《EBV在CAEBV中克隆起源》的翻译
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北师大版高中英语新教材(选择性必修第三册)课文Lesson 1 To Clone or not to Clone?第一课克隆还是不克隆Cloning is the process of making an exact copy of a plant or animal and developing it either naturally or artificially. Natural cloning has been going on for generations. For example, gardeners have been using a form of cloning when they take a cutting from a plant and place it in a suitable medium, such as soil. Another example of natural cloning is identical twins, who are produced from the same egg.克隆是通过自然或人为的方式,对植物或动物进行精确复制、培育的过程。
自然克隆由来已久。
例如,园丁们从植物上截取一段,放在合适的培养基中(例如土壤),就是一种克隆。
自然克隆的另一个例子是同卵双胞胎,它们是由同一个卵子受精产生的。
For years, there had been attempts to clone animals artificially. The first successfully cloned animal was a sheep named Dolly in 1996. At first, Dolly grew normally, but later she developed an illness that is more normally found in much older animals. She lived for six and a half years, only half the life of the sheep from which she was cloned. After Dolly, scientists have cloned more than 20 mammal species, including camels, cattle, deer, dogs, goats and mice. However, they have found a similar pattern of health problems with these other species as well. This has led to questions such as, “Will this be a major issue for all cloned animals?” “Will it continue to happen forever?”.多年来,人们一直在尝试人工克隆动物。
人教版八年级上册:《奇妙的克隆》课文原文克隆是什么一个细菌经过20分钟左右就可一分为二;一根葡萄枝切成十段就可能变成十株葡萄;仙人掌切成几块,每块落地就生根;一株草莓依靠它沿地“爬走”的匍匐茎,一年内就能长出数百株草莓苗……凡此种种,都是生物靠自身的一分为二或自身的一小部分的扩大来繁衍后代,这就是无性繁殖。
无性繁殖的英文名称叫“Clone”,音译为“克隆”。
实际上,英文的“Clone”起源于希腊文“Klone”,原意是用“嫩枝”或“插条”繁殖。
时至今日,“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”,凡来自一个祖先,无性繁殖出的一群个体,也叫“克隆”。
这种来自一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫“无性繁殖系”,简称无性系。
自然界的许多动物,在正常情况下都是依靠父方产生的雄性细胞(精子)与母方产生的雌性细胞(卵子)融合(受精)成受精卵(合子),再由受精卵经过一系列细胞分裂长成胚胎,最终形成新的个体。
这种依靠父母双方提供性细胞、并经两性细胞融合产生后代的繁殖方法就叫有性繁殖。
但是,如果我们用外科手术将一个胚胎分割成两块、四块、八块……最后通过特殊的方法使一个胚胎长成两个、四个、八个……生物体,这些生物体就是克隆个体。
而这两个、四个、八个……个体就叫做无性繁殖系(也叫克隆)。
可以这样说,关于克隆的设想,我国明代的大作家吴承恩已有精彩的描述孙悟空经常在紧要关头拔一把猴毛变出一大群猴子,猴毛变猴就是克隆猴。
克隆鲫鱼出世前后1979年春,中国科学院武汉水生生物研究所的科学家,用鲫鱼囊胚期的细胞进行人工培养,经过385天59代连续传代培养后,用直径10微米左右的玻璃管在显微镜下从培养细胞中吸出细胞核。
与此同时,除去鲫鱼卵细胞的核,让卵细胞留出空间做好接纳囊胚细胞核的准备。
一切准备就绪后,把玻璃管吸出的核移放到空出位置的鲫鱼卵细胞内。
得到了囊胚细胞核的卵细胞在人工培养下大部分夭亡了。
在189个这种换核卵细胞中,只有两个孵化出了鱼苗,而最终只有一条幼鱼渡过难关,经过80多天培养后长成8厘米长的鲫鱼。
儿童慢性活动性EB病毒感染诊疗规范(2021年版)一、概述慢性活动性EB病毒感染(chronic active Epstein-Barr virus infection, CAEBV)是EBV感染T细胞或NK细胞引起的淋巴增殖性疾病,2016年WHO将CAEBV分类为EBV相关T或NK细胞淋巴增殖性疾病(EBV-positive T- orNK-lymphoproliferative diseases,EBV-T/NK-LPD)。
CAEBV 的发病机制并不完全清楚,机体的免疫功能缺陷或病毒基因组片段缺失导致机体的免疫系统不能控制EBV在体内的活动是可能的发病机制。
CAEBV临床表现有两个特点:系统性炎症表现和肿瘤性增生表现。
EBV相关噬血细胞综合征(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)即系统性炎症的重要表现。
CAEBV在疾病的发展过程中有可能最终转化为EBV相关淋巴瘤。
被EBV感染的T或NK细胞浸润组织脏器导致多个系统和脏器损害,浸润血管并继发免疫反应导致血管炎的发生。
种痘样水疱病(hydroa vacciniforme,HV)和重度蚊虫叮咬过敏(severe mosquito bite allergy,sMBA)是两种典型的CAEBV引起的皮肤损害。
二、适用范围符合下述CAEBV诊断标准的患儿。
三、诊断(一)临床表现1.CAEBV的临床表现多种多样,其主要特征是传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis, IM)样症状持续或反复存在。
主要表现为发热、咽峡炎、肝、脾、淋巴结肿大、皮疹等。
2.血液系统:白细胞减低(或增高)、贫血或血小板减少、肝脾淋巴结肿大。
3.消化系统:腹泻、消化道溃疡、出血、肝功损害、黄疸。
4.呼吸系统:肺间质病变为主,可表现为咳嗽、气促、呼吸困难,严重时可出现浆膜腔积液。
5.皮肤黏膜:严重蚊虫叮咬过敏(sMBA)和种痘样水疱病(HV),口唇或咽部疱疹。
Unit2 克隆:它将把我们引向何方?克隆一直与我们同在,而如今它还要持续下去。
这是一种用来生产与原型完全相同的动植物的方法。
当园艺师从生长着的植物上剪下枝条来培植新植物时,就会产生这种现象。
这种现象也发生在动物身上,从同一个原生卵子产生性别和相貌相同的双胞胎也是克隆。
实际上,这些都是自然克隆现象。
克隆技术有两大用途。
第一,园艺师一直用它生产大量的供商用的植物;第二,它在对新植物物种的研究以及对动物的医学研究方面都是很有价值的。
克隆植物简单,但克隆动物就比较复杂了,是一项很难完成的任务。
克隆哺乳动物的多次尝试都失败了。
但是,科学家的决心和耐心最终得到了回报,这就是1996年具有突破性的克隆羊“多莉”的诞生。
它的程序如下图所示:1.母羊(A)提供一个卵细胞。
2.在卵细胞中取出细胞核。
3.卵细胞准备接受新的细胞核。
4.母羊(B)提供一个供克隆的躯干细胞。
该细胞核应包含生产一头新羊所需要的全部基因。
5.取出该细胞的细胞核。
6.用电把母羊(B)的躯干细胞核和母羊(A)的卵细胞结合起来。
7.细胞分裂并生长成胚胎。
8.把胚胎植入另外一头母羊(C)体内,母羊(C)就是克隆羊的代孕者。
9.这头小羔羊就是母羊(B)所提,供的细胞核克隆而成的。
一方面,整个科学界都在关注着首例成功的克隆动物多莉羊的成长¨多莉看来是在正常地成长着,这很令人鼓舞。
接着传来了多莉病重的坏消息。
研究克隆的科学家发现多莉得的病更容易发生在年老的羊身上.这让他们很沮丧。
多莉总共只存活了六年半,这是它的原型羊寿命的一半。
可悲的是,同样无法控制的命运也在影响着其他物种,如克隆鼠。
科学家的脑海里产生的问题是:“这是不是所有克隆动物的一个主要困难呢?这种现象会不会永远发生?如果改进程序,问题会不会解决?另一方面,多莉的出生引起了一阵强烈的反对,对,对媒体和公众的想象力也产生了巨大的影响。
它引起了争议,因为它突然打开了人们的眼界,看到了有可能:用克隆技术来治疗重病,甚至克隆出人类。
Unit2 THE RETURN OF THE DINOSAURS? 恐龙的回归?The possibility of cloning fierce and extinct wild animals has always excited film makers. 克隆凶猛和灭绝的野生动物的可能性一直使电影制片商感到兴奋。
And they are not the only ones! 然而他们并不是唯一对此感到兴奋的人。
The popularity of films such as Jurassic Park, in which a scientist clones several kinds of extinct dinosaurs, proves how the idea struck a mixture of fear and excitement into people's hearts.在《侏罗纪公园》这部影片中,有一位科学家克隆了好几种不同的绝种恐龙。
类似这样的电影很受欢迎,证明了这一想法使人们感到既兴奋又恐惧。
But in fact we are a long way from being able to clone extinct animals.但事实上,想要克隆绝种动物,我们还要很长的路程要走。
Scientists are still experimenting with cloning mammals.科学家们现在还在进行克隆哺乳动物实验,This is because the cloning of mammals is still a new science and its story only began seriously in the 1950s as this list shows:这是因为克隆哺乳动物仍然还是一门新的科学,它是从20世纪50年代才开始进行认真研究的,如下表所示:1950s cloning of frogs 1996 first clone of a mammal: Dolly the sheep 20世纪50年代:克隆青蛙1966年:首次克隆哺乳动物(多莉)1970s research using the embryos of mice 2000 cow gave birth to a bison20世纪70年代:用老鼠胚胎进行研究2000年:母牛生野牛1979 work on embryos of sheep and mice 2001 China's first cloned twin calves1979年:对羊和老鼠的胚胎进行研究2001年:中国首次克隆出双胞胎小牛1981 first experimental clones of mice 2002 first cloned cats1981年:首次对老鼠进行实验性的克隆2002年:首次克隆猫1983 first experimental clones of cows 2005 first cloned dog1983年:首次对母牛进行实验性的克隆2001年:首次克隆狗……From time to time people suggest that extinct animals like dinosaurs, can possibly be brought back to life through cloning.不时地会有人提议,克隆技术将有可能使地球上已经消失的动物(如恐龙)复活。
题目:EB病毒感染的T/NK细胞亚群在慢性活动性EB病毒感染中的克隆起源关键词:EB病毒慢性活动性EB病毒感染淋巴组织增生性疾病CD-34细胞外标题:在CAEBV中克隆的被EB病毒感染的T/NK细胞子集缩写:BM:骨髓( bone marrow), CAEBV: 慢性活动性EB病毒感染(chronic active Epstein-Barr virus infection), EBV:EB病毒( Epstein-Barr virus), EBER: EB病毒编码的mRNA(Epstein-Barr virus-encoded mRNA),EBNA:EB病毒核抗原( Epstein-Barrvirus-nuclear antigen), HLH:噬血淋巴组织细胞瘤病( hemophagocytic lymphohistiocytosis), HIV:人类免疫缺陷病毒即艾滋病毒HIV( human immunodeficiency virus), HMB: 蚊虫叮咬过敏症(hypersensitivity to mosquito bite), Ig:免疫球蛋白(immunoglobulin), IM:传染性单核细胞增多症( infectious mononucleosis), LMP:潜伏感染膜蛋白(latent membrane protein), MNC:单核细胞(mononuclear cell), Lin:遗传( lineage), LPD:恶性淋巴瘤( lymphoproliferative disease), NK:自然杀伤细胞( natural killer), PB:周边血液( peripheral blood), PCR:聚合酶链反应(polymerase chain reaction),TCR:T细胞受体( T-cell receptor)版权转易:无摘要:在免疫应激学中,会间或出现被EB病毒感染的B细胞的克隆扩充,这样经EB病毒感染的T细胞/NK细胞就会在慢性活动性EB病毒感染(CAEBV)的病人体内扩散;慢性活动性EB病毒感染是一种罕见的单核细胞增多症,根据受感染的靶细胞的不同可以将其分类为T细胞型和NK细胞型,目前此病的发病机理仍不十分清楚。
为了寻找被EB病毒感染的T细胞/NK细胞的克隆起源,可通过高度净化从6个病人体内获得细胞因子的方法来评估病毒的分布和克隆类型。
病人1有被EB病毒感染的T细胞受体,即Vδ2/Vγ9-表达细胞的单克隆增生,并且在αβT细胞中携带较低的EB病毒复制数目。
病人2和3体内有被EB病毒感染的CD4+T细胞的克隆扩充,而且在CD56+细胞中携带较低的EB病毒负荷。
病人4、5和6体内存在较CD3+细胞带有更高EB病毒负荷的CD56+细胞的扩充。
在5个病人中多数目标人群的克隆带决定EB病毒的末端复制。
这个末端复制的规格表明了在4个病人中少数目标人群子集合的克隆类型和多数目标人群子集合的克隆类型是相同的。
但是并没有发现EB病毒存在于病人的骨髓CD34+细胞谱系中,其反应是阴性。
这一结果说明EB病毒能够在细胞分化阶段感染T/NK细胞,但是不能感染CAEBV病人的CD34+骨髓造血干细胞。
简介:大于90%的成年人会被EB病毒感染,并且这种感染会伴随一生。
原发性的感染经常在青少年和年轻的成年人中引起严重的传染性单核细胞增多症。
γ疱疹病毒进入CD21+B细胞中,在记忆B细胞库中通过带有EB病毒特异性细胞毒素的T细胞避免免疫排除来建立潜伏性感染1,被EB病毒感染的B细胞恶性淋巴瘤在免疫缺乏症的病人中显现。
最近,在非免疫功能受损的主体中,像是慢性活动性EB病毒感染(CAEBV)和EB病毒联合性嗜血淋巴组织细胞瘤病(HLH),由EB病毒驱动的异常T/NK细胞恶性淋巴瘤已经被鉴别出来了2,3。
CAEBV是一种罕见的单核细胞增多临床综合征,其特点是EB病毒DNA的高循环水平和类似传染性单核细胞增多症的周期性症状,并伴随冠状动脉病变,脉络膜视网膜炎和脑牵连4。
CAEBV首次被描述是作为一种以B细胞为靶细胞的进行性EB病毒感染所呈现的,但是大多数从亚洲方面报道的病例是将其作为EB病毒感染的T/NK细胞恶性淋巴瘤,根据被感染的靶细胞,可以将亚洲地区类型的CAEBV分类为T细胞型和NK细胞型5-7。
NK细胞类型可能与蚊虫叮咬过敏症(HMB)以及某些慢性疾病有关联。
然而,未进行同种异体的干细胞移植的病人,不论受哪一类型的影响,都会导致胎儿的死亡8-9。
CD8+T细胞比较特别地针对EBV-HLH的病人,但是病毒却遍布于CAEBV病人体内T/NK细胞的每一个子集合。
细胞式特定感染并不能保证转化变形或是组织渗透。
尽管有越来越多的报道,但T 细胞感染的起因仍不十分明确。
EB病毒DNA的游离基因存在一个可以末端复制序列的高度变异重复反应,这种序列在进入细胞时被由线性基因组环化所决定的随机重组所加入。
由于TR数目在EB病毒再生和再感染的循环中是固定的,这种变化则表示有潜伏性感染的细胞在复制。
尽管这样,细胞纯度和染色敏感性限制了CAEBV中T/NK细胞的精确分化。
在病人体内建立的由EB病毒产生的T/NK细胞系并不代表活的有机体内的克隆特性。
在当代研究中,通过利用高精确度的细胞排序,在CAEBV病人体内的T/NK细胞EB病毒的负载和克隆能力是可以被分析出来的。
伴随克隆型感染证据的存在,可以发现多数目标人群和另一目标群拥有一样的EB病毒DNA。
首先,这一结果意味着T/NK细胞的前体细胞受到感染,反之,与T/NK细胞拥有共同的淋巴祖细胞的骨髓CD34+细胞则没有涉及到感染之列。
所以,CAEBV的发病原理曾经被讨论过,在这里应特别的提及EB病毒感染的细胞起源。
材料和研究方法:1.病人2002至2008年期间,这六个日本病人在九州大学附属医院接受治疗并且康复了,所有病人均完成了临床诊断标准11(临床档案资料如表格1所示)。
疾病发作的中位时间是3.5年(范围是1-8年),其特殊的症候包括:蚊虫叮咬过敏(n=4),痘样水疱(n=4)以及冠状动脉损害(n=1)。
其中三个病人有对抗EB病毒抗体的形式,五个病人体内存在增长的激活T细胞和/或高CD4/CD8比率的数目,三个病人体内主要的靶细胞是T细胞,三个是NK细胞。
对于周边血液(PB)的单核细胞(MNCs)来说,通过EBV-TR和免疫球蛋白(Ig)/T细胞受体(TCR)基因,这种克隆是可以屏蔽的。
在研究期间,没有病人接受过细胞毒素的作用。
研究控制包括EB病毒血清反应阳性的课题以及有免疫性血小板减少症的病人。
2.抗体、细胞染色和分类筛选通过离心分离方法把单核细胞分开(卡佩尔·奥罗拉)。
在染色了抗CD3、CD4、CD8和CD56的单克隆抗体之后,用真空灌胶分选层析法(德国贝尔吉施格拉德巴赫市美天旎生物技术)通过免疫粒子,细胞的每一个部分就能被分离出来。
接着,在用FITC标记成对的抗Vδ2单克隆抗体(贝克曼库尔特公司, 法国马赛市)或是PE标记成对的TCRαβ单克隆抗体染色之后,层析抗FITC标记或者是抗PE粒子(美天旎基因工程),可以得到T细胞受体(TCR)Vδ2+细胞和T细胞受体αβ+细胞。
在淋巴细胞消耗柱耗损了CD3+细胞之后,利用淋巴细胞分离柱(德国贝尔吉施格拉德巴赫市美天旎生物技术)即可收集CD56+细胞。
这个过程产出纯度高于97%的细胞样品,此细胞的纯度是利用流式细胞仪通过流式细胞术所决定的。
为了培养出高纯度(>99.9%)的CD3+细胞、 Vδ2+细胞、TCRαβ+细胞和CD34+细胞,所有细胞的排序和分析均是由流式细胞分选仪(仪器型号:FACS Aria)完成的(BD 生物科学, Oxnald, PA, 美国)。
随着各自的FITC标记的成对单克隆抗体染色之后,CD3+细胞、 Vδ2+细胞和TCRαβ+细胞就能被准确的分类出来了。
BM CD34+细胞的分类如下所示,像之前描述的一样,间接的利用了CD34粒子组分将CD34+细胞从骨髓细胞中浓缩出来12。
经过分析和排序,用Cy5-PE或是PC5成对的谱系混合,包括CY5-PE或是PC5成对的抗 CD3、 CD4、CD8、CD10、 CD20、CD11b、CD14、GPA,FITC标记成对的抗CD3、 CD4 或Vδ2,PE标记成对的抗Vαβ、 CD16或是CD56,来染色细胞样品,抗原提呈细胞成对的抗CD34和非活性细胞用碘化丙啶染色后被排除。
流式细胞分选仪把CD34+细胞从骨髓细胞中分离出来。
满足条件的同种配对单克隆抗体对照物决定每一个凹槽的染色水平。
为了避免任何污染,第二次的分类拣选牢牢的遵从第一次分类拣选的方式。
得到的数据用FlowJo软件分析(Tree Star公司)。
再次分析必须确保获得的细胞纯度与之前的一致,都是> 99.9%的(补充的部分见图表1)。
3.DNA抽取和EB病毒DNA实时PCR从细胞样品中提取高分子的DNA,DNA被用于PCR和Southern印迹,根据已制定的方法,进行EB病毒DNA的实时PCR4,6。
简言之,就是分别于5S末和3S末时在 TaqMan调查上用报道染色分子和通过核苷酸臂连接的冷却粉质贴上标签。
基因剂量通过ABI PRISM 7700来进行分析(PE 生物系统, 加拿大福斯特市),DNA用荧光定量聚合酶链反应普遍掌握组合(PE生物系统)、引物和TaqMan试样进行混合。
PCR要满足的条件是在刚开始的2分钟内保持50°C的温度,后10分钟内持续95°C,继则50个周期后保持95°C达15秒和60°C达1分钟的水平。
曾有过EB病毒感染的健康人群显示在周边血液中每毫升小于200个的DNA复制,以及在核细胞中每微克小于40个的DNA复制。
4.Southern印迹探查用EB病毒串联反复(TR)或是TCR/Ig基因Southern印迹的实施按照之前已制定的方式进行2,13,简言之,5μg 高分子加重于DNA上,DNA被Eco RI和/或Bam HI吸收。
被吸收的DNA经0.9%琼脂糖胶电泳转运到Byodine-B上,再将Byodine-B和带P标签32的试样混合。
用5.2-kbBam HI-Eco RI片段评估淋巴细胞的克隆能力,其中,5.2-kb Bam HI-Eco RI片段包括EBV染色体组的TR排序和/或C β1、Jβ1、Jβ2、Jγ和 JH的 TCR/Ig基因试样。
正常的对照DNA从健康但EBV血清反应阳性的成年人的MNC中提取。
5.γδT细胞的基因分析通过常规方法,从高纯度的周边血液经PAN标记TCRγδ阳性的周边血核细胞中提取染色体杂交品种。
对于TCRδ基因和TCRγ基因,N区PCR 产物的直接排序已完成。