毒;Huh7. 5细胞;共培养【作者】胡姚;张婷;叶颖子;王晓红;俞蕙【作者单位】复旦大学附属儿科医院感染科上海，201102;上海交通大学附属儿童医院消化科上海，200040;复旦大学附属儿科医院感染科上海，201102;复旦大学附属儿科医院感染科上海，201102;复旦大学附属儿科医院感染科上海，201102【正文语种】中文AbstractObjectiveThe numbers, subsets and function of natural killer (NK) cells altered in chronic hepatitis C virus (HCV) infected patients which indicating its association with chronic HCV infection, but the exact mechanisms remain unclear. To explore the functional effect of HCV infection on NK cells in vitro and the possible mechanism behindit.MethodsHuman hepatoma Huh7.5 cells were transfected with genomic RNA from cell culture adapted JC1 genotype 2a HCV strain (Huh7.5-HCVcc) and co-cultured with NK cells isolated from whole peripheral blood of concentrated healthy donors. The functional effect of HCV infection on NK cells was assessed by testing cytokine-secreting and cytotoxicity before and after co-culture.ResultsWhen co-cultrued with Huh7.5-HCV of MOI 4.8, the levels of IFN-γ, TNF-α and IL-10 secreted by NK cells were inhibited. The inhibition of secreting IFN-γ was specially significant at 6(P<0.001),9(P<0.001) and 12(P=0.001) hours co-cultured with Huh7.5-HCV. The inhibition of secreting TNF-α was specially significant 6 h(P<0.001), 9h(P<0.001) and 12 h(P=0.001) after co-cultured with Huh7.5-HCVcc. And the significant inhibition of secreting IL-10 appeared at 6 h(P<0.001) and 9 h(P=0.006) after co-cultured with Huh7.5-HCVcc. The strongest cytokine-secreting inhibition appeared 6 h after co-cultured with Huh7.5-HCVcc, the inhibition rate was 24.1%, 20.7% and 24.3%, respectively. The cytotoxicity decreased significantly 6 h after co-cultured with Huh7.5-HCVcc(P=0.023), and the average inhibition rate was 16.6%.ConclusionWhen in vitro cocultrued with Huh7.5-HCVcc of MOI 4.8, the NK cells functions of IFN-γ, TNF-α and IL-10 cytokine-secreting and cytotoxicity were inhibited. The degree of inhibition was different at different time points, which indicated that NK cells may act differently during HCV infection.在慢性丙肝患者外周血和肝脏中，NK细胞的细胞总数、占外周血淋巴细胞数的比例较健康者均有不同程度的下降，NK细胞亚群也发生了变化，CD56brightNK细胞亚群比例呈上升趋势，CD56dimNK细胞亚群比例下降[1～4]，且随着病程进展而发生变化[5]，提示其可能与慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染相关。