临床微生物室标准操作程序

临床微生物检验基本技术标准操作规程微生物检验实验室标本处理标准操作规程 (137)微生物检验实验室标本接种标准操作规程 (138)微生物检验实验室细菌鉴定操作规程 (139)微生物检验实验室不染色标本检查法标准操作规程 (140)微生物检验实验室革兰染色标准操作规程 (141)微生物检验实验室抗酸染色标准操作规程 (142)微生物检验实验室墨汁染色标准操作规程 (144)微生物检验实验室药物敏感试验标准操作规程 (145)取粪便脓血部位标本根据检验申请单要求选择平板，立即接种。

4.6 尿标本接收标本后，立即对标本进行编号、登记，将尿标本混匀，用10ul定量接种环立即接种血琼脂平板、麦康凯平板，分离细菌和菌落计数。

参考文献[1] 周庭银编著.临床微生物诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007[2] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员批准人：XXX医院检验科微生物检验实验室标本接收标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0563灭菌。

用接种环伸入菌种管内挑取移种之菌落。

伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线，或直接自下而上蜿蜒划线。

将接种环垂直插入半固体培养基的中央，穿刺至培养基底部，然后穿刺线推出接种环。

4.4 穿刺培养法4.4.1 此法用于保存菌种，观察动力及某些生化反应。

4.4.2 以接种环挑取细菌培养物，插入半固体培养基的中央，穿刺至培养基底部，然后沿原穿刺线退出接种环。

4.5 液体培养基接种法用灭菌接种环挑取菌落或标本。

在试管内壁于液面交界处研磨，使细菌混匀在液体培养基中。

参考文献[1] 周庭银编著.临床微生物诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007[2] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员批准人：革兰阳性球菌：选择GP卡（阳性菌鉴定卡）。

微生物实验室设置及管理程序
1.目的
规范微生物实验室的设置及管理程序，保证检验结果的准确性和可靠性。

2.适用范围
适用于临床微生物实验室的设置和日常管理等。

3.职责
实验室负责人参与本实验室设置和管理。

4.程序
4. 1实验室设置
4.1.1临床微生物室设标本接种、细菌鉴定和药敏、培养基配制等岗位。

4. 1. 2微生物实验室分为污染区、半污染区和清洁区。

污染区为已被病原微生物污染的区域，如标本收发室、病原微生物检测实验室等;半污染区为可能被病原微生物污染的区域如缓冲间、工作服放置室、走廊等;清洁区为未被病原微生物污染的区域，包括办公区、会议室、休息室等。

4. 2实验室管理
4. 2. 1严格遵守微生物实验室的生物安全制度，参见《二级生物安全防护程序》。

4.2.2非本实验室工作人员，未经许可不得人内;进修、实习或其他科室人员应经实验室负责人同意并登记后才能进入实验室;禁止穿着工作服进入清洁区。

4.2.3实验完毕后做好清洁消毒工作。

4.2.4污染的处理参见《二级生物安全防护程序》。

4.2.5实验室质量管理参见《质量管理程序》、《室间质量控制管理程序》、((室内质量控制管理程序》等相关文件。

4.2.6实验室生物安全管理参见《实验室安全管理程序》、《二级生物安全防护程序》等相关文件。

4. 2. 7实验室人力资源管理参见《实验室人员的配置及培训程序》、《工作人员职责设置程序》。

微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。

本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤，确保检查结果的准确性和可靠性。

二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品，包括食品、医药和化妆品等。

三、操作步骤1. 准备工作：清洁实验室工作台面和仪器设备，准备所需的培养基和试剂，并确保仪器设备的正常运转。

2. 取样：按照产品的取样标准，从不同批次或不同位置进行取样，并确保取样的代表性。

3. 样品制备：将取样的产品进行样品制备，包括稀释、搅拌和过滤等步骤，以便于后续的微生物检查。

4. 培养：将样品接种在适当的培养基上，根据不同的微生物种类和要求进行培养，并进行恒温培养一定时间。

5. 计数：在培养一定时间后，对培养基上的菌落进行计数，并按照标准方法进行结果的记录和确认。

6. 结果判定：将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对，根据结果作出是否合格的判定。

7. 结果记录：将微生物限度检查的结果进行记录，包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息，并将结果报告给相关部门或供应商。

四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能，严格按照操作规程执行。

2. 实验室应保持清洁、卫生，并进行定期消毒和验证。

3. 实验室设备应定期维护和校准，确保设备的准确性和可靠性。

4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准，存放在干燥、阴凉、避光的环境中。

5. 检查结果应及时报告，并根据结果采取相应的控制措施。

以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容，希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查，确保产品质量和安全。

临床微生物检验标准化操作临床微生物检验是临床诊断的重要组成部分，其结果直接关系到患者的治疗方案和预后评估。

因此，标准化操作在临床微生物检验中显得尤为重要。

本文将从标本采集、实验操作、结果判读等方面介绍临床微生物检验的标准化操作。

1. 标本采集。

标本采集是临床微生物检验的第一步，也是至关重要的一步。

不规范的标本采集可能会导致检验结果的误差，影响临床诊断。

因此，在进行标本采集时，需要注意以下几点：（1）标本采集时间，标本采集的时间应符合临床需要，并且应在医生的指导下进行。

不同的微生物在不同的时间段内的检出率可能会有所不同，因此需要根据临床情况选择合适的标本采集时间。

（2）标本采集部位，标本采集部位应选择合适的部位，并且在采集前要进行充分的消毒处理，以避免外部微生物的干扰。

（3）标本容器，不同的微生物需要不同类型的容器进行采集，因此需要选择合适的标本容器，并且在采集后要及时送至实验室进行检验。

2. 实验操作。

实验操作是临床微生物检验的核心环节，其准确性和规范性直接关系到检验结果的准确性。

在进行实验操作时，需要注意以下几点：（1）实验操作环境，实验操作应在符合微生物检验要求的环境下进行，避免外部环境对实验结果的干扰。

（2）实验操作流程，实验操作应按照标准化的操作流程进行，严格控制每一个操作步骤，避免操作失误。

（3）实验操作记录，实验操作过程中需要做好详细的记录，包括标本信息、操作步骤、操作人员等信息，以便后续的结果分析和追溯。

3. 结果判读。

结果判读是临床微生物检验的最后一步，也是决定临床诊断的关键环节。

在进行结果判读时，需要注意以下几点：（1）结果解读标准，对于不同的微生物检验结果，需要根据相应的标准进行解读，避免主观因素对结果的影响。

（2）结果报告准确性，结果报告应准确无误，包括微生物的种类、数量、药敏信息等内容，以便医生进行合理的临床诊断和治疗。

（3）结果保存与追溯，检验结果需要进行有效的保存和追溯，以便后续的质控和审查。

微生物日常工作流程
微生物实验室的日常工作流程包括样品采集、样品准备、细菌培养、菌落计数、细菌鉴定等步骤。

1. 样品采集
根据实验目的,从不同的源头采集样品,如空气、水、食物、患者等。

采集时要注意无菌操作,避免样品被外源污染。

2. 样品准备
将采集的样品进行留取、稀释等预处理,配制成适合微生物培养的状态。

3. 细菌培养
将处理后的样品接种到培养基上,置于恒温培养箱进行培养。

控制培养条件如温度、湿度等,为微生物生长创造最佳环境。

4. 菌落计数
培养结束后,观察培养皿上菌落的数量、大小、颜色等,进行定量记录。

5. 细菌鉴定
通过菌落形态特征、生化试验等方法,鉴定培养皿上生长的细菌属种。

6. 数据记录
将实验过程和结果详细记录,以便后期分析。

以上是微生物实验室的基本日常工作流程。

根据不同实验目的,流程中可能还包括抗生素敏感性测试、致病性检测等步骤。

微生物实验室标准操作程序质量手册实验操作者:XXXXXXXX执行日期：X年X月X日启用日期:XX年X月X日标准操作程序文件01 试剂贮存和配制区工作制度02 标本处理区工作制度03 细菌自动分析区工作制度04 试剂贮存和配制区标准操作程序05 标本处理区标准操作程序06 细菌自动分析区标准操作程序07 紫外消毒标准操作程序08 消毒液配制使用标准操作程序09 普通冰箱使用标准操作程序10 超低温冰箱标准操作规程11 洁净工作台使用操作规程12 VITEK32型自动分析系统标准操作程序13 移液器使用标准操作程序14 高速离心机操作标准操作程序15 冰箱维护和保养标准操作程序16 电热恒温水浴箱操作程序17 洁净工作台维护和保养程序18 可移动紫外消毒车使用操作程序19 加样器校准标准操作程序20 离心机维护保养操作程序21 温度计校准程序22 试剂的质检操作程序23_微生物实验室岗位职责（暂行）24 临床标本的保存程序25 临床检验及收费程序26 微生物检验收收费价格27 普通培养阴性操作程序28 真菌培养阴性操作程序29 苛养菌培养阴性操作程序30 抗酸杆菌培养阴性操作程序31 支原体培养检验操作程序标本处理区工作制度进入本区需穿工作服、工作鞋。

本区只能进行:临床标本的保存,标本接种、培养、及其菌株检验前处理、菌悬液制备、染色标本检查、非上机鉴定与药敏试验操作等危险操作，其它操作不得在此区进行.在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套、口罩和帽子，严格按照操作规程进行。

工作结束后必须立即对工作区进行清洁或消毒.非本实验室工作人员未经允许不得进入。

试剂配制和无菌区工作制度进入该区需穿专用工作服和工作鞋.本区只能进行贮存试剂的制备、试剂的分装和平板的制备。

在整个本区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程进行.工作结束后必须立即对工作区进行清洁和消毒。

非本实验室工作人员未经允许不得进入。

临床微生物实验室血培养操作标准1 范围本标准规定了血培养标本临床微生物检验的技术要求。

本标准适用于开展血培养的临床微生物实验室。

2 术语一套血培养：从同一穿刺点同时采集的血液标本，分别注入需氧和厌氧瓶；静脉输液港：一种植入皮下，可长期留置在体内的静脉输液装置；HACEK菌群：嗜沫嗜血杆菌、伴放线放线杆菌、人心杆菌、啮氏艾肯菌和金氏金菌；血培养污染率：一般由凝固酶阴性葡萄球菌、革兰阳性棒状杆菌、芽孢杆菌、痤疮丙酸杆菌和微球菌等污染引起的阳性瓶占总送检瓶数的比例。

3 导言人体血液中有很多物质，包括溶菌酶、白细胞、免疫球蛋白、补体等，可在几分钟内将入侵血流的微生物清除。

当微生物感染超出人体免疫系统的防御能力时，人体不能将微生物局限于原始感染的部位，或在治疗中不能通过切除、引流等措施清除感染源，那这些微生物将侵入血液迅速繁殖形成菌血症或真菌血症。

一过性菌血症常发生于对感染灶的外科处理、黏膜的创伤操作和易污染的外科手术，亦可发生于全身或局部感染的早期；间歇性菌血症常发生于腹腔等部位未能及时引流的脓肿；持续性菌血症常发生于感染性心内膜炎等血管内膜感染以及伤寒和波浪热的最初几周。

菌血症是临床急症，应尽快采集血液进行培养。

血培养是对入住急诊科、ICU患者、移植患者以及静脉插管患者的败血症进行早期诊断的一种方法，并根据阳性血培养病原菌的药物敏感性试验，可为临床医生提供最佳的抗菌药物治疗方案，对降低病死率有很大帮助，血培养对于临床诊断和预后评估也具有重要的意义。

4 血样采集和培养瓶接种4.1 采血指证可疑感染患者出现以下一种或几种特征时，可以考虑采集血培养：发热（≧38℃）或低温（≤36℃），寒战，白细胞计数增多（计数＞10.0×109 /L，特别有“核左移”时）或减少（计数＜3.0×109 /L），皮肤黏膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，C反应蛋白、降钙素原（PCT）、1，3-β-D-葡聚糖（G试验）升高及突然发生的急性呼吸、体温和生命体征改变。

样本接收、核对、接种、培养标准操作程序【目的】标本的质量是检验结果准确性与有效性的基础，为使标本从病人到实验室这一过程受控，保证准确可靠的检验结果，特制定本程序。

【适用人员】临床微生物实验室检验人员【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

【步骤】1.接收样本：核对各样本号与申请单联号是否一致，如不一致马上与病房联系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。

核查各送检样本是否符合要求。

1)痰液样本：先看外观、再直接涂片镜检，低倍镜下见白细胞>10个/LP，上皮细胞<25个/每个视野，为合格痰液。

2)无菌体液样本：检查各种无菌体液样本的盛放器皿是否符合要求。

3)容易干燥的样本：对一些容易干燥的样本如大便、咽拭子、脓液拭子、泌尿生殖道拭子等是否已经干燥。

对不符合要求的样本必需与临床联系，以便作出相应处理，方法如联号不符的样本。

做好记录。

对符合的样本进行接种，并注明日期。

2.样本接种：1)大便致病菌、三线，分区划线接种于麦康凯平板；2)血液、骨髓按要求采集直接注射于法国梅里埃双相血培养瓶送检；3)支原体培养+药敏，按支原体操作规程接种于支原体专用培养基；4)衣原体检测,按衣原体操作规程操作；5)其它标本(痰液、咽拭子、脑脊液、各种无菌体液、脓液分泌物)分别接种血平皿、麦康凯平板，分三区划线接种；对脓液、脑脊液等在接种的同时应对其沉渣进行革兰染色，如有细菌立刻通知临床，并做记录。

4 样本培养：移种过的血平板、麦康凯平板、血液增菌培养瓶及支原体培养条板均置于35.0℃的培养箱（HH.B11.420型）。

临床微生物SOP-室内质量控制管理程序1.目的：规范微生物实验室管理程序，确保临床报告的质量。

2.适用范围：微生物实验室的所有检验项目。

3.职责：实验室检验人员均必须熟知并遵守本程序。

4.程序：4.1 分析前质量管理4.1.1 检验申请单临床医生应按照《微生物检测项目申请程序》申请临床微生物检测。

口头申请追加样本检验项目，必须在样本有效期内申请，并补正式的检验申请单。

4.1.2 生成微生物检验标本标签护士应在核对医嘱、病人信息和检验申请信息后，按照《微生物标本检验标签程序》生成申请单和微生物检验项目标签，并将微生物检验项目标签正确贴于容器上。

4.1.3 标本的采集手册实验室应制定样本采集手册，指导正确采集和处理样本。

4.1.4 样本采集和运输样本采集人员应按照《采样前病人识别程序》确认病人，按照《标本采集、运输程序》采集样本，并在规定的时间和温度范围内，使用指定的运输培养基，安全运送到微生物室。

4.1.5 样本的接收样本接收人员应严格按照《标本接收、识别程序》《标本拒收程序》对标本接收或拒收，并记录。

4.1.6 微生物检验标本信息输入微生物实验室接种实验室岗位检验人员严格按照《微生物标本信息输入程序》录入、核对病人信息和标本信息等质料。

4.1.7 样本储存微生物实验室接种岗位检验人员按照《微生物标本检验前储存程序》正确储存未能及时处理的标本。

已经检验的样本应在保证性质稳定的条件下，将样本以适当的方式保留到规定时间内，以便能在出具结果报告后可以复查，或做补充检验。

4.2 分析中质量管理4.2.1 试剂的质量控制4.2.1.1 所有试剂用于检测标本前，必须做质控以评估质量并记录质控结果，只有质控合格才可以使用。

下列试剂每进一批新批号或货号要求用阴、阳性标准菌株或质控菌株评估其质量（表2-1）。

触酶、氧化酶、凝固酶、β-内酰胺酶、Optochin、X、V 和XV 纸片；细菌鉴定系统使用的每一种鉴定卡及相关试剂；表2-1 常用实验试剂质量控制试剂阳性对照阴性对照监测频率氧化酶铜绿假单胞菌A TCC27853 大肠埃希菌A TCC25922 每次新配制时及使用中每个工作日触酶金黄色葡萄球菌A TCC25923 A群链球菌A TCC19615 每次新配制时及使用中每个工作日靛基质大肠埃希菌A TCC25922 肺炎克雷伯菌A TCC13883 1%蛋白胨水及靛基质试剂:每次新配制时及使用中每个月1次直接用于检测病人标本有内标准的抗原试验如：金黄色葡萄球菌乳胶凝集试剂（每天或每次做质控）；抗血清（至少每半年用阴、阳性质控菌株做质控）；革兰染液（每周一次用阴、阳性质控片做质控）；抗酸染液（每次使用要求用阴、阳性质控片做质控）；自制试剂（每配制一批新试剂做质控）。

临床微生物检验标准化操作在临床微生物检验中，标准化操作是非常重要的。

标准化操作可以保证检验结果的准确性和可靠性，同时也可以提高检验效率和降低误诊率。

本文将从标本采集、标本处理、培养和鉴定等方面介绍临床微生物检验的标准化操作。

一、标本采集标本采集是临床微生物检验的第一步，也是最为关键的一步。

标本采集不当会导致检验结果的误差和假阳性率的增加。

因此，在标本采集时，需要注意以下几点：1. 标本采集时间应该在病情发生后的早期，以避免细菌繁殖过多而影响检验结果。

2. 标本采集前应该对采集部位进行消毒处理，以避免细菌污染。

3. 标本采集时应该采集足够的量，以保证检验的准确性。

二、标本处理标本处理是临床微生物检验的第二步，也是非常重要的一步。

标本处理不当会导致细菌死亡或者繁殖过多而影响检验结果。

因此，在标本处理时，需要注意以下几点：1. 标本处理应该在采集后尽快进行，以避免细菌死亡或者繁殖过多而影响检验结果。

2. 标本处理时应该选择合适的处理方法，以保证细菌的存活和检验的准确性。

3. 标本处理时应该避免污染，以避免影响检验结果。

三、培养培养是临床微生物检验的第三步，也是非常重要的一步。

培养不当会导致细菌死亡或者繁殖过多而影响检验结果。

因此，在培养时，需要注意以下几点：1. 培养条件应该符合细菌的生长要求，以保证细菌的存活和检验的准确性。

2. 培养时间应该足够长，以保证细菌的繁殖和检验的准确性。

3. 培养时应该避免污染，以避免影响检验结果。

四、鉴定鉴定是临床微生物检验的最后一步，也是非常重要的一步。

鉴定不当会导致误诊和漏诊。

因此，在鉴定时，需要注意以下几点：1. 鉴定方法应该选择合适的方法，以保证检验的准确性。

2. 鉴定时应该遵循标准化操作流程，以保证检验的准确性。

3. 鉴定时应该避免主观判断，以避免误诊和漏诊。

总之，临床微生物检验的标准化操作是非常重要的。

只有通过标准化操作，才能保证检验结果的准确性和可靠性，同时也可以提高检验效率和降低误诊率。