属植物除具有极高的观赏价值外
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淡黄花百合的组织培养
收稿日期
:20052
052
29。
作者简介
:
李黛(
19622)
,女
,副教授
;主要从事植物生理研究工作。李 黛1
谈 锋2
祝顺琴2
(
11遵义师范学院生物系 贵州遵义
563002;21西南师范大学生命科学学院 重庆
400715)
摘要
:采用正交试验的方法
,在
MS固体培养基上研究不同浓度蔗糖、
62
BA(
62苄基腺嘌呤)及
NAA(α
2奈乙酸)对淡黄花百
合芽增殖和愈伤组织生长的影响
,结果表明
:芽增殖的最佳培养基为
MS+01
5ppm62
BA+01
5ppmNAA+4%蔗糖。愈伤
组织增殖的最适培养基为
MS+01
5ppm62
BA+1ppmNAA+3%蔗糖。
关键词 淡黄花百合 芽增殖 愈伤组织 正交试验
TissueCultureof
LiliumsulphureumBaker
LiDai1
TanFeng2
ZhuShunqin2
(
11
Dept.ofBiology,ZunyiNormalCollege,Zunyi
563002,
21
CollegeofLifeScienceSouthwestChinaNormalUniversity,Chongqing
400715)
Abstract:Usingthemethodoforthogonalexperiment,westudytheinfluenceofdifferentdensityofsucrose,
62
BAandNAAonthebudandcallusgrowthof
LiliumsulphureumBakerinMSsolidmedium1
Theresultshows
thatThebestmediumofbudgrowthisMS+01
5ppm62
BA+01
5ppmNAA+4%sucrose1
Thebestmediumof
callusgrowthisMS+01
5ppm62
BA+1ppmNAA+3%sucrose1
Keywords
LiliumsulphureumBaker
Budgrowth
CallusOrthogonalexperiment
随着社会的进步
,人民生活水平的提高及对健康的重视
,开发未病先防的保健产品成为一种发展趋势。百合
属植物除具有极高的观赏价值外
,还具食用价值
,是我国卫生部审批通过的首批药食两用植物
,不仅临床上有着
广泛的应用
,而且作为加工保健产品的原料也极具开发前景。
20世纪
90年代以来
,我国开发了多种百合饮料和
百合粉[1]
。淡黄花百合(
LiliumsulphureumBaker)作为一个药食两用的野生种
,为多年生宿根草本植物
,产于贵
州省
,是百合开发的重要资源
,由于百合组织培养繁殖与传统繁殖方法相比具有节省用种量、繁殖速度快、减少病
害等优点
,目前对百合组培快繁研究较多[2~7]
,但对药食两用品种淡黄花百合的研究尚未见报道
,本文介绍了对
淡黄花百合组培技术的研究。
1 材料与方法
11
1 材料
淡黄花百合
(
LiliumsulphureumBaker)采自贵州务川县野生林下
,在西南师范大学生命科学院药用植物园地
内盆栽于紫色壤土中。将鳞茎用自来水冲洗干净、分瓣
,在自来水下流水冲洗
30min左右
,于超净工作台上用
75%的酒精浸泡
10s左右
,然后用
01
1%的升汞消毒
15min,无菌水冲洗
5次以上。切去鳞片上部
,留下长约
1cm的中下部
,将其接种在
pH值为
51
8的
MS+01
5mg/L62
BA+1mg/LNAA+3%蔗糖固体培养基中
,每瓶接种
一个切段
,在温度为
25℃
,光照强度为
1200lx,照光时间为
12h/d的条件下培养
,36d后可获得无菌丛生芽和愈
伤组织。将所得的愈伤组织和不定芽分别接种到
MS+01
5mg/L62
BA+01
5mg/LNAA+3%蔗糖的培养基中扩
繁
,即可获得供试材料。
・
72・第
24卷第
9期
2005年
9月 种 子(
Seed)
Vol1
24No1
9
Sep. 2005表
1
L
9(
3)4
正交试验
水平因 子A:62BA(
mg/L)
B:NAA(
mg/L)C:蔗糖(g/L)(空列
)
芽增殖
101
101
12
201
501
53
311
011
04
愈伤组织增殖
101
101
53
201
511
04
311
021
05
芽分化
101
501
02
211
001
13
321
001
54
表
2 芽增殖
L
9(
3)4
试验结果
组号因子
ABC接种芽
总数芽增殖
总数增殖
总数
101
101
12204821
40
201
101
53207831
90
301
111
04204521
25
401
501
13207931
95
501
501
542010651
25
601
511
02206531
25
711
00114207031
50
811
001
52205021
50
911
011
03205721
85
K
1171197163
K
2250234214
K
3177167221表
3 芽增殖试验结果的方差分析
方差来源偏差平方和自由度平均偏差平方和
F值F
0105F
0101
A641
482321
24
71
9233
31
1141
88
B371
542181
77
41
613
C331
412161
71
41
113
e7041
8817341
04
注
:3显著
;33极显著。11
2 方法
采用正交试验筛选不定芽增殖及
愈伤组织增殖和分化的最佳培养基。
所用基本培养基均为
MS培养基
,正交
实验采用
L
9(
3)4
正交表
,62
BA、
NAA、
蔗糖浓度三因素三水平的试验设计见
表
1,D因素作为空列。
将上述供试材料按正交试验方案
进行增殖和分化试验。芽增殖试验是
将扩繁后的不定芽接到芽增殖培养基
中
,每瓶
2株
,每组
20个重复
,培养
40
d;愈伤组织增殖试验是将扩繁后的愈
伤组织接到愈伤组织增殖培养基中
,每
瓶接
01
5cm见方的愈伤组织一块
,每组
10个重复
,培养
40d。培养前后用电子
天平分别称重计算愈伤组织质量
,得出
愈伤组织增重(
mg/d・
g・
FW)。芽分
化试验是将扩繁后的愈伤组织接到芽
分化培养基中
,每瓶接约
01
5cm3
的愈
伤组织
2块
,每组
13个重复
,50d后统
计分化出的芽数。
芽增殖、愈伤组织增殖和分化的培
养条件与鳞片的芽诱导相同。
2 结果与分析
21
1 芽增殖试验结果与分析
淡黄花百合芽增殖正交试验
L
9(
3)4
结果见表
2。对表
2的结果进行
方差分析
,结果见表
3。
表
2、表
3显示
:62
BA浓度的差异
对淡黄花百合芽增殖的效果以
01
5mg/
L为最好
,差异达极显著水平
,NAA和
蔗糖浓度的效果则分别以
01
5mg/L和
4%为最好
,差异均达显著水平。正交
实验中
,第
5组培养基中增殖的芽较
多
,生长较好(见图
1)
,此外
,从
K值看
出
,蔗糖浓度为
3%时效果也较好
,因
此
,淡黄花百合芽增殖的最佳培养基应
为
:MS+01
5mg/L62
BA+01
5
mg/LNAA+3%蔗糖。
・
82・第
24卷第
9期
2005年
9月 种 子(
Seed)
Vol1
24No1
9
Sep.
2005