毛细管电泳化学发光

通过荧光检测毛细管电泳法快速灵敏地检测人体血浆中的亚硝酸盐的方法本文选自塔兰塔(Talanta)，爱思唯尔(Elsevier)出版，纯分析化学期刊。

作者：安范舒普代尔，来自比利时鲁汶大学。

摘要:分析亚硝酸盐,NO指示剂在体内的产生,为研究NO在体内的合成提供了一个有用的工具。

通过其衍生反应和2、3二氨基萘(DAN)中一个快速、灵敏荧光-毛细管电泳法被发展来测定了人体血浆中的亚硝酸盐。

亚硝酸盐在人体血浆中很容易与DAN在酸性条件下反应得到收益率很高的荧光2,3-萘酚三唑(NAT)。

荧光检测是完成施达赛检测的最佳化方式，它允许一种等离子体样品的直接分析而不像大多数堆积样品的CE-UV方法。

乙腈可去除蛋白质。

短程注射和高压电(30千伏)可缩短分析时间。

用20mm,pH值为9.23的缓冲溶液可更好的分离。

NAT的分离在1.4分钟内完成，除蛋白等离子体样品以5s每50 mbar水动力地的速度被注射到60厘米×75微米的内部直径无涂层的玻璃毛细管里。

激发波长被选中为一个宽带滤波器(240-400nm),发射光在418nm被测量通过采用一个截止过滤器。

在2到500nm的范围内获得一个好的线性关系(R2=0.9975)。

在原始血浆样本中亚硝酸盐的检测极限是0.6nm, 比我们此前的CE-UV法低了750倍。

先进的荧光-毛细管电泳法相对于目前的荧光高效液相色谱法，具有更简单的系统和更低的成本优势，同时也很灵敏。

这个研究表明该方法测定人体血浆中亚硝酸盐在的浓度与频繁报道的一致。

1介绍研究表明，亚硝酸盐在生理和病理条件下有可能成为NO合成的一个标志，因此在实验和临床研究中可能作为一个生化参数。

但是到目前为止，还没有真正关于人体血浆中亚硝酸盐的浓度的共识。

具报告，一般水平的亚硝酸盐在人体血浆中“不能检测”的范围达到26微米。

人体血浆中亚硝酸盐的浓度最合理的范围是从100纳米到1微米，通过大多数研究者团体的测量最常报道的结果是从100纳米到200纳米。

电化学发光免疫传感器的研究及应用现状摘要：电化学发光免疫技术是将高灵敏度的电化学发光和高特异性的免疫反应相结合的一种交叉学科研究的成果。

电化学发光主要应用在免疫系统、生物酶等方面的研究，而电化学发光免疫传感器在临床领域中有较明显的成果。

因此，本文将从电化学发光免疫传感器的研究和应用现状两个方面，对电化学发光免疫传感器进行进一步的研究，尤其在医学方面能够有更多突破，实现在更多领域中的应用。

关键词：电化学发光；免疫传感器；研究；应用现状；一、电化学发光免疫传感器的概念（一）电化学发光的概念电化学发光即电致化学发光，是一种通过在电极上施加一定电压，用来引发物质在电极表面进行电化学反应，反应产生的能量激发发光物质由基态迁移到激发态，处于激发态的物质不稳定会返回基态，在这一过程中会伴随光信号产生，产生光信号后通过光/电转换器，将光信号转换成电信号，来实现对目标物的检测。

ECL分析法不仅具有仪器简单，灵敏度高，还具有试剂用量少、时空可控性强等优点，现阶段，电化学发光技术已广泛应用于免疫分析、生物分子和其他生物分子检测中。

（二）免疫传感器的概念免疫传感器是一种将高特异性的免疫反应和高超的物理转换器结合起来的一种分析类器件。

由于免疫反应具有强的特异性，加之物理转换器的高的灵敏度，使得免疫传感器也成为一种有效检测样品的方法，受到人们的热切关注。

目前，免疫传感器也已经广泛地应用于临床医学检测等领域。

（三）电化学发光免疫传感器的概念电化学发光免疫传感器是一种将电化学发光与免疫传感器结合起来的一种具有很高免疫特性的一种装置。

利用电化学发光的高灵敏度的传感技术，再结合特异性免疫反应，最终可以达到一种对临床中微量物质进行定量的检测。

二、电化学发光免疫传感器的研究及应用电化学发光免疫传感器是将抗体或者抗原通过一定方式负载在电极上作为识别探针，当抗体与抗原发生特异性反应后，其产生的复合物与电化学发光信号之间建立一定关系，然后通过光电转换器，将光信号转换成电信号，从而对目标物进行检测。

醇苷及多糖同步分离纯化的应用。

以新疆特色资源管花肉苁蓉为原料，采用膜分离技术，将管花肉苁蓉水提液先后经过30ku 超滤膜、400u 纳滤膜。

得到2种目标产物，一是多糖粗品，多糖得率为57.40%，纯度为51.82%；二是苯乙醇苷粗品，苯乙醇苷得率为66.86%，其中松果菊苷、毛蕊花糖苷、总苯乙醇苷纯度分别为26.54%、3.36%、31.11%。

形成了一套采用膜分离技术加工管花肉苁蓉水提液的新工艺体系，此工艺操作简单安全、能耗及成本较低，可实现管花肉苁蓉苯乙醇苷及多糖的低碳、高效同步分离纯化。

3结束语综上所述，苯乙醇类化合物具有水溶性和吸湿性，易溶于甲醇，可溶于丙酮，性质较为稳定。

其提取工艺有加热回流提取、乙醇浸出提取、水溶媒提取、甲醇提取、微波辅助提取、超声辅助提取、微波-超声辅助提取、酶解提取等。

纯化方法有中压柱层析技术、大孔树脂技术和膜分离技术等。

参考文献[1]孔征,毛乐静,霍仕霞,等.Box-Behnken 响应面法优化管花肉苁蓉中毛蕊花糖苷的提取工艺研究[J].中国药房,2019,30(14):1970-1974.[2]黄翔,郭晔红,贾存勤,等.肉苁蓉提取工艺及干燥方式研究[J].中草药,2019,50(15):3622-3630.[3]朱玉婷,李茂星,王建,等.中压柱层析快速分离纯化肉苁蓉提取物中的松果菊苷和毛蕊花苷[J].解放军药学学报,2018,34(06):491-493.[4]刘朋龙,王亮.应用大孔树脂分离纯化管花肉苁蓉中苯乙醇苷研究[J].农产品加工,2018(23):11-14.[5]蒋华彬,刘丽莎,张清,等.膜分离技术同步分离纯化管花肉苁蓉苯乙醇苷及多糖[J].食品科技,2019,44(07):229-234.（作者简介：柳雯———女，1983年出生，本溪市化学工业学校，主要从事食品、药品、化学品及农产品的分析检验及方法研究）山药是薯蓣科植物薯蓣的干燥根茎，具有补益气、消渴生津、保健、养颜等功效，是中国传统的药食同源的天然植物。

电化学发光相关知识1、电化学发光概述电化学发光（electrochemiluminescence，ECL）是指将一定的电压或电流信号施加到电极上使得电化学反应发生，在电极表面产生物质，这些电极反应产物之间或电极产物与体系中其它共存组分之间发生化学反应产生激发态物质，当激发态物质从激发态返回基态时释放能量产生光辐射的一种现象[1,2]。

电化学发光反应发生的条件如图1。

电化学发光是化学发光方法与电化学方法结合的一种方法，因此其综合了化学发光灵敏度高和电化学反应容易被控制的优点。

另外由于电化学发光分析方法线性范围宽、分析快速、重现性好、操作简便等，使得其越来越受到研究者的关注[2-5]。

图1电化学发光反应发生的条件图对电化学发光现象的详细研究是在20世纪60年代，随着电子科技技术的飞速发展以及灵敏度很高的光电传感器的出现，为电化学发光的研究提供了有力的依据，Kuwana等最先利用脉冲电压研究了铂电极上鲁米诺的电化学发光机理，使人们对电化学发光及其机理有了初步的认识，同时人们也研究发现除了鲁米诺以外还有一些稠环芳烃也可以在一定的条件下产生电化学发光现象，为接下来对芘类化合物、呋喃、吲哚类、蒽及其衍生物的电化学发光研究奠定了有力的基石。

到20世纪80年代，电化学发光的研究范围更加广泛，相关报道也逐渐增多，并且电化学发光分析开始与高效液相色谱、毛细管电泳等分离技术联用，为其在实际中的应用提供了有力的依据，并且使得发光信号的稳定性有了一定的提升。

三联吡啶钌是这个时期的重大发现，它可以用于草酸、氨基酸等多种物质的测定，为电化学发光的研究提出了新的思路。

20世纪90年代以后，电化学发光已经成为一个非常活跃的领域，对其机理的认识已经更加深入，电化学发光的装置、电极材料等都得到了大的发展，并且电化学发光的应用已经扩展到免疫分析、DNA分子检测、生物活体分析等领域。

总之，电化学发光一直在朝着独特、灵敏度高、分析范围广的方向发展。

电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，包括了电化学和化学发光两个部分。

在该反应中N-羟基琥珀酰胺（NHS）与三丙胺（TPA.两种电化学活性物质可同时失去电子发生氧化反应，由激发态回复到基态的过程中发射光子（hv），这一过程中在电极表面的循环反应产生多个光子，使光信号增强。

电化学发光分析法具有灵敏度高、仪器设备简单、操作方便、易于实现自动化等特点，广泛地应用于生物、医学、药学、临床、环境、食品、免疫和核酸杂交分析和工业分析等领域。

在21世纪中必将继续为解决人类面临的各种重大问题发挥更加显著的作用。

本书主要讲述了电化学发光基本原理、基本类型、检测技术、应用、毛细管电泳电化学发光应用实例等内容。

电化学发光的应用：1、电极表面活性分布的表征2、电极表面粗糙度的表征3、流体动力学研究4、固态电子传输研究5、反应动力学研究6、观察酶活性的变化7、分析化学上的应用电化学发光应用的前景电化学发光由于结合化学发光方法和电化学方法的优点，一方面可以从光学和电化学两个侧面对一些体系进行更全面的研究，这样可以更加有利于揭示许多单独用一种方法难以深入了解的问题。

另外一方面，电化学发光分析方法的灵敏度常常只取决于电极表面附近分析物的浓度，极大地方便了分离与富集，使电化学发光分析方法迅速发展成为未来免疫分析和DNA分析最具竞争力的方法之一。

因此我们完全有理由相信：电化学发光方法将成为一个独具魅力的研究方向。

今后电化学发光研究的热点主要有下面几个方向：（1）电化学发光生物芯片的研究与开发。

主要要解决以下几个问题。

第一个问题是DNA在电极上的固定。

第二个问题是高效的电化学发光探针的制备。

第三个问题是电化学发光仪器的微型化，智能化和遥控化。

（2）继续完善现有的电化学发光免疫分析方法，使该方法成为一种常规的分析方法。

（3）电化学发光方法与其它分离技术的联用与开发。

使电化学发光方法成为一种广谱的分析方法。

特别是将吡啶钌电化学发光用于氨基酸等胺类物质的测定。