高效液相色谱指纹图谱的梯度条件优化
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生长在同一地段而致误采。
其二是三脉叶马兰生长范围较广而且量多,某些药农见利忘义有意伪充。
4.2药材切成饮片后,形状上较难分辩,但二者的头状花序较易区分,刘寄奴的呈椭圆形,白色似米粒,小花全为管状花,其叶脉羽状,无离基三出脉。
药材具芳香气,味淡。
而三脉叶马兰头状花序呈半球形,较大,小花有舌状花和管状花,其叶有离基三出脉和羽状脉。
气微,苦、辛。
4.3二者的显微特征差别较大,刘寄奴药材表面具“T”字形非腺毛,腺毛顶面观呈鞋底形;叶主脉底部钝圆略呈圆锥形,上表面稍突起,且中央微凹。
叶图6三脉叶马兰的粉末显微特征1.非腺毛2.草酸钙针晶3.方晶4.腺毛5.簇晶6.花粉粒7.叶下表皮及气孔肉组织与茎髓薄壁细胞中有草酸钙簇晶散在。
三脉叶马蓝无“T”字形非腺毛,叶主脉上下面突起明显,底部钝圆呈半圆形。
髓部薄壁细胞内含多数短小的草酸钙针晶。
二者花粉粒的形态和大小,表面特征差异也较明显。
参1处理20min,过滤,取滤液加95%乙醇稀释至适量浓度。
于岛律UV2450型紫外分光度计上,在200—400nm波长范围内测定其紫外光谱。
结果:刘寄奴考文献在330nm波长处有一最大吸收峰,在300nm波长处有肩峰;而三脉叶马兰仅在329nm波长处有一最大吸收峰。
44.1中国医学科学院药用植物资源开发研究所,中国医学科学院药物研究所等.中药志.第四册.jE京:人民卫生出版,1988:43讨论刘寄奴的混杂原因可能有二:其一是二者均2李时珍.本草纲目(校点本,上册).北京人民出版社,199l:959来源于菊科植物,在开花之前茎叶的形状和色泽均有相似之处,其生长环境与习性相似,且二者常混杂(2003一11—26收稿)紫菀药材的高效液相色谱指纹图谱与定量分析周军辉1伍蔚萍1谢子民2孙文基h(1.西北大学陕西省生物医药重点实验室,西安710069;2.西安市药品检验所,西安710068)摘要目的:建立紫菀药材的反相液相色谱定性和定量鉴别分析方法。
高效液相色谱法在中药指纹图谱中的应用现状及分析【关键词】高效液相色谱法摘要:综述了高效液相色谱(HPLC)法指纹图谱在中药质量操纵方面的应用,并通过供试品的制备、标准品的选择、结果分析方式来论述中药指纹图谱的应用现状,指出高效液相色谱法应用于中药指纹图谱中现有不足的地方和以后的进展方向。
关键词:高效液相色谱;中药指纹图谱Application and Analysis of Fingerprint in Traditional Chinese Medicine by HPLCAbstract:This paper summarized the application of fingerprint of traditional Chinese medicine by HPLC to the quality also reviewed the actuality of fingerprint in traditional Chinese medicine through the preparation for sample,the choice for standard sample,and the method of result pointed out the main problems at present and the prospective future in application of fingerprint of traditional Chinese medicine by HPLC.Key words:HPLC; Fingerprint of Traditional Chinese medicine当前,中药指纹图谱技术在国内外已成为一种进展趋势。
第一是美国食物与药品治理局(FDA)许诺草药保健品申报资料能够提供色谱指纹图。
世界卫生组织(WHO)在1996年草药评判指导原那么中也规定:若是草药的活性成份不明,能够提供指纹图谱以证明产品质量的一致。
·论著·基金项目:国家中医药管理局2015年度中医药行业科研专项(201507002)作者单位:100102摇北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室[姬蕾(硕士研究生)、杨冉冉、乔艺涵(硕士研究生)、索亚然(硕士研究生)、梁文举(硕士研究生)、倪璐(硕士研究生)、赵霞(硕士研究生)、赵崇军(博士研究生)、林瑞超];中国中医科学院中药研究所(邹迪新)作者简介:姬蕾(1993-),女,2016级在读硕士研究生。
研究方向:中药品质评价研究。
E鄄mail:642981026@通信作者:林瑞超(1954-),博士,教授,研究员,博士生导师。
研究方向:中药品质评价研究。
E鄄mail:linrcha307@;邹迪新(1983-),女,讲师,博士。
研究方向:中药复方药效物质基础及作用机制研究。
E鄄mail:zoudixin@决明子超高效液相色谱指纹图谱研究姬蕾摇杨冉冉摇乔艺涵摇索亚然摇梁文举摇倪璐摇赵霞摇赵崇军摇林瑞超摇邹迪新揖摘要铱摇目的摇运用超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)技术建立一种快速、高效、全面评价中药决明子质量的指纹图谱方法。
方法摇流动相选用乙腈-0.1%磷酸水溶液对样品进行梯度洗脱,流速设置为0.3mL /min,检测波长为290nm,柱温为30益,进样量为3滋L。
色谱柱采用沃特世公司BEH C 18(2郾1伊100mm 1.7滋m)色谱柱,共计分析了28批不同地区中药决明子的UPLC。
结果摇初步建立了决明子UPLC 指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析,共确定了40个共有峰,通过与标准物质保留时间的对比进行分析,初步确认了其中的10个化合物。
结论摇本实验方法为中药决明子提供了一种操作简便、快速、重复性好的质量评价方法,可为中药决明子的质量控制提供一定的参考。
揖关键词铱摇决明子;摇指纹图谱;摇质量评价;摇超高效液相色谱技术揖中图分类号铱摇R284摇揖文献标识码铱摇A摇doi:10.3969/j.issn.1674鄄1749.2019.05.008Study on UPLC fingerprint of Semen Cassiae 摇JI Lei ,YANG Ranran ,QIAO Yihan ,et al.摇College of Pharmacy ,Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100102,ChinaCorresponding author :LIN Ruichao ,E鄄mail :linrcha307@ ;ZOU Dixin ,E鄄mail :zoudixin@揖Abstract 铱摇Objective 摇To establish a rapid,efficient and comprehensive method for the evaluationof the quality of Semen Cassiae ,a kind of Chinese medicne,by UPLC fingerprint.Methods 摇The mobile phase was eluted with acetonitrile -0.1%phosphoric acid aqueous solution.The flow rate is set to 0.3mL·min -1,the detection wavelength is set to 290nm,and the column temperature is set to 30毅C.The injection volume is set to 3滋L.And it was analyzed by Waters BEH C18(2.1伊100mm 1.7滋m)column.The UPLC fingerprints of 28batches of TCM Semen Cassiae in different regions were analyzed.Results 摇UPLC fingerprints of Semen Cassiae were preliminarily established,and the chromatographicfingerprint similarity evaluation system of traditional Chinese medicine was used to analyze.A total of40common peaks were identified.The comparison with the retention time of standard materials was carried out,and 10of them were initially confirmed.Conclusion 摇This experimental method provides a simple,rapid and reproducible quality evaluation method for Semen Cassia ,providing a reference for the quality control of Semen Cassia .揖Key words 铱摇Semen Cassia ;摇Fingerprint;摇Quality evaluation;摇UPLC摇摇中药决明子,其性苦,甘,归大肠,肝经[1]。
制备型高效液相色谱法及其在中药研究中的应用一、本文概述制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography, Prep-HPLC)是一种重要的色谱分离技术,以其高效、快速、自动化的特点在多个领域,特别是中药研究中发挥着越来越重要的作用。
本文旨在全面介绍制备型高效液相色谱法的基本原理、技术特点以及其在中药研究中的应用情况。
文章将概述制备型高效液相色谱法的基本原理和操作流程,包括色谱柱的选择、流动相的优化、样品的制备和分离等关键环节。
文章将重点讨论制备型高效液相色谱法在中药研究中的应用,包括中药成分的分离纯化、质量控制、药物代谢动力学研究等方面。
文章还将对制备型高效液相色谱法在未来的发展趋势和挑战进行展望,以期为相关领域的科研人员提供有益的参考和启示。
二、制备型高效液相色谱法的基本原理与技术制备型高效液相色谱法(Preparative High Performance Liquid Chromatography,Prep-HPLC)是高效液相色谱法(HPLC)的一个重要分支,它主要用于大规模分离、纯化和制备样品。
其基本原理基于混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡,通过高压泵将流动相推动,使待测样品在固定相和流动相之间不断进行吸附、解吸、再吸附的分配过程,从而实现各组分的有效分离。
制备型高效液相色谱法通常使用更粗的色谱柱和更高的流速,以实现更大规模的分离和制备。
与分析型高效液相色谱法相比,制备型高效液相色谱法更注重样品的纯度和回收率,而不仅仅是各组分的定性和定量分析。
在制备型高效液相色谱法中,选择合适的固定相和流动相至关重要。
固定相的选择应根据样品的性质和目标组分的特性来确定,常用的固定相包括硅胶、氧化铝、聚合物等。
流动相的选择则要考虑其与固定相的相容性、对目标组分的洗脱能力以及分离效果等因素。
制备型高效液相色谱法还涉及到柱层析、梯度洗脱、循环洗脱等技术。
高效液相色谱-紫外光谱法建立3,5-二硝基苯甲酸工业品的色谱指纹图谱韦玉娜;李超;练鸿振【摘要】建立了3,5-二硝基苯甲酸工业品的高效液相色谱-紫外光谱的指纹图谱.首先,在Kromasil C18色谱柱上,以水-甲醇-0.10%高氯酸水溶液(体积比为25∶45∶30)为流动相,流动相流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,对3,5-二硝基苯甲酸及其相关杂质进行了分离分析.在此基础上,通过运行大量样品,筛选共有组分,绘制具有共同特性的指纹图谱.根据待测样品色谱峰的保留时间、紫外光谱及其色谱峰面积,与色谱指纹图谱进行分析对比,建立了控制3,5-二硝基苯甲酸产品质量的新方法.该方法在产品含量测定方面结果准确、可靠,在产品质量控制方面直观、方便.阐述了"整体性"和"明确性"是精细化工中间体指纹图谱的基本属性和发展方向.【期刊名称】《岩矿测试》【年(卷),期】2007(026)002【总页数】6页(P81-86)【关键词】色谱指纹图谱;3,5-二硝基苯甲酸;高效液相色谱-紫外光谱法【作者】韦玉娜;李超;练鸿振【作者单位】教育部生命分析化学重点实验室,南京大学化学化工学院,南京大学现代分析中心,江苏,南京,210093 ;教育部生命分析化学重点实验室,南京大学化学化工学院,南京大学现代分析中心,江苏,南京,210093 ;教育部生命分析化学重点实验室,南京大学化学化工学院,南京大学现代分析中心,江苏,南京,210093【正文语种】中文【中图分类】O657.72;O625.5近年来,中国已经成为世界精细化工中间体的主要出口国之一,但由于精细化工研究开发创新能力较弱,生产工艺水平较低,产品缺乏强劲的国际竞争力。
造成这种现状重要原因之一是精细化工产品的分析测试方法比较落后,质量标准体系不够完善,导致生产控制的盲目性。
因此,在现阶段解决我国精细化工行业研发和生产问题的瓶颈之一是提高分析测试水平[1]。
清血解毒合剂的高效液相色谱指纹图谱研究熊鑫,黄传奇,程璐(武汉市第一医院药学部,武汉 430022)摘 要 目的 建立清血解毒合剂的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为其科学的评价和质量控制提供实验依据。
方法 通过高效液相色谱方法,采用伊利特C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈 0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长230nm,流速1.0mL·min-1,进样量10μL,分析时间90min,并采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2010版)软件对10批样品进行图谱处理。
结果 以26号峰黄芩苷为参照物,共标出36个共有峰,色谱峰分离度良好,并指认7个色谱峰,分别为没食子酸、原儿茶醛、儿茶素、咖啡酸、芍药苷、甘草苷和黄芩苷。
结论 该实验建立的指纹图谱方法准确,简单,稳定易操作,且专属性强,可作为清血解毒合剂质量控制的有效方法。
关键词 清血解毒合剂;黄芩苷;色谱法,高效液相;指纹图谱中图分类号 R286;R927.2 文献标识码 A 文章编号 1004-0781(2020)10-1394-06DOI 10.3870/j.issn.1004 0781.2020.10.014 开放科学(资源服务)标识码(OSID)StudyonHPLCFingerprintofQingxueJieduMixtureXIONGXin,HUANGChuanqi,CHENGLu(DepartmentofPharmacy,WuhanNo.1Hospital,Wuhan430022,China)ABSTRACT Objective ToestablishahighperformanceliquidchromatographicfingerprintanalysismethodforQingxuejiedumixturetoprovideexperimentalbasisforitsscientificevaluationandqualitycontrol. Methods HighperformanceliquidchromatographywasperformedonanEliteC18column(4.6mm×250mm,5μm),andthemobilephasewasacetonitrile 0.05%phosphoricacidforthegradientelutionwithcolumntemperatureof30℃.Thedetectionwavelengthwassetat230nm,andflowratewas1.0mL·min-1.Injectionvolumewas10μLandtheanalysistimewas90minutes.“Chinesemedicinechromatographicfingerprintsimilarityevaluationsystem”(2010version)softwareissuedbytheNationalPharmacopoeiaCommissionwasusedfortheprocessingof10batchesofsamples. Results Withbaicalin’speak26asareference,atotalof36commonpeakswereidentifiedwithgoodresolution.Thechromatographicpeakswerewellseparated,andsevenchromatographicpeakswereidentifiedasgallicacid,protocatechuicaldehyde,catechin,caffeicacid,paeoniflorin,glycyrrhizin,andbaicalin. Conclusion Thefingerprintmethodestablishedinthisexperimentwasaccurate,simple,stable,andeasytooperate,andhadstrongspecificity.ItcanbeusedasaneffectivemethodforqualitycontrolofQingxueJiedumixture.KEYWORDS QingxueJiedumixture;Baicalin;Chromatography,highperformanceliquid;Fingerprint 清血解毒合剂(制剂批准文号:鄂药制字Z20180184)是武汉市第一医院的自制制剂,具有凉血解毒的功效,用于流火丹毒、急性皮炎、皮疹。
三七药材高效液相色谱指纹图谱的研究张迅杰;赫军;柳芳;刘志燕;梁莹莹;张淑君;张相林【摘要】目的:建立三七药材的色谱指纹图谱.方法:采用高效液相色谱法分析,色谱柱为Kromasil-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.9ml/min,分析时间75 min,检测波长203 nm.测定对照药材和10个批次三七药材的色谱图,确立标准图谱.结果:将10个批次三七药材图谱和三七对照药材图谱进行对比,标定了39个共有峰,指认了其中6个主要色谱峰,10个批次三七药材的相似度在0.755~0.963之间.结论:该分析方法的稳定性、精密度、重现性较好,为三七药材的质量控制提供了依据.%OBJECTIVE:To establish the chromatograph fingerprint of Panax notoginseng.METHODS:HPLCanalysis was carried out on a Kromasil-C18 column(250mm×4.6mm,5μm)with the mobile phase consisting of acetonitrile-0.1%phosphoric acidin gradient mode,and the column temperature was kept at 25℃ and flow rate was 0.9 ml/min,the analytic time was 75 min with detection wavelength of 203 nm.10 batches of samples and control medicine herbs were determined to establish the standard HPLC fingerprint of Panaxnotoginseng.RESULTS:After comparing 10 batches of samples with control medicine herbs fingerprints,there were 39 common peaks in the fingerprints of 10 samples,six of which were identified.The similarity of 10 batches of Panax notoginseng samples were 0.755-0.963.CONCLUSIONS:The method was in good reproducibility,precision and stability.The present research provides new evidence for the quality control of Panax notoginseng.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2017(017)006【总页数】3页(P725-727)【关键词】三七;高效液相色谱法;指纹图谱【作者】张迅杰;赫军;柳芳;刘志燕;梁莹莹;张淑君;张相林【作者单位】中日友好医院药学部,北京100029;北京中医药大学中药学院,北京100029;中日友好医院药学部,北京100029;中日友好医院药学部,北京100029;中日友好医院药学部,北京100029;北京中医药大学中药学院,北京 100029;中日友好医院药学部,北京100029;中日友好医院药学部,北京100029;中日友好医院药学部,北京100029【正文语种】中文【中图分类】R927三七是五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根,是我国名贵的传统中药,主产于云南、广西等地。
元通合剂的高效液相色谱指纹图谱熊鑫;程璐;黄传奇;饶俊珍;张红【摘要】目的建立元通合剂的高效液相(HPLC)指纹图谱,为其质量控制提供参考依据.方法采用WondaSilC18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10 μL,分析时间70 min,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2010版)软件处理HPLC图谱.结果建立了元通合剂的HPLC指纹图谱,以黄芩苷为参照物,标出10个共有峰,分离度良好,10批元通合剂指纹图谱相似度均>0.9.结论该方法操作简便,重复性好,所建立的HPLC指纹图谱专属性强,可用于元通合剂质量的综合评价.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2018(037)009【总页数】4页(P1115-1118)【关键词】元通合剂;黄芩苷;色谱法,高效液相;指纹图谱【作者】熊鑫;程璐;黄传奇;饶俊珍;张红【作者单位】武汉市第一医院药学部,武汉430022;武汉市第一医院药学部,武汉430022;武汉市第一医院药学部,武汉430022;武汉市第一医院药学部,武汉430022;武汉市第一医院药学部,武汉430022【正文语种】中文【中图分类】R286;R927.11元通合剂由龙胆、黄芩、大青叶、木通等15味药材组成,是武汉市第一医院自制制剂,具有清热利湿、行气止痛的功效,用于带状疱疹、单纯性疱疹、血管炎及爬虫皮炎等疼痛性皮肤病。
临床使用多年,疗效确切。
本制剂含多味中药,化学成分复杂,且还受各味药材的产地、用药部位和制备工艺的影响,仅以当归对照药材和栀子苷对照品的薄层鉴别作为质量控制的方法,对于中药复方制剂而言,难以全面准确地反映该制剂的质量。
中药指纹图谱反映复杂成分的中药及其制剂内在质量的均一性和稳定性,是中药理论研究与新药开发的研究模式和体系,也是目前国内外广泛接受的一种中药质量控制模式和技术[1-9]。
半枝莲高效液相色谱指纹图谱研究赵伟伟;王颢颐;任燕【摘要】采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-水(0.2%磷酸,B)为流动相,梯度洗脱(0~15 min,5%~15%A;15~85min,15%~35%A),流速1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温25℃,进样量10μL,建立了不同产地半枝莲药材的指纹图谱.其精密度、重现性以及稳定性良好.以野黄芩苷作为对照峰,标定了13个特征峰为其共有峰.采用中药色谱指纹图谱相似度软件进行测评,8份药材的相似度介于0.953~0.768.主成分分析获得2个主要成分,累积贡献率可达80.347%.应用指纹图谱并结合主成分分析,能够准确的评价半枝莲药材的质量.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2017(045)022【总页数】3页(P90-92)【关键词】半枝莲;高效液相色谱;指纹图谱;主成分分析【作者】赵伟伟;王颢颐;任燕【作者单位】滨州医学院, 山东烟台 264003;烟台一中, 山东烟台 264000;滨州医学院, 山东烟台 264003【正文语种】中文【中图分类】R282.5半枝莲为唇形科植物半枝莲(Scutellaria barbata D. Don)的干燥全草,别名有小韩信草、并头草等,在华北、华东、中南及西南地区分布最多[1]。
此药味辛、苦,性寒,有归肺养肝肾之功效,可以清热解毒、消除肿痛;对咽喉肿痛、跌打损伤及蛇毒、黄疸起作用。
半枝莲有多种生物活性,可抑制病原、抗肿瘤、杀菌等[2],民间常把半枝莲用作抗肿瘤中草药。
半枝莲化学成分很多,黄酮类和二萜类所占比重较大[3]。
《中华人民共和国药典》2015年版中药质量标准中,半枝莲的质量评价主要通过总黄酮及野黄芩苷的含量测定来控制。
文献[4-7]也大多通过测定有效成分野黄芩苷及总黄酮的含量来评价其质量的优劣。
高效液相色谱指纹图谱的梯度条件优化
一、实验目的
1.进一步熟悉高效液相仪的操作。
2.学习梯度洗提的参数优化。
二、仪器与样品
1. HP1200高效液相色谱仪,配自动进样器,高压两元梯度泵及二极管阵列检测器。
2. 手动进样器,低压四元梯度泵,可变波长紫外检测器。
3. 色谱柱:Agilent C18键合固定相(15cm*
4.6mm,5um)。
4.茵陈药材
5. 甲醇(HPLC grade),H
3PO
4
(AR),纯净水,绿原酸标样
三.样品预处理
称取1克茵陈,用10ml甲醇/水(50/50)超声提取20分钟,过0.45um微孔滤膜,备用。
四.初始分析条件
(1) 流动相与梯度:根据文献自行设计
(2) 检测波长:根据文献自行设计
(3) 流速:0.8-1.0ml/min
(4) 柱温:室温
(5) 进样量:10-20uL
五.实验内容
根据初始条件下的分离情况,调整梯度洗脱参数,如起始浓度,斜率等,实现绿原酸类组分的基线分离。
六. 思考
(1)梯度洗脱与等度洗脱相比,各有何优缺点?
(2)对于复杂样品,你该如何着手开始实验?
(3)该实验中如何进行定性与定量分析?你认为影响定量准确度的因素可能会有哪些?。