软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项

软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。

番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。

番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。

自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。

操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2.常规脱蜡至水。

3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。

4.酸性乙醇分化液分化15s。

5.蒸馏水洗10min。

6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。

7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。

8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

9.二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h 失去染色能力。

3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。

5.95%乙醇脱水时间不宜过长。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

革兰氏染色法操作规程革兰氏染色法操作规程1目的建立革兰氏染色法操作规程，确保革兰氏染色法操作规范化、科学化。

2范围适用于用革兰氏染色法对细菌进行分类和鉴定。

3职责3.1检验员：负责按本规程进行革兰氏染色操作。

3.2 QC主管、质量部经理：负责监督。

4内容4.1仪器与用具酒精灯、洁净的盖玻片、接种环、滴管、生物显微镜。

4.2材料4.2.1试剂结晶紫、番红、碘化钾、碘、95%乙醇、草酸铵、香柏油。

4.2.2试液及配制方法4.2.2.1 结晶紫染色液：称取结晶紫2g，溶于20ml 95%乙醇中；称取草酸铵0.8g，溶于80ml水中；将两种溶液混合，静置48h后使用。

4.2.2.2碘染色液：称取碘化钾2g，加5～10ml水使充分溶解，加碘1g，待完全溶解后，加水至300ml。

4.2.2.3 番红复染液：称取番红0.25g溶于10ml 95%乙醇中，然后加水100ml。

4.3操作步骤4.3.1 样品固片取一干净的载玻片，用接种环挑取一环无菌水于载玻片中，挑取少量菌于生理盐水中涂片或直接滴一滴待检菌在盖玻片中央，自然干燥固定。

4.3.2 初染滴加结晶紫染液于已固定的涂片上，染1min，用水冲洗、甩干。

4.3.3 媒染滴加碘染色液，液作用1min，用水冲洗、甩干。

4.3.4 脱色滴加95%乙醇脱色，置白色背景下，侧动盖玻片，直至无紫色脱落为止（约为20-30秒），立即用水冲洗、甩干。

4.3.5 复染滴加番红复染液，染1-2 min，用水冲洗、甩干。

4.3.6 镜检置油镜下观察。

先用低倍镜找准目标，于涂有样品处滴加香柏油一滴，用油镜观察。

4.3.7 结果判定革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。

以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常呈假阳性。

4.4 注意事项4.4.1 待检菌菌龄应为18～24h。

一般情况下，革兰氏阴性菌的染色反应较稳定，不易受菌龄长短影响；而革兰氏阳性菌，有的在幼龄时呈阳性，超过24h可变为阴性。

番红O固绿染色液
货号M025
原理:
番红(也称作番红O或基本红2)是个用在组织学和细胞学的生物染色剂。

番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂，将所有的细胞核染成红色。

这在革兰氏染色和内孢子染色都
试剂盒组成:
操作流程：
1. 石蜡切片脱蜡至水，自来水冲洗3min;
2. (取等量的A液B液混合，即为铁苏木素溶液。

现用现配，用多少配多少，用后丢弃。

混合后的染色液为紫黑色，染色能力强，并不易褪色。

但不易久存，24小时后失去染色能力。

)铁苏木精染色3min;自来水冲洗3min;
3. 盐酸酒精溶液分化3-5Sec；自来水冲洗3min。

4. 入固绿染色液中染色8min；
5. 在1％的醋酸中快速分化3Sec；
6. 速洗1min;
7. 入番红O染色液中染色3min（最多）
8. 95％酒精冲洗浮色；
9. 100%酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。

结果：
细胞核呈黑色，细胞浆、软骨下骨区呈绿色，粘蛋白、软骨及钙化软骨、肥大细胞颗粒呈橙色/红色。

染色注意事项:
1.标本固定尽可能用多聚甲醛固定.脱钙后一定要流水冲洗过夜后再脱水包埋.否则番红不
易着色.
2.如果染色不理想可以考虑在细胞核染色后用饱和苦味酸水溶液处理30min,水洗后再入
固绿染色液染色.
3.番红O固绿染色液分化很关键,步骤5、6时要快；步骤8速度要快，否则红色褪色。

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

改良番红O-固绿软骨染色液简介：软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。

软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。

改良番红O-固绿软骨染色法的染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色，与呈现红色的软骨对比鲜明，从而将软骨组织与骨组织区分开。

组成：编号名称DB00825×50mlDB00825×100mlStorage试剂(A) A1: Weigert A液25ml 50ml RT 避光A2: Weigert B液25ml 50ml RT试剂(B): 酸性乙醇分化液50ml 100ml RT试剂(C): 固绿染色液50ml 100ml RT 避光试剂(D): Safranin O stain 50ml 100ml RT 避光试剂(E): 乙酸溶液50ml 100ml RT使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。

2、常规脱蜡至水。

3、入新鲜配制的Weigert染液染色。

4、酸性乙醇分化液分化。

5、蒸馏水洗1min。

6、在固绿染色液内浸染，蒸馏水洗1min。

7、入Safranin O stain内浸染色，蒸馏水洗1min。

8、用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，蒸馏水洗1min。

9、分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。

10、二甲苯透明，光学树脂封固。

染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色注意事项：1、需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。

2、Weigert染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h后失去染色力。

3、切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。

有效期：6个月有效。

番红染色原理
番红(也称作番红O或基本红2或藏红T)是个用在组织学和细胞学的生物染色剂。

番红在一些染色的实验计划表中用作复染剂，将所有的细胞核染成红色。

这在革兰氏染色和内孢子染色都是典型的复染剂。

它也可以被用来检测软骨、黏蛋白和肥大细胞的颗粒。

番红是从藏红花柱头中提取的一种天然染色剂，为橙红色粉末。

是植物组织学实验中最常用的染色剂之一。

可溶解于水和乙醇。

通常配成1%水溶液染植物的木质部，也可以按照以下配方配成苯胺番红液对组织进行块染：番红5g，95%乙醇50mL，苯胺20mL，蒸馏水450mL。

番红能够对植物的木质化、栓质化和角质化部分进行染色，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。

染色时间一般为2~24hrs，常与固绿等进行合作染色。

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。

将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。

将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。

将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。

两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

番红固绿染色(骨组织)染色步骤下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!而且本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!骨组织的染色是在病理学中常见的一种技术，用于观察骨组织的微观结构和染色表现，从而帮助医生做出诊断和治疗方案。