临床分子生物学检验标志物

第1～6章1、现代分子生物学的开端：1953年，Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构，标志着现代分子生物学的兴起，为揭开人类生命现象的本质奠定了基础。

2、临床分子生物学检验：是分子生物学技术在临床检验诊断应用中发展起来的，以疾病为中心、以生物分子标志物为靶标的新一代临床检验诊断技术，是临床分子生物学的重要组成部分。

3、应用到临床的分子标志物包括基因组DNA、各种RNA、蛋白质和各种代谢物。

4、分子标志物：是指可以反映机体生理、病理状态的核酸、蛋白质（多肽）、代谢产物等生物分子，是生物标志物的一种类型。

5、核酸分子标志物包括：基因突变，DNA多态性，基因组DNA片段，RNA和循环核酸等多种形式。

6、DNA一级结构（直径，两个碱基之间的距离，一个螺距，一个螺旋有多少个核苷酸）：DNA一级结构就是指各核苷酸单体沿多核苷酸链排列的顺序。

7、DNA二级结构（右手螺旋—B型最常见，左手螺旋—Z型）：DNA的二级结构是双螺旋结构，主要特征是①主干链反向平行：DNA分子是一个由两条平行的脱氧多核苷酸链围绕同一个中心轴盘曲形成的右手螺旋结构，两条链行走方向相反，一条链为5’→3’走向，另一条链为3’→5’走向。

磷酸基和脱氧核糖基构成链的骨架，位于双螺旋的外侧；碱基位于双螺旋的内侧。

碱基平面与中轴垂直。

②侧链碱基互补配对：两条脱氧多核苷酸链通过碱基之间的氢键连接在一起。

DNA双螺旋的直径为2nm，一圈螺旋含10个碱基对（一个螺旋有20个核苷酸），每一碱基平面的轴向距离为0.34nm，故每一螺距为3.4nm，每个碱基的旋转角度为36°。

8、DNA三级结构（真核生物DNA三级结构是染色质或染色体）：DNA双螺旋进一步盘曲形成更加复杂的结构，称为三级结构。

超螺旋是DNA三级结构的最常见的形式。

9、真核生物的DNA形成染色质的包装过程（4步）：①形成核小体：构成染色质的基本单位是核小体。

核小体由核小体核心和连接区组成。

生物标志物的探测及其诊断应用生物标志物（biomarkers）是指能够检测到生物体内的某些生化指标或物质，例如DNA、RNA、蛋白质和代谢产物等，在生物医学领域中具有重要的应用价值，尤其是在疾病诊断、治疗和监测中。

本文将介绍生物标志物探测的方法和在临床诊断中的应用。

一、生物标志物探测方法1.基于分子生物学的方法基于分子生物学的方法是最常用的生物标志物探测方法之一，它包括PCR（聚合酶链式反应）、DNA芯片和质谱分析等。

PCR是一种敏感性极高的检测方法，能够从微量样品中扩增出目标DNA区域，用于检测体内某些基因的变异情况。

DNA芯片则是一种高通量的生物分析技术，可以同时检测几千个基因的表达情况。

而质谱分析则通过对样品分子的质量和荷质比进行分析，可以确定样品中含有的物质种类和数量。

2.生物传感器法生物传感器法是一种新兴的生物标志物探测方法，在生物体内或体外监测目标生物标志物的浓度和变化。

它由两大部分组成，一部分是生物感受器，另一部分是信号转换器。

生物感受器能够与目标分子高度特异性地结合，将结合事件转换为可测定的信号，信号转换器则能够将信号转换为数字信号，进行数据处理和分析。

3.免疫学方法免疫学方法是生物标志物探测的重要手段之一，包括酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫荧光法和放射免疫分析等。

其中，ELISA是最常见的分析方法之一，利用抗体与特定分子之间的亲和性，在板上制备出测定特异性高、灵敏度高和速度快的检测体系。

二、生物标志物在临床诊断中的应用生物标志物在临床诊断中的应用非常广泛，下面介绍几个例子。

1.乳腺癌诊断乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，其中HER2/neu是常见的生物标志物，它与乳腺癌的预后和治疗反应有关。

HER2/neu的阳性率在乳腺癌患者中为15%-20%，通过免疫组化和原位杂交等技术能够检测到它的表达水平，从而作为乳腺癌的诊断和治疗标志物。

2.肝病诊断肝病的诊断需要非常准确的生物标志物，其中肝功能指标包括血清谷草转氨酶（ALT）、血清谷丙转氨酶（AST）和总胆红素等。

临床分子生物学检验技术知到章节测试答案智慧树2023年最新济宁医学院第一章测试1.下列哪项检测需应用分子生物学检验技术（）参考答案:乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测2.1976年，简悅威应用DNA分子杂交技术成功进行了（）疾病的产前诊断。

参考答案:α-地中海贫血3.临床分子生物学检验最常用的分子标志物是（）参考答案:核酸4.下列核酸分子标志物中游离在体液细胞外的是（）。

参考答案:循环核酸5.下列关于循环核酸说法错误的是（）参考答案:利于肿瘤等疾病的早期检测，正常人体内不存在第二章测试1.下列关于分子生物标志物说法错误的是（）参考答案:分子生物标志物仅指能够反应机体病理状态的生物大分子2.下列叙述哪项是错误的（）参考答案:原核生物结构基因是断裂基因3.卫星DNA序列属于（）参考答案:串联重复序列4.以下哪项不是真核生物核基因组的特点（）参考答案:重复序列少见5.大肠杆菌类核结构的组成是（）参考答案:蛋白质+DNA1.下列关于DNA分离纯化说法错误的是（）参考答案:DNA提取过程要加入RNA酶抑制剂抑制RNA酶活性2.下列关于RNA分离纯化说法错误的是（）参考答案:RNA提取过程要加入DNA酶抑制剂抑制DNA酶活性3.常利用哪些性质进行分离纯化蛋白质（）参考答案:分子大小不同、溶解度不同、表面电荷不同、与配体的特异亲和力都是4.蛋白质分离纯化方法叙述错误的是（）参考答案:琼脂糖凝胶常用于蛋白质的分离5.纯DNA溶液的A260/ A280值为（）参考答案:1.81.以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针结合，则该样本为（）。

参考答案:携带者2.下列探针标记方法中，（）法在标记之前探针的长度已经确定.。

参考答案:化学法全程标记3.Southern杂交通常是指（）。

参考答案:DNA和DNA杂交4.基因芯片技术的本质是（）。

参考答案:核酸分子杂交技术5.检测的靶序列是RNA的技术是（）。

分子生物学检验标志物引言分子生物学检验标志物是指在分子生物学领域中使用的特定分子或生物标志物，用于评估个体的生物学状态、疾病风险或治疗反应。

这些标志物可以通过观察和分析个体的基因、蛋白质或核酸等分子水平的变化，提供有关个体健康和疾病的重要信息。

在医学诊断和疾病预测中，分子生物学检验标志物扮演着重要的角色。

它们可以帮助医生确定疾病的存在、预测疾病的发展趋势，并根据个体的分子特征制定个性化的治疗方案。

随着分子生物学技术的不断发展，越来越多的分子生物学检验标志物被发现和应用到临床实践中。

这些标志物包括基因变异、表观遗传学改变、蛋白质表达水平等。

通过对这些标志物的检测，医生可以更加准确地判断个体的生物学状态，并制定相应的治疗措施。

在本文中，我们将详细介绍几种常见的分子生物学检验标志物，包括其背景、重要性以及在临床实践中的应用。

通过了解这些标志物的特点和作用，有助于我们更好地理解和应用分子生物学在医学领域的意义和潜力。

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___ 2020;26(12):1262-1272.分子生物学检验标志物的定义3] Wang C。

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___ 2020;26(12):1262-1272.分子生物学检验标志物的定义分子生物学检验标志物是指用于检测和诊断疾病的生物分子或生物学特征。

这些标志物可以是DNA、RNA、蛋白质、代谢物等分子，或者是细胞、组织或器官的特定生物学特征。

通过分析这些标志物的存在、数量、结构或功能的异常，可以对疾病的发生、发展和治疗效果进行评估。

分子生物学检验标志物是指用于检测和诊断疾病的生物分子或生物学特征。

临床研究中的生物标志物与诊断指标临床研究是药物开发过程中的重要一环，而生物标志物与诊断指标的应用，则为临床研究提供了更全面、准确的评价手段。

本文将从定义、分类、应用和技术方法等方面，探讨生物标志物与诊断指标在临床研究中的重要性及应用前景。

一、生物标志物和诊断指标的定义与分类1. 生物标志物的定义生物标志物是指能够测量和评估生物体状态或生物过程的物质、指标或特征。

它可以是生物体内的分子、基因、蛋白质等，也可以是生理指标以及影像学表现等。

2. 诊断指标的定义诊断指标是指能够用来确定某种疾病或疾病阶段的物质、指标或特征。

它可以是临床表现、实验室检测结果等。

3. 生物标志物和诊断指标的分类根据性质和应用范围不同，生物标志物和诊断指标可分为多种类型，包括分子标志物、遗传标志物、影像标志物、生理标志物等。

二、生物标志物与诊断指标在临床研究中的应用1. 早期疾病筛查生物标志物和诊断指标在早期疾病筛查中发挥着重要作用。

通过选择合适的生物标志物和诊断指标，可以对高风险人群进行定量分析和评估，提前发现疾病的风险因素，有助于早期干预和治疗。

2. 疾病诊断与鉴别诊断生物标志物和诊断指标在疾病诊断和鉴别诊断中具有重要意义。

通过检测不同生物标志物的水平或特征，可以对不同病理状态进行定性或定量判断，帮助临床医生进行准确的诊断和鉴别诊断。

3. 疗效评估和预后判断生物标志物和诊断指标在疗效评估和预后判断中扮演着重要角色。

通过检测治疗前后生物标志物和诊断指标的变化，可以评估治疗的疗效和效果，并对患者的预后进行判断和预测。

三、生物标志物和诊断指标的相关技术方法1. 分子生物学技术分子生物学技术包括PCR、基因测序、基因芯片等，可以检测和分析相关基因或基因组的表达水平、变异情况等，为生物标志物的筛选和发现提供可靠依据。

2. 免疫学技术免疫学技术包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术等，可以测量和检测血清或体液中蛋白质的含量和相关指标，为生物标志物的监测和评估提供手段。

临床生化学中的常见生物标志物与意义解析生化学作为医学领域中重要的研究分支之一，致力于研究人体内各种生物分子的合成、分解，以及其在生理和病理过程中的作用。

在临床实践中，通过测量特定生物标志物的含量和变化，可以用于疾病的早期诊断、预后判断以及治疗效果的监测。

本文将对临床生化学中的常见生物标志物及其意义进行解析。

一、血浆中的生物标志物1. 肝功能指标血浆中的丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等指标可以反映肝功能的变化。

ALT和AST常用于评估肝细胞损伤的程度，ALP则主要用于观察肝胆系统的病理变化。

2. 肾功能指标血浆中的尿素氮（BUN）、肌酐以及尿酸等指标可以反映肾功能的变化。

BUN主要用于评估肾小球滤过功能，肌酐则可以反映肾小管排泄功能。

尿酸作为嘌呤代谢产物，其升高可以提示可能存在尿酸盐结晶，从而引发尿酸盐结石或痛风等疾病。

3. 血脂指标血浆中胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇等指标可以反映人体脂质代谢的异常情况。

胆固醇和甘油三酯升高可以提示脂代谢紊乱，而高密度脂蛋白胆固醇的降低则可能是心血管疾病的风险因素。

二、尿液中的生物标志物1. 尿常规指标尿液中的尿比重、酸碱度、尿液颜色等指标可以反映人体的水分代谢和尿路病理变化情况。

例如，尿比重过高可能提示存在脱水情况，尿液颜色异常则可能预示着潜在的肾脏疾病。

2. 微量元素尿液中的锌、铁、铜等微量元素可以作为某些疾病的辅助诊断指标。

例如，铜在Wilson病中的蓄积可以通过测量尿液中的铜含量来进行早期诊断。

三、血液中的生物标志物1. 炎症指标血液中的白细胞计数、C-反应蛋白（CRP）以及血沉等指标可以反映炎症反应的程度。

白细胞计数升高可能是感染或炎症的表现，CRP和血沉则常用于判断炎症的活动性。

2. 凝血指标血液中的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）以及纤维蛋白原等指标可以反映出凝血功能的异常程度。

生物标志物的检测方法及应用随着生物医学科学的发展，人们对疾病的认识越来越深刻，对于疾病的预防与诊治也变得越来越细致。

生物标志物是指生物体内的某种化学物质，可用于诊断疾病、监测治疗、评估患者复发和预后等方面。

生物标志物的检测方法也多种多样，如何选择最合适的检测方法，对于准确地使用生物标志物具有关键性意义。

一、生物标志物的分类生物标志物可按其检测原理来分类：（1）基于分子生物学方法，如PCR、RT-PCR、蛋白质组学等；（2）基于免疫学方法，如ELISA、荧光免疫法、放射免疫法等；（3）基于物理化学方法，如电化学法、质谱法、光学传感器等。

生物标志物还可按其生物特性分类：（1）生化标志物，包括血清蛋白、血清酶、神经肽等；（2）细胞标志物，包括肿瘤标志物等；（3）遗传标志物，包括染色体变异、基因突变等。

二、生物标志物的检测方法1.基于分子生物学方法PCR是最常见的一种基于分子生物学的生物标志物检测方法，可以快速高效地检测多种病原体。

PCR法适用于检测DNA、RNA等生物大分子，通常是将生物样本经过简单的提取处理，将其所需的核酸分离出来，再进行PCR扩增。

PCR方法的优势在于可以快速、敏感、特异地检测生物标志物，并且可以在样本中快速筛选出病原体。

不过PCR有一定的局限性，其较大的问题在于对于某些生物体内的标志物不易检测或不适用，比如RNA标志物就需要依靠转录酶反应（RT-PCR）进行扩增检测。

同时PCR需要许多精细、复杂的试剂和设备，具有一定成本，而且还容易出现阳性假阳性等问题，可能会影响检测结果的准确性。

蛋白质组学是一种通过质谱技术鉴定生物物种样本中蛋白质的方法，蛋白质组学可以检测到某些特定的蛋白质标志物，能够提供更全面的疾病信息，但其检测方法有较高的成本、复杂性和技术门槛。

2.基于免疫学方法免疫检测法就是利用抗体与抗原间的免疫偶联反应来检测生物标志物的方法。

免疫学方法通常是将所需的抗体与标准生物标志物做免疫反应，通过抗体与生物标志物的特异性结合从而完成标志物的检测。

第 1～6 章1、现代分子生物学的开端：1953 年，Watson 和 Crick 提出了 DNA 双螺旋构造，标志着现代分子生物学的兴起，为揭开人类生命现象的本质奠定了根底。

2、临床分子生物学检验：是分子生物学技术在临床检验诊断应用中进展起来的，以疾病为中心、以生物分子标志物为靶标的一代临床检验诊断技术，是临床分子生物学的重要组成局部。

3、应用到临床的分子标志物包括基因组 DNA、各种 RNA、蛋白质和各种代谢物。

4、分子标志物：是指可以反映机体生理、病理状态的核酸、蛋白质〔多肽〕、代谢产物等生物分子，是生物标志物的一种类型。

5、核酸分子标志物包括：基因突变，DNA 多态性，基因组 DNA 片段，RNA 和循环核酸等多种形式。

6、DNA 一级构造〔直径，两个碱基之间的距离，一个螺距，一个螺旋有多少个核苷酸〕：DNA 一级构造就是指各核苷酸单体沿多核苷酸链排列的挨次。

7、DNA 二级构造〔右手螺旋—B 型最常见，左手螺旋—Z 型〕：DNA 的二级构造是双螺旋构造，主要特征是①主干链反向平行：DNA 分子是一个由两条平行的脱氧多核苷酸链围绕同一个中心轴盘曲形成的右手螺旋构造，两条链行走方向相反，一条链为5’→3’走向，另一条链为3’→5’走向。

磷酸基和脱氧核糖基构成链的骨架，位于双螺旋的外侧；碱基位于双螺旋的内侧。

碱基平面与中轴垂直。

②侧链碱基互补配对：两条脱氧多核苷酸链通过碱基之间的氢键连接在一起。

DNA 双螺旋的直径为 2nm，一圈螺旋含 10 个碱基对〔一个螺旋有 20 个核苷酸〕，每一碱基平面的轴向距离为 0.34nm，故每一螺距为 3.4nm，每个碱基的旋转角度为36°。

8、DNA 三级构造〔真核生物 DNA 三级构造是染色质或染色体〕：DNA 双螺旋进一步盘曲形成更加简单的构造，称为三级构造。

超螺旋是 DNA 三级构造的最常见的形式。

9、真核生物的 DNA 形成染色质的包装过程〔4 步〕：①形成核小体：构成染色质的根本单位是核小体。

分子生物标志物名词解释
分子生物标志物是指可以在生物体内观察、测量或分析的特定
分子或分子组合，其存在或表达水平与某种生物学状态、疾病状态
或生理过程相关联。

这些标志物可以是蛋白质、核酸、代谢产物等
生物分子，它们在疾病的发生、发展和治疗过程中起着重要的作用。

从分子生物学的角度来看，标志物可以用于诊断疾病、监测疾
病进展、评估治疗效果以及预测疾病风险。

例如，肿瘤标志物可以
帮助医生诊断肿瘤、监测肿瘤治疗效果，甚至预测肿瘤复发的可能性。

另外，某些特定的基因或蛋白质标志物也可以用于个体化医学，帮助医生选择最合适的治疗方案。

此外，分子生物标志物还可以用于研究生物学过程和疾病机制。

科研人员可以通过分析标志物的表达模式和变化趋势，深入了解疾
病的发生机制，寻找新的治疗靶点，甚至开发新的药物。

总之，分子生物标志物在医学诊断、治疗和疾病研究中起着至
关重要的作用，它们的发现和应用不断推动着生物医学领域的发展
和进步。

分子生物学检验标志物生物标志物（biomarker）可测定并定量的生物学参数，可作为健康和生理状态的评估指标。

生物标志物具重要价值，贯穿疾病的全过程 治疗中发生前 发生后★ 筛选；★ 风险评估； ★ 诊断、分期、分级； ★ 指导治疗的选择； ★ 监控治疗过程；★ 指导修改治疗方案；生物标志物的特征是可以客观的测量和评价，作为正常的生理过程、疾病过程或药物对治疗干预的反应的指标。

生物标志物的分类•0型（疾病自然病史标志物）•1型（药物活性标志物）•2型（替代终点）生物标志物分类（根据来源）：来自生物样本（血样、尿样、组织等）；记录值（体温、血压或心电图等）；影像学检查（超声、CT或MRI等）；生物标志物分类（根据用途）：预测性生物标志物、筛查性生物标志物、诊断性生物标志物、分级性生物标志物、预后性生物标志物、替代终点等。

分子生物标志物（molecular biomarker）是生物标志物的一种类型，是指可以反映机体生理、病理状态的核酸、蛋白质（多肽）、代谢产物等生物分子。

分子生物标志物的分类：核酸分子生物标志物（DNA和RNA）蛋白质生物标志物代谢产物生物标志物DNA生物标志物基于基因突变的分子生物标志物（点突变，插入/缺失突变，动态突变）；基于基因多态性的分子生物标志物（限制性片段长度多态性、小卫星和微卫星多态性、单核苷酸多态性、拷贝数多态性）；基于DNA甲基化修饰的分子生物标志物；基于线粒体DNA的分子生物标志物；RNA生物标志物基于转录产物的分子生物标志物mRNA标志物miRNA标志物lncRNA标志物蛋白质生物标志物免疫组织化学Western blot质谱分析液体活检与肿瘤循环肿瘤细胞（circulating cell）循环DNA（circulating DNA）循环RNA（circulating RNA）外泌体（exosomes）。

外泌体（exosomes）是细胞外囊泡中的较小组分，由细胞内的多泡内体与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外基质中的一种膜性囊泡,是细胞之间信息传递的重要载体。