常见猪病的检测引物汇总
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最全常见疫病实验室检测方法目录常见疫病实验室检测方法 (1)目录 (1)常见ELISA操作方法 (3)亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒 (3)猪瘟抗原检测试剂盒 (6)猪瘟病毒抗体阻断ELISA试验 (12)猪瘟单抗酶联免疫吸附试验 (14)口蹄疫结构蛋白检测方法(3ABC-I-ELISA) (16)口蹄疫抗体液相阻断-酶联免疫吸附试验 (18)PRRS抗体间接酶联免疫吸附试验 (22)犬细小病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (24)犬瘟热病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (26)常见PCR操作方法 (28)猪伪狂犬病毒PCR诊断试剂剂盒 (28)猪圆环病毒PCR诊断试剂盒 (31)常见RT-PCR操作方法 (34)口蹄疫病毒分子检测诊断试剂盒 (34)H5亚型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒说明书(20次) (36)新城疫病毒RT-PCR 检测试剂盒 (38)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒 (41)凝集、血凝实验操作方法 (44)弓形虫间接血凝试验(lHA)试剂使用说明书 (44)伪狂犬病乳胶凝集试验试剂盒 (45)猪细小病毒病乳胶凝集试验〈LAT〉诊断试剂盒使用说明书 (46)猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验〈LAT〉操作程序 (47)猪瘟正向间接血凝试验试剂使用说明书及实验操作程序 (48)口蹄疫正向间接血凝试验 (51)高致病性禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验程序 (52)琼脂扩散试验 (54)鸡马立克氏病 (54)禽流感琼脂凝胶免疫扩散试验 (56)荧光抗体检测 (58)猪瘟荧光抗体试验操作程序 (58)对狂犬病疑似动物脑组织的直接免疫荧光(dFA)检测 (59)血清学诊断检测常用试剂配方 (61)禽流感HA和HI试验用溶液的配制 (61)补充实验 (64)猪流感病毒H1亚型Hl试验抗原与阴、阳性血清说明书 (64)猪流感病毒RT-PCR检测 (67)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒猪繁殖与呼吸综合症(Nsp2 1594~1680变异株)RT-PCR检测实验 (69)一、布鲁氏菌病试管凝集试验抗原与阴、阳性血清 (72)二、布鲁氏菌病虎红平板凝集试验 (73)动物结核病诊断操作规程 (74)常见ELISA操作方法亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒一试剂盒内含物.说明书亚洲 1 型口蹄疫阳性对照血清( 己稀释浓度为 1:8) .96 孔 ELISA 板亚洲 1 型口蹄疫阴性对照血清.液体稀释槽 3% 双氧水.U 型96孔抗原抗体反应板 25×PBST洗涤液(稀释时准确量取).封板膜豚鼠抗血清稀释液.灭活亚洲Ⅰ型口蹄疾病毒抗原 (用冰决包裹 ) 终止液.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒兔抗血清包被缓冲液(碳酸盐)胶囊.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒豚鼠抗血清底物 (柠檬酸 -磷酸盐)缓冲液片剂.兔抗豚鼠血清IgG-辣根过氧化物酶结合物 OPD 片剂二器材准备 ( 需用户自备 )1.移液器:5-50µl移液器、0.2—10µl移液器、50—200µl移液器、50—300µl 12道移液器各一把。
实验室对猪病的检测可以采用多种方法和技术。
以下是一些常见的猪病检测方法:
1.血清学检测:通过采集猪的血液样本,进行血清学检测,包括血清抗体检测和血清学指
标检测。
这些检测可以用于确定猪是否感染了特定的病原体,或者是否已经产生了免疫应答。
2.分子生物学检测:分子生物学技术,如聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应
(RT-PCR)和核酸杂交等,可以用于检测病原体的核酸序列,从而确定猪是否感染了特定的病原体。
这些方法通常能提供快速、准确的结果。
3.细菌学和真菌学检测:通过细菌培养、细菌鉴定和真菌培养等方法,可以检测猪体内是
否存在细菌或真菌感染。
这些检测方法可以确定病原体的种类和敏感性,以便选择合适的治疗方法。
4.组织学检测:通过取得猪的组织样本,进行组织学检测,如病理学检查、免疫组织化学
染色和组织培养等,可以确定病变的组织学特征,辅助诊断和病因分析。
5.免疫学检测:包括免疫荧光、免疫酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫电泳等方法,可
以检测猪体内特定抗体或抗原的存在,用于诊断感染性疾病。
猪病大全,20种猪场常见疾病的防治措施目前的生猪养殖,病害种类日趋复杂。
比如:仔猪黄白痢、猪瘟、猪流感、猪链球菌、猪口蹄疫、猪丹毒、猪传染性胃肠炎、仔猪副伤寒等等频见各大养猪场。
在此,掌握这几种病症的基本治疗措施,有着现实的必要性。
故此下文主要为大家介绍的猪病大全,乃现今猪场常见的几种猪病,及其防治,供参考。
猪病大全,20种猪场常见疾病的防治措施,收藏起来以备不时之需1、猪瘟猪瘟防治,规范引种,严格消毒,接种防疫疫苗。
临床治疗,用抗猪瘟血清,每次10倍剂量注射,诱导机体产生干扰素,达到康复治疗的目的。
期间,做好防控继发病准备,用氟苯尼考注射治疗,防控效果更好。
2、猪链球菌猪链球菌防治,重点改善猪群管理,清洁猪舍环境,接种防疫疫苗附红细胞体病重点是引种和消毒,特别注意打耳号、断尾、阉割等环节的器械消毒。
流行季节饲料添加阿散酸或对氨基苯砷酸钠,病猪可用血虫净、新胂凡纳明配合土霉素、四环素进行治疗。
3、仔猪黄白痢仔猪黄白痢防治,重点加强妊娠期母猪和哺乳期母猪的饲喂管理,注意清洁养猪卫生环境。
母猪产前,接种用大肠杆菌苗,产生母源抗体,仔猪经吮乳能增强抗黄白痢的能力。
病猪注射粘杆菌素,同时灌服庆大霉素,同窝仔猪灌服庆大霉素,严重脱水者进行补液。
猪病大全,20种猪场常见疾病的防治措施,收藏起来以备不时之需4、母猪乳腺炎母猪有乳腺炎的应及时治疗。
弓形虫病重点是消毒、灭鼠,禁止猫狗等动物进出猪舍。
病猪一侧肌注磺胺间甲氧嘧啶+TMP,首次加大剂量,另一侧注射安乃近。
5、应激性腹泻应激性腹泻重点是提高猪舍温度,加强饲养管理。
发病猪注射庆大霉素,全群用诺氟沙星拌料,饮水添加电解多维,严重脱水者进行补液。
6、猪流感猪流感防治,重点提高舍温。
临床用安乃近、柴胡、吗啉胍、地塞米松磷酸钠、青霉素,组合治疗,效果要好些。
改善养殖卫生条件,增强猪群抗病体质,降低此病感染概率的基础上,一旦有疑似病例出现,务必第一时间隔离诊治,及时控制疫情蔓延,确保健康猪群不受污染。
猪链球菌病的实验室鉴定及防治措施猪链球菌病是一种由猪链球菌(Streptococcus suis)引起的猪类常见疾病,属于致病性较强的细菌性感染。
本文将介绍猪链球菌病的实验室鉴定方法以及预防和治疗的措施。
实验室鉴定方法:1. 细菌分离:从病猪体内采集疑似感染的组织样本,如腹膜、淋巴结等,通过无菌操作将样本划取到含有适宜培养基的培养物中,进行培养。
在37℃恒温培养箱中,培养24小时至48小时,观察培养物中是否有菌落形成。
2. 形态鉴定:提取培养物中的菌落,通过显微镜观察菌落形态特征。
猪链球菌为革兰氏阳性球菌,单个菌落呈圆形或椭圆形,表面光滑,边缘整齐。
3. 生理生化特性鉴定:通过一系列生理生化测试,如需氧性/厌氧性、氧需求量、产气等,来判断菌株的生理特性。
猪链球菌在氧气存在的情况下生长较好,能产生酸和气体,同时产生亚硝酸盐。
4. 血清学鉴定:通过血清学方法,如凝集试验或血清诊断试纸片,鉴定猪链球菌的血清学特性。
猪链球菌有多个血清型,主要是血清型2和血清型9。
预防和治疗措施:1. 疫苗接种:猪链球菌病的预防首选疫苗接种,有效提高猪对该病的免疫力。
有条件的养殖场可选择聚合糖疫苗或高效价灭活疫苗,定期进行疫苗接种。
2. 环境卫生管理:保持养殖环境的卫生与清洁,定期清理猪圈和养殖设备,消毒器具和场地,降低猪链球菌的滋生和传播。
3. 强化饲养管理:提高猪场饲养管理水平,保证猪只的营养、健康与免疫状态。
合理配制饲料,增加猪只的抗病能力,提高免疫功能。
4. 临床治疗:一旦发生猪链球菌病,要及时进行诊断和治疗。
在兽医指导下,使用抗生素进行治疗,以控制和消除感染。
总结:猪链球菌病是一种致病性较强的细菌感染疾病,造成了很大的经济损失。
通过实验室的鉴定方法可以准确诊断该病,采取相应的预防和治疗措施能有效控制猪链球菌病的传播,并保障猪场的养殖效益和健康发展。
浅谈种猪疾病的种类及检疫检验方法种猪是畜牧业中非常重要的一个品种,而猪疾病对猪的生长发育和繁殖产生着很大的影响,及时发现和诊断猪疾病显得尤为重要。
本文将从种猪疾病的种类和检疫检验方法两个方面来进行讨论。
一、种猪疾病的种类1. 猪瘟猪瘟是一种由猪瘟病毒引起的急性传染病,主要表现为高热、精神萎靡、食欲下降、呕吐、腹泻等症状。
严重时还可能导致死亡。
猪瘟是一种非常具有传染性的疾病,一旦发生,往往会对整个猪群造成非常严重的危害。
2. 传染性胃肠炎传染性胃肠炎是由转染性传染性胃肠炎病毒引起的急性传染病,主要表现为呕吐、腹泻、腹痛等症状。
猪只的精神状态下降,食欲也大大减退。
传染性胃肠炎同样也具有很高的传染性,可能会引起整个猪群的感染。
3. 猪链球菌病以上仅是几类常见的猪疾病,实际上猪的疾病种类还有很多。
针对这些疾病,我们需要进行相应的检疫检验,以便及时发现、诊断和控制疾病的传播。
二、检疫检验方法1. 临床观察法临床观察法是最为常见的一种检疫检验方法,通过对猪只的临床表现进行观察和分析,以便及时发现和诊断疾病。
在进行临床观察的时候,需要对猪只的食欲、精神状态、体温、呼吸等进行仔细观察,如果发现异常情况,应当及时采取相应的治疗措施。
2. 疫苗接种法疫苗接种是预防猪疾病的一种非常有效的方法,通过接种相应的疫苗,可以有效地提高猪只的免疫力,从而减少疾病的发生。
在接种疫苗的时候,需要选择正规的养猪场或者疾病防制机构进行接种,确保接种的疫苗是合格的,避免出现接种失败导致的问题。
3. 实验室检测法实验室检测法是通过实验室对猪只的血液、粪便等进行检测,进而进行疾病的诊断和判断。
常见的实验室检测方法包括血清学检测、微生物学检测、分子生物学检测等。
这些检测方法可以较为准确地判断猪只是否感染了某种疾病,从而及时采取相应的治疗措施。
4. 环境检测法除了对猪只本身进行检测外,对养猪场的环境进行检测同样也非常重要。
通过检测饮水、饲料、粪便等环境因素,可以更好地了解猪只的生长环境,并及时发现可能存在的疾病传播源,从而采取针对性的措施。
猪的检测项目
摘要:
1.猪的检测项目概述
2.猪的检测项目具体内容
3.猪的检测项目的意义和应用
正文:
猪的检测项目是指针对猪的各种疫病、生长状况、肉质等方面进行的检测。
这些检测项目有助于保障猪肉的质量和安全,提高猪场的经济效益,同时也有助于防止疫病的传播。
猪的检测项目具体包括以下几个方面:
1.疫病检测:主要包括猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等疫病的检测。
通过检测,可以及时发现疫病,采取有效措施进行防治,防止疫病的传播和蔓延。
2.生长状况检测:主要包括猪的体重、体长、背膘厚等生长指标的检测。
通过检测,可以了解猪的生长状况,为猪场的饲养管理提供科学依据。
3.肉质检测:主要包括猪的肌肉组织、脂肪组织、骨骼肌纤维等肉质指标的检测。
通过检测,可以了解猪的肉质状况,为猪肉的质量评价和分级提供依据。
4.饲料成分检测:主要包括猪饲料中的蛋白质、脂肪、矿物质、维生素等营养成分的检测。
通过检测,可以了解猪饲料的营养成分,为猪场的饲料配方提供依据。
猪的检测项目的意义和应用主要体现在以下几个方面:
1.保障猪肉质量和安全:通过对猪的检测,可以及时发现疫病、生长异常等情况,采取有效措施进行处理,从而保障猪肉的质量和安全。
2.提高猪场经济效益:通过对猪的检测,可以为猪场的饲养管理、饲料配方等提供科学依据,提高猪场的经济效益。
3.防止疫病传播:通过对猪的检测,可以及时发现疫病,采取有效措施进行防治,防止疫病的传播和蔓延。
中小规模养猪场猪病实验室检测技术及注意事项随着养猪业的不断发展,养猪场的规模也在不断扩大。
对于中小规模养猪场来说,猪病的检测是非常重要的,可以帮助养猪场及时发现猪的健康问题,采取有效的措施防止疫病的传播。
建立一套完善的猪病实验室检测技术及科学的操作规范是非常必要的。
一、实验室检测技术1、病原微生物的检测病原微生物的检测是猪病实验室检测的核心内容之一。
在中小规模养猪场,主要需要检测的病原微生物包括猪瘟病毒、圆环病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪流行性腹泻病毒等。
针对这些病原微生物的检测,需要使用PCR技术、ELISA技术等现代化的生物学检测手段,能够快速、准确地检测出病原微生物的存在。
除了病原微生物,猪病实验室还需要对病原菌进行检测。
常见的病原菌有沙门氏菌、大肠杆菌、猪链球菌等。
针对这些病原菌的检测,需要使用细菌培养、PCR技术、酶联免疫吸附法等方法,能够准确地鉴定出病原菌的种类和数量。
3、疫苗滴度的检测在猪病防控中,疫苗的滴度检测是非常重要的。
通过检测疫苗的滴度,可以判断疫苗的有效性,为猪病的预防提供有力的保障。
疫苗滴度的检测通常采用细胞培养、传染量测定法等技术,能够准确地测定出疫苗的滴度。
二、注意事项1、实验室环境的清洁与消毒建立猪病实验室时,首先要保证实验室环境的清洁与消毒。
实验室的各项设备、培养皿、试剂瓶等物品都需要定期进行清洁和消毒,以防止受到外来细菌的污染。
2、实验室操作规范在猪病实验室中,操作规范是非常重要的。
工作人员要严格按照操作规程,做好实验记录,避免实验过程中发生误操作或交叉感染。
3、安全防护措施为了保障工作者的健康和安全,猪病实验室需要配备充足的防护设备,包括口罩、手套、防护服等。
在操作过程中,要注意避免接触有害物质,以免造成伤害。
4、废弃物处理在实验室检测过程中产生的废弃物需要及时清理处理,避免对环境和人员造成污染。
废弃物可以通过消毒和分装等方式进行处理,确保实验室的环境卫生。
几种常用的猪病检测方法在饲养猪的过程中,掌握一些常用的猪病检测方法,能帮助饲养户更加科学、更加系统的饲养猪,提高猪的出栏率,减少猪病的发生概率,同时加强猪病检测方法的运用和研究,不仅能够快速精准地检测出猪病的类型,及时给予科学有效的治疗,降低养殖风险。
还能够提高猪病研究检测的水平,提升猪病的预防和治疗效果。
下面介绍三种常见的猪病检测方法。
1、致病性大肠杆菌的检测这种猪病是饲养过程中经常发生的疾病,是饲养户必须注重的一种猪病。
在这类型猪病的检测过程中,应该掌握科学的方法,借助于材料实验法来进行有效检测。
在实践检测过程中,EMB、TSI、小白鼠等,这些材料是大肠杆菌检测的基本材料,准备好这些材料再开展有效的分离实验,其次分离培养,这是猪病检测的重要环节,在实际的检测过程中,需要借助于精密性的分离培养来观察细菌的演变。
将病猪的主要器官,如肝、脾等主要部位,给予针对性的接种实验,然后放在恒温37℃中培养一天时间,观察这些核心器官的变化。
再次进行一定的生化鉴定,通过一系列反应实验来进行科学的检测与试验。
在MR试验中,可以通过颜色的不同来判断检测结果,红色代表阳性反应,黄色代表着阴性反应,最后在猪病的检测过程中,还应该进行科学的致病性实验,来判断是哪一类的病毒、细菌导致大肠杆菌的发作。
在此基础上进行科学的药敏实验,通过药敏实验可以精准地分析出致病因子,能够精准地分析出这类型病菌的抑制因子,进而选择敏感药物,来有效地抑制这类型病菌的发生。
2、沙门氏菌的检测在猪病类型中,因沙门氏菌的感染而引起猪生病同样是比较常见的。
为了检测这一类型的猪病,需要借助于科学的试验,精密性的检测流程,才能有效的检测这一类型的猪病。
首先在检测开始前,需要结合实验来进行相关材料的准备,这是实验开始的基础,也是提高检测效果的基础。
这些实验材料包括SC、LD等等。
其次进行科学的分离试验,在实践过程中,需要筛选病猪的肝、脾等核心器官。
在无菌环境下保存这些器官,同时在实验开始后,还需要对这些核心器官进行一定的剪取,剪取方法仍需要保障肝脾器官的无菌操作。
腹泻诊断:
田小艳 猪流行性腹泻病毒( Porcine epidemic diarrhea virus ,PEDV) 、猪
传染性胃肠炎病毒( Porcine t rans2 missible gast roenteritis virus , TGEV)
和猪轮状病毒( Porcine rotavirus , PRV) 是3 种引起猪病毒性腹泻的重要病
原
引物设计与合成 根据GenBank 中PRV、TGEV 和PEDV 核酸序列分别设计引物:
上游P1 : 5′-AAAGATGCTAGGGACAAAATTG-3′;下游P2 :
5′-TTCAGATTGTGGAGCTATTCCA -3′。
P1/ P2 为PRV 检测引物,扩增VP6 基因片段的309bp 。
上游P3 : 5′-GATGGCGACCAGATAGAAGT -3′
下游P4 : 5′-GCAATAGGGTTGCTTGTACC -3′。P3/P4 为TGEV 检测引物,扩增N 基
因保守片段的612bp 。
上游P5 : 5′-GAAA TAACCA GGGTCGTGGA-3′; 下游P6 : 5′- GCTCACGAACA GCCACA
TTA -3′。P5/ P6 为PEDV 检测引物,扩增N 基因保守片段的492 bp 。
张 坤,
本试验旨在建立能同时检测猪流行性腹泻病毒( PEDV) 、猪传染性胃肠炎病毒( T GEV) 和猪A群轮状
病毒( GAR) 的多重RTPCR 检测方法
PEDV
P1 5-TTCGGTTCTATTCCCGTTGATG-3
P2 5-CCCATGAAGCACTTTCTCACTATC-3
扩增长度663
TGEV
P3 5 TT ACAAACTCGCT AT CGCAT GG3
P4 5 TCTT GTCACAT CACCTTT ACCTGC3
扩增长度528
GAR
P5 5 CCCCGGT AT TGAATATACCACAGT3
P6 5 TTT CTGT TGGCCACCCTT TAGT3
扩增长度333
李敬双 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因序列及其相关
的RT-PCR检测方法
TGEV P1:5′ -TTGTCAACACACAAGGGCAAGC-3′
TGEV P2:5′ -CAAGTCCAAAAGTGCGATCA CC-3′
PEDV P1:5′ - TCGTTTTGGGTGGTTACCTAC-3′
PEDV P2:5′ - AGTGGCAAATACATTGGCAGCG-3′
扩增片段长度TGEV 为426 bp,PEDV 为584 bp。
由大连宝生物公司合成。
蓝儿诊断:
何玲,
JXA1 变异野毒与JXA1-R 疫苗毒的快速鉴别体系, 其目的片段大小分别为400、290 bp,
根据PRRSV 经典毒株CH1a( GenBank 登录号: AY032626) 、VR2332 ( GenBank
登录号: EF536003) 与变异毒株GD ( GenBank 登录号: EU109503) 、HuN4( GenBank 登录:
号EF635006) 、PJX143 ( GenBank 登录号: EF488048)、JXA1 ( GenBank 登录号: EF112445)
的序列差异设计了针对变异毒株的特异性引物, BYFP: 5-GTCCTAACGGTTCGGAAGAAAC-3; BYRP:
5-GAGCTGAGTATTTTGGGCGTGT-3。根据疫苗毒JXA1 R ( GenBank 登录号: FJ548853) 与野毒
株的序列差异设计了PRRSV 疫苗毒的特异性引物, H MFP: 5-GAATGTTCGCACGGTCTC-3;
HMRP:5-TCAAGGAAATGGCTGGT-3。
PRRSV JXA1 与JXA1-R 目的基因大小分别为400、290 bp, 与预期大小相符。疫苗毒JXA1-R
用BYFP/ BYRP 也能扩增出大小为400 bp 的目的条带, 但是变异野毒JXA1不能扩增出引物对
HMFP/ HMRP 的目的片段( 图1)
王鑫
,
参考VR2332 ( AY150564) 、CH1a ( AY032626) 、JXA1 ( EF112445) 及
HUN4( EF635006) 等毒株的ORF5 基因序列, 设计1 对引物。P1:
5-TCTTTTTGGCATACTGTTGGCA,P2: 5-GCCGTGCTATCAAGACAGAAGT。在美洲株VR2332 的位置分
别为13 750~ 13 772, 14 394~14 416跨越整个ORF5 区域, 扩增片段长666 bp。引物送长春
联星生物制品公司合成。
猪瘟诊断:
扩增CSFV NS5B 区599 bp 目的片段。
P1 TRACCAYGCAYATGWCAGAAGTACC 11053 - 11077
P2 AGTCGACTTCCCTGGTTTCACTTG 11628 - 11651