普鲁士蓝染色液说明书(核固红法)

普鲁士蓝染色步骤
普鲁士蓝染色的步骤包括：
1. 切片：将待染色的组织切成3~5微米的薄片。

2. 烤片：将切片放入烤片机中，在70℃下烤制30分钟。

3. 捞片：将烤好的切片放入水浴锅中，温度设置为49℃，浸泡20秒后取出。

4. 脱蜡、复水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中脱蜡，然后放入无水乙醇、75%乙醇、蒸馏水中复水。

5. 染色：将切片放入普鲁士蓝染色工作液中，完全覆盖组织，室温染色1小时。

染色后，用自来水冲洗切片，去除多余的染料。

6. 复染：将切片放入普鲁士蓝染液C中，室温染色3~5分钟。

染色后，用自来水冲洗至切片流水无色。

7. 脱水封片：将切片经3次无水乙醇脱水，每次5分钟，再经二甲苯透明5分钟，然后以中性树胶封片。

以上是普鲁士蓝染色的基本步骤，每一步都需要仔细操作以保证染色效果。

普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理
首先，普鲁士蓝是一种阳离子染料，可以与阴离子物质发生结合。

它的颜色为深蓝色，对于电镜染色或组织切片的染色非常适用。

其次，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理与铁离子的还原反应有关。

普鲁士蓝染色试剂盒中包含了还原剂和氧化剂。

还原剂将铁离子还原为两价的铁离子，而氧化剂将两价的铁离子氧化为三价的铁离子。

铁离子在试剂盒中的相互转变过程中，会和普鲁士蓝结合形成普鲁士蓝染料。

这种染料具有很强的颜色稳定性和耐光性。

在实际的染色过程中，首先需要准备待染物样本，通常是细胞切片或组织切片。

然后将待染物样本浸入染色试剂盒中，使其充分浸透。

接着，将样本置于特定条件下进行染色反应。

染色反应的条件通常包括温度、反应时间以及试剂盒中存在的其他化学物质的浓度等。

染色反应进行的时间越长，染色的深度越深。

染色反应进行的温度越高，染色的速度越快。

普鲁士蓝染色试剂盒中的其他化学物质对染色反应的影响也非常重要。

例如，存在过量的铁离子会抑制染色反应的进行，而存在过量的氧化剂会使染色淡化。

最后，染色完成后，需要通过温和洗涤、脱水和固定来清洁和稳定染色结果。

这样可以去除多余的染色物质，使染色结果更加清晰和稳定。

总而言之，普鲁士蓝染色试剂盒的染色原理主要涉及阳离子染料的结合特性，以及铁离子的还原和氧化反应。

这种染色方法适用于电镜染色和组织切片的染色研究中，具有简单、快速、稳定等优点。

北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS：75881-23-1分子式：C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝（Alcian）又称爱先蓝或阿尔辛蓝等，是一种类铜钛花青共轭染料，最初用于纺织纤维染色。

这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。

阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。

该异硫脲基呈中度碱性，使阿利新蓝带阳离子。

阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明，普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。

如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物，即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。

pH值为2.5时组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，是带有羧基的组织（如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色。

pH值为1.0时，组织内的硫酸根电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。

中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白）不能与阿利新蓝反应。

操作步骤（仅供参考）：1、二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，入蒸馏水再水化。

2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。

3、入阿利新蓝染色液染色30min。

4、流水冲洗5min。

5、入核固红染色液复染5-10min。

6、流水冲洗1min。

北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水，二甲苯透明。

8、中性树胶封片。

染色结果：注意事项：1、固定液采用10%中性福尔马林。

2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖，应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝，即调pH值为1.0。

染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同，染色时间应相应延长。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

产地：国产提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。

Leagene。

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核固红染色液(0.2%)
简介：
核固红(Nuclear fast red)又称细胞核坚牢红，分子式为C14H8NNaO7S，分子量为357.27，微红至深棕色粉末，溶于乙醇和水。

核固红染色液(0.2%)是由核固红、氧化剂组成，常用于细胞核染色。

组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。

2、一般复染细胞核时间控制在5～10min。

染色结果：细胞核呈不同程度的红色。

相关：编号
名称
DC0096 Storage Nuclear fast red stain(0.2%)100ml RT 避光使用说明书1份
编号名称
DA0059 甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
DA0072 中性红染色液(1%)
DE0001 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)
DG0005 糖原PAS染色液
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。

Lillie 二价铁染色液简介：含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。

当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，主要显示三价铁盐。

在极少数情况下，铁存在于其还原态的亚铁之中，Lillie 法是显示二价铁的很好地的方法，其特异性较好。

组成：自备材料：1、系列乙醇2、蒸馏水操作步骤(仅供参考)：1、 组织固定于中性福尔马林或其他碱性固定液，常规脱水包埋。

2、 切片厚度，常规脱蜡至水。

3、 蒸馏水水洗。

4、 切片入Lillie stain (见注意事项4)，浸染。

5、 蒸馏水充分冲洗。

6、 入核固红染色液，淡染细胞核。

7、 蒸馏水冲洗。

8、 常规脱水透明，中性树胶封固染色结果：编号 名称DJ0004 2×50mlStorage 试剂(A)A1:Lillie 二价铁A 液 25ml RT A2:Lillie 二价铁B 液25mlRT临用前，取A1、A2混合即为Lillie stain ，不宜提前配制。

试剂(B): 核固红染色液 50mlRT 避光 使用说明书1份二价铁深藤氏蓝细胞核、其他组织红色阴性对照(可选)：取相同对照切片脱蜡至水。

结果为阴性。

注意事项：1、该染色法适用于石蜡切片、冰冻切片和树脂切片，切片脱蜡应尽量干净。

2、组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。

避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

3、整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。

4、Lillie stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。

甲基蓝水溶液(Methyl blue,1%)简介：甲基蓝(Methyl blue)又称棉蓝，分子量为799.8，常被用作生物染色剂，用于动物组织学中原生动物活体、细菌、神经细胞的染色。

组成：编号DZ0019 Storage名称Methyl blue Stain(1%) 100ml RT 避光使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、样品处理①对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5～10min。

更换新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。

无水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸馏水2min。

②对于冰冻切片：蒸馏水2min。

③对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10min以上。

(或采用如下步骤：每25cm2加入PBS/甲醇溶液5ml，静置2min，弃液。

加入新鲜甲醇5ml，静置10min，弃液。

)蒸馏水洗涤2min。

换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、美蓝染色①Methyl blue Stain(1%)染色(可以根据染色结果和要求调整时间)。

②用蒸馏水或自来水充分洗涤，进行观察和拍照。

染色结果：组织或细胞蓝色注意事项：1、第一次使用本试剂时建议先取1～2个样品做预实验。

2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。

相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液DZ0037 印度墨汁NR0003 Lezol(总RNA提取试剂)PS0013 RIPA裂解液(强)TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。

红细胞内外铁粒染色一、原理：骨髓细胞外铁及有核红细胞中铁粒与亚铁氰化钾作用后，呈普鲁士兰阳性反应。

二、试剂：1、4%低铁氰化钾25ml（低铁氰化钾1g+蒸馏水25ml配成4%低铁氰化钾）2、4%HCL 25ml。

（+蒸馏水 ml即4％HCL）染色时1、2液混合即可。

3、1%核固红(核固红配制时，用5%硫酸铝溶解)25g硫酸铝+500 ml蒸馏水即5%硫酸铝,1g核固红+100ml5%硫酸铝即1%核固红.三、方法：1、干燥血片或骨髓片，用福尔马林37℃薰蒸固定5分钟水洗(蒸馏水)2、入4%低铁氰化钾盐酸混合液37℃(先预热20分钟)，置入血片或骨髓片40分钟水洗待干3、入1%核固红复染15~20分钟，水洗待干。

(蒸馏水)四、结果判定：铁粒幼细胞：胞质内出现兰色颗粒的幼红细胞。

环铁粒幼细胞：幼红细胞质内的兰色颗粒在6个以上，并围绕于核周排列成环形者。

铁粒红细胞：含有兰色铁颗粒的红细胞。

红细胞外铁：根据铁量的多少以“0”—“++++”表示，正常人一般为“+”—“++”（观察骨髓小粒）“0”：无铁粒可见“+”：有少数铁粒或偶见到铁小珠“++”：有铁粒小珠和少数小块“+++”：有很多的铁粒小珠和少数铁小块“++++”：有很多的铁粒、小珠并有小块红细胞内铁：计数100个有核红细胞，以含铁粒红细胞百分数报告。

正常人一般铁粒幼红细胞占40%，以I、II型为主，无环形铁粒幼红细胞。

“+”仅含1个铁颗粒“++”含2-5个铁颗粒“+++”含6-9个铁颗粒“++++”含10个以上铁颗粒五、临床意义：1.鉴别缺铁性与非缺铁性贫血：缺铁性贫血时，细胞外铁消失，铁粒幼红细胞减少，平均为3%，因此铁染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。

2.诊断铁粒幼红细胞性贫血：铁粒幼细胞性贫血时，细胞外铁显著增多（++++），其所含铁颗粒的数目也较多，颗粒也粗大。

因此本染色可作为诊断铁粒幼细胞性贫血的重要方法。

出现较多的环形铁粒幼细胞，可占幼红细胞的15%以上。

普鲁士蓝测定法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述部分:普鲁士蓝测定法是一种常用的分析化学方法，用于测定溶液中的亚铁离子（Fe2+）的浓度。

该方法以其简单、快速和准确的特点而被广泛应用于环境监测、化学分析和生物科学研究等领域。

在普鲁士蓝测定法中，普鲁士蓝（Prussian Blue）作为指示剂，通过与亚铁离子形成可见光谱的深蓝色沉淀来进行浓度的测定。

普鲁士蓝是一种由亚铁离子和氰酸根离子所组成的无机化合物，其具有较高的稳定性和灵敏度。

本文旨在全面介绍普鲁士蓝测定法的原理、步骤和应用，并对其进行评价和展望。

首先，我们将详细阐述普鲁士蓝测定法的原理，包括指示剂的选择和反应机理。

随后，我们将介绍该方法的具体步骤，包括样品的处理和浓度计算等。

最后，我们将探讨普鲁士蓝测定法在不同领域的应用，例如环境水质监测和医学诊断等。

通过对该方法的全面分析和综合评价，我们可以更好地了解普鲁士蓝测定法的优势和局限性，并为未来的研究提供一些建议和展望。

综上所述，本文将对普鲁士蓝测定法进行深入的探讨和总结，旨在为读者提供一个关于该方法的全面介绍，并推动其在实际应用中的进一步发展和运用。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以描述普鲁士蓝测定法长文的整体框架和各个部分的内容摘要。

文章结构如下：1. 引言：本部分介绍普鲁士蓝测定法的概述，包括其基本原理、步骤和应用范围。

同时，描述文章的结构和各个部分的内容概要。

2. 正文：2.1 普鲁士蓝测定法的原理：该部分详细解释普鲁士蓝测定法的基本原理，包括反应机理和主要的化学反应过程。

同时，探讨普鲁士蓝与待测物质之间的关系和相互作用。

2.2 普鲁士蓝测定法的步骤：本节介绍普鲁士蓝测定法的具体操作步骤，包括实验所需试剂和仪器设备，以及每个步骤详细的操作流程。

同时，说明每个步骤的目的和原理，并提供实验中可能遇到的注意事项。

2.3 普鲁士蓝测定法的应用：该部分列举普鲁士蓝测定法在不同领域中的应用案例，包括环境分析、化学分析和生物医学研究等。