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食用菌菌种分离的方法和操作步骤以及注意事项食用菌菌种分离的方法和操作步骤菌种分离即是进行食用菌菌丝纯化的过程，它是制种工作的重要环节，通俗地讲就是把食用菌菌丝从自然中单独分离出来进行纯培养，从而获得纯食用菌菌丝的过程。
菌种分离是一项重要而又细致的工作，每个环节都必须严格按照无菌操作规程进行。
食用菌的分离方法很多，常用的有组织分离法、孢子分离法和基内菌丝分离法三种。
1.组织分离法组织分离法是将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。
其特点：一是属于无性繁殖，能够保持原有菌种的优良特性，是生产中获得纯菌种的常用方法，且简单易行，取材广泛，菌丝萌发快。
二是组织分离操作简便，又不易带入杂菌，容易获得纯菌种。
但对银耳、黑木耳等胶质菌因其子实体种菌丝极少，如用组织分离培养，则往往不易成功。
1.1子实体分离种菇要选择朵大盖厚、柄短、八九分成熟的优良品种。
切去菇体基部，在超净工作台用75%的酒精棉球进行擦拭菌盖与菌柄两次，进行表面消毒。
接种时，只要将种菇撕开，用消毒后的小刀在菌柄与菌盖的交界处切取一小块组织，再用接种针将组织块放入PDA培养基的试管斜面中间。
置于24℃温度下培养3-5天就可以看到组织块上产生白色绒毛状菌丝，转管扩大即得到菌种。
如香菇、平菇等可以使用此方法。
1.2菌核组织分离茯苓、猪苓、雷丸等食用菌的子实体不易采集。
而常见的是它储藏营养的菌核。
用菌核分离，同样可以获得菌种。
方法是将菌核表面洗净，用酒精消毒，切开菌核，取中间组织一小块，约黄豆大小，接种在PDA培养基斜面上，在24℃下培养，产生菌丝后进行分离纯化。
应注意的是，菌核是储藏器官，大部分是多糖类杂质，只有少量的菌丝，因此挑选的组织块要大一些，如果组织块过小，则不易分离出菌种。
1.3菌索分离法菌索分离常用于蜜环菌分离。
方法是选新鲜的活菌索，用75%酒精棉球将菌索表面消毒后，去掉菌鞘，把白色菌髓部分用无菌剪刀切成小段，接入PDA斜面培养基上，在24℃下培养，有白色菌丝长出且无污染，即表明分离成功。
食用菌的发酵与菌种培养技术食用菌是指能够供人食用并具有一定经济价值的真菌，如蘑菇、平菇、香菇等。
食用菌的发酵过程中，菌种培养技术起到至关重要的作用。
下面将详细介绍食用菌的发酵与菌种培养技术。
食用菌的发酵是指利用菌丝体在适宜的环境条件下进行代谢，产生有益的物质，如食用菌的生长、发育和产生的营养成分等。
食用菌发酵的基本原理是通过提供适宜的养料、湿度和温度等环境条件，使菌丝体能够进行正常的代谢活动，从而达到产生所需产品的目的。
在食用菌发酵过程中，菌种培养技术是最为关键的一环。
食用菌的菌种培养技术主要包括菌种贮藏、菌种增殖和菌种分离等过程。
首先是菌种贮藏，目的是将菌株保存在适宜的条件下，以便后续的菌种培养和发酵使用。
常用的菌种贮藏方法有鳞片法、石膏板法和液体氮贮藏法等。
其中，液体氮贮藏法是目前最为常用的一种方法，其优点是能够长期保存菌种，并且能够保持菌株的原始特性。
在菌种增殖过程中，首先需要消毒培养基和培养器具，以防止外界杂菌的污染。
然后，将经过贮藏的菌种接种到含有适宜养分的培养基上进行培养。
培养基的成分和配比在不同食用菌的菌种培养中有所不同，需要根据具体情况进行调整。
菌种增殖过程中，还需要控制培养温度、湿度和pH值等因素，以促进菌丝体的生长和繁殖。
菌种分离是指将菌丝体从菌种中分离出来，以便后续的纯培养和发酵使用。
菌种分离主要包括传代分离和单孢分离两种方法。
传代分离是将菌种连续传代培养，通过培养基的选择性和稀释性来分离出单菌种。
而单孢分离是将菌种在培养基上稀释到只有一个孢子的浓度，然后将单个孢子分离出来。
菌种分离的目的是为了获取纯培养的菌种，并消除菌株间的遗传差异。
食用菌的发酵与菌种培养技术在提高食用菌产量和品质方面起到关键作用。
通过科学的菌种培养技术，可以选择和定向培育优良的菌株，提高菌株的生长速度和产量，同时还能够控制食用菌的营养成分和口感等特性。
因此，发酵与菌种培养技术的研究和应用对于食用菌行业的发展具有重要的意义。
食用菌菌种制作工艺流程及各工序生产规程一：生产工艺流程培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查)→成品二：生产规程0：母种使用玻璃试管和棉塞，试管18mm×180mm．1或20mm×200mm，棉主要使用梳棉，不应使用脱脂棉。
0：原种使用650mL-750ml，耐126℃高温的五色或近五色的玻璃茵种瓶，或850ml耐126℃高温白色半透明符合?食品包装用聚乙稀成型品卫生标准?规定的塑料菌种瓶，或15cm×28cm耐126℃高温符合?食品包装用聚乙烯成型品卫生标准?规定的聚丙烯塑料袋．各类容器部应使用棉塞，棉塞应符合规定；也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。
0：栽培种使用符合原种规定的容器，也可使用≤17cm×35cm耐126℃高溫符合?食品包装用聚乙烯成型品卫生标准?规定的聚丙烯塑料袋。
各类容器都应使用棉塞或无棉塑料盖，并符合原种规定。
0：母种常用培养甚及其配方培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)马铃薯200 g(用浸出汁)，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000mL，PH值自然。
培养基(综台马铃薯葡萄糖琼脂培养基)马铃薯200g(用浸出汁)，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁o.5g，琼脂20g，水1000 mL，pH值自然。
0：生物制剂和天然材料类生物制剂如酵母粉和蛋白胨，天然材料如木屑、棉籽壳、麦麸等，要求新鲜、无虫、无螨、无霉、洁净；枯燥。
0：净化工作台的消毒处理方法先用75％酒精或新洁尔灭溶液进行外表擦拭消毒，然后预净20min．0：培养期的检查各级菌种培养期间应定期检查，及时拣出不合格菌种．0:培养条件要求不同种类或不同品种应分区培养。
根据培养物的不同生长要求，给予其适宜的培养温度〔多在室温20℃～24℃〕，保持空气相对湿度在75%以下，通风，避光。
0:灭菌效果的检查方法培养基配制后应在4h内进锅灭菌。
母种培养基灭菌0.11MPa～0.12MPa，30min。
菌种生产技术的规范性要求根据NY/T528食用菌菌种生产技术规程，菌种生产的规范性技术要求包括技术人员、场地、厂房设置和布局、设备设施、使用品种和扩大繁殖、生产工艺流程、过程技术等。
一、技术人员要求与生产菌种的级别相适应，有省级人民政府农业行政主管部门考核合格的检验人员和生产技术人员；二、场地要求地势高燥、通风良好，排水畅通，交通便利；至少300米内无规模养殖的畜禽舍，无垃圾（粪便）场，无污水源，无大量扬尘源（如水泥厂、石灰厂、沙石厂、木材加工厂等）。
三、厂房设置和布局为了创造和保持环境洁净，减少污染，利于食用菌菌种的生长，要求摊晒场、原料库、配料分装场（室）与要求无菌或高度洁净的冷却、接种和培养等场所相隔离，同时各类房屋设施的设计和建造要符合食用菌菌种生产的技术需要。
四、设备设施《食用菌菌种生产技术规程》对菌种场应具备的设备设施及其性能和安全性进行了具体规定。
五、使用品种和扩大繁殖要求从具生产资质的供种单位引种，种性清楚。
明确规定不可使用来源不清、种性不清的菌种，更不可使用生产性状未经系统试验验证的组织分离物做种源生产菌种。
这为通过认定的优良品种的推广，保证使用品种性状优良，保证菌种质量提供了法律保证。
《食用菌菌种管理办法》和《食用菌菌种生产技术规程》规定，上一级菌种场可以生产其以下级别的菌种，而下级菌种场不可生产其以上级别的菌种。
这就是说，三级菌种场不可买一支试管母种一直扩大繁殖成栽培种，因为在这过程中有二级种的生产过程，而三级菌种场没有二级种生产资质，二级菌种场也不可买入一支试管自行转管，扩大后再繁殖二级、三级菌种，因为不具备一级种生产资质。
这就是说，下一级菌种场必须使用上一级菌种场的菌种作为种源，一级菌种场的种源必须可靠，经过出菇试验的验证。
而且各级菌种的扩大繁殖量有相应规定，这也是质量监督评判的重要技术依据。
六、生产工艺流程从目前科学技术水平看，食用菌菌种采用固体培养还是有足够的技术保证的，特别是作为销售的菌种，多需要一定距离的运输，固体菌种便于运输。
