黄连不同炮制品的质量考察

关键词 黄连 ;炮制品 ;小檗碱 ;质量 中图分类号 : R283 文献标识码 : A 文章编号 : 100124454 (2007) 0820915203
黄连为毛茛科植物黄连 Coptis ch inensis Franch1 三角叶黄连 Coptis deltoidea C1Y1 Cheng et H siao或 云连 Coptis teeta W all 的 干 燥 根 茎 。其 性 寒 , 味 苦〔1〕。黄连有多种炮制方法 ,因此其功能与主治也 有差别 。生黄连具有清热燥湿 ,泻火解毒的功能 ,用 于湿热痞满 、呕吐 、泻痢 、黄疸 、高热神昏 、心火亢盛 、
心烦不寐 、血热吐 、目赤吞酸 、牙痛 、消渴 、痈肿疔疮 ; 酒黄连善消上焦火热 ,用于目赤 、口疮 ;姜黄连清胃 和胃止呕 ,用于寒热互结 ,湿热中阻 ,痞满呕吐 ;萸黄 连舒肝和胃止呕 ,用于肝胃不和 ,呕吐吞酸〔2〕。因 此 ,研究不同黄连炮制品的质量 ,可为临床用药提供 参考 ,同时也为今后制定不同黄连炮制品的质量标 准提供依据 。
3 不同黄连炮制品的鉴别 311 显色反应〔1〕 取不同黄连炮制品 ,打成粗粉 , 分别取约 1 g,加乙醇 10 m l,加热至沸腾 ,放冷 ,滤 过 ,作为供试品 。 31111 反应 1:取供试品 5滴 ,加稀盐酸 1 m l与含 氯石灰少量 ,即显樱红色 。 31112 反应 2:取供试品 5 滴 ,加 5%没食子酸乙 醇溶液 2～3 滴 ,蒸干 ,趁热加硫酸数滴 ,即显深绿 色。
硅胶 G薄层板上 , 以苯 2乙酸乙酯 2异丙醇 2甲醇 2水 (6∶3∶115 ∶115 ∶013)为展开剂 ,置氨蒸气饱和的展 开缸内 , 展 开 , 取 出 , 晾 干 , 置 紫 外 分 析 仪 下 ( 365 nm )检视 。供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的 位置上 ,显相同的一个绿黄色荧光斑点 。
4 高效液相法测定不同黄连炮制品的含量 411 盐酸小檗碱对照品溶液的制备 精密称取在 100℃干燥 5 h的盐酸小檗碱对照品 5150 mg,置 50 m l量瓶中 ,加流动相溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,制成 每 1 m l含 0111 mg的溶液 ,即得 。 412 不同黄连炮制品供试品溶液的制备 将黄连 炮制品 打 成 粗 粉 , 分 别 取 约 011 g, 精 密 称 定 , 置 100m l量瓶中 ,加流动相 80 m l,超时处理 40 m in,放 冷 ,用流动相稀释至刻度 ,摇匀 ,取约 4 m l用 0145 μm 微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,即得 。 413 色谱条件和系统适用性试验〔5〕 色谱柱 : D i2 amonsil C18柱 ( 416 mm ×250 mm , 5 μm ) ; 流动相 : 0103 mol磷酸二氢钾 2乙腈 ( 63 ∶37 ) ,柱温 : 30℃,流 速 110 m l/m in,检测波长 265 nm。取盐酸小檗碱对 照溶液和黄连对照药材溶液及生黄连供试品溶液 10μl注入色谱仪 ,记录色谱图 。结果盐酸小檗碱保 留时间为 619 m in,主峰与杂质峰分离良好 。理论塔 板数 > 9000。 414 线性关系 分别精密取不同体积的对照品溶 液 1, 2, 5, 10, 15, 20μl注入色谱仪中 ,测定峰面积 。 以对照品的质量 ( X)为横坐标 ,峰面积 ( Y)为纵坐 标 ,得 回 归 方 程 : Y = 207514, X = - 1917, R = 019999,说明盐酸小檗碱在 0111 μg～2120 μg范围 内线性关系良好 。
盐酸小檗碱对照品和黄连对照药材购自中国药 品生物制品检定所 。
黄连药材购自四川成都药材站 ,吴茱萸 、生姜购 自华浦中药饮片厂 ,经专家鉴定分别为毛茛科植物
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中药材 Journal of Chinese M edicinal M aterials 第 30卷第 8期 2007年 8月
黄连 Coptis ch inensis Franch1 的干燥根茎 、云香科植 物吴茱萸 Evod ia ru taeca rpa ( Juss1) B enth1 的干燥近 成熟果实和姜科植物姜 Z ing iber officina le Rosc1 的 新鲜根茎 。
参考文献
[ 1 ] 中国植物志编委会编 1中国植物志 1北京 :中国科学出 版社 , 19791
(2006 - 08 - 10收稿 2007 - 03 - 26修回 )
·加工炮制与养护 ·
黄连不同炮制品的质量考察
任世禾 1 ,杨春欣 2 (11上海中医药大学附属上海市中医医院药剂科 ,上海 200071; 21 复旦大学附属中山医院药剂科 ,上海 200032 )
415 稳定性试验 精密吸取生黄连供试品溶液 10 μl,分别于 010、015、110、210、410、610和 810 h注入 色谱仪中 。测得峰面积值 ,实验结果表明供试品溶 液在 8 h内稳定 。RSD 为 0138%。 416 重复性试验 取同一批号的生黄连供试品溶 液 6份 ,精密吸取 10 μl,注入色谱仪中 。测得峰面 积值 ,实验结果表明供试品溶液重复性好 , RSD 为 0138% ( n = 6) 。 417 精密度试验 取盐酸小檗碱对照品溶液 ,连 续进样 6次 ,每次 10μl,测定峰面积值 ,实验结果表 明精密度试验符合要求 , RSD 为 0111% ( n = 6) 。 418 回收率试验 取已知含量的生黄连粗粉约 011 g, 精 密 称 定 , 置 100 m l量 瓶 中 , 精 密 加 入 含 61950 mg的盐酸小檗碱溶液 ,加流动相 80 m l,超声 处理 40分钟 ,放冷 ,用流动相稀释至刻度 ,摇匀 ,取 约 4 m l用 0145 μm 微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,精密 吸取 10μl,注入色谱仪中 。测得峰面积值 ,实验结 果表明回收率试验符合要求 , RSD 为 0198% ( n = 5) 。 419 样品测定 分别精密吸取黄连的不同炮制品 制成的供试品 ,按上述色谱条件进行分析 ,进样 10
结果 5种黄连炮制品对上述反应 1和 2均呈阳 性反应 。 312 薄层层析法鉴别〔1〕 31211 供试品溶液的制备 :取不同黄连炮制品 ,打 成粗粉 ,分别取约 50 mg,加甲醇 5 m l,加热回流 15 m in,滤过 ,滤液补加甲醇使成 5 m l,即得 。 31212 对照品溶液的制备 :取盐酸小檗碱对照品 , 加甲醇制成每 1 m l含 015 mg的溶液 。 31213 对照药材溶液的制备 :取黄连对照药材约 50 mg,加甲醇 5 m l,加热回流 15 m in,滤过 ,滤液补 加甲醇使成 5 m l,即得 。 31214 薄层层析方法 :取不同黄连炮制品的供试 品溶液与对照品溶液及对照药材溶液分别点于同一
81472 71119 81886 71775 81018
以上所测 5种不同黄连炮制品中盐酸小檗碱的 含量均高于 2005版中国药典一部中规定的不低于 316%的标准 。 5 讨论 511 采用高效液相法测定不同炮制法加工而成的 黄连中小檗碱的含量 ,虽然其小檗碱的含量均高于 药典标准 ,符合国家标准要求 ,但不同炮制品中小檗 碱的含量是有差异的 。其中酒黄连含量最高 ,与生 黄连比较 ,因经过加酒喷洒 ,有利于小檗碱的溶出 。 炒黄连含量低 ,因经过清炒后 ,水分减少 ,使小檗碱 溶出也减少 。姜黄连和吴茱萸黄连 ,因加入姜汁和 吴茱萸汁 ,可能有成分与小檗碱相互结合 ,降低了溶
生黄连 炒黄连 酒黄连 姜黄连 吴茱萸黄连
173518 174114 173816 145617 145819 145718 182219 182614 182417 159013 158910 158917 164413 164414 164414
84172 71119 89180 77154 80118
小檗碱 (Berberine)是黄连中的主要化学成分 , 现常作为控制黄连质量的成分之一 。本文采用薄层
层析和高效液相色谱法 ,对不同黄连炮制品的质量 进行了考察 。 1 仪器与药品
Agilent 1100高效液相色谱系统 (Agilent公司 , 美国 )四元泵 ,二极管阵列检测器 ,自动进样器 , Agi2 lent色谱工作站 。超声波清洗器 (必能信超声上海 有限 公 司 ) , FA2004 型 电 子 天 平 (上 海 天 平 仪 器 厂 ) , 0145μm 微孔滤膜 (上海半岛实业有限公司净 化器材厂 ) 。 ZF2I型三用紫外分析仪 (上海顾村电 光仪器厂 ) ;硅胶 G薄层层析 (M erckw 公司 ) ,乙腈 (色谱纯 ) ,其余试剂为分析 ,纯水为重蒸馏水 。
摘要 目的 :对黄连不同的炮制品进行质量考察 。方法 :将黄连分别炮制成生黄连 、炒黄连 、酒黄连 、姜黄连 、 吴茱萸黄连 ,采用显色反应 ,薄层层析鉴别和高效液相法测定不同黄连炮制品中小檗碱的含量 。结果 :各种黄连炮 制品的显色反应均呈阳性 ,薄层层析鉴别斑点也基本相同 ,小檗碱的含量分别是 :生黄连 81472%、炒黄连 71119%、 酒黄连 81886%、姜黄连 71775%和吴茱萸黄连 81018%。结论 :经不同方法炮制的黄连 ,其主要成分小壁碱的含量 发生变化 ,但均符合 2005版中国药典一部中规定的不低于 316%的标准 。
广泛的应用价值 。实验结果表明白花泡桐不同药用 部位的有效成分熊果酸含量差别较大 ,其中叶的含 量最高 , 达到了 1117%。白花泡桐主要分布于安 徽 、浙江 、福建 、台湾 、江西 、湖南 、湖北 、四川 、云南 、 贵州 、广东 、广西 ,野生或栽培 ,在河北 、河南 、陕西等 地也有引种 ,为开发利用提供了丰富的药材资源 。
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Hale Waihona Puke ·915·219 样品含量测定 同一产地的白花泡桐叶 、果 壳 、花 、种子 ,分别平行三次取样 ,计算熊果酸含量结 果见表 1。 3 讨论 311 熊果酸为非极性的五环三萜酸 ,根据这一特 性 ,选择甲醇 、乙醇 、氯仿作为提取溶液 ,比较了 3种 提取液和不同提取时间 (015 h、110 h、115 h)提取效 果 ,结果甲醇提取率最高 。故选用甲醇为提取溶液 , 超声 (功率 250 W ,频率 70 KHz)提取 110 h。 312 本实验建立的 RP2HPLC 方法简单 、准确 、灵 敏度高 、重现性好 ,可用于含熊果酸中药材及其制剂 的质量控制 。 313 熊果酸因其众多的药理作用 ,在临床上具有
2 不同黄连炮制品的制备 211 生黄连 将原药除去泥沙等杂质 ,快洗 ,取出 (质硬者 中途 淋水 ) , 润 透 , 切 极 薄 片 ( 015 mm 以 下 ) ,干燥〔3〕。 212 炒黄连 (清炒 ) 取净药材置热锅中 ,用文火 炒至棕黄色 ,微具焦斑 ,筛去灰屑 ,即得〔4〕。 213 酒黄连 (炒 ) 生黄连 100 kg,酒 1215 kg。取 净药材喷洒酒 ,拌匀 ,不时翻动 ,使之吸尽 ,用文火炒 至干 ,取出 ,即得〔4〕。 214 姜黄连 (炒 ) 生黄连 100 kg,生姜 1215 kg。 先将生姜捣烂 ,压榨取汁 ,炒法与酒制相同〔4〕。 215 吴茱萸黄连 (炒 ) 生黄连 100 kg,制吴茱萸 1215 kg,将吴茱萸水煎 015 h,去渣取汁 ,炒法与酒 制相同〔4〕。
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μl,测得峰面积值 ,通过回归方程计算盐酸小檗碱的 含量 。结果见表 1。
表 1 不同黄连炮制品中盐酸小檗碱的含量
饮片名称
测得峰面积
平均峰 测得量 含量 面积 (mg/ g) ( % )