第七章-食用菌菌种生产

[食用菌技术]食用菌菌种生产技术规程前言食用菌菌种生产技术是否规范直接影响菌种的质量，从而影响食用菌产品的质量。

我国食用菌菌种生产采用母种、原种、栽培种的三级繁育程序。

为了实现食用菌菌种生产技术规范化，确保菌种质量，维护菌种生产者、经营者和使用者的合法权益，特制定本标准。

本标准的附录A、附录B均为规范性附录。

本标准由农业部种植业管理司提出。

本标准起草单位：中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心、中国农业科学院土壤肥料研究所、农业部食用菌产品质量监督检验测试中心(上海)。

本标准主要起草人：张金霞、贾身茂、王南、左雪梅、申进文．食用菌菌种生产技术规程1. 范围本标准规定了各种食用菌各级菌种生产的生产场地、厂房设置和布局、设备设施、使用品种、生产工艺流程、技术要求和贮存运输要求。

本标准适用于各种各级食用菌苗种生产。

2. 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 4789.28---1994 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB 9387--1988 食品包装用聚乙烯成型品卫生标准GB 9688?1988 食品包装用聚丙烯成型品卫生标准3. 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

3.1 品种strain经各种方法分离、诱变、杂交、筛选而选育出来具特异性、均一(一致)性和稳定性的具有同一个祖先的群体。

也常称作菌株或品系。

3.2菌种pure cu]ture经人工培养并可供进一步繁殂或栽培使用的食用菌苗丝纯培养物，包括母种、原种乳栽培种。

3.3母种 stock culture经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和单位，也称一级种、试管种。

《食用菌生产》课程标准一、概述（一）课程性质本课程是高职园艺技术类专业的专业主干课程。

通过本课程的学习，使学生具备食用菌种生产与常见菌类栽培生产技能。

（二）课程基本理念“以就业为导向，以能力培养为本位、“理论以实用够用”为原则，强化专业技能训练为中心。

本课程学习重点在于掌握必须的基本理论知识的同时，加强基本技能的实习实训教学，使学生熟练掌握食用菌的基本理论及实习实训操作技术技能。

培养适应食用菌生产、管理、服务第一线需要的高级技能型人才。

（三）课程设计思路按照“以能力为本位，以职业实践为主线，以项目课程为主体的模块化专业课程体系”的总体设计要求，本门课程以菌种生产和菌类栽培生产能力为基本目标，彻底打破学科课程的设计思路，紧紧围绕工作任务完成的需要，选择和组织课程内容，突出工作任务与知识的联系，让学生在职业实践活动的基础上掌握知识，增强课程内容与岗位能力要求的相关性，提高学生的就业能力。

学习项目选取的基本依据是该门课程涉及的工作领域和工作任务范围，在设计过程中，以菌种生产和菌类生产的产品为载体，使工作任务具体化，产生具体的学习项目。

其编排依据是该职业所特有的工作任务逻辑的关系，而不是知识关系。

依据工作任务的需要、高等职业学校学生的学习特点和职业能力形成的规律，按照“学历证书与职业资格证书嵌入式”的设计要求确定课程的知识、技能等内容。

依据各学习项目的内容总量以及在该门课程中地位分配各学习项目的课时数。

学习程度用语主要使用“了解”、“理解”、“能”或“会”等用语来表达。

“了解”用于表述事实性知识的学习程度，“理解”用于表述原理性知识的学习程度，“能”或“会”用于表述技能的学习程度。

二、课程目标1、总目标通过任务引领的项目活动，使学生具备从事食用菌种生产和菌类栽培生产的基本知识和基本技能。

培养学生就业、择业及创业就业能力。

2、具体目标能掌握食用菌种生产和菌类栽培生产的基本知识；会食用菌一级菌种培养基配制、灭菌，无菌操作接种、培养；会食用菌一级纯菌种的组织分离培养、扩大繁殖；会食用菌二级菌种谷粒培养基配制、灭菌，无菌操作接种、培养；会食用菌三级菌种木屑培养基、棉籽壳培养基配制、灭菌，无菌操作接种、培养；会蘑菇、香菇、金针菇、草菇、平菇等代表性菇类的栽培生产。

食用菌菌种的制作与培养一、母种制作（一）母种培养基制作1.母种培养基的种类母种是菌种生产的关键，要求纯度高，不能混生杂菌，同时母种的菌丝体较为纤细，分解培养料的能力较弱。

因此，母种菌丝体需要培养在营养丰富，易被吸收，表面光滑易于鉴别有无杂菌感染的琼脂培养基上。

适合母种菌丝生长的琼脂培养基种类很多，常用的有下列几种：（1）马铃薯一葡萄糖一琼脂培养基马铃薯（去皮）200克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（2）麦芽汁一葡萄糖一琼脂培养基干麦芽250克琼脂15〜20克葡萄糖（或蔗糖）10克水 1000毫升（3）胡萝卜一葡萄糖一琼脂培养基胡萝卜100克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水 1000毫升（4）蘑菇汁一葡萄糖一琼脂培养基（适用于蘑菇）鲜蘑菇250克琼脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水 1000毫升（5）蛋白胨一葡萄糖一琼脂培养基蛋白胨2克葡萄糖20克磷酸氢二钾2克维生素B1 （硫胺素）0.5毫克磷酸二氢钾0.5克琼脂18克硫酸镁0.5克水1000毫升2.母种培养基的制法以最常用的马铃薯一葡萄糖一琼脂培养基的制法为例介绍如下：先将马铃薯去皮，洗涤，切成小块加水1000毫升，煮沸15〜20分钟，取双层纱布过滤，取其滤液，加入琼脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加热使其溶化，最后补足水分，使其容量仍为1000 毫升。

趁热分装于试管中，装量约为试管长度的1/5左右，装管时要注意不使培养基沾污试管壁和试管口。

试管口塞上大小合适的棉花塞，塞入试管口内的长度为棉塞总长的3/5。

塞好棉塞后，每10 支作一捆，用牛皮纸包扎好后，置铁丝网笼中，然后进行高压灭菌。

如作为抱子分离用，则将培养基分装于三角瓶或培养皿中，然后高压灭菌。

3.母种培养基的消毒灭菌：母种培养基通常用高压蒸汽灭菌锅来消毒灭菌，常用的高压蒸汽灭菌锅有直式、卧式和手提式三种。

将配制好后的母种培养基移入上述任何一种高压蒸汽灭菌锅中，在15公斤/平方厘米压力下，灭菌30分钟。

[基础]食用菌菌种制作技术图文1图文食用菌菌种制作技术一、菌种生产程序母种繁殖栽培种示意图菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。

其中母种的分离选育技术性强，一般由专业制种单位制作。

而原种和栽培种的制作则比较简单。

下面介绍各级菌种的制作技术。

二、母种的分离选育母种可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下：1、采集种源采集种源用具选择有八成熟、朵形圆正、肉质肥厚、无病虫害的优良菇体作为种源。

采集1～2朵装入灭菌纸袋，带回接种箱进行消毒。

2、母种培养基配制母种培养基常用的是琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200～250g，琼脂15～20g，葡萄糖20～25g，清水1000ml。

也可以加硫酸镁1～1.5g，维生素B1微量，磷酸二氢钾2～3g。

先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于烧杯（或铝锅）内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。

然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化。

再将葡萄糖等加入，并补水至1000ml。

稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液。

将汁液趁热装入玻璃试管内，装至管长的1/5。

管口用棉花塞塞紧。

或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量为20ml。

然后置于高压锅内，在98～108千帕/cm2的压力下灭菌30分钟左右。

灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。

3、母种分离方法①、孢子弹射法将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的孢子自然散落在培养基上萌发菌丝。

也可以剪取一小块菇体，贴附在试管斜面培养基表面，让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种。

②、组织分离法将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半掰开，或用刀片切开，使菇体形成对开。

在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5mm×10mm的小薄片，用接种针挑取1块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种。

食用菌菌种制作的关键步骤
食用菌菌种制作是培育食用菌的关键步骤之一，下面是制作食用菌菌种的主要步骤：
1.培养基准备：准备适合菌种生长的培养基。

培养基的配方根据不同的菌种和培养条件而异，通常包括碳源（ 如葡萄糖）、氮源（ 如酵母提取物）、矿物质和其他必需的营养物质。

培养基要进行高压蒸汽灭菌，以确保无菌状态。

2.接种菌株：从纯种培养基或已培育的食用菌菌种中挑选合适的菌株，以进行后续的培养。

接种菌株时，需要保持严格的无菌操作，以防止外源菌的污染。

3.培养条件控制：菌种在培养基上进行生长和繁殖，需要控制适当的温度、湿度和光照条件。

不同的食用菌对环境条件有不同的要求，因此需要根据菌种的特性进行调控。

4.培养时间和观察：菌种需要在一定的时间内培养到达适当的生长阶段。

培养过程中需要不断观察菌种的生长情况，确保其生长良好，避免不良菌株的出现。

5.分离纯化：当菌株在培养基上生长良好并达到理想状态后，可以进行分离和纯化。

通过分离，可以获得单一的、纯净的菌种，有利于后续的大规模培养和应用。

6.保存和传承：完成菌种制备后，可以将菌种保存在低温条件下，如冷冻保存或制备培养基上的冻干粉，以备将来使用。

同时，可以定期传承、更新菌种，确保菌种的质量和活力。

制备高质量的食用菌菌种需要严格的无菌操作、合适的培养基、
适宜的培养条件和及时的观察管理。

菌种质量对于食用菌生产的成功与否至关重要。