西洋参中人参皂苷类HPLC测定及其指纹图谱研究_陈军辉

2005, Vol. 26, No. 11食品科学※分析检验200

３．１定性方面

固相微萃取纤维的吸附方式对待测物的物理、化学

性质不造成破坏，顶空分析可以直接得到样品所释放出

的气体的化学组成，因此顶空分析法在气味分析方面有

独特的意义和价值［５］，因此它不仅可用于已知产品的挥

发性、半挥发性成分的定性鉴定研究，更重要的是可

以用于从自然或加工环境中寻找未知的、新的香料来

源，如从国内外某些著名的地方风味小吃挥发性成分

中、从某种自然环境或原料（如某些熏香草类、香木类

等）挥发性成分中吸附、辨别和开发出新的香料品种。

在此类应用中，由于对未知待测物性质不了解，须根

据预计沸点、挥发度的不同采用多种萃取温度，根据

预计极性的不同采用合适的萃取纤维、色谱柱和电解

质，经过多次试验来得到最佳的检测方法。

３．２定量方面

在挥发性、半挥发性成分的ＳＰＭＥ定量检测中，若

待测成分需要准确定量或待测成分是复杂的体系，特别

是对于那些低、高沸点成分均有，保留时间范围较宽

的体系，应该采取多个萃取温度和多种内标物进行分段

操作。采用单一萃取温度、单一内标物来检测复杂体

系中待测成分的含量是不够完整的。根据预备试验总离子流图（或色谱图）中各成分的保留时间情况，用不同的

萃取温度萃取不同挥发性、保留时间的成分。并在每

次萃取时使用与该次挥发性成分保留时间接近、性质相

似的内标物，使得每阶段的含量都最接近真实。

参考文献：

［１］Ｐｏｓｅｎ　Ｈ，　Ｚｕｐａｎｉｃ－Ｋｒａｊｌ　Ｌ．　Ｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ　ｍｉｃｒｏ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　［Ｊ］．

Ｔｒｅｎｄｓ　ａｎａｌ　Ｃｈｅｍ，　１９９９，１８：　２７２－２８２．

［２］Ｍａｒｉａ　Ｐｉａ　Ｇｉａｎｅｌｌｉ，　Ｍｏｎｉｃａ　Ｆｌｏｒｅｓ，　Ｆｉｄｅｌ　Ｔｏｌｄｒａ．

Ｏｐｔｉｍｉｓｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　（ＳＰＭＥ）　ｆｏｒ

ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ｄｒｙ－ｃｕｒｅｄ　ｈａｍ　［Ｊ］．　Ｊ

Ｓｃｉ　Ｆｏｏｄ　Ａｇｒｉｃ，　２００２，　８２：　１７０３－１７０９．

［３］帅琴，　杨薇，　郑岳君，　等．　固相微萃取与气相色谱－质谱联

用测定有机磷杀虫剂的残留量［Ｊ］．　色谱，　２００３，　２１（３）：２７３－

２７６．

［４］周菊珍，　周培庆．　固相微萃取实验条件的优化［Ｊ］．　华东师

范大学学报（自然科学版），　２０００，　（１）：　１０３－１０６．

［５］Ｐｈｉｌｉｐ　Ｍａｒｒｉｏｔｔ，　Ｒｏｂｅｒｔ　Ｓｈｅｌｌｉｅ，　Ｃｈａｒｌｅｓ　Ｃｏｒｎｗｅｌｌ．　Ｇａｓ　Ｃｈｒｏ－

ｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　ｆｏｒ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　［Ｊ］．　Ｊ

Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ　Ａ，　２００１，　９３４：１－２２．西洋参中人参皂苷类ＨＰＬＣ测定

及其指纹图谱研究

陈军辉，谢明勇，王慧琴，彭日煌，王远兴

（南昌大学 食品科学教育部重点实验室，江西　南昌 ３３００４７）

摘 要：对１２种西洋参中的７种人参皂苷进行ＨＰＬＣ同时测定，建立西洋参中人参皂苷含量测定的现代分析方法，

并建立起西洋参人参皂苷类的色谱指纹图谱。ＨＰＬＣ测定条件：梯度洗脱，Ａｌｌｔｉｍａ　Ｃ１８色谱柱，乙腈－０．０５％磷酸

水溶液为流动相，流速为１．２ｍｌ／ｍｉｎ，柱温为　３５℃，紫外检测器，检测波长２０３ｎｍ。在选定的最佳色谱条件下

每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性，７种人参皂苷的加标回收率为９４．１％～９７．９％。对色谱指纹

图谱进行相似度和聚类分析计算，得到了令人满意的结果。该法为西洋参样品的质量和品种鉴定提供了较全面的信

息，并为ＨＰＬＣ　应用于样品复杂组分的分析和鉴别开拓了新的领域。

关键词：高效液相色谱法；西洋参；人参皂苷；指纹图谱

Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．　Ｌ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ａｎｄ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｔｈｅｉｒ　Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　Ａｎａｌｙｓｉｓ

ＣＨＥＮ　Ｊｕｎ－ｈｕｉ，ＸＩＥ　Ｍｉｎｇ－ｙｏｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｈｕｉ－ｑｉｎ，ＰＥＮＧ　Ｒｉ－ｈｕａｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｙｕａｎ－ｘｉｎｇ

收稿日期：２００４－１１－１１作者简介：陈军辉（１９７８－），男，在读硕士，主要从事食品化学与天然活性成分的分析和利用。201※分析检验食品科学2005, Vol. 26, No. 11

（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，　Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　Ｎａｎｃｈａｎｇ ３３００４７，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ　：Ａ　ｍｏｄｅｒｎ　ＨＰＬＣ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｖｅｎ　ｍａｊｏｒ　ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ　１２　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ

Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．　Ｌ．　Ｔｈｅｉｒ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．　Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ

ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｂｙ　ｌｉｎｅａｒ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｕｎｄｅｒ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ：　Ａｌｌｔｉｍａ　Ｃ１８　（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，　５μｍ）　ｃｏｌｕｍｎ，　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．０５％

ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｓ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ，　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ＵＶ　ａｔ　２０３ｎｍ，　ｆｌｏｗ－ｒａｔｅ　ｏｆ　１．２ｍｌ／ｍｉｎ，　ｃｏｌｕｍｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　３５

℃．　Ｔｈｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ，　ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｖｅｎ

ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．　Ｌ　ｗｉｔｈ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　９４．１％～９７．９％．　Ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌ　ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ

ａｎａｌｙｓｉｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ　ａｎｄ

ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．Ｌ　ｓａｍｐｌｅｓ．　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｃｏｕｌｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｕｓｅｆｕｌ　ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ

Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ＨＰＬＣ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅｓ．

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．　Ｌ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ

中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２－６６３０（２００５）１１－０２００－０７

西洋参（Ｐａｎａｘ　ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ．　Ｌ）又名西洋人参、洋

参、花旗参、广东人参，为五加科植物。西洋参主

产于美国、加拿大及法国，近年我国亦有栽培。西洋

参味苦，性凉，入心、肺、肾经，功能以补益为主，

可滋阴降火、益气生津［１］。皂苷类成分是西洋参中主要

活性物质，其化学研究比较全面和深入。迄今为止，

中外学者已自原产和引种西洋参根中分离鉴定出皂苷类

成分１９种以上［２］。综合文献报道发现［３～５］，人参皂苷

Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｇ１、Ｒｇ２、Ｒｅ为西洋参中

含量较高的７种皂苷，其质量分数占总皂苷的９０％以

上。因此，西洋参中最主要的７种人参皂苷的含量成为

评价西洋参及其制剂的重要指标。国内外对西洋参皂苷

的测定基本同人参皂苷，多采用比色法、薄层光密度

法、薄层扫描法、高效液相色谱法进行［６］。文献中针

对人参皂苷的ＨＰＬＣ分析工作已有报道。陈薇［５］等采用

高效液相色谱法分离测定人参中的６种人参皂苷，许传

莲［７］等采用ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定西洋参茎叶中６种人参皂苷，

徐智秀［８］等采用高效液相色谱－质谱－质谱法分析人参皂

苷。目前，中药指纹图谱技术已成为国内外公认的鉴

别中药品种和评价中药质量的最有效手段，中药指纹图

谱的整体性和模糊性正好符合中药质控的要求，较之单

一成分或指标成分的质控方法，更具有科学性和全面性

［９，１０］。贾晓斌［１１，１２］等报道了人参中皂苷类成分的ＨＰＬＣ指

纹谱研究和复方人参注射液的ＨＰＬＣ指纹图谱研究；翟

为民［１３］等报道了人参、西洋参及三七参指纹图谱的鉴

别。但迄今为止，西洋参中人参皂苷类指纹图谱的研

究还未见报道。本文建立了一种同步测定西洋参根中７

种人参皂苷含量的反相高效液相色谱法，为西洋参根皂

苷类含量的测定提供了一种快速分离测定新方法，并建

立起１２种西洋参样品的液相色谱指纹图谱。从而可为进

一步研究西洋参产地、气候、收获期与各种皂苷含量之间的关系奠定方法学基础，也可为西洋参样品的质量

和品种鉴定提供较全面的信息和检测标准。

１材料与方法

１．１实验仪器试剂和样品

仪器：　ＦＡ１１０４电子天平 上海精天电子仪器厂；

电子恒温不锈钢水浴锅 上海宏兴机械仪器实业制造公

司；旋转蒸发器 上海荣生有限公司；ＳＹ３２００超声波

清洗器 上海声源超声波仪器设备有限公司；高效液相

色谱仪 美国Ｗａｔｅｒｓ公司；５１５二元高压梯度系统，

２４８７紫外可变检测器，ＰＣＭ泵控制器，Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ３２

色谱工作软件，柱温箱，手动进样器（２０μｌ定量环）。

试剂与药品：人参皂苷对照品Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｃ、

Ｒｄ、Ｒｇ１、Ｒｇ２、Ｒｅ吉林大学化学学院（含量测定用）；

乙腈：ＨＰＬＣ级试剂美国Ｆｉｓｈｅｒ公司；甲醇：ＨＰＬＣ级

试剂上海陆都化学试剂厂；水为重蒸水，正丁醇：分

析纯上海豪申化学试剂有限公司；ＨＰＬＣ用所有试剂均

经过０．４５μｍ微孔滤膜过滤及超声脱气处理。

样品：西洋参样品见表１。

编号样品采集时间编号样品采集时间１新加坡１２００２－１０－１７７吉林洋参４２００３－０４－１０２吉林洋参７２００２－１０－１７８吉林洋参５２００３－０４－１０３加拿大２００２－１２－０６９吉林洋参６２００３－０４－１０４吉林洋参１２００３－０４－１０１０广州洋参２００２－１２－０６５吉林洋参２２００３－０４－１０１１新加坡２２００２－１０－１７６吉林洋参３２００３－０４－１０１２吉林洋参８２００２－１０－１７表１ 西洋参样品来源Table 1 Samples used in this work

１．２色谱条件