土壤水解性氮的测定(碱解扩散法)
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土壤水解性氮的测定(碱解扩散法)
1方法原理土壤水解性氮又称碱解氮或土壤有效氮,包括无机态氮(铵态氮、硝态氮)及易水解的有机态氮(氨基酸、酰铵和易水解蛋白质)。
碱解氮的含量和有机质含量及质量有关,有机质含量高,熟化程度高,有效性氮含量也高;反之,有机质含量低,熟化程度低,有效性氮的含量也低。
碱解氮含量作为植物氮素营养较无机氮有更好的相关性,所以测定碱解氮比测定氨态氮和硝态氮更能确切的反映出近期内土壤的供氮水平。
用碱液处理土壤时,易水解的有机氮及铵态氮转化为氨,硝态氮则先经硫酸亚铁转化为铵。
以硼酸吸收氨,再用标准酸滴定,计算水解性氮含量。
2应用范围本方法适用于各类土壤中水解氮的测定
3主要仪器恒温培养箱、扩散皿、毛玻璃、移液管(10ml、2ml)、滴定管、三角瓶(250ml)、玻璃棒。
4试剂①1.8molL-1 NaOH:称取72.0g NaOH溶于水中,冷却后稀释至1L。
②1.20molL-1 Na0H:称取48g NaOH溶于水中,冷却后稀释至1L。
③2%的硼酸溶液:称取硼酸20g,溶于水中,稀释至1L。
④混合指示剂溶液:称取0.50g溴甲酚绿和0.10g甲基红于玛瑙研钵中,加入少量5%的乙醇,研磨至指示剂全部溶解后,加95%乙醇至100ml。
贮于棕色瓶中。
⑤锌-硫酸亚铁还原剂:称取50g FeSO4及1g锌粉(可省去)磨细,并通过0.25筛孔,装入棕色瓶中,存于阴凉处。
⑥碱性胶液:称取40g 阿拉伯胶(可用明胶代替)放入装有50ml水于烧杯中,温热至70~80℃搅拌促溶(水浴加热),冷却约1h,加入20ml甘油和20ml饱和K2CO3水溶液,搅匀放冷,离心除去泡沫及不溶物,将清液贮于玻璃瓶中备用。
⑦0.10molL-1盐酸标准溶液:
配制量取9ml盐酸,注入1L水中。
标定称取0.20g(精确至0.0001g)于270~300℃灼烧至恒量的基准无水碳酸钠,溶于50ml水中,加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,用0.10molL-1盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2min,冷却后继续滴定至溶液呈暗红色。
同时做空白试验。
盐酸标准溶液准确浓度按下式计算:
C = m/[(V1-V2)*0.05299]
式中:c-盐酸标准溶液浓度,mol L-1;m-称取无水碳酸钠的质量,g;V1-盐酸溶液用量,ml;V2-空白试验盐酸溶液用量,ml;0.05299-1/2Na2CO3的豪摩尔质量,g。
5操作步骤①称取通过0.25mm筛孔的风干土样2g(精确到0.001g)和1g硫酸亚铁粉剂均匀铺在扩散皿外室,水平地轻轻旋转扩散皿,使土样铺平。
②在扩散皿的内室中,加入2ml 2%含的硼酸溶液,再加1滴定氮混合指示剂。
然后在扩散皿的外室边缘涂上碱性胶液,盖上毛玻璃,旋转数次,使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合,然后小心地用橡皮筋二根交叉成十字形圈紧。
再慢慢转开毛玻璃的一边,使扩散
皿外室露出一条狭缝,迅速加入10mL 1.20molL-1NaOH液于扩散皿的外室中,立即将毛玻璃旋转盖严。
③在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿,使溶液与土壤充分混匀;随后小心放入40℃的恒温箱中。
④24h后取出,用微量滴定管以0.01molL-1的盐酸(或硫酸)标准液滴定扩散皿内室硼酸液中吸收的氨量,其终点为颜色由蓝色变为紫红色。
滴定时应用细玻璃棒搅动内室溶液,不宜摇动扩散皿,以免溢出。
⑤在样品测定的同时,另取一扩散皿,做空白试验,不加土壤,其他步骤与有土壤的相同。
再加上参备样。
6结果计算土壤中水解氮(mgkg-1)=C*(V-V0)*14*1000/W
C- 盐酸标准液的浓度;V- 样品测定时用去盐酸标准液的体积;V0-空白测定时用去盐酸标准液的体积;14- 氮的mol质量;1000-换算系数;W- 土壤重量(g) 。
7注意事项在测定过程中碱的种类和浓度、土液比例、水解的温度和时间等因素对测得值的高低,都有一定的影响。
为了要得到可靠的、能相互比较的结果,必须严格按照所规定的条件进行测定。
特制碱性溶胶必须先溶解再混合,否则会结块。
注意扩散皿一定要刷干净,尤其是内室,否则一加硼酸,就会立刻变成蓝色。
如变成蓝色,则需重新做。
8参考指标土壤水解性氮(mgkg-1)等级
<25 极低
25~30 低
50~100中等
100~150高等。