4消化酶在鱼类肠道中的分布

第42卷㊀第6期2023年12月黑龙江水产Northern Chinese FisheriesVol.42No.6December 2023文章编号:1674-2419(2023)06-0422-03作者简介:郑伟(1973.9-),男,汉族,福建福清人,大专学历㊂广东鱼兴港水产有限公司工程师㊂主要从事大口黑鲈和鳜鱼的养殖与物流技术工作㊂E -mail:26064979@㊂肠膜蛋白对加州鲈肠道消化酶活力的影响郑㊀伟,郑时忠,郑智鹏(广东鱼兴港水产有限公司,广东佛山528203)摘㊀㊀要:试验旨在研究不同水平的肠膜蛋白对加州鲈肠道消化酶活力的影响,并确定肠膜蛋白在加州鲈(Micropterus salmoides )生产中的最适添加水平㊂试验选择480尾健康㊁体况相近㊁体重约为5g 的加州鲈,按照单因素试验设计,随机分成4组个处理,每个处理组3个重复,每个重复40尾加州鲈㊂试验加州鲈分别饲喂含有2%㊁4%和6%的肠膜蛋白的基础饲料,肠膜蛋白等比例替代鱼粉㊂饲养期60d㊂试验结束,采集各组加州鲈的肠道组织,检测肠道消化酶活力㊂结果显示,2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中脂肪酶活力显著比对照组提高(P <0.05),且4%和6%肠膜蛋白组脂肪酶活力显著高于2%肠膜蛋白组(P <0.05);4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中胰蛋白酶活力显著高于对照组(P <0.05);2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中糜蛋白酶活力显著高于对照组(P <0.05)㊂研究表明,加州鲈饲料中添加一定剂量的肠膜蛋白可以提高肠道中消化酶活力,且以4%的添加剂量为宜㊂关键词:肠膜蛋白;肠道;消化酶;加州鲈(Micropterus salmoides )中图分类号:S965.211文献标志码:A㊀㊀近些年,随着水产养殖业的快速发展,导致养殖中需要大量的饲料,且饲料成本约占养殖成本的70%,尤其是动物性蛋白原料的缺乏,限制了水产养殖业的快速发展㊂鱼粉是水产养殖业中主要的蛋白原料,蛋白含量较高,氨基酸较平衡并富含大量的不饱和脂肪酸,是一种优质的动物性蛋白原料;但由于其价格的不断上涨,过量依赖进口,导致其在水产饲料中应用受限[1]㊂寻找鱼粉的替代品对水产养殖业的健康发展至关重要㊂其中,鸡肠膜蛋白是以新鲜的鸡肠为原料,经过蛋白酶处理后,喷雾干燥制得的动物性蛋白原料[2]㊂肠膜蛋白经蛋白酶酶解后会产生大量的游离氨基酸和小肽,营养丰富,在畜禽养殖生产中具有广泛的应用前景[3]㊂目前,肠膜蛋白在猪生产中的应用研究结果较多㊂谢飞等[4]研究了肠膜蛋白对猪营养物质消化率的影响,研究发现适量的肠膜蛋白粉可以提高猪对饲料总能㊁中性洗涤纤维及粗蛋白的消化率,且肠膜蛋白粉的最适添加水平为20%㊂胡玲玲等[5]研究了肠膜蛋白对仔猪生长性能的影响,发现添加2.5%的肠膜蛋白可以显著提高仔猪的生长性能,且鸡肠膜蛋白与猪肠膜蛋白对仔猪生长性能的影响效果相当㊂在珍珠龙胆石斑鱼的研究中发现,肠膜蛋白替代9%的鱼粉对其生长性能无显著影响[6]㊂唐涛[7]研究发现,适量的肠膜蛋白可以有效提高黄鳝生长性能的趋势,可以降低肠道炎症反应,有效促进肠道黏膜紧密连接蛋白的表达,提高肠道绒毛高度,且肠膜蛋白的最适添加水平为5%㊂加州鲈(Microp-terus salmoides )是从20世纪70年代引入中国,主要在中国南方养殖,由于其肉质鲜美㊁营养丰富,深受广大消费者的喜爱㊂该试验以加州鲈为研究对象,探究不同水平的鸡肠膜蛋白对其肠道消化酶活力的影响,并确定肠膜蛋白在加州鲈养殖中的最适添加水平,为加州鲈的低成本㊁可持续养殖提供参考㊂1材料与方法1.1肠膜蛋白该研究中使用的肠膜蛋白由山川生物科技有限㊃224㊃公司提供㊂试验加州鲈购自福清本地水产养殖场㊂1.2试验设计试验选择480尾健康㊁体况相近㊁体重约为5g 的加州鲈,按照单因素试验设计,随机分成4个处理,每个处理4个重复,每个重复40尾加州鲈㊂试验加州鲈分别饲喂含有2%㊁4%和6%的肠膜蛋白的基础饲料,肠膜蛋白等比例替代鱼粉㊂饲养60d㊂试验结束,采集各组加州鲈的肠道组织,检测肠道消化酶活力㊂试验分组及处理见表1㊂表1㊀试验分组及处理分组处理对照组基础饲料2%组基础饲料+2%肠膜蛋白4%组基础饲料+4%肠膜蛋白6%组基础饲料+6%肠膜蛋白1.3试验基础饲料试验加州鲈的基础饲料以豆粕㊁鱼粉㊁肠膜蛋白为蛋白源,以豆油和鱼油为脂肪源配制,其原料组成及营养成分含量见表2㊂表2㊀试验加州鲈的基础饲料组成及营养成分/%原料比例营养成分含量豆粕15粗蛋白45.59鱼粉43粗脂肪10.03面粉20水分9.04鱼油4豆油3磷酸二氢钙1纤维素10预混料41.4养殖管理试验加州鲈采取循环水养殖㊂正式试验开始前,先驯养7d适应养殖环境,期间投喂基础饲料㊂正式试验期,每天投喂饲料量为加州鲈体重的3%~ 4%,投喂2hrs后吸出残饵㊂养殖水pH值约为7.5,水温约为27.5ħ,溶解氧含量大于5.5mg/L㊂1.5肠道酶活力的测定试验结束后,从每个重复中选择3尾加州鲈麻醉采集肠道组织样品,-80ħ冰箱中保存,用于测定胰蛋白酶㊁糜蛋白酶㊁脂肪酶活力,检测方法参考试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书㊂1.6数据处理各组加州鲈肠道酶活力指标数据采用SPSS24采用单因素方法分析显著性,LSD分析组间差异, P<0.05表示数据具有显著差异㊂2结果不同水平的肠膜蛋白对加州鲈肠道消化酶活力的影响见表3㊂表3㊀不同水平的肠膜蛋白对加州鲈肠道消化酶活力的影响指标对照组2%肠膜蛋白组4%肠膜蛋白组6%肠膜蛋白组SEM P值脂肪酶(U/L)80.54c96.05b107.65a102.98a5.850.028胰蛋白酶(U/mg)1253.87b13.25.84ab1475.97a1407.51a26.850.041糜蛋白酶(U/mg)74.31b86.65a94.65a92.31a 5.970.026注:同行数据被标注不同字母表示差异显著(P<0.05)㊂由表3数据可见,2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中脂肪酶活力显著比对照组提高(P<0.05),且4%和6%肠膜蛋白组脂肪酶活力显著高于2%肠膜蛋白组(P<0.05);4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中胰蛋白酶活力显著高于对照组(P<0.05);2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中糜蛋白酶活力显著高于对照组(P<0.05)㊂3讨论肠道是水产生物消化吸收饲料中营养物质的主要场所,肠道的消化吸收能力与其中的消化酶活性直接相关㊂胰蛋白酶和糜蛋白酶主要消化饲料中蛋白质;而脂肪酶可以将长链的甘油水解为脂肪酸供机体消化吸收㊂该试验中,2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中脂肪酶活力显著比对照组提高,且4%和6%肠膜蛋白组脂肪酶活力显著高于2%肠膜蛋白组;4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中胰蛋白酶活力显著高于对照组;2%㊁4%和6%肠膜蛋白组加州鲈肠道中糜蛋白酶活力显著高于对照组,表明适量的肠膜蛋白显著提高了加州鲈肠道消㊃324㊃化吸收能力㊂熊娟等[8]研究了肠膜蛋白对加州鲈生长性能㊁肠道及肝脏的影响,研究发现,肠膜蛋白替代3%的鱼粉可以显著降低饲料系数,可以显著降低丙二醛㊁谷草转氨酶及谷丙转氨酶活力,显著提高肠道中脂肪酶㊁胰蛋白酶㊁糜蛋白酶等消化酶活性,也显著提高了血清中抗氧化酶活力㊂目前,肠膜蛋白在加州鲈养殖生产中应用研究结果较少㊂陈灵涵等[9]研究了肠膜蛋白对大鳞副泥鳅生长㊁消化酶及抗氧化能力的影响,发现适量的肠膜蛋白对大鳞副泥鳅肠道消化酶活力未产生显著性影响,但可以提高其生长性能㊂以上研究结果与本试验研究结果不完全相同,可能是因为试验鱼种类㊁肠膜蛋白来源不同导致的,未来还需要进一步研究相关的作用机制㊂4结论该试验结果表明,在加州鲈养殖中添加一定水平的肠膜蛋白可以提高肠道中脂肪酶㊁胰蛋白酶及糜蛋白酶活力,增强了肠道的消化吸收能力;综合各项数据来看,4%的肠膜蛋白添加水平较为适宜㊂参考文献:[1]周歧存,麦康森,刘永坚,等.动植物蛋白源替代鱼粉研究进展[J].水产学报,2005,29(3):404-410. [2]朱滔.肠膜蛋白营养价值及其在水产动物饲料中的应用[J].水产养殖,2021,42(05):11-14.[3]朱滔,黄小燕.肠膜蛋白在动物生产中应用研究进展[J].饲料研究,2015(20):9-13.[4]谢飞,赵金标,黄强,等.不同替代比例肠膜蛋白粉对猪有效能及营养物质消化率的影响[J].饲料工业,2020, 41(03):21-26.[5]胡玲玲,杨红军,顾莞婷.鸡肠膜蛋白对保育猪生长性能的影响[J].饲料与畜牧,2018(11):74-76. [6]植心妍,杨烜懿,王光辉,等.酶解肠膜蛋白粉在珍珠龙胆石斑鱼饲料中的应用[J].水产科学,2023,42(03): 509-516.[7]唐涛.肠膜蛋白对黄鳝生长和肠道健康的影响[D].长沙:湖南农业大学,2019.[8]熊娟,王标,杨红军,等.肠膜蛋白对加州鲈生长性能和肝肠健康的影响[J].饲料工业,2021,42(01):17-23. [9]陈灵涵,郑宗林,朱成科,等.肠膜蛋白对鱼粉的不同替代水平对大鳞副泥鳅幼鱼生长性能㊁消化酶活性及抗氧化能力的影响[J].饲料与畜牧,2017(07):39-43.Effects of intestinal membrane proteins on the activity of intestinal digestive enzymes in Micropterus salmoidesZHENG Wei,ZHENG Shizhong,ZHENG Zhipeng(Guangdong Yuxing Harbor Aquatic Co.,Ltd,Foshan528203,Guangdong China)Abstract:The experiment was designed to investigate the effects of different levels of intestinal membrane proteins on the activity of intestinal digestive enzymes of Micropterus salmoides,and to determine the optimum level of intes-tinal membrane proteins to be added in the production of Micropterus salmoides.A total of480healthy Micropterus salmoides in similar body condition and weighing about5grams were randomly divided into four treatments with three replicates of40Micropterus salmoides each,according to a one-way experimental design.The experimental Micropterus salmoides were fed a basal diet containing2%,4%and6%of enteric membrane protein,with enteric membrane protein replacing fishmeal in equal proportions.The feeding period was60days.At the end of the ex-periment,the intestinal tissues of Micropterus salmoides in each group were collected and the intestinal digestive en-zyme activities were tested.Membrane protein groups were significantly higher(P<0.05)than the control group. The study showed that the addition of a certain dose of enteromucosal proteins to Micropterus salmoides feed can im-prove the digestive enzyme activity in the intestine,and the4%additive dose is suitable. Keywords:intestinal membrane protein;intestine;digestive enzymes;Micropterus salmoides㊃424㊃。

第四章牛蛙主要消化酶的分布及pH和温度对消化酶活力的影响牛蛙(Rana catesbeinana)隶属两栖纲无尾目蛙科，其肉质细嫩，味道鲜美，营养丰富，是有名的肉用型蛙类。

牛蛙具繁殖快、适应性强、生长迅速和抗逆性强等优点，且其养殖饲料易取。

在我国，牛蛙的人工养殖得到了大规模推广[1]。

研究消化酶的活力及其影响因素可了解动物对食物不同成分的消化能力，为动物天然饲料的选择、优质人工饲料的配制和适宜养殖条件的确立提供理论基础，对提高动物养殖的经济效益无疑是有帮助的。

目前，对低等脊椎动物消化酶的研究主要集中在经济养殖型鱼类[2-9]和爬行类[10]，对两栖类消化酶的研究报道较少[11-14]。

奚刚等[14]对牛蛙幼体发育阶段消化道蛋白酶和淀粉酶的活力变化情况进行了研究。

有关成体牛蛙消化系统消化酶分布情况及各种理化因子对牛蛙消化酶活力的影响方面的研究尚未见报道。

pH和温度是影响牛蛙生活的重要环境因子，其可通过影响消化酶活力直接影响牛蛙对食物的消化吸收能力，并最终影响牛蛙的生长发育。

本文在检测牛蛙消化系统蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶分布情况的基础上，对pH和温度对牛蛙消化酶活力的影响进行了研究，旨在增进对牛蛙消化生理特点的认识，为牛蛙人工养殖中环境因子的控制和饲料营养成分的合理搭配提供理论依据。

1 材料与方法1.1 实验材料鲜活的成体牛蛙购自芜湖市黄山西路菜市场，重250~300 g。

将牛蛙毁髓处死，剖腹，迅速取出胰脏和完整消化道。

将消化道剪开，用4℃ 预冷的0.65 %的生理盐水快速洗净，按食道、胃、前肠、中肠和后肠(直肠)取材，用吸水纸轻轻吸干，称重。

1.2 酶液的制备根据所称得的消化系统各部分的质量，加入20倍质量的4 ℃蒸馏水，在冰水浴中充分匀浆，捣成糜状，以2000 r/min的速度冷冻离心15 min，取上清液即为酶液。

保存于4℃冰箱中，8 h内分析完毕。

1.3 消化酶活力的测定1.3.1 蛋白酶活力的测定采用福林-酚试剂法[11]，略有改动。

大马哈鱼的腹部器官与消化生理大马哈鱼是一种古老而神秘的淡水鱼类，它们在亚洲地区被广泛饲养和捕捞。

这种鱼的腹部器官和消化生理起着至关重要的作用，对其健康和生存至关重要。

大马哈鱼的腹部器官包括胃、肠道和肝脏等重要组织。

它们在鱼类的消化过程中起着关键作用。

让我们来深入了解大马哈鱼的腹部器官和消化生理。

首先，大马哈鱼的胃是其消化系统的关键部分之一。

胃是用来储存和分解进食物的器官。

大马哈鱼的胃袋相对较大，可以容纳大量的食物。

这有助于保持鱼类在食物罕见时的存活能力。

胃内有酸性消化液，能够分解食物中的蛋白质和其他重要营养物质。

其次，大马哈鱼的肠道是消化过程的关键一环。

肠道是食物在体内消化和吸收的主要区域。

大马哈鱼的肠道相对较长，这有助于食物充分消化和吸收营养成分。

肠道内壁有许多纤毛和微绒毛，能增加吸收表面积，提高食物的消化效率。

此外，肠道中还有一定数量的消化酶，能够进一步分解食物中的营养物质，使其更容易被鱼体吸收和利用。

除了胃和肠道，大马哈鱼的肝脏也是其消化生理的重要组成部分。

肝脏是一个关键的代谢器官，负责分解和转化体内的物质。

它在消化过程中扮演着重要角色，产生和分泌胆汁，以帮助肠道消化和吸收食物中的脂肪。

此外，肝脏还负责代谢和排除体内的废物和毒素，维持身体内部环境的稳定。

大马哈鱼的消化生理过程是一个复杂的系统。

食物的消化从口部开始，随后经过咽喉进入胃部。

在胃中，食物被分解和储存。

然后，食物经过肠道逐渐消化和吸收。

消化过程中，胃液中的酸性环境和肠道中的消化酶起着至关重要的作用。

大马哈鱼的消化生理过程还受到饮食习惯和环境因素的影响。

大马哈鱼是杂食性鱼类，其饮食主要包括昆虫、小鱼和水生植物等。

它们的消化系统适应了这种杂食性饮食。

然而，过度喂食或不当饮食可能会导致消化问题和健康隐患。

为了确保大马哈鱼的消化系统的健康，养殖者和捕捞者需要采取一些措施。

首先，提供适宜的饮食，包括提供均衡的营养和适当的食物质量。

其次，避免过度喂食和不恰当的饮食习惯，遵循适当的喂养频率和量。