新型分子标志物microRNA
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新型分子标志物microRNA 在肿瘤诊断中的应用
主讲人:刘敏
中山大学附属第一医院
目录content 1
2
3
microRNA概述
循环microRNA
microRNA的产业应用4总结
1 microRNA概述
什么是microRNA?microRNA是一类长约22nt的单链小RNA,
由细胞内源产生的发卡(hairpin)结构转
录本加工而来1。
pri-miRNA
pre-miRNA
miRNA
1. Huang L, et al: Hsa-miR-19a is associated with lymph metastasis and mediates the TNF-alpha induced epithelial-to-mesenchymal transition in colorectal cancer. Sci Rep 2015.
的发现
microRNA
Victor Ambros Gary Ruvkun
200019932001
lin-4let-7miRNA 1.
Ambros V,et al: The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell 19932.
Ruvkun G,et al: Posttranscriptional regulation of the heterochronic gene lin-14 by lin-4 mediates temporal pattern formation in C. elegans. Cell 19933.Ruvkun G,et al: The 21-nucleotide let-7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans. Nature 2000
microRNA的功能
转录抑制|mRNA切割|mRNA降解1. Cellura D, et al: miR-19-Mediated Inhibition of Transglutaminase-2 Leads to Enhanced Invasion and Metastasis in Colorectal Cancer. Mol Cancer Res
microRNA参与调节各种病理生理过程
miRNA的功能涉及到各种生理病理
过程,包括发育过程调节、抵抗病
毒入侵、动物免疫功能调节、各器
官/系统疾病以及肿瘤等。
miRBase数据库
•miRBase是一个提供包括miRNA序列数据、注释、预测
基因靶标等信息的全方位数据库。
•miRBase收录的 miRNA 条目数已达38589 个。
人类基因组所编码的miRNA已经达到 1881 个。
•关于miRNA研究发表的年论文量在2017 年已达到13179篇。
2
循环microRNA
循环
microRNA 细胞内
microRNA
循环microRNA 的发现
2008年
1.Chen X, et al: Characterization of microRNAs in serum: a novel class of biomarkers for diagnosis of cancer and other diseases. Cell Res 2008
wrie CH,et al. Detection of elevated levels of tumour-associated microRNAs in serum of patients with diffuse large B-cell lymphoma. Br J Haematol
microRNA在血清中稳定存在南京大学研究团队通过Solexa测序技
术发现人血清中稳定存在microRNA,并且microRNA能够抵抗RNase的降解作用。
Solexa测序显示血清中富含miRNA 血清miRNA对抗RNase
1.Characterization of microRNAs in serum: a novel class of biomarkers for diagnosis of cancer and other diseases
循环microRNA的来源
自人血清中发现microRNA后,研究者们又在血浆、唾液、尿液等体液中发现了稳定的miRNA存在,这些miRNA被称为循环microRNA。
循环microRNA的来源主要包括:
a)破裂的细胞或受损的组织被动释放
b)经由外泌体主动分泌
c)与RNA结合蛋白结合被分泌
循环microRNA研究现状
循环microRNA 与肿瘤
血清
qRT-PCR 1. Wang J, Zhang KY, Liu SM, Sen S. Tumor-associated circulating microRNAs as biomarkers of cancer. Molecules.
循环microRNA 与肿瘤a)原癌miRNA和抑癌miRNA
b)不同肿瘤组织具有特异的microRNA表达谱
与弥漫性B细胞淋巴瘤
Lawrie CH,et al. Detection of elevated levels of tumour-associated microRNAs in serum of patients with diffuse large B-cell lymphoma. Br J Haematol
microRNA
与消化道肿瘤胃癌结肠癌
1.
Liu HN, Liu TT, Wu H, Chen YJ, Tseng YJ, Yao C, Weng SQ, Dong L, Shen XZ. Serum microRNA signatures and metabolomics have high diagnostic value in colorectal cancer using two novel methods. Cancer Sci. 2.Liu HN, Wu H, Tseng YJ, Chen YJ, Zhang DY, Zhu L, Dong L, Shen XZ, Liu TT. Serum microRNA signatures and metabolomics have high diagnostic value in gastric cancer. BMC Cancer.
microRNA与结直肠癌
Akihiko Tsuchida, Shinichiro Ohno, Weihong Wu, Nariso Borjigin, Koji Fujita, Tastuya Aoki, Shinobu Ueda, Masakatsu Takanashi and Masahiko Kuroda .miR-92 is a key oncogenic component of the miR-17–92 cluster in colon cancer
miR-92a的发明奖项
microRNA与胰腺癌
•Liu R等人通过采用全基因组水平的小分子核
酸测序技术,对胰腺癌病人和正常人血清中
表达异常的microRNA进行了筛选,发现了
包括miR-25在内的7种microRNA对胰腺癌
具有一定的诊断价值。
•而在筛选出的7种microRNA中,miR-25
的诊断贡献(Fold change)最大。
Serum MicroRNA Expression Profile as a Biomarker in the Diagnosis and Prognosis of Pancreatic Cancer
microRNA与胰腺癌
Ren C, Chen H, Han C, Wang D, Fu D. Increased plasma microRNA and CD133/CK18-positive cancer cells in the pleural fluid of a pancreatic cancer patient with liver and pleural metastases and correlation with chemoresistance. Oncol Lett.
miR-25的发明奖项
2016年度国家教育部技术发明奖一等奖
3 microRNA的应用
国外microRNA的应用
业 内 领 先
早 期 检 测
以组织、细胞中 microRNA 为检测对象
以血液中 microRNA 为检测对象
microRNA-25与胰腺癌
microRNA在胰腺癌早期诊断的临床意义
microRNA在胰腺癌早期诊断的临床意义
项目灵敏度特异度样本正确率约登指数Kappa值ROC曲线下面积
统计汇总75.58%93.03%88.05%0.690.7010.921
miRNA-25对早期胰腺
癌的检测也具有非常
高的灵敏度
microRNA的临床诊断价值
国内microRNA的应用
microRNA-92a与结直肠癌
检测方法:荧光定量PCR法
样本类型:粪便
microRNA在结直肠癌早期诊断的临床意义
总结
谢谢!。