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HPLC法测定心叶紫金牛中岩白菜素的含量刘元;宋志钊【摘要】目的:建立心叶紫金牛中岩白菜素的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以AQ-C18色谱柱为分离柱,以甲醇-水(22:78)为流动相,285nm为检测波长,柱温为室温.结果:岩白菜素在0.05～0.80μg范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系(r=0.9996),平均回收率为102.7%,RSD为2.37%(n=6).结论:该方法简便、准确、重复性好,可作为该药材含量测定方法.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2013(022)014【总页数】2页(P22-23)【关键词】心叶紫金牛;岩白菜素;HPLC【作者】刘元;宋志钊【作者单位】广西中医药研究院,广西,南宁,530022;广西中药质量标准研究重点实验室,广西,南宁,530022;广西中医药研究院,广西,南宁,530022;广西中药质量标准研究重点实验室,广西,南宁,530022【正文语种】中文【中图分类】R284.1心叶紫金牛，又名走马风、红铺地毯，为紫金牛科紫金牛属植物心叶紫金牛（Ardisia maclurei Merr.）的全株，是瑶药“七十二风”中的走马风［1］，具有镇咳祛痰，活血调经，消肿止痛之功效，用于治疗肺结核，慢性支气管炎，咳嗽气喘，月经不调，痛经，产后恶露不尽，产后体弱，风湿疼痛，跌打损伤等。
目前心叶紫金牛尚未有法定标准，对其有效成分及药理学研究更是尚未涉及，本研究采用高效液相色谱法测定心叶紫金牛中岩白菜素的含量，为心叶紫金牛的质量控制提供了检测依据。
日本岛津LC－20ATVP高效液相色谱仪，SPD－20AVP紫外检测仪；威玛龙色谱工作站；AQ－C18（4.6mm× 250mm，5μm）；KQ－100VDB双频数控超声清洗仪。
甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
岩白菜素对照品（中国药品生物制品检定所，批号1532－200202）。
金莲花药材高效液相色谱法指纹图谱分析作者：王巧，许磊，冯超，杨维，李德强，张维，张兰桐【摘要】目的建立金莲花药材的HPLC指纹图谱分析方法，对不同来源的金莲花药材进行分析。
方法色谱柱为Zorbax SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30 ℃，检测波长200 nm，流动相为乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱，流速1.0 ml/min，记录色谱图50 min。
采用直观分析和相似度软件评价金莲花药材质量。
结果11批金莲花药材相似度较高，色谱峰强度是不同药材的主要差别，共有20个共有峰，其中两个主要共有特征色谱峰为荭草素-2''-O-β-L-半乳糖苷和荭草苷。
结论所建立的指纹图谱分析方法特征性强，为金莲花药材的质量控制提供了依据。
【关键词】金莲花指纹图谱高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo establish HPLC fingerprints of Flos Trollii Chinensis and to evaluate quality of different Flos Trollii Chinensis samples. MethodsA Zorbax SB-C18 (150 mm×4.6 mm, 5 μm) was used, the mobile phase consisted ofacetonitrile and 0.05% phosphoric acid with gradient elution, the flow rate was 1.0 ml/min, the column temperature was 30℃, and the detection wavelength was 200 nm. The chromatograms were recorded in 50 min. Visual analysis and the similarity evaluation system were used for samples analysis from diverse habitats.ResultsThe chromatographic profiles of the samples collected from different regions were similar. The major difference resulted from intensity of chromatographic peaks. Twenty common peaks were found and two of them were recognized as orientin-2"-O-β-L-galactopyranosyl and orientin. ConclusionThe developed fingerprint method is of high individuality and specificity and can be applied for quality evaluation of Flos Trollii Chinensis. Key words： Flos TrolliiChinensis; Fingerprint; HPLC 金莲花为毛茛科植物金莲花Trollius chinensis Bunge.的干燥花，始载于《本草纲目拾遗》，谓其“味苦，性寒，无毒”，可“治口疮，喉肿，浮热牙宣，耳疼，目痛”，具有“明目，解岚瘴”的功效。
HPLC测定莲不同部位紫云英苷及异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量裴香萍; 李慧峰; 杜晨晖; 刘海霞; 张淑蓉【期刊名称】《《中国中医药信息杂志》》【年(卷),期】2019(026)012【总页数】4页(P75-78)【关键词】莲; 紫云英苷; 异鼠李素-3-O-葡萄糖苷; 高效液相色谱法; 含量测定【作者】裴香萍; 李慧峰; 杜晨晖; 刘海霞; 张淑蓉【作者单位】山西中医药大学山西晋中 030600; 山西振东安特生物制药有限公司山西晋中 030600【正文语种】中文【中图分类】R284.1莲Nelumbo nucifera Gaertn.为睡莲科多年生宿根草本植物，兼具食用和药用价值，主要含有生物碱类、黄酮类、花青素、挥发油类、有机酸、甾醇、挥发油及微量元素等[1]，具有降脂、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗惊厥、保肝等药理作用[2-4]。
我国莲的种植基地主要分布于江西、福建、湖南、湖北、浙江、河北等地，其中莲子、莲藕以食用为主，荷叶、莲花、莲梗、莲房、莲子心以药用为主。
目前莲房、莲须、莲子、莲子心、荷叶收载于2015年版《中华人民共和国药典》（一部）[5]，对荷叶中荷叶碱、莲子心中的莲心碱成分进行了定量控制，而对莲花、莲梗、莲房的含量测定研究报道相对较少。
为控制相关药材质量，本研究对莲不同部位（莲花、莲梗、莲房、荷叶）中的紫云英苷和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷进行含量测定，为其药食价值利用及资源开发奠定基础。
Waters 2695高效液相色谱仪，Empower工作站，Waters 2998检测器（美国Waters公司）；ZF-90型暗箱式紫外透射仪（上海顾村电光仪器厂）；XS205DU电子分析天平（梅特勒−托利多仪器有限公司）。
莲花共13批，7批为开放的花（购于药材市场），6批为花蕾（自采）；荷叶6批，莲房6批，莲梗6批。
经山西中医药大学杜晨晖副教授鉴定为睡莲科植物莲Nelumbo nuciera Gaertn.。
中药锦灯笼中酸浆苦素类化合物含量测定马哲;梁茂新【摘要】以中药锦灯笼中抗炎活性成分4,7-二去氢新酸浆苦素B为对照品,用HPLC法对该药材进行了含量测定研究.Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液(40:60)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长353nm,柱温为室温.该物质在3.27×10-3～2.62×10-2μg呈良好的线性关系,平均回收率为99.1%.该方法简单易行,结果稳定、可靠,为该药材质量标准的建立提供依据.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2010(038)007【总页数】3页(P165-167)【关键词】锦灯笼;4,7-二去氢新酸浆苦素B;高效液相【作者】马哲;梁茂新【作者单位】辽宁中医药大学方剂学科,辽宁,沈阳,110032;辽宁中医药大学方剂学科,辽宁,沈阳,110032【正文语种】中文锦灯笼为茄科植物酸浆 Physalis alkekengi L1var1franchetii (Mast1)Makino的干燥宿萼或带果实的宿萼,又名挂金灯、灯笼果。
全国大部分地区有分布。
味苦,寒。
归肺经。
具有清热解毒,利咽,化痰,利尿的功效。
用于咽痛音哑,痰热咳嗽,小便不利;外治天疱疮,湿疹[1]。
中国药典 2005版尚无含量测定方法。
目前国内对该药材的含量测定研究报道尚少,有用木犀草素作为对照品进行分析,但专属性较差[2-4]。
本实验以中药锦灯笼中抗炎活性成分 4,7-二去氢新酸浆苦素B为对照品,用 HPLC法对该药材进行了含量测定研究,方法简便、快捷、专属性强、定量准确。
岛津高效液相色谱仪 (LC-20A四元低压梯度泵,SPD-20A紫外检测器);Precisa XS 225A电子天平。
甲醇、乙腈为色谱纯,天津瑞金特化学品有限公司;水为二次蒸馏水;锦灯笼宿萼购于辽宁省,经辽宁中医药大学药学院药用植物教研室王冰教授鉴定为酸浆属植物Physalis alkekengi L1 var1franchetii(Mast1)Makino。
荧光光度法测定福建组培金线莲中总黄酮含量目的建立测定福建组培金线莲中总黄酮含量的荧光光度法。
方法根据黄酮类化合物与Al3+能形成稳定的荧光络合物，采用95%乙醇超声提取福建组培金线莲中的总黄酮，以槲皮素为对照品，用荧光光度法测定总黄酮含量。
结果在选定的实验条件下，槲皮素浓度与荧光强度具有良好的线性关系，线性范围为0.002～0.400 μg/mL，检出限为0.000 4μg/mL，线性方程F=200 2.6C+5.529 6，相关系数r=0.999 5，测得福建组培金线莲中总黄酮含量（按干燥品计算）为73.98μg/g，平均回收率为99.95% ，相对标准偏差为0.92%（n=5）。
结论本法操作简便、快速、准确，适用于福建组培金线莲中总黄酮的含量测定。
[Abstract] Objective To establish the Spectrofluorimetry of determining total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl.from Fujian . Methods On the basis of reaction of total flavanoid with alumimum ion to form fluorescent material，using 95% ethanol by ultrasonic wave to extract total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl from Fujian，a fluorimetric method for determination of total flavanoid was proposed by taking quecetin as standard sample. Results Under the optimum conditions，a linear relationship was obtained between the fluorescence intensity and the concentration of quercetin in the range of 0.002～0.400μg/mL，and th e detection limit was 0.000 4μg/mL，linearity relationship was F=2002.6C+5.5296，correlativity was 0.9995，determination of total flavanoid in tissue cultured anoectochilus roxburghii (wall.)lindl from Fujian (according to the dry product calculation) was 73.98 μg/g，average rate of recovery was 99.95%，RSD was 0.92%(n=5). Conclusion This method is simple，rapid，accurate which is suitable for determining total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii (wall.)lindl.from Fujian.[Key words] Anoectochilus roxburghii (wall.)lindl;Tissue cultured from fujian; Total flavanoid;Spectrofluorimetry金线莲[anoectochilus roxburghii （wall.）lindl.][1] 为兰科开唇兰属植物，又名金线兰、金线草等，民间素有“药王”“金草”“神药”等美称，是福建省和台湾等地极其珍贵、稀少的中药材。
紫金化毒栓的质量标准研究目的：建立紫金化毒栓的质量标准。
方法：采用薄层色谱法（TLC）对栓剂中金银花、连翘、关黄柏、五倍子进行定性鉴别[1]；采用高效液相色谱法（HPLC）对制剂中绿原酸和连翘苷进行定量测定。
结果：薄层鉴别专属性强、斑点清晰、分离度好；绿原酸和连翘苷进样量分别在0.07976～1.994 μg （r=0.9998）、0.1202～3.005 μg（r=0.9999）范围内线性关系良好，平均加样回收率（n=6）分别为98.11%、99.17%，RSD分别为0.92%、0.85%。
结论：所建立的定性、定量分析方法简便快速、重复性好、准确度高，能够有效控制紫金化毒栓的质量。
标签：紫金化毒栓；HPLC；TLC紫金化毒栓是名老中医临床经验方，根据中医辨证施治理论将金银花、连翘、黄柏等中药合理配伍，并按一定比例配方制成的栓剂[2]，具有清热解毒、活血燥湿、消肿生肌的功效。
主要用于湿热瘀阻所致的带下病，症见带下量多、色黄或异味、或阴部瘙痒以及宫颈炎高危型人乳头瘤病毒感染（HPV）见上述证候者。
为了保证临床用药的安全性、有效性，建立紫金化毒栓中有效成分的定性定量控制方法有至关重要的意义。
本实验采用TLC法对处方中的金银花、连翘、关黄柏、五倍子进行定性鉴别，采用HPLC法测定栓剂中的金银花中绿原酸的含量和連翘中连翘苷的含量，为紫金化毒栓临床用药的安全有效性提供了保障，也为紫金化毒栓的质量标准建立奠定基础。
1 仪器与材料1.1 仪器LC-2010 AHT高效液相色谱仪（日本岛津）；色谱柱Dikma Diamonsil C18（250mm×4.6mm，5μm），色谱柱Platisil ODS C18（250mm×4.6mm，5 μm）；电子分析天平；UV-2450紫外分光光度计（岛津）；KQ-250DB型数控超声波清洗器；高速冷冻离心机；紫外分析仪。
1.2 材料绿原酸对照品（批号：110753-200413，纯度：96.2%）、连翘苷对照品（批号：110821-201112，纯度：96.8%）、没食子酸对照品（批号：11083-200803，纯度：90.1%）、盐酸小檗碱（批号：110713-201212，纯度：86.7%）、金银花对照药材（批号：121060-200805）、关黄柏对照药材（批号：120937-200506）、五倍子对照药材（批号：121078--200402）、紫草对照药材（新疆紫草）（批号：121430-201103）、连翘对照药材（批号：120908-201218）均购自中国食品药品检定研究院；紫金化毒栓（批号：20130401，20130402，20130403，自制）；甲醇、乙腈为色谱纯（迪马公司），水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯；硅胶G板、硅胶H板、硅胶GF254板均为青岛海洋化工厂产品。
《天然低共熔溶剂和分子印迹技术提取短瓣金莲花黄酮类成分的研究》篇一天然低共熔溶剂与分子印迹技术提取短瓣金莲花黄酮类成分的研究摘要：本文旨在探讨天然低共熔溶剂（NDES）与分子印迹技术（MIT）在短瓣金莲花黄酮类成分提取中的应用。
通过对比传统提取方法，本研究发现NDES与MIT的联合使用能够显著提高黄酮类成分的提取效率与纯度。
本文首先介绍了短瓣金莲花的化学成分及其药理作用，随后详细阐述了NDES与MIT的原理及研究方法，最后通过实验数据分析了两种技术的效果，并得出结论。
一、引言短瓣金莲花作为一种传统中药材，其含有丰富的黄酮类成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，如何有效提取其黄酮类成分，一直是中医药研究的重要课题。
传统的提取方法虽然已经较为成熟，但仍存在提取效率低、纯度不高、对环境不友好等问题。
近年来，天然低共熔溶剂（NDES）与分子印迹技术（MIT）在天然产物的提取中得到了广泛应用，它们独特的物理化学性质使得它们成为新的研究方向。
二、天然低共熔溶剂（NDES）及其在短瓣金莲花黄酮提取中的应用天然低共熔溶剂（NDES）是由天然物质如生物分子和离子等组成的低熔点混合物。
由于其具有良好的溶解能力和较低的挥发性，NDES在天然产物的提取中具有显著优势。
在短瓣金莲花的黄酮类成分提取中，NDES能够有效地溶解黄酮类化合物，同时避免使用有毒有害的有机溶剂，有利于环保和人体健康。
三、分子印迹技术（MIT）及其在短瓣金莲花黄酮提取中的应用分子印迹技术（MIT）是一种通过制备具有特定识别功能的印迹聚合物来分离和纯化目标分子的技术。
该技术具有高选择性、高效率、重复使用性好等优点。
在短瓣金莲花的黄酮类成分提取中，MIT可以针对黄酮类化合物的结构特点，制备出具有高选择性的印迹聚合物，从而有效地提高黄酮类成分的纯度。
四、实验方法与结果分析1. 实验材料与仪器实验所需材料包括短瓣金莲花、天然低共熔溶剂、分子印迹聚合物等。
紫金莲的化学对照品研究
（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
作者：李勇军，何迅，廖尚高，王爱民，兰燕宇，黄勇，王永林
【摘要】目的：建立从紫金莲中制备白花丹醌对照品的方法。
方法: 用萃取、低压硅胶柱层析、重结晶等方法对紫金莲乙醇提取物进行分离纯化，通过质谱、核磁其振、薄层色谱及高效液相色谱等方法对其分离产物进行结构鉴定和纯度测定。
结果: 制备得到的白花丹醌对照品经薄层色谱检查无杂质，二维和三维高效液相色谱检查为单一成分，纯度在98％以上，符合中药化学对照品含量测定要求。
结论: 建立的制备白花丹醌对照品的方法简单,对照品纯度高,可作为紫金莲及其制剂质量研究用化学对照品。
【关键词】紫金莲；白花丹醌；质量控制
［Abstract］ Objective: To establish a method for preparing the reference substance of plumbagin. Methods: Ethanol-extract of Radix Ceratostigmae was isolated and purified by combining solvent extraction with column chromatography and recrystallization methods. Plumbagin was identified by mass
spectrometry (MS)and nuclear magnetic resonance (NMR).Purity of the products was determined by TLC and HPLC. Results: The purity of plumbagin was over 98%. Conclusion: This method is simple and effective to produce products with high purity, and the product can be used as reference in the quality control of Radix Ceratostigmae and its preparation.
［Key words］ Radix Ceratostigmae; plumbagin; quality control
紫金莲为兰雪科植物紫金莲(Ceratostigma willmottianum Stapf)的干燥根，具有活血止痛，通经活络，化瘀散结的功效，用于治疗跌扑骨折，风湿麻木，扭伤等[1]。
目前对紫金莲药材的质量控制方法仅有性状和理化鉴别[1]，难以真正体现和保障其内在品质，为了更好地保证和评价紫金莲质量，通过对该药材的成分研究，发现白花丹醌是紫金莲药材的主要成分。
国内外的药理研究表明，紫金莲中的白花丹醌具有抗菌、祛痰、抗生育等多种活性[2]。
为了便于紫金莲药材及其制剂的质量研究，2007年6月~12月参考有关文献[3~5]，对白花丹醌对照品的制备进行了研究，报告如下。
1 仪器与试药
VarianINOVA-400核磁共振波谱仪；HP5973-MSD质谱仪；美国安捷伦科技公司Agilent 1100高效液相色谱仪系列，含四元低压梯度系统、在线脱气机、自动进样器、柱温箱、阵列二极管检测器（DAD）
及ChemStation B01.03色谱工作站；日本岛津UV-2401PC紫外-可见光分光光度计，色谱用硅胶（200～300目）及硅胶G预制板由青岛海洋化工厂生产。
乙腈(色谱纯)、甲醇（色谱纯）、磷酸（分析纯），水为二次蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
实验样品采自贵州省织金县，由贵阳医学院龙庆德老师鉴定为Ceratostigma willmottianum Stapf.。
2 方法与结果
2.1 药材提取与分离紫金莲药材粗粉1.5 kg，用3倍量乙醇回流提取2次，每次1.5 h，过滤，滤液减压回收乙醇至750 ml，加水750 ml混匀，用氯仿萃取3次，每次300 ml，合并氯仿，减压回收氯仿得浸膏13 g。
2.2 化合物分离13 g浸膏用少量丙酮溶解，加30 g硅胶(200~300目)拌样，晾干，研细，备用；取硅胶(200~300目) 300 g，用石油醚（30~60 ℃）湿法装柱；将拌样硅胶上于装好硅胶柱表面，用石油醚（30~60 ℃）∶醋酸乙酯 (9.5∶0.5) 洗脱，分段收集；各段在硅胶G预制板上点样，用石油醚（30~60 ℃）∶醋酸乙酯 (9∶1)展开，检查合并Rf =0.5的桔黄色主斑点部分，回收溶剂，残留物用10 g 硅胶拌样，上于200 g硅胶(200~300目)柱上，用石油醚（30~60 ℃）∶氯仿(8∶2) 洗脱，分段收集；各段在硅胶G预制板上点样，用石油醚（30~60 ℃）∶氯仿 (6∶4)展开，检查合并Rf =0.5的桔黄色主斑点部分，回收溶剂，残留物用适量氯仿溶解放置结晶，滤出结晶，得黄色颗粒结晶2.5 g。
2.3 结构确定白花丹醌呈桔黄色针晶；熔点78.5~79.5 ℃；UV λmax（MeOH）：209.5、264.5、415.0 nm；EI-MS m/z：188(M+,100),173,160,145,131,120,103；IR(KBr)cm-1： 1 664,1 645(C=O),1 609,1 455(Ar),1 365,1 259,1 231,1 161,1 028,902,836,752；1H-NMR(CDCl3)δ： 2.27（3H,d,J=0.8 Hz,2-CH3）,6.80（1H,d,J=0.8 Hz, 3-H）,7.26(1H,dd,J=2.0, 7.6 Hz 6- H),7.60(2H,m, 7,8- H)；13C-NMR(CDCl3)：16.5(2-CH3),115.0(C-4a)119.3(C-8),124.1(C-6),132.0 (C-8a), 135.4(C-3), 136.1(C-7), 149.6(C-2), 161.1(C-5), 184.7(C-1),190.2(C-4)。
以上数据与文献[2,6,7]报道的一致，确定该化合物为白花丹醌，结构式见图1。
2.4.1 杂质检查
取白花丹醌加甲醇制成1 g/L样品溶液，条带状点于硅胶GF254薄层板上，点样量10 μl、20 μl；展开剂：石油醚（60~90℃）∶乙酸乙酯（9∶1）；正己烷∶丙酮（9.5∶0.5），石油醚（60~90℃）∶氯仿（8∶2）；色谱识别：紫外光（254 nm）灯下和10%硫酸乙醇加热后检视；在薄层板上经3个展开系统两种显色方式检识均呈单一斑点，色谱中不显杂质斑点。
2.4.2 峰面积归一化法纯度检查
Hypersil C18色谱柱(200 mm×5.0 mm，5 μm) 以乙腈为流动相A, 0.1%磷酸为流动相B，按表1中的规定进行洗脱；用DAD检测器在230、254、270、329、360 nm测定，各波长下的峰面积按归一
化法计算，结果白花丹醌对照品在各波长下测定的含量均大于98%，结果见表2、图2。
表2 白花丹醌各波长的测定结果（略）
3 讨论
从紫金莲中提取白花丹醌在回收乙醇过程中，发现使用低浓度乙醇时，白花丹醌可随溶剂蒸馏出部分，造成损失，于是在回收到1 ml 含2 g生药时停止回收，加一倍水，用氯仿提取富集白花丹醌进行下一步分离。
在稳定性研究中发现，白花丹醌在光照高湿条件下稳定，但有升华性，因此白花丹醌需要密闭低温保存。
白花丹醌为紫金莲的活性成分，含量较高，性质稳定，用上述制备方法进行提取、分离、纯化，操作方便，重现性好，制备的白花丹醌符合对照品的要求，可作为紫金莲及其制剂质量研究时的化学对照品。
【参考文献】
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若干问题探讨[J].上海医药，2007(5):231-232.
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