属植物除具有极高的观赏价值外

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淡黄花百合的组织培养

收稿日期

:20052

052

29。

作者简介

:

李黛(

19622)

,女

,副教授

;主要从事植物生理研究工作。李 黛1

 谈 锋2

 祝顺琴2

(

11遵义师范学院生物系 贵州遵义 

563002;21西南师范大学生命科学学院 重庆 

400715)

摘要

:采用正交试验的方法

,在

MS固体培养基上研究不同浓度蔗糖、

62

BA(

62苄基腺嘌呤)及

NAA(α

2奈乙酸)对淡黄花百

合芽增殖和愈伤组织生长的影响

,结果表明

:芽增殖的最佳培养基为

MS+01

5ppm62

BA+01

5ppmNAA+4%蔗糖。愈伤

组织增殖的最适培养基为

MS+01

5ppm62

BA+1ppmNAA+3%蔗糖。

关键词 淡黄花百合 芽增殖 愈伤组织 正交试验

TissueCultureof

LiliumsulphureumBaker

LiDai1

TanFeng2

ZhuShunqin2

(

11

Dept.ofBiology,ZunyiNormalCollege,Zunyi 

563002,

21

CollegeofLifeScienceSouthwestChinaNormalUniversity,Chongqing 

400715)

Abstract:Usingthemethodoforthogonalexperiment,westudytheinfluenceofdifferentdensityofsucrose,

62

BAandNAAonthebudandcallusgrowthof

LiliumsulphureumBakerinMSsolidmedium1

Theresultshows

thatThebestmediumofbudgrowthisMS+01

5ppm62

BA+01

5ppmNAA+4%sucrose1

Thebestmediumof

callusgrowthisMS+01

5ppm62

BA+1ppmNAA+3%sucrose1

Keywords 

LiliumsulphureumBaker 

Budgrowth 

CallusOrthogonalexperiment

随着社会的进步

,人民生活水平的提高及对健康的重视

,开发未病先防的保健产品成为一种发展趋势。百合

属植物除具有极高的观赏价值外

,还具食用价值

,是我国卫生部审批通过的首批药食两用植物

,不仅临床上有着

广泛的应用

,而且作为加工保健产品的原料也极具开发前景。

20世纪

90年代以来

,我国开发了多种百合饮料和

百合粉[1]

。淡黄花百合(

LiliumsulphureumBaker)作为一个药食两用的野生种

,为多年生宿根草本植物

,产于贵

州省

,是百合开发的重要资源

,由于百合组织培养繁殖与传统繁殖方法相比具有节省用种量、繁殖速度快、减少病

害等优点

,目前对百合组培快繁研究较多[2~7]

,但对药食两用品种淡黄花百合的研究尚未见报道

,本文介绍了对

淡黄花百合组培技术的研究。

1 材料与方法

11

1 材料

淡黄花百合

(

LiliumsulphureumBaker)采自贵州务川县野生林下

,在西南师范大学生命科学院药用植物园地

内盆栽于紫色壤土中。将鳞茎用自来水冲洗干净、分瓣

,在自来水下流水冲洗

30min左右

,于超净工作台上用

75%的酒精浸泡

10s左右

,然后用

01

1%的升汞消毒

15min,无菌水冲洗

5次以上。切去鳞片上部

,留下长约

1cm的中下部

,将其接种在

pH值为

51

8的

MS+01

5mg/L62

BA+1mg/LNAA+3%蔗糖固体培养基中

,每瓶接种

一个切段

,在温度为

25℃

,光照强度为

1200lx,照光时间为

12h/d的条件下培养

,36d后可获得无菌丛生芽和愈

伤组织。将所得的愈伤组织和不定芽分别接种到

MS+01

5mg/L62

BA+01

5mg/LNAA+3%蔗糖的培养基中扩

,即可获得供试材料。

72・第

24卷第

9期

2005年

9月 种 子(

Seed)

Vol1

24No1

9 

Sep. 2005表

1 

L

9(

3)4

正交试验

水平因 子A:62BA(

mg/L)

B:NAA(

mg/L)C:蔗糖(g/L)(空列

)

芽增殖

101

101

12

201

501

53

311

011

04

愈伤组织增殖

101

101

53

201

511

04

311

021

05

芽分化

101

501

02

211

001

13

321

001

54

2 芽增殖

L

9(

3)4

试验结果

组号因子

ABC接种芽

总数芽增殖

总数增殖

总数

101

101

12204821

40

201

101

53207831

90

301

111

04204521

25

401

501

13207931

95

501

501

542010651

25

601

511

02206531

25

711

00114207031

50

811

001

52205021

50

911

011

03205721

85

K

1171197163

K

2250234214

K

3177167221表

3 芽增殖试验结果的方差分析

方差来源偏差平方和自由度平均偏差平方和

F值F

0105F

0101

A641

482321

24

71

9233

31

1141

88

B371

542181

77

41

613

C331

412161

71

41

113

e7041

8817341

04

:3显著

;33极显著。11

2 方法

采用正交试验筛选不定芽增殖及

愈伤组织增殖和分化的最佳培养基。

所用基本培养基均为

MS培养基

,正交

实验采用

L

9(

3)4

正交表

,62

BA、

NAA、

蔗糖浓度三因素三水平的试验设计见

1,D因素作为空列。

将上述供试材料按正交试验方案

进行增殖和分化试验。芽增殖试验是

将扩繁后的不定芽接到芽增殖培养基

,每瓶

2株

,每组

20个重复

,培养

40

d;愈伤组织增殖试验是将扩繁后的愈

伤组织接到愈伤组织增殖培养基中

,每

瓶接

01

5cm见方的愈伤组织一块

,每组

10个重复

,培养

40d。培养前后用电子

天平分别称重计算愈伤组织质量

,得出

愈伤组织增重(

mg/d・

g・

FW)。芽分

化试验是将扩繁后的愈伤组织接到芽

分化培养基中

,每瓶接约

01

5cm3

的愈

伤组织

2块

,每组

13个重复

,50d后统

计分化出的芽数。

芽增殖、愈伤组织增殖和分化的培

养条件与鳞片的芽诱导相同。

2 结果与分析

21

1 芽增殖试验结果与分析

淡黄花百合芽增殖正交试验

L

9(

3)4

结果见表

2。对表

2的结果进行

方差分析

,结果见表

3。

2、表

3显示

:62

BA浓度的差异

对淡黄花百合芽增殖的效果以

01

5mg/

L为最好

,差异达极显著水平

,NAA和

蔗糖浓度的效果则分别以

01

5mg/L和

4%为最好

,差异均达显著水平。正交

实验中

,第

5组培养基中增殖的芽较

,生长较好(见图

1)

,此外

,从

K值看

,蔗糖浓度为

3%时效果也较好

,因

,淡黄花百合芽增殖的最佳培养基应

:MS+01

5mg/L62

BA+01

5

mg/LNAA+3%蔗糖。

82・第

24卷第

9期

2005年

9月 种 子(

Seed)

Vol1

24No1

9 

Sep. 

2005