临床微生物实验室基本操作总体流程
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微生物学实验室操作规程微生物学实验室操作规程第一章总则第一条为了保证实验室工作的顺利进行,确保实验室安全和实验结果的准确性与可靠性,特制定本规程。
第二条本规程适用于所有进入微生物学实验室的人员,包括实验室工作人员、研究生、本科生以及其他访问者。
第三条实验室的工作时间为每天的8:00-17:00,非工作时间需要特殊申请,并由主管人员审批。
第四条实验室工作人员应遵守实验室工作时间,不得在未经批准的情况下擅自离开实验室。
第五条进入实验室的人员必须佩戴实验室指定的防护设备,包括实验服、手套、护目镜等。
第二章实验室工作流程第六条实验室的工作流程包括实验前准备、实验操作、实验后处理等环节。
实验室成员应按照规定的流程进行工作。
第七条实验前准备包括准备实验所需的试剂、培养基、设备等,并做好相应的记录和标记。
第八条实验操作应遵循实验操作规程,按照实验计划进行操作,并根据实验结果进行记录。
第九条实验后处理包括处理实验产生的废液、废弃物等,保持实验室清洁和卫生。
第三章实验室安全第十条实验室工作人员必须了解实验室安全操作规程,严禁违反安全操作规定,确保实验室的安全。
第十一条实验室工作人员应定期参加安全培训,并按照培训要求执行。
第十二条实验室工作人员在操作过程中应注意个人防护,不得穿戴开裆裤、露指露脚等不符合实验室要求的服装。
第十三条实验室工作人员在操作前应对实验环境进行检查,排除存在的安全隐患。
第十四条实验室工作人员离开实验室时应关闭实验室的主要设备,保持实验室的安全。
第十五条出现实验室安全事故时,实验室工作人员应立即采取紧急措施,保护自己和他人的安全,并及时报告主管人员。
第四章实验室卫生第十六条实验室工作人员应保持实验室的整洁和卫生,严禁在实验室内吃东西、随意扔弃垃圾。
第十七条实验室工作人员应按照规定的要求进行实验室的日常清洁工作,并保持实验室的通风状况良好。
第十八条实验室工作人员应定期清理实验室的培养基、试剂等过期物品,并做好相应的记录。
微生物限度检查工作流程实验前:1.对实验器皿的准备:对玻璃器皿进行清洗,将洗净干燥的平皿、乳钵、刻度吸管等用牛皮纸包裹,放入鼓风干燥箱中于160℃干热灭菌2小时或放入高压蒸汽灭菌柜于121℃湿热灭菌30分钟,备用。
2.对实验用培养基及稀释液的准备:按规定比例配制实验所需的各种培养基及稀释液,包好,放入高压蒸汽灭菌柜于121℃湿热灭菌30分钟,备用。
3.洁净服的准备:将当天实验所用洁净服放入高压蒸汽灭菌柜于121℃湿热灭菌30分钟,备用。
实验中:1.将实验所需器皿、培养基、洁净服、样品、稀释液放入相应的传递窗中,打开紫外灯,照射30分钟。
2.打开洁净室的通风设备1小时以上,观察洁净室各个规定区域的压差是否符合相应规定范围,若不符合,则因通知设备部门及时进行调整。
3.进入洁净室,换上工作鞋,用洗手液洗手,烘干,换上洁净服,戴上口罩、手套,并与喷手器下用75%乙醇或0.1%新洁尔灭对双手进行消毒。
4.进入万级洁净走廊,观察各个规定房间的温度、湿度、压差是否符合规定,并与传递窗中将经紫外灯照射后的样品、器皿稀释液及培养基,放入相应的实验室(如微生物限度检查室或无菌检查室)。
并将培养基的温度控制在45℃以下(若培养基出现凝固现象时,因微波炉加热融化;若温度太高时,则因用纯化水降温至不烫手背宜。
5.打开超净工作台的紫外灯,照射30分钟,然后再打开超净工作台的通风设备。
用75%乙醇或0.1%新洁尔灭对实验所用工作台面进行擦拭消毒(消毒时应遵循由里到外,由上到下,由洁净要求高到洁净要求低的原则)。
6.按照适宜的次序于超净工作台内摆放好稀释液、天平、消毒液、集菌仪、剪刀、镊子等物品,用75%酒精棉球进行消毒,将样品内包装表面用碘酒棉球以及75%酒精棉球依次进行消毒。
将营养琼脂平板与超净工作台的做、中、右各置一个(平板需经下预培养48小时且无菌生长),开盖暴露30min,测定的沉降菌每平板不得超过1cfu,则符合百级超净工作台的沉降菌标准(注:在洁净工作台进行操作时,为防止污染,应用酒精棉球对双手反复消毒)。
微生物常规实验流程及过程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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铜陵中山医院实验室微生物操作sop文件支原体培养鉴定及药敏操作规程1.目的支原体是缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,也是目前所知能在人工培养基中生长繁殖的最小微生物,呈多形态性,基本为球形,亦可呈球杆状或丝状,可通过除菌滤器。
支原体种类繁多,分布广泛,已分离到150多种,而人体支原体至少有15种,其中对人类有致病作用的主要有:肺炎支原体、解脲脲原体、人型支原体和生殖道支原体。
在这里主要是介绍解脲脲原体和人型支原体的培养检测程序。
2.范围采集生殖道或尿道标本检测解脲脲原体和人型支原体。
适用于尿液、尿道分必物、前列腺液、精液和宫颈分泌物等。
3.培养程序3.1形态与培养特性支原体没有细胞壁,形态多形性,但主要有三种基本形态:球形、双球形和丝状。
革兰染色阴性,但不易着色,姬姆萨染色着色较好,呈淡紫色。
支原体营养要求较高,一般以牛心浸液为基础,再添加10%~20%的动物血清及10%的新鲜酵母浸液。
支原体最适pH为7.8~8.0,低于pH 7.0则死亡,一般为兼性厌氧菌,个别菌种为专性厌氧菌。
该菌生长缓慢,在支原体培养基中典型菌落呈“油煎蛋”样,其中以肺炎支原体的菌落最大,解脲脲原体的菌落最小,宜在低倍镜下观察。
支原体在液体培养基中生长量较少,一般不易浑注。
3.2程序步骤3.2.1标本取样后立即送检,必须在2h以内接种,2~8℃保存不超过5h,尿液标本应在膀胱内停留>2h以上,新鲜标本取10ml经3000r/min离心15min对样本进行浓集后取0.2ml.沉淀进行培养。
3.2.2试剂盒放置至室温后,在编号区标上编号,取出试剂,将稀释液加到培养基干粉瓶的2.9ml标线处,摇匀待干粉完全溶解后吸50ul到C-孔,作为阴性对照孔。
3.2.3将拭子或样本(尿液或液体标本取离心后的沉淀0.2ml)加入培养液中,拭子应稍加用力挤压旋转数次,使样本充分溶解于培养液,弃拭子,用移液器分别吸50ul培养液加入余下各孔中,然后每孔滴加二滴无菌液状石蜡,盖上盖,置35~37℃孵箱中培养,分别于24h观察解脲脲原体和48h观察人型支原体的培养及药敏结果。
微生物实验室操作规程一、引言微生物实验室是进行微生物学研究和实验的重要场所,为确保实验室的安全性和实验结果的准确性,制定和遵守一套严格的操作规程是必不可少的。
本文旨在提供一份详细的微生物实验室操作规程,以确保实验室的安全和实验的顺利进行。
二、实验室准备1. 实验室环境要求:实验室应具备良好的通风系统,确保空气流通,并且保持适宜的温度和湿度。
实验室内应保持整洁,定期进行消毒和清洁。
2. 实验室设备准备:实验室应配备必要的设备和仪器,如培养箱、显微镜、离心机等。
设备应定期检查和维护,确保其正常运行。
3. 实验室材料准备:实验室应配备必要的试剂和培养基,确保其质量和有效期。
试剂和培养基的储存应按照规定进行,避免受潮和污染。
三、实验室安全1. 个人防护:进入实验室前,必须穿戴实验服、手套和口罩,并戴上护目镜。
实验服应定期更换和清洗,手套应每次实验后更换。
2. 废物处理:实验产生的废物应按照规定进行分类和处理。
生物废物应经过高温和压力处理,化学废物应按照规定进行处理和处置。
3. 灭菌操作:实验室应配备高温高压灭菌器,并按照规定对实验器具、培养基等进行灭菌处理。
实验结束后,必须清洗和消毒实验台和仪器。
四、微生物培养操作1. 培养基准备:根据实验需求,准备适当的培养基。
培养基的配制应按照规定进行,避免污染和误差。
2. 培养物接种:接种前,必须先进行无菌操作,消毒培养器具和工作台。
接种时,要采取无菌技术,避免外界污染。
3. 培养条件控制:根据微生物的生长特性,控制培养的温度、湿度和pH值等条件。
定期观察培养物的生长情况,及时调整培养条件。
五、实验记录和数据分析1. 实验记录:每次实验都要详细记录实验过程、使用的试剂和仪器、观察结果等。
记录应准确、清晰,并按照规定进行保存。
2. 数据分析:对实验结果进行统计和分析,确保数据的可靠性和准确性。
可以使用统计软件进行数据处理和图表绘制。
六、事故处理和应急措施1. 实验事故处理:发生实验事故时,应立即采取相应的应急措施,保护人员安全。