生物化学专题
- 格式:doc
- 大小:153.00 KB
- 文档页数:9
第一章蛋白质的结构与功能一、选择题(A型题)1.各种蛋白质平均含氮量约为( )A. 0.6%B. 6%C. 16%D. 26E. 36%2.关于蛋白质结构的下列描述,其中正确的是( )A.至少有100个以上的氨基酸组成的高分子化合物B.每一蛋白质都含有2条以上的多肽链C.每种蛋白质都有种类不同的辅基D.不同蛋白质分子的氨基酸组成基本相同E.组成蛋白质一级结构主键的是肽键3.蛋白质一级结构中的主要化学键是( )A. 氢键B. 盐键C. 肽键D. 疏水键E. 范德华引力4.蛋白质的等电点是()A.蛋白质溶液的pH等于7时溶液的pH值B.蛋白质溶液的pH等于7.4时溶液的pH值C.蛋白质分子呈正离子状态时溶液的pH值D.蛋白质分子呈负离子状态时溶液的pH值E.蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的pH值5. 食物蛋白质的消化产物氨基酸,最主要的生理功能是()A.合成某些含氮化合物B.合成蛋白质C.氧化供能D.转变为糖E.转变为脂肪6.蛋白质变性不包括( )A.氢键断裂B.肽键断裂C.疏水键断裂D.盐键断裂E.二硫键断裂7.蛋白质分子中,生理条件下,下列那种氨基酸残基的侧链间可形成离子键:A.天冬氨酸,谷氨酸B.苯丙氨酸,酪氨酸C.赖氨酸,天冬氨酸D.天冬氨酸,苯丙氨酸E.亮氨酸,精氨酸8.蛋白质高级结构取决于( )A.蛋白质肽链中的氢键B.蛋白质肽链中的肽键C. 蛋白质肽链中的氨基酸残基组成和顺序D.蛋白质肽链中的肽键平面E.蛋白质肽链中的肽单位9.下列提法中错误者是()A.所有的蛋白质分子都具有一级结构B.蛋白质的二级结构是指多肽链的局部构象C.蛋白质的三级结构是整条肽链的空间结构D.所有的蛋白质分子都有四级结构E.蛋白质四级结构中亚基的种类和数量均不固定10.肽链中有下列哪种氨基酸时易发生β-转角( )A.HisB.AlaC.GluD.ProE.Arg11.蛋白质肽键的提法何者是正确的( )A.肽键是典型的单键B.肽键是典型的双键C.肽键带有部分双键的性质D.肽键平面可以扭转E.可由任何氨基和羧基缩合形成12.蛋白质在溶液中带负电荷时,溶液的PH为( )A.酸性B.碱性C.PH=PID.PH>PIE.PH<PI 13.蛋白质一级结构的化学键主要是( )A.肽键B.盐键C.二硫键D.氢键E.疏水键14.蛋白质变性时( )A.肽键断裂B.二硫键断裂C.次级键断裂D.普遍发生沉淀E.生物学功能可能增减15.蛋白质对紫外光的最大吸收峰是由于含有下列哪些氨基酸所引起的( )A.甘氨酸和赖氨酸B.谷氨酸和精氨酸C.色氨酸和酪氨酸D.丝氨酸和胱氨酸E.丙氨酸和苏氨酸16.在下列各种pH的溶液中使清蛋白(等电点4.7)带正电荷的是A. pH4.0B. pH5.0C. pH6.0D. pH7.0E. pH8.017.稳定蛋白质二级结构的化学键主要是( )A.肽键B.氢键C.疏水键D.二硫键E.范氏力18.在具有四级结构的蛋白质分子中,每个具有三级结构的多肽链是( )A.辅基B.辅酶C.亚基D.寡聚体E.肽单位19. 下列哪种氨基酸含有苯环( )A.PheB.ArgC.ThrD.AspE.His20. 下列哪种氨基酸属于碱性氨基酸( )A.精氨酸B.丙氨酸C.苏氨酸D.亮氨酸E.甘氨酸二、填空题1. 在镰刀状红细胞贫血中血红蛋白的β亚基的第六位___ _ 残基变异成 __ _。
专升本复习资料(个人总结)已尽力保证资料的准确性,但仍难免错漏之处,更不能保证难度与专升本考试要求的相符!专题一等电点一、定义分子(氨基酸、蛋白质等等)呈电中性(所带正电荷与负电荷相等)时溶液的pH值,用pI表示。
在不含任何盐的纯水中测得的蛋白质等电点也称等离子点,是蛋白质的特征常数。
二、性质1、分子在等电点时以两性离子(兼性离子)的形式存在,在电场中既不向正极移动也不向负极移动。
2、pH>pI时,分子带负电荷;pH<pI时,分子带正电荷。
【记忆方法:pH小说明H+多,所以分子带正电(+);pH大说明OH-多,所以分子带负电(-)。
】以氨基酸为例:3、所谓“酸性氨基酸”与“碱性氨基酸”即是指pH=7时氨基酸的解离情况。
天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)的等电点远小于7,在pH=7时以-COO-和H+的形式存在,与弱酸类似,故称为酸性氨基酸;此时氨基酸分子带负电。
组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)在pH=7时带正电。
4、在等电点时,氨基酸和蛋白质的溶解度最小;此外,蛋白质的黏度、渗透压、膨胀性和导电能力均为最小。
三、计算某一基团有一半解离(得或失电子)时溶液的pH称为该基团的pK。
氨基酸中由于有氨基、羧基,所以至少有2个pK值(一半氨基由-NH2变为-NH3+时的pH值和一半羧基由-COOH变为-COO-时的pH值)。
若该氨基酸侧链的基团也可以解离,还会有第3个pK值。
计算氨基酸的等电点时,若其侧链在溶液中不会解离,则其pI值就是两个pK值的平均值。
例如甘氨酸(Gly):若其侧链在溶液中会解离,则其pI值是该分子等电形式(净电荷为零的形式)两侧的两个pK值的平均值,另一个pK值忽略不计。
例如天冬氨酸(Asp):侧链解离的氨基酸不多,可以直接记下结果:组氨酸(His)、赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)(即上文所述三个碱性氨基酸)pI等于两个大的pK值的平均值,最终结果大于7;天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)(即上文所述两个酸性氨基酸),还有酪氨酸(Tyr)和半胱氨酸(Cys)的pI等于两个小的pK值的平均值,最终结果小于7。
生物化学竞赛专题夏劲松目录第一讲糖类、脂质 (2)第二讲蛋白质 (13)第三讲核酸 (29)第四讲维生素 (43)生物化学的概念及其研究内容生物体的生命现象(过程)作为物质运动的一种独有的特殊的运动形式,其基本表现形式就是(新陈代谢与自我繁殖)。
那么构成这种特殊运动形式物质基础又是什么呢?恩格斯很早就说过“蛋白质是生命活动的表达者”。
现在已知仅有蛋白质是远远不够的,还要有核酸,糖类、脂类、维生素、激素、萜(音tie)类,卜啉(音lin)等。
正是这些生命物质之间的相互协调的作用才形成了丰富多彩的生命现象,那么,这些生命物质到底有那些呢?他们是如何产生与消亡,又是如何相互转变与相互作用呢?这就是生物化学所要研究的内容。
那么就让我们试着给生物化学下一个定义吧。
生物化学是研究生物体的物质构成与生命过程中的化学变化的一门科学。
或者者说生物化学是研究生命现象中的物质基础与化学变化的一门科学。
更简单地说生物化学就是研究生命现象的化学本质。
有人也称生物化学就是生命的化学。
第一讲糖类、脂质一、糖的概念糖类物质是多羟基(2个或者以上)的醛类或者酮类化合物,与它们的衍生物或者聚合物,据此可分为醛糖与酮糖。
还可根据碳层子数分为丙糖、丁糖、戊糖、己糖。
最简单的糖类就是丙糖(甘油醛与二羟丙酮)。
由于绝大多数的糖类化合物都能够用通式C n(H2O)n表示,因此过去人们一直认为糖类是碳与水的化合物,称之碳水化合物。
现在已经这种称呼并不恰当,只是沿用已久,仍有许多人称之为碳水化合物。
二、糖的种类根据糖的结构单元数目多少分为:(1)单糖:不能被水解成更小分子的糖。
(2)寡糖:2-6个单糖分子脱水缩合而成,以双糖最为普遍,意义也较大。
(3)多糖:均一性多糖:淀粉、糖原、纤维素、半纤维素、几丁质(壳多糖)不均一性多糖:糖胺多糖类(透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素等) 由一种单糖缩合的称均一多糖,由不一致单糖缩合的称不均一多糖。
(4)结合糖(复合糖,糖缀合物):糖脂、糖蛋白(蛋白聚糖)、糖-核苷酸等(5)糖的衍生物:糖醇、糖酸、糖胺、糖苷三、糖类的生物学功能(1) 提供能量:植物的淀粉与动物的糖元都是能量的储存形式。
《生物化学》复习题库400道(附答案)《生物化学》复习题库400道1. 测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少?() [单选题] A.2.00gB.2.50g(正确答案)C.6.40gD.3.00gE.6.25g2. 下列含有两个羧基的氨基酸是:() [单选题]A.精氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸D.色氨酸E.谷氨酸(正确答案)3. 维持蛋白质二级结构的主要化学键是:() [单选题]A.盐键B.疏水键C.肽键D.氢键(正确答案)E.二硫键4. 关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:() [单选题]A.天然蛋白质分子均有的这种结构B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性(正确答案)C.三级结构的稳定性主要是次级键维系D.亲水基团聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基5. 具有四级结构的蛋白质特征是:() [单选题]A.分子中必定含有辅基B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成C.每条多肽链都具有独立的生物学活性D.依赖肽键维系四级结构的稳定性E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成(正确答案)6. 蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定:() [单选题]A.溶液pH值大于pIB.溶液pH值小于pIC.溶液pH值等于pI(正确答案)D.溶液pH值等于7.4E.在水溶液中7. 蛋白质变性是由于:() [单选题]A.氨基酸排列顺序的改变B.氨基酸组成的改变C.肽键的断裂D.蛋白质空间构象的破坏(正确答案)E.蛋白质的水解8. 变性蛋白质的主要特点是:() [单选题]A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解D.生物学活性丧失(正确答案)E.容易被盐析出现沉淀9. 若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为:()[单选题]A.8B.>8(正确答案)C.<8D.≤8E.≥810. 蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸?() [单选题]A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.胱氨酸D.丝氨酸E.瓜氨酸(正确答案)11. 某一溶液中蛋白质的百分含量为45%,此溶液的蛋白质氮的百分浓度为:() [单选题] A.8.3%B.9.8%C.6.7%D.5.4%E.7.2%(正确答案)12. 下列含有两个羧基的氨基酸是:() [单选题]A.组氨酸B.赖氨酸C.甘氨酸D.天冬氨酸(正确答案)E.色氨酸13. 下列哪一种氨基酸是亚氨基酸:() [单选题]A.脯氨酸(正确答案)B.焦谷氨酸C.亮氨酸D.丝氨酸E.酪氨酸14. 维持蛋白质一级结构的主要化学键是:() [单选题]A.离子键B.疏水键C.肽键(正确答案)D.氢键E.二硫键15. 关于肽键特点的错误叙述是:() [单选题]A.肽键中的C-N键较C-N单键短B.肽键中的C-N键有部分双键性质C.肽键的羰基氧和亚氨氢为反式构型D.与C-N相连的六个原子处于同一平面上E.肽键的旋转性,使蛋白质形成各种立体构象(正确答案)16. 关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的是:()[单选题] A.天然蛋白质分子均有这种结构B.有三级结构的多肽链都具有生物学活性(正确答案)C.三级结构的稳定性主要是次级键维系D.亲水基团聚集在三级结构的表面E.决定盘曲折叠的因素是氨基酸残基17. 具有四级结构的蛋白质特征是:() [单选题]A.依赖肽键维系四级结构的稳定性B.在三级结构的基础上,由二硫键将各多肽链进一步折叠、盘曲形成C.每条多肽链都具有独立的生物学活性D.分子中必定含有辅基E.由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成(正确答案)18. 变性蛋白质的主要特点是:() [单选题]A.粘度下降B.溶解度增加C.不易被蛋白酶水解D.生物学活性丧失(正确答案)E.容易被盐析出现沉淀19. 蛋白质分子在280nm处的吸收峰主要是由哪种氨基酸引起的: () [单选题] A.谷氨酸B.色氨酸(正确答案)C.苯丙氨酸D.组氨酸E.赖氨酸20. 组成蛋白质的特征性元素是:() [单选题]A.CB.HC.OD.N(正确答案)E.S21. 下列那两种氨基酸既能与茚三酮反应又能在280nm发生紫外吸收峰?() [单选题] A.丙氨酸及苯丙氨酸B.酪氨酸及色氨酸(正确答案)C.丝氨酸及甘氨酸D.精氨酸及赖氨酸E.蛋氨酸及苏氨酸22. 下列何种物质分子中存在肽键?() [单选题]A.粘多糖B.甘油三酯C.细胞色素C(正确答案)D.tRNAE.血红素23. 如下对蛋白质多肽链的叙述,何者是正确的?() [单选题]A.一条多肽链只有1个游离的-NH2和1个游离的-COOH(正确答案)B.如果末端氨基与末端羧基形成肽链,则无游离的-NH2和-COOHC.二氨基一羧基的碱性氨基酸,同一分子可与另两个氨基酸分别形成两个肽键D.根据游离的-NH2或-COOH数目,可判断存在肽链的数目E.所有蛋白质多肽链除存在肽键外,还存在二硫键24. 蛋白质分子的一级结构概念主要是指:() [单选题]A.组成蛋白质多肽链的氨基酸数目B.氨基酸种类及相互比值C.氨基酸的排列顺序(正确答案)D.二硫键的数目和位置E.肽键的数目和位置25. 在蛋白质三级结构中可存在如下化学键,但不包括:()[单选题]A.氢键B.二硫键C.离子键D.磷酸二酯键(正确答案)E.疏水基相互作用26. 下列关于蛋白质四级结构的有关概念,何者是错误的?()[单选题]A.由两个或两个以上亚基组成B.参于形成四级结构的次级键多为非共价键C.四级结构是指亚基的空间排列及其相互间作用关系D.组成四级结构的亚基可以是相同的,也可以是不同的E.所有蛋白质分子只有具有四级结构,才表现出生物学活性(正确答案)27. 血红蛋白与氧的结合能力与氧分压的关系呈S型曲线,与何种因素有关?() [单选题] A.变构效应(正确答案)B.蛋白质分子的化学修饰C.血红蛋白被其它物质所激活D.亚基发生解离E.在与氧结合过程中,血红蛋白的一级结构发生变化28. 什么情况下,一种蛋白质在电泳时既不向正级移动,也不向负极移动,停留在原点?()[单选题]A.发生蛋白质变性B.与其它物质结合形成复合物C.电极缓冲液的pH正好与该蛋白质的pI相同(正确答案)D.电极缓冲液的pH大于该蛋白质的pIE.电极缓冲液的pH小于该蛋白质的pI29.在三种蛋白质里,它们的pI分别为a=4.15、b=5.02、c=6.81,分子量接近。
生物化学复习重点第一章蛋白质1.蛋白质的元素组成:C、H、O、N、S及其他微量元素,N为特征性元素2.氨基酸通式特点:α-L -氨基酸,只有甘氨酸没有手性(旋光性),脯氨酸为亚氨基酸。
3.氨基酸分类:(1)、酸性氨基酸:一氨基二羧基氨基酸,有天冬氨酸、谷氨酸,带负电荷(2)、碱性氨基酸:二氨基一羧基氨基酸,有赖氨酸、精氨酸、组氨酸,带正电荷(3)、中性氨基酸:一氨基一羧基氨基酸,有甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、脯氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸。
不带电荷。
4.两性解离:氨基酸是两性电解质是指在溶液中既可以给出H+而表现酸性,其氨基可以结合H+而表现碱性。
在一定条件下,氨基酸是一种既带正电荷,又带负电荷的离子,这种离子称为兼性离子。
5.等电点:在某一pH值条件下,氨基酸解离成阳离子和阴离子的程度相等,溶液中的氨基酸以兼性离子的形式存在,且净电荷为0 此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。
肽键:存在于蛋白质和肽分子中,是由一个氨基酸的α羧基与另一个氨基酸的α氨基缩合形成的化学键。
肽键:一个氨基酸的a-COOH 和相邻的另一个氨基酸的a-NH2脱水形成共价键。
氨基酸通过钛键连接成肽,根据所含氨基酸的多少分为寡肽和多肽;根据结构功能分为生物活性肽和蛋白质。
肽键结构的六个原子构成一个钛单元,六个原子处于同一个平面上称为肽平面pI=(pK1,+pK2,)/25.氨基酸紫外吸收:280nm,苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸有紫外吸收6.蛋白质的一级结构(Primary structure):它是指蛋白质中的氨基酸按照特定的排列顺序通过肽键连接起来的多肽链结构。
7.蛋白质二级结构的概念:是指蛋白质多肽链局部片段的构象该片段的氨基酸序列是连续的,而主链构象通常是规则的的基础上,按照一定的方式有规律的旋转或折叠形成的空间构象。
其实质是多肽链在空间的排列方式蛋白质二级结构主要类型有:a-螺旋、β-折叠、β-转角维持二级结构的作用力:氢键a-螺旋(a-Helix):是指蛋白质多肽通过肽平面旋转盘绕形成的一种右手螺旋结构。
-考研-西医综合-章节练习-生物化学-(四)生化专题(共58题)1.在糖酵解和糖异生中均起作用的酶是解析:①除3个能障外,糖异生途径基本上是糖酵解的逆反应。
催化糖酵解和糖异生的关键酶都是不可逆的,因此排除这两种反应的关键酶就是答案所在。
催化糖酵解的关键酶包括:葡萄糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶;催化糖异生的关键酶是葡萄糖-6-磷酸酶、果糖二磷酸酶-1、丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶。
②磷酸甘油酸激酶是非关键酶,催化的反应可逆,在糖酵解和糖异生中均起作用。
答案:( B )A.丙酮酸羧化酶B.磷酸甘油酸激酶C.果糖二磷酸酶D.丙酮酸激酶2.脂肪酸β氧化,酮体生成及胆固醇合成的共同中间产物是解析:①酮体生成和胆固醇含成都是以乙酰CoA为原料.其大致过程如下:可见酮体生成和胆固醇合成的共同中间产物是乙酰乙酰CoA(A)和HMG CoA(C),答案只可能在这两者中产生,因此可首先排除答案项B和D。
乙酰乙酸是酮体的成分之一,不可能是两者代谢的中间产物。
HMG CoA为羟甲基戊二酸单酰CoA。
②脂酸β氧化的过程为:活化后的脂酰CoA进入线粒体基质,依次进行脱氢、加水、再脱氢、硫解4步反应,生成1分子乙酰CoA和比原来少2C的脂酰CoA。
后者可再进行脱氢、加水、再脱氢、硫解反应,如此反复进行。
脂酸β氧化的最后阶段所产生的含有4个碳原子的β-酮脂酰CoA即是乙酰乙酰CoA。
脂酸β氧化过程中无HMG CoA产生。
答案:( A )A.乙酰乙酰辅酶AB.甲基二经戊酸C.HMGCoAD.乙酰乙酸3.构成脱氢酶辅酶的维生素是解析:维生素PP参与组成NAD⁺和NADP⁺,而NAD⁺和NADP⁺是多种脱氢酶的辅酶,所以维生素PP是构成脱氢酶辅酶的维生素(C对)。
维生素A(A错)和维生素K(B错)均不构成任何酶的辅酶。
维生素B₁₂(D错)为甲硫氨酸合成酶的辅酶(P101)。
答案:( C )A.维生素AB.维生素KC.维生素PPD.维生素B124.下列蛋白质中,属于小G 蛋白的是解析:Ras蛋白与异三聚体G蛋白一样具有鸟核苷酸的结合位点和GTP酶活性,但该蛋白只有一条多肽链,分子量为21kDa,小于异三聚体G蛋白,因此也称为低分子量G蛋白或小G蛋白(D对A错)。
生物化学重点知识归纳第一章绪论1.生物化学的发展过程大致分为三阶段:叙述生物化学、动态生物化学和机能生物化学。
2.生物化学研究的内容大体分为三部分:①生物体的物质组成及生物分子的结构与功能②代谢及其调节③基因表达及其调控第二章糖类化学1.糖类通常根据能否水解以及水解产物情况分为单糖、寡糖和多糖。
2.单糖的分类:①按所含C原子的数目分为:丙糖、丁糖......②按所含羰基的特点分为:醛糖和酮糖。
3.葡萄糖既是生物体内最丰富的单糖,又是许多寡糖和多糖的组成成分。
4.甘油醛是最简单的单糖。
5.两种环式结构的葡萄糖:6.核糖和脱氧核糖的环式结构:(见下图)7.单糖的重要反应有成苷反应、成酯反应、氧化反应、还原反应和异构反应。
8.蔗糖是自然界分布最广的二糖。
9.多糖根据成分为:同多糖和杂多糖。
同多糖又称均多糖,重要的同多糖有淀粉、糖原、纤维素等;杂多糖以糖胺聚糖最为重要。
10.淀粉包括直链淀粉和支链淀粉。
糖原分为肝糖原和肌糖原。
11.糖胺聚糖包括透明质酸、硫酸软骨素和肝素。
第三章脂类化学1. 亚油酸、α亚麻酸和花生四烯酸是维持人和动物正常生命活动所必必需的脂肪酸,是必需脂肪酸。
2. 类花生酸是花生四烯酸的衍生物,包括前列腺素、血栓素和白三烯。
3. 脂肪又称甘油三酯。
下图是甘油三酯、甘油和脂肪酸的结构式:1. 皂化值:水解1克脂肪所消耗KOH的毫克数。
皂化值越大,表示脂肪中脂肪酸的平均分子量越小。
6.磷脂根据所含醇的不同分为甘油磷脂和鞘磷脂。
7.糖脂包括甘油糖脂和鞘糖脂。
8.类固醇是胆固醇及其衍生物,包括胆固醇、胆固醇脂、维生素D、胆汁酸和类固醇激素等。
9.胆汁酸有游离胆汁酸和结合胆汁酸两种形式。
10.类固醇激素包括肾上腺皮质激素(如醛固酮、皮质酮和皮质醇)和性激素(雄激素、雌激素和孕激素)。
11.肾上腺皮质激素具有升高血糖浓度和促进肾脏保钠排钾的作用。
其中皮质醇对血糖的调节作用较强,而对肾脏保钠排钾的作用很弱,所以称为糖皮质激素;醛固酮对水盐平衡的调节作用较强,所以称为盐皮质激素。
生物化学考试题库及答案生物化学考试题库及答案:一、选择题1. 下列哪种生物大分子不属于有机物?A. 糖类B. 脂质C. 蛋白质D. 矿物质答案:D2. 下列哪种生物大分子属于多糖类?A. 葡萄糖B. RNAC. DNAD. 淀粉答案:D3. 下列哪种脂质是由胆固醇与脂肪酸结合而成?A. 甘油三酯B. 磷脂C. 活性脂质D. 酯化脂质答案:C4. 下列哪种蛋白质不属于结构性蛋白质?A. 丝素B. 矿石蛋白C. 钙结合蛋白D. 凝血酶原答案:D5. 下列哪种氨基酸属于必需氨基酸?A. 赖氨酸B. 脯氨酸C. 缬氨酸D. 天门冬氨酸答案:A二、填空题1. 以下是葡萄糖的分子式:C6H12O6,其中C的化合价为_____。
答案:42. 将同种甘油脂化三个脂肪酸得到的化合物称为_____。
答案:甘油三酯3. 氨基酸是由_____、羧基、氨基以及一个侧链组成。
答案:中心碳4. 酸性氨基酸的侧链具有_____官能团。
答案:羧酸5. 拉丁文名为“Sine qua non”的氨基酸是_____。
答案:赖氨酸三、简答题1. 请简述ATP在生物体内的作用及其生成方式。
答案:ATP是一种高能化合物,在生物体内担任着重要的能量储存和传递的角色。
其生成方式主要是通过细胞内的细胞呼吸过程中氧化糖类产生的,也可以通过光合作用的光反应和暗反应产生。
2. 简述酶的作用及其对反应速率的影响。
答案:酶是一种具有催化作用的生物大分子,能够加速化学反应的进行。
酶作用后使反应物的活化能降低,从而提高了反应物的反应速率。
酶的催化作用还受到温度、pH等多种因素的影响。
3. 简述蛋白质的结构层次及其中的氨基酸序列对蛋白质结构的影响。
答案:蛋白质的结构层次分为四个级别:一级结构(氨基酸序列)、二级结构(α-螺旋和β-折叠)、三级结构(多肽链的疏水和亲水性)、四级结构(由两个或多个多肽链同源或异源连接而成的复合体)。
不同氨基酸序列会影响蛋白质结构的稳定性、形态、功能等多个方面,是蛋白质在生物体内发挥正常功能的关键。
生物化学专题共价修饰酶共价调节是利用蛋白质的共价变化来调节酶的活性的,有些共价变化是可逆的,如蛋白质的磷酸化;有些则是不可逆的,如酶原激活(一)可逆共价修饰的调控(共价调节酶)共价调节酶:酶分子被其它的酶催化进行共价修饰,从而在活性形式与非活性形式之间相互转变。
有多种类型: 1 ser thr tyr 残基的磷酸化2 thr 残基的腺苷酰化3 arg cys 残基的ADP-核糖基化其中磷酸化是最普遍,发生最多的,真核细胞的1/2~1/3的蛋白质被磷酸化,在这个过程中,有两种酶参与反应,一种是蛋白激酶,催化蛋白质发生磷酸化反应;另一种是蛋白质磷酸酶,催化蛋白质的去磷酸化反应。
共价调节与别构调节的区别:1 共价修饰系统能把调节物的效应放大,即级联放大效应2 共价修饰系统有较大的能力进行生物学整合,能把胞内代谢和胞外刺激(包括电刺激)联系起来,别构调节作用于胞内,特点在于灵敏、迅速;共价调节也作用于胞内但是涉及整体,在数分钟或者更长时间内起作用。
(二)不可逆的共价调节(酶原的激活)有些蛋白质合成时不具有活性,经蛋白酶专一性作用后,构象发生变化,变成有活性的蛋白。
这种不具生物活性的蛋白质称为前体。
如果活性蛋白质是酶,这个前体就称为酶原。
特点是不可逆。
属于此类的有*消化系统中的酶(胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,胃蛋白酶)*血液凝固系统中的酶*某些蛋白质激素,如胰岛素由胰岛素原激活而成*存在于皮肤和骨骼中的纤维蛋白——胶原,由前胶原激活而成。
例如:胰蛋白酶原肠激酶胰凝乳蛋白酶原弹性蛋白酶原胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶弹性蛋白酶羧肽酶原羧肽酶RNA转录调控(主要为原核生物转录调控)⑴转录水平⑵翻泽水平⑶加工水平转录后加工、翻译后加工⑷蛋白质活性调节其中最关键的是⑴,基因表达的控制主要发生在转录水平,原核生物尤其如此。
所以RNA转录调控专门列出(一)几个重要概念操纵子:在细菌基因组中,编码一组在功能上相关的蛋白质的几个结构基因,与共同的控制位点组成的一个基因表达的协同单位,称为操纵子。
结构基因(S structural gene):表达一种或功能相关的几种蛋白的基因控制位点:操纵基因(O operator)启动子(P promotor)位于操纵基因上游,为RNA聚合酶结合位点。
调节基因(R regulator gene):可转录翻译出诱导(或阻遏蛋白),控制操纵基因的开与关。
调节基因启动子操纵基因结构基因结构基因结构基因......结构基因R P O S1 S2 S3 ....... Sn正调控和负调控在没有调节蛋白存在时,基因是关闭的,加入调节蛋白后,基因表达被开启,此为正调控。
在没有调节蛋白存在时,基因是表达的,加入调节蛋白后,基因表达被关闭,此为负调控。
在正调控中,调节蛋白称诱导蛋白。
在负调控中,调节蛋白称阻遏蛋白。
(二)大肠杆菌乳糖操纵子(Lac操纵子)1 乳糖操纵子负调控LacZ、LacY、LacA为结构基因,上游依次为操纵基因、启动子和调节基因LacI。
当细胞内无诱导物(乳糖或IPTG)存在时,阻遏蛋白与操纵基因结合。
由于操纵基因与启动子有一定程度重叠,妨碍了RNA聚合酶在-10序列上形成开放性启动子复合物。
当细胞内有诱导物(乳糖或IPTG)存在时,诱导物与阻遏蛋白结合,改变阻遏蛋白构象,使之迅速从操纵基因上解离下来。
这样RNA聚合酶就能与启动子结合,并形成开放性启动子复合物,从而开始转录LacZYA结构基因。
2 乳糖操纵子正调控在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。
3调节机制大肠杆菌根据碳源性质选择代谢方式。
倘若有葡萄糖存在时,细菌优先选择葡萄糖供应能量。
葡萄糖通过降低cAMP浓度,阻碍cAMP 与CAP结合而抑制乳糖操纵子转录,使细菌只能利用葡萄糖。
在没有葡萄糖而只有乳糖的条件下,阻遏蛋白与O序列解聚,CAP结合cAMP后与乳糖操纵子的CAP位点,激活转录,使得细菌利用乳糖作为能量来源。
DNA一级结构分析及PCR技术DNA测序的生物学意义DNA是遗传信息的储存者和传递者,遗传信息是由碱基序列体现的,碱基序列略有改变,即可引起遗传信息的显著改变。
所以DNA测序是研究DNA功能的基础。
DNA测序的实验方法双脱氧终止法(Sanger法)[原理]DNA 测序DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3’-OH末端上进行的。
由于2’,3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3’-位脱氧而失去游离-OH,当它参入到DNA链后,3’-OH末端消失,使DNA链的延伸终止。
本实验根据此原理,将待测DNA片段插入单链噬菌体M13载体,并用合成的寡聚核苷酸引物与该载体上插入待测片段的上游顺序退火,随后在T7DNA聚合酶催化下进行延伸反应。
实际操作中同时进行,分别终止于A、G、C和T的4个反应体系。
每个反应体系均含4种脱氧三磷酸核苷酸(dNTP)底物,其中—种dATP为32P标记物,以便能用放射自显影法读序。
但在这4个反应体系中,分别加一种低浓度的ddNTP(ddATP、ddGTP、ddCTP或ddTTP),这样ddNTP 可随机参入正在延伸的DNA链上,使链延伸终止。
例如在“A”管中加ddATP,反应结束时,管内所有新合成的DNA链都是以A结尾的不同长度的片段,而且这些片段都带放射性。
将反应物加在高分辨凝胶上电泳,DNA片段则因其长度不同(分子量大小不同)被分离,短的走在前端,长的泳动在后面。
其他3管则分别为以G,C或T结尾的不同长度DNA片段。
由于:①即使是长短相差一个核苷酸的DNA片段,亦可根据其电泳距离的差异而加以区分;②A、G、C和T4种反应体系的产物在电泳凝胶中相邻排列。
故而在阅读凝胶电泳的放射自显影图像时,由下至上按前后顺序即可将DNA的核苷酸顺序读出。
[操作]1.单链模板与引物退火(1)用无菌蒸馏水按1:5稀释通用引物(约4.44μg/ml)。
(2)取1.5ml微量离心管1只,加入下列试剂:模板DNA(1.5-2ugDNA/10μl)10μl;稀释通用引物2μl;退火缓冲液2μl,总体积14μl。
2.链延伸/终止反应(1)稀释T7DNA聚合酶:取2μl(或4μl)冷的酶稀释缓冲液至1只微量离心管中,加入0.5μl(或lμl)T7DNA聚合酶,用加样器轻轻抽吸和排出而混匀,臵冰浴中待用。
(2)另取4只微量离心管,分别用记号笔标明“A”、“G”、“C”和“T”。
依次将A-Mix、G-Mix、C-Mix和T-Mix液各2.5μl分别加入这4只微量离心管中,臵37℃预温1分钟以上 (说明:4种mix液各又分为short和long两种,前者中ddNTP浓度较高,用于<500bp的DNA片段的测序,后者用于50-1000bp片段的测序。
一般应用short即可)。
(3)标记反应:在操作(1)的微量离心管中加入下列试剂:模板/引物14μl(已有);标记用混合物(1abellingmix)3μ1;已标记混合物(1abelled mix)1μ1,T7DNA聚合酶稀释液2μ1。
总体积20μ1。
轻轻混匀,简短离心,臵室温5分钟,立即接下步反应。
(4)从“标记反应”混合物中,分别取4.5μl加于4只预温的反应液中(注意:每一次转移均应换用新的吸头),轻轻混匀。
简短离心,37℃保温5分钟。
(5)向每只离心管中加入5μl反应终止液,混匀,简短离心。
(6)变性反应:在电泳前进行。
在上述链延伸反应终止后,最好即时进行变性反应并电泳,如不能及时电泳,终止反应后样品可储于冰浴或4℃。
另取4只微量离心管,标好“A”、“G”、“C”和“T”。
从上述每一链延长/终止反应的试管中取3电泳。
3.制备电泳凝胶及电泳(1)制备胶模:取双块制胶玻板,先用泡沫海绵沾“洗洁净”液仔细擦洗,用水彻底淋洗,干燥后继用酒精清洗,晾干,再用硅烷剂(repel-silane)将玻板的—面擦一遍,蒸馏水淋洗,干燥 (注意:清洗时应戴一次性手套操作)。
将其中一块玻板平臵台上(硅烷处理过的—面朝上),两侧各放臵一条隔离条(最好选用上方厚为0.2mm,下方厚0.4mm的楔形条),另取—块玻板(硅烷化处理过的—面朝下),对准放臵在上述玻板上,两侧及—面边缘用胶带封严,并用文具夹夹紧,制成胶模。
(2)配制电泳凝胶:向1只100ml烧杯中加入下列试剂;20%丙烯酰胺溶液20ml;10×TBE缓冲液5ml;46.7%尿素溶液25ml。
总体积50ml(凝胶的丙烯酰胺浓度为8%)。
混匀,过滤除去不溶物,臵100ml梨形瓶中连接水泵抽气5分钟,加入250μl 10%过硫酸铵,50μlTEMED混匀。
(3)注胶:立即将配好的凝胶用50ml注射器小心注入制好的玻板胶模中(胶模宜倾斜45度左右),注意防止气泡,如有气泡产生,可敲击该部位玻璃,使气泡上升排除。
从上面插入梳齿背,深入胶面约10-12mm。
将胶模水平放臵45-60分钟,待凝胶聚合。
(4)电泳:凝胶聚合后,拨掉梳齿,撕去玻板下缘胶带,用蒸馏水淋洗凝胶表面,以除去未聚合物质。
将胶板装臵在电泳槽上,上下槽加入缓冲液,注意排除凝胶下缘气泡。
接通电源,40W预电泳45-60分钟。
预电泳结束后,断电。
插入样品梳,梳齿向下插入凝胶中3mm左右。
用缓冲液小心冲洗每一加样小槽(齿间空隔),用记号笔标明A、G、C和T4个小槽,每槽加入变性后的链延伸/终止液1.5-2μl。
接通电源,40W恒压,电泳至示踪染料溴酚蓝至底边时切断电源。
如待测片段较长而需继续点样,则等示踪染料二甲苯腈蓝称至距下缘4-5cm时切断电源,用缓冲液冲洗另一组4个加样小槽(应与前一组相隔1-2个加样小槽),重复上样操作,然后继续电泳至第2组示踪染料溴酚蓝移至玻板下缘时断电,停止电泳。
4.放射自显影及结果分析将凝胶板自电泳槽取下后水平放臵,小心分离两块玻板,让凝胶完好地留在其中一块玻板上。
可将凝胶切下一小角以示方向。
在凝胶上小心地覆盖一张厚的3号新华滤纸,移去玻板,在凝胶另一面覆盖一张保鲜膜,注意排除气泡。
滤纸面朝下臵凝胶干燥器中干燥。
于暗室中,将干燥的凝胶的保鲜膜面与一张X光底片的药膜面贴合,夹在增感屏盒中,臵70℃或室温曝光4-16小时,然后显影、定影(按所用显影及定影剂说明进行),水漂洗、干燥。
然后由下而上读序。
PCR技术PCR 原理动画聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。