蝴蝶兰的组织培养技术

毕业论文（设计）学生姓名:指导教师：专业名称: 园林技术所在系部：园林系2010年 3 月 9 日辽宁林业职业技术学院毕业论文评审书蝴蝶兰品种组织培养技术摘要：被誉为“洋兰王后"的蝴蝶兰，几年来一直都处于花卉销售的首位，一直受到花迷们的青睐。

近年来除了盆花,还大量被用作切花材料，切花中除我们常见的插花用途之外，还是制作胸花的好材料，在开会庆典场合备受瞩目，至于用来制作新娘捧花，也是目前国内流行的新风潮，深受广大消费者的好评，这就使得高品质的蝴蝶兰需求量逐年增加。

但目前由于专业性培育蝴蝶兰的整体水品不是很高，关键的生产环节技术薄弱,造成蝴蝶兰生产成本较高繁殖系数偏低,工业化生产效率不高，许多名贵品种短缺，品质较低,且市场售价较高。

因此建立和完善蝴蝶兰组培快繁技术是解决这一问题的关键环节。

本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素，并提出了相应的对策，为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。

关键词：蝴蝶兰；快繁技术；养殖;褐变目录前言……………………………………………………………………………………………第一章蝴蝶兰的生态习性…………………………………………………第二章蝴蝶兰的快速繁殖技术…………………………………………………2.1茎尖培养…………………………………………………2。

2蝴蝶蝶兰的诱导培养基为ＶＷ、ＫＣ、ＭＳ、ＢＫ……………………………2。

3叶片培养…………………………………………………2.4花梗腋培养…………………………………………………2。

5根尖培养…………………………………………………2.6 原球茎的继代培养与育苗…………………………………………………第三章蝴蝶兰的栽培管理…………………………………………………3.1栽培介质…………………………………………………3.2温度……………………………3。

3浇水………………………………………………………………………3.4光照……………………………………………………………………3。

蝴蝶兰组织培养技术研究进展摘要：蝴蝶兰的传统繁殖方式为分株繁殖，繁殖系数低，速度慢，不能满足日益增长的市场需求。

组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径，本文综述了蝴蝶兰的原球茎诱导增殖培养，并对我国未来蝴蝶兰研究发展进行了展望。

关键词：蝴蝶兰;原球茎;组织培养蝴蝶兰是兰科蝶属植物，花形奇特，色彩艳丽，花期持久，一般2～3个月，最长可达半年，适于家庭摆设或作切花用于花篮、花束等。

但蝴蝶兰很难用传统的方式进行无性繁殖。

蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株很少发育侧芽，且种子极难萌发，对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢，故多采用组织培养的方法对其进行快速繁殖。

原球茎是兰科植物组织培养产生的特有现象。

原球茎的发生途径可以由花梗节段、幼叶、根段、茎尖等部位直接产生，也可以通过诱导愈伤组织，再从愈伤组织诱导原球茎产生。

不同外植体原球茎的诱导，其特点及培养基的选择也不同。

本文就蝴蝶兰原球茎诱导增殖培养的研究现状进行综述。

1 外植体的选择外植体的来源是决定外植体能否培养成功的重要因素，不同品种、不同器官之间的分化程度和能力存在差别，因此，在进行组织培养时必须选择合适的外植体进行无菌操作才能保证蝴蝶兰组织培养的成功。

常用于蝴蝶兰组织培养的外植体有茎尖、根、叶片和花梗芽。

1.1 茎尖茎尖是最早用于兰花快速繁殖的外植体，较容易诱导培养，是成功率较高的部位。

利用蝴蝶兰的茎尖诱导出类原球茎，再由类原球茎分化成苗。

这种培养的突出问题在于蝴蝶兰为单茎性植株，剥取茎尖就损坏了母株本身，而蝴蝶兰茎极短，操作困难，易污染。

但茎尖培养的优点是比较容易获取类原球茎或愈伤组织，因为茎尖分生组织细胞的生理年龄小，易于脱分化和分化，同时，操作细致还能达到脱毒效果，获得无病毒苗。

1.2 根尖蝴蝶兰根为外植体诱导原球茎的诱导率相对较低。

以蝴蝶兰新发生的根尖段切成0.5～0.8 cm接种到培养基上，遮光处理4～5 d，14d后可形成愈伤组织。

将蝴蝶兰根平放在培养基上经过约50 d的培养后，根尖顶端可长出原球茎，其诱导率在75％左右，而根尖分生区以外的根段上却诱导不出原球茎。

蝴蝶兰的组织培养生命科学与工程学院生物技术（1）班黄龙洲P092114260一实验目的：1 掌握蝴蝶兰组织培养的方法;2了解植物组织培养的方法；3 学习植物组织培养的原理；4 了解不同浓度BA对蝴蝶兰生根的影响。

二实验原理：蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)为兰科蝴蝶兰属植物,因花型奇特、色彩艳丽、花期长久而享有“洋兰皇后”的美誉[1]。

蝴蝶兰原产于缅甸、菲律宾、台湾、马来西亚、印度尼西亚等热带亚洲地区,具有极高的观赏和经济价值,是国际上最具商业价值的四大观赏热带兰之一。

蝴蝶兰属单茎性气生兰,再生能力弱,很难进行分株繁殖,且种子无胚乳,自然条件下难以萌发,增殖系数低,难以满足日益增长的市场需求。

应用植物组织培养技术进行蝴蝶兰快速繁殖可以缩短繁育周期,获得大量成株,并可以保持优良性状,维护种质资源,是蝴蝶兰快速繁殖的有效途径。

在以蝴蝶兰根尖、茎尖、叶片和花梗芽为外植体诱导原球茎时,由于根尖的诱导率低,摘取茎尖会损失母株等原因,因此在蝴蝶兰组织培养中根和茎都不是诱导原球茎的理想材料。

而蝴蝶兰叶片和花梗芽作为外植体诱导圆球茎时,其诱导率较高、对母株伤害不大,是较为理想的外植体材料。

三实验材料：蝴蝶兰的茎尖、或根、或叶片或花梗芽四实验试剂：MS、（或）1/2MS、（或）VW、（或）B5、（或）KC、（或）花宝及其改良型等,（种差异及外植体来源不同导致不同品种及外植体对最适培养基的选择有所不同。

）激素NAA1mg/L，500mg/L 的水解乳蛋白，7g/L 琼脂，30g/L 蔗糖，不同的浓度BA （2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L、10mg/L。

五实验方法：1. 外植体的消毒。

从蝴蝶兰植株上取下幼叶（分14d、30d）或气生根尖，放在自来水下冲洗干净。

在超净工作台上，将叶和根尖放入无菌瓶，用75%酒精消毒30s，然后用无菌水清洗2～3 遍，再用0.1%升汞溶液浸泡10min（分钟），用无菌水冲洗4～5遍后待用。

主要经济植物组织培养技术2---蝴蝶兰一、授课章节主要经济植物组织培养技术2---蝴蝶兰。

二、学时安排2学时。

三、教学目标1．通过蝴蝶兰组培技术的学习，掌握兰科花卉的组培快繁技术。

四、教学重点、难点分析重点：蝴蝶兰的培养程序。

难点：增殖与继代培养。

五、教具电化教学设备, 试管苗。

六、教学方法讲授法，演示法。

七、教学过程Ⅰ导入本次课主要介绍的是蝴蝶兰的组织培养技术。

II新课二、蝴蝶兰的组织培养技术（一）培养意义蝴蝶兰属于兰科、蝴蝶兰属，为多年生热带花卉，是世界上栽培最广泛、最受喜爱的洋兰之一。

蝴蝶兰的繁殖大多采用分株的方法，得到种苗量少，不能满足栽培的需求。

通过组织培养技术繁育蝴蝶兰种苗，实现“兰花工业”是目前繁殖率最高、种苗质量最优秀的方法。

（二）培养程序1.外植体的选择蝴蝶兰的组织培养外植体有茎尖、茎段、叶片、花梗腋芽、花梗节间、根尖等，各部位都能诱导成功，只是难易程度不一。

蝴蝶兰是单茎性热带气生兰，只有一个茎尖，如果直接从开花植株取得茎尖或茎段，整株造成浪费。

以叶片或根尖作外植体，材料丰富，但诱导周期长、难度大；用花梗腋芽或花梗节间作外植体，容易诱导，外植体表面灭菌成功率高，是最合适的外植体取样部位。

2.外植体的处理、接种与初代培养●花梗腋芽的培养：蝴蝶兰为总状花序，近顶端的节着生花蕾，近基部的几个节，常具有苞叶覆盖的腋芽。

剪取整枝花梗，清水冲洗30min，将花梗剪成长约2～3cm带腋芽的切段，用无菌吸水纸或纱布吸干水分，带入无菌操作室按无菌操作程序进行接种。

先用70%的酒精溶液浸泡30s，再用0.1%的升汞溶液浸泡8～10min，用无菌水反复冲洗5～8次，接种在MS+BA 3mg/L的培养基上，可使腋芽萌发为丛生芽。

●花梗节间的培养：生长中的蝴蝶兰幼嫩花茎最具分化原球茎的能力。

取生长期在45d以内的蝴蝶兰花梗，经无菌操作消毒后（消毒方法同花梗腋芽），斜切成1～1.5mm厚的薄片，平放在固体培养基上。

蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖蝴蝶兰属热带气生兰，花形似蝴蝶，因而得名。

其花形态美丽，色彩丰富，花期长，在热带兰中有“兰花皇后”之美称，是近年来最受欢迎的洋兰之一。

蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株极少发育侧芽，且种子极难萌发,对其进行常规性的繁殖，增殖速度很慢，因此，多采用组织培养的方法对其进行快速繁殖，以达到工厂化育苗的目的。

1 植物材料蝴蝶兰Lm品种的幼叶。

2 培养条件诱导培养基：MS+BA3.0+NAA0.2。

继代培养基:MS+BA2.0+NAA0.5。

在上述培养基中均加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L（克/升），椰汁200mL/L（毫升/升）。

育苗培养基:1/2MS+IBA1.5+NAA0.05，并加入蔗糖20g/L（克/升），琼脂12g/L （克/升），活性炭5g/L（克/升），椰汁200mL/L（毫升/升）。

培养温度25℃-28℃，每日光照10h-12h（小时），光照强度1600lx-2000lx（勒克斯）。

3 培养方法与生长分化情况3.1 外植体接种从蝴蝶兰植株上取下幼叶（以3-4月龄的植株最好），放在自来水下冲洗干净，然后放入烧杯内待用。

在超净工作台上，将烧杯内的叶片用75%酒精消毒30s（秒），然后用无菌水清洗2-3遍，再用0.1%升汞溶液浸泡11min（分钟），最后用无菌水冲洗4-5遍。

用无菌手术刀将叶片切成5mmx5mm见方的小块，平放或按极性接种在诱导培养基上，近轴面向上，每瓶不宜接种太多。

3.2 原球茎的诱导与增殖幼叶切块在诱导培养基上培养1-2月后，从每个叶片组织块上产生1-7个不等的原球茎，此时，在无菌条件下,将原球茎取出切割成几小块，转入继代培养基中，进行增殖培养。

培养一段时间（60天左右）后，再进行分割转移，通过这种方式，原球茎可成倍增长。

3.3 小植株的培养将不需继代的原球茎转移到育苗培养基上分化出芽，并逐渐发育成丛生小植株。

在无菌条件下，切开丛生小植株，将小植株转入育苗培养基上培养。

蝴蝶兰组织培养关键技术探讨植物组织培养技术在近几十年中得到了广泛应用。

它可以被用来繁殖新的植株、提取次生代谢产物、进行基因转化等。

在这些应用中，蝴蝶兰也是一个极具潜力的实验对象。

蝴蝶兰作为世界上最具代表性和最广泛应用的兰花之一，在组织培养中也有着重要的地位。

但是，由于蝴蝶兰组织培养的复杂性，使得研究人员需要更深入的了解这个体系才能更好地应用。

蝴蝶兰种植材料的选择选择合适的种植材料是组织培养的第一个步骤。

在蝴蝶兰中，筒状茎是最常用的组织培养种植材料。

它们是由花茎和叶子部分加厚而成的。

筒状茎可以容易地被分离成许多芽体和芽触须，因此只需要少量的筒状茎就能开展大规模地组织培养介质的配置蝴蝶兰不同发育阶段对培养基成分的要求也不同。

早期的幼苗需要较多的氮源和较低的磷酸盐浓度，以促进株高生长，而成熟后的植物则需要较少的氮源，较多的磷酸盐，以便生成较多的花茎和花蕾。

不同类型的蝴蝶兰组织在培养基配方上也存在差异。

对于直立型蝴蝶兰，培养基中磷酸盐的浓度可以略高，可增加花序的分化，而对于地生型蝴蝶兰，氮源的含量应该增加以增进它们的生长和发展。

植物生长调节剂的添加植物生长调节剂可以增进不同种类的蝴蝶兰的生长和分化。

常用的生长调节剂包括IAA、IBA、NAA、BA、KT、ZN、GA3、2、4-D 等，而它们的作用机制也不尽相同。

对于蝴蝶兰来说，BA 往往是组织培养中最重要的激素，它能促进幼苗生长和芽体分化。

KT 可以促进花序分化，GA3和2、4-D 对于不同种类蝴蝶兰都可以促进植株延长生长和徒长。

因此，在不同的生长阶段和应用场景中，需要选用不同的生长调节剂组合。

温度、湿度和光照等培养条件适宜的温度、湿度和光照都是组织培养中非常关键的因素。

温度以25℃ ~ 28℃ 为宜，湿度以 80% ~ 90% 为宜，植株和试管应避免暴露在直接阳光下。

在实际应用中，还需要针对不同的种类和品种，进行合理的调整和修正，以达到最优的生长效果。

蝴蝶兰组织培养及体胚发生技术研究的开题报告一、选题背景和意义蝴蝶兰属于兰科植物中的高档花卉，在国内和国际市场上具有广泛的市场需求和经济价值。

由于野生种类的环境受到破坏，采摘野生种类已经受到限制，培育高品质蝴蝶兰成为了重要的发展方向。

组织培养技术是目前蝴蝶兰种质创新和繁殖方式的关键技术之一，对于快速繁殖优质、高产、抗病虫害的蝴蝶兰品种具有至关重要的作用。

二、研究目的和内容本研究的目的是探究蝴蝶兰的组织培养技术和体胚发生技术，以实现对蝴蝶兰生长发育过程的控制和调节，进而能够用于高品质蝴蝶兰的繁殖和遗传育种。

具体的研究内容包括：1. 蝴蝶兰花器官培养技术研究：通过对花茎、花粉、花柱等试管内培养的组织细胞进行生长观察和培养条件优化，实现各花器官的快速繁殖。

2. 蝴蝶兰体胚发生技术研究：通过优化外植体处理、植物生长调节物质的添加和培养基成分的调整等手段，实现蝴蝶兰体胚形成和发育，以及体胚转化和培养。

3. 蝴蝶兰品种优化和选育研究：在蝴蝶兰组织培养和繁殖技术的基础上，对蝴蝶兰种质资源进行繁育，筛选并鉴定具有优良性状的优良品种。

三、研究方法和步骤1. 蝴蝶兰花器官培养技术研究：（1）准备组织培养器材和培养基，包括培养瓶、试管等。

（2）剥离蝴蝶兰的各个器官组织。

（3）优化培养条件，包括培养基的配方、光照强度、温度、湿度等。

（4）对各器官组织的培养和生长情况进行观察和记录。

2. 蝴蝶兰体胚发生技术研究：（1）收集蝴蝶兰的植物外植体，处理后进行培养。

（2）筛选适合的培养基配方，添加生长激素、维生素和糖类等营养物质。

（3）调节培养条件，加强光照和通气。

（4）观察育苗的生长状况，测量外植体的发育情况和体胚的数量和质量指标。

3. 蝴蝶兰品种优化和选育研究：（1）选取具有潜在育种价值的蝴蝶兰品种。

（2）对外植体进行组织培养和体胚发生培养，育成大量的蝴蝶兰无性系。

（3）评价优良品种的性状，进行品种鉴定。

（4）推广优良品种，用于实际生产和市场需求。

蝴蝶兰的组织培养综述摘要：对于兰科植物选取蝴蝶兰作为代表进行组织培养，包括外植体的选择，灭菌方法，培养基的成分配制，培养条件及缓苗移植方案等。

利用组培技术培育培养名贵品种的兰科植物—蝴蝶兰的无病毒植株。

关键词：组织培养蝴蝶兰无病毒植株蝴蝶兰属是著名的切花种类，全属50多种，蝴蝶兰是单茎性附生兰，茎短，叶大，花茎一至数枚，拱形，花大，因花形似蝶得名。

其花姿优美，颜色华丽，为热带兰中的珍品，有“兰中皇后”之美誉。

蝴蝶兰是植物界被子植物门单子叶植物纲天门冬目兰科蝴蝶兰属的植物。

主要分布在菲律宾，马来半岛和我国台湾。

喜欢高气温、高湿度、通风透气的环境；不耐涝，耐半阴环境，忌烈日直射，忌积水，畏寒冷，生长适温为22~28℃，越冬温度不低于15℃越冬温度不低于15度。

兰花在我国素有“花中君子”之称，具有极高的观赏价值。

随着经济的发展，人民对兰花的购买力增加，兰花迅速成为一项产业，并迅速向工业化生产发展，尤其是蝴蝶兰。

过去传统的分枝繁殖远远不能满足于市场的需求。

为了适应蝴蝶兰事业的发展，可以进行兰花的植物组织培养来满足人们的需求。

一.培养部位：大多数植物根、茎、叶和花器等各个部位都能培养成功。

而兰科植物可以培养的部位主要是顶芽和侧芽，一部分种类可以采用隐芽等休眠芽，个别可从叶片培养得植株，各属适宜培养的部位也有区别。

1.新芽的茎尖茎尖是细胞分裂最旺盛的部分，也是培养成功率最高的部位，但需要较高的分离技术。

2.休眠芽在顶芽失去发芽力时它能发芽。

其芽裸露，故分离技术简单。

但易污染，所以要注意灭菌。

3.茎的隐芽茎的隐芽是较难分离的芽，其成活率与休眠芽差不多。

4.花梗当兰花开花约一个月后，剪取其花梗顶端及若干个花梗腋芽，切成2～3cm长的切段，每段带一腋芽，基部向下插于培养基中。

二.外植体的选择：蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道，方法各异，难度各有高低。

蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，达75%；其次为花梗，成活率为 62.5%；叶片和根尖最差，分别为12.5%和7.5%。

园艺园林 282023.01蝴蝶兰组织培养技术要点分析张 婷(广东省惠州市农业科学研究所，广东 惠州 516000)摘要：近年来蝴蝶兰开始频繁出现在各地区的花卉市场中，因此，相关科研单位、企业开始逐渐增加对其生产投入以及组织培养力度。

但是，现阶段蝴蝶兰生产所有的组织培养基配方、培养环境以及规格苗生产中栽培基质等尚未与国际先进水准齐平，导致蝴蝶兰产业在实际发展中受到严重限制。

本文主要是对蝴蝶兰组织培养技术要点进行分析。

关键词：蝴蝶兰；组织培养技术；原球茎本文研究了蝴蝶兰组织培养的相关技术，通过实验论证了在散射光环境下幼叶诱导蝴蝶兰原球茎能够达到最佳效果。

最佳培养基为MS+6-BA6毫克/升水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖5克/升（pH=5.4）；最适增殖培养基为MA+6-BA2毫克/升+NAA1毫克/升+水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）；最适生根长苗培养基为1/2MS+IBA1.5毫克/升+NAA0.05毫克/升+0.3%活性炭+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）。

1 蝴蝶兰组织培养技术的注意事项1.1 培养基添加物对蝴蝶兰增值与分化的影响一般可以在蝴蝶兰组织培养中添加适量天然物质，能够供给蝴蝶兰幼苗微量营养成分、生长激素等，像是在其中加入120毫克/升香蕉泥，就能够对原有pH值进行缓冲，以此达到壮苗与生根作用。

相关资料指出，在培养基中加入适量椰乳或香蕉泥，能够促进原球茎的增值。

在蝴蝶兰丛生芽中加入一定的添加物，能够促进和诱导幼苗生根。

而在其内加入高浓度活性炭，能够促进原球茎增值。

1.2 原球茎继代中褐化的防治蝴蝶兰与其他兰科植物类似，原球茎状体在继代培养过程中易褐变死亡，很难增值。

通过将1克/升活性炭加入到培养基中，并在合适时间内将原球茎褐化的部分进行切除，并重新配置新鲜的培养基，防治外植体出现褐变死亡，将10%椰子水加入培养基中，能够让原球茎更快生长，在其增值环节中有效抑制褐变现象。