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Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)
简介：
Tris-乙酸电泳缓冲液即Tris acetate-EDTA buffer，简称TAE。1×TAE工作液中含有
40mM Tris-acetate、1mM EDTA(pH8.0)。TAE是常用的DNA电泳缓冲液, 本试剂是50
倍浓缩的TAE，主要由2M Tris-acetate，50mM EDTA组成，使用时需用蒸馏水或去离子
水稀释50倍后使用。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、用蒸馏水或去离子水稀释到1×后使用。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号
名称
NA0030 NA0030 Storage
50×TAE 500ml 5L RT
使用说明书 1份
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乙酸缓冲液(0.05mol/L,pH4.3)
简介：
乙酸缓冲液(0.05mol/L,pH4.3)由乙酸钠、氯化钠等组成，其乙酸钠浓度为0.05mol/L ，用乙酸调节pH 值至4.3，可以用于单克隆抗体的纯化等用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 IH0335 Storage 乙酸缓冲液(0.05mol/L,pH4.3) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CS0001
ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DC0032
Masson 三色染色液 DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 DF0135
多聚甲醛溶液(4% PFA) NA0030
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)。
实验室常用缓冲液配置方案1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：称量gTris置于1L烧杯中。
加入约800ml的去离子水，充足搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调理所需要的pH 值。
PH值浓HCl约70ml约60ml约42ml将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后，室温保留。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，由于Tris溶液的pH值随温度的变化差别很大，温度每高升1℃，溶液的pH值大概降低个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L配制方法：1.量取以下溶液，置于1L烧杯中。
1MTris－HClBuffer（，，）100ml500mMEDTA(PH8.0) 20ml向烧杯中加入约800ml的去离子水，平均混淆。
将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。
室温保留。
MTris-HCl(pH8.8)组份浓度：MTris-HCl配制量：1L配制方法：称量gTris置于1L烧杯中。
加入约800ml的去离子水，充足搅拌溶解。
用浓盐酸调理pH值至。
将溶液定容至1L。
高温高压灭菌后，室温保留。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，由于Tris溶液的pH值随温度的变化差别很大，温度每高升1℃，溶液的pH值大概降低个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量NaAc3H2O·置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调理pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml高温高压灭菌后，室温保留。
5)PBSBuffer组份浓度：137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量：1L配制方法：1.称量以下试剂，置于1L烧杯中。
NaCl 8gKClNa2HPO4KH2PO4向烧杯中加入约800ml的去离子水，充足搅拌溶解。
DNA凝胶电泳常用试剂配制DNA 的凝胶电泳1.琼脂糖凝胶电泳含不同量琼脂糖的凝胶的分离范围常用电泳缓冲液缓冲液使用液浓储存液（每升） Tris-乙酸（TAE ）1×:0.04mol/L Tris －乙酸0.001mol/L EDTA50×:242g Tris 碱 57.1ml 冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)Tris-磷酸（TPE ）1×:0.09mol/L Tris-磷酸0.002mol/L EDTA10×:108g Tris 碱15.5ml 85％磷酸（1.679g/ml ）40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)Tris-硼酸（TBE ）a0.5×:0.045 mol/L Tris-硼酸0.001mol/L EDTA5×:54g Tris 碱27.5g 硼酸20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)碱性缓冲液b1×:50mmol/L NaOH 1mmol/L EDTA1×:5ml 10mol/L NaOH2ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)a ．TBE 浓溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以往都以1×TBE 作为使用液（即1：5稀释浓贮存液）进行琼脂糖凝胶电泳。
但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。
目前几乎所有的琼脂糖凝胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶电泳使用的1×TBE ，是琼脂糖凝胶电泳时使用液浓度的2倍。
聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流通量通常较大，需要使用1×TBE 以提供足够的缓冲容量。
b. 碱性电泳缓冲液应现用现配。
凝胶中的琼脂糖含量〔％（w/v ）〕线状DNA 分子的有效分离范围（kb ）0.3 5－60 0.6 1－20 0.7 0.8－10 0.9 0.5－7 1.2 0.4－6 1.5 0.2－3 2.00.1－2凝胶加样缓冲液缓冲液类型6×缓冲液贮存温度Ⅰ0.25％溴酚蓝0.25％二甲苯青FF40%(w/v)蔗糖水溶液4℃Ⅱ0.25％溴酚蓝0.25％二甲苯青FF15％聚蔗糖（Ficoll）（400型；Pharmacia）水溶液室温Ⅲ0.25％溴酚蓝0.25％二甲苯青FF30％甘油水溶液4℃Ⅳ0.25％溴酚蓝40%(w/v)蔗糖水溶液4℃Ⅴ碱性加样缓冲液300mmol/L NaOH6mmol/L EDTA18%聚蔗糖（Ficoll）（400型；Pharmacia）水溶液0.15%溴甲酚绿0.25％二甲苯青FF4℃使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品浓度，以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利；含有在电场中能以可预知速率向阳极泳动的染料。
一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
