核苷(酸)类似物抗病毒治疗及其耐药机制的分子生物学

ＬＡＭ 的 影 响 ｌ ５ 。
△虹 Ａ Ｇ
Ｄ Ｎ Ａ ｐ ｏ ｌ 中碱 基 可 发 生 突 变 。 核 苷 类 似 物 （ Ｌ ＡＭ、 Ｌ ｄ Ｔ及 Ｅ Ｔ Ｖ
属 于 此类 ） 及核 苷 酸 类似 物 （ Ａ Ｄ Ｖ及 Ｔ Ｄ Ｆ属 于 此类 ） 两类 的碱 基
（ ｑ ｕ ａ ｓ ｉ ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｓ ） ［ １ ， 即在受遗传 变异 、 竞 争 及 选 择 作 用 影 响 的
Ｇ ｃ Ｇ， 查遗传密码表 ， 仍然 均为丙 氨酸 ， Ａ） 。无 生 物 学 及 临 床
意义 。
高 度 相关 但 不 完 全 相 同 的 变 异 株 和 重 组 基 因 组 组 成 的 动 态 簇 群 。 在未 接 受 Ｎ Ａ治疗 的患者 中， 野 生 株 占准 种 的绝 大 多 数 ，
ｕＨ Ｈ
ＡＴ Ｔ或 Ａ ＴＡ（ 异亮氨 酸） ， 写 做 Ｍ２ ０ ４ Ｉ ， 即 ＹＭＤ Ｄ 基 序 的
２ ’ 脱 曩３ 。 琉代 赡麓 嚏禳 警 （ 拉米走 定） 精Ｖ 薹棚 时的 井霹性 雇糟
臆穗 嚏脱 曩Ｉ 奎 苷 （ １ ｉ ｌ ｔ 臆营 ） ｝ 糟 ｖ ｌ 董捌 时的 天然 窟翱
图 ４ 拉 米 夫 定 与 胞 嘧 啶 脱 氧 核 苷 分 子 结 构 的 比较 （ 二） 碱 基 突 变 的两 种 形 式 ＝ １ 错义（ ｎ ｏ ｎ ｓ ｙ ｎ ｏ ｎ ｙ ｍｏ ｕ ｓ ） 变 异 碱 基 突 变 后 ＡＡ 随 之 发 生 改 变， 如后述的 ｒ ｔ Ｍ２ ０ ４ Ｖ／ Ｉ 变 异 。有 生 物学 及 临床 意 义 。 同义（ ｓ ｙ ｎ ｏ ｎ ｙ ｍｏ ｕ ｓ ） 变 异 虽 有 碱 基 突 变 但 Ａ Ａ 未 随之 发
基突变 。
４ ． ＥＴＶ ： ｒ ｔ Ｍ２ ０ ４ Ｖ／ Ｉ ，ｒ ｔ Ｌ１ ８ ０ Ｍ，ｒ ｔ Ｖ１ ７ ３ Ｌ， ｒ ｔ Ｉ １ ６ ９ Ｔ，
ｒ ｔ Ｔ１ ８ ４Ｇ ， ｒ ｔ Ｓ ２０ ２Ｉ ， ｒ ｔ Ｍ２ ５（ ） Ｖ。
以 上每 个 数 字 为 ｒ ｔ 的变异 位点 ， 每 个 数 字 前 的 英 文 字 母
ＹＩ Ｄ Ｄ变 异 。在 以上 变 异 之 一 的基 础 上 ， 若 同 时再 发 生 Ｌ （ 亮 氨 酸） １ ８ ０ Ｍ 或 ＶＩ ７ ３ Ｌ的变异 ， 则为辅 助变异 ， 辅 助 变 异 后 ＨＢ Ｖ 存活能力增强 ， 对 其他 ＮＡ 的后 续 治 疗 易 产 生 耐药 。 用 Ｌ ＡＭ 耐 药 变 异 后 序 贯 单 药 使 用 ＡＤ Ｖ或 Ｅ ＴＶ 后 可 选
生 改 变 。如 ｒ ｔ ｌ ８ １ 位点的 Ｇ Ｃ Ｔ（ 丙 氨酸 ， Ａ） 变为 Ｇ Ｃ Ｃ、 ＧＣ Ａ 或
择出 ｒ ｔ 多位 点 变 异 的多 重 耐 药 病 毒株 ｌ １ “ ］ 。
（ 四） ｒ ｔ 碱 基 突 变 后 为何 发 生耐 药 在 ＨＢ Ｖ 感 染 者 体 内常 形成 由 基 因 十 分 相 似 但 不 完 全 等 同 的 病 毒 株 组 成 的 准 种
（ 三） 碱 基 突 变 的 位 点
随 Ｎ Ａ治 疗 时间 的延 长 ， ｒ ｔ ／
耐 药 变 异 株在 患 者 使 用 ＮＡ 前 就 可 能 少 量 隐 匿 存 在 （ 预 存 耐 药） ， 也可 在 用 药 过 程 中产 生 ， 患 者 用 药 后 对 药 物 敏 感 的 野 生 株 受到抑制 ， 含 有 耐 药 变 异 的 病毒 株 以有 更 多 空 间进 行 复 制 ， “ 此 消彼长” 。当 对 某 一 药 物有 耐药 性 的病 毒 株 成 为 准 种 中 的 主 要 病毒株 时 ， 此 药 即 失 去 疗 效［ ５ ］ 。 当耐 药 突 变 株 达 到 准 种 的 ２ Ｏ 以上 时用 直 接 Ｐ Ｃ Ｒ对 ｒ ｔ 进 行测 序可 以检 出 ］ 。再 具 体 到 碱 基 突 变 后 发 生耐 药 的直 接 原 因 是 变 异 株 的 ｒ ｔ 影 响 到 ＮＡ 与 其结合 ， 如 Ｌ ＡＭ 治 疗 中 的 ｒ ｔ Ｍ２ ０ ４ Ｖ／ Ｉ 变异 ， Ｖ 和 Ｉ比 Ｍ 多 出 了一 个 ０甲基 ， 造成 Ｌ ＡＭ 结 合 位 点 的空 间 拥 挤 ， 从而使 Ｌ Ａ Ｍ 不能有效地与 ｒ ｔ 结合， 由此 ｒ ｔ Ｍ２ ０ ４ Ｖ／ Ｉ 变 异 株 的 复 制 不 再 受
是 未 变 异前 （ 野 生 株病 毒 ） ＡＡ 的 缩 写 ， 数 字 后 的英 文 字 母 是 变 异后（ 变异株病毒） ＡＡ 的 缩 写 。 Ｌ ＡＭ 引 起 的变 异 较 高 于 其 他 ＮＡ。 Ｅ ＴＶ 和 ＴＤ Ｆ 的基 因 屏障高 ， 其 ５年 的 基 因 变 异 累计 仅 为 １ ． ２ 和 ０ ］ 。Ｅ ＴＶ 治 疗 后 的 变 异 需 要 有 ３个 位 点 同 时 发 生 碱 基 突 变 ， 因 Ｌ ＡＭ 与 Ｅ Ｔ Ｖ存在交叉耐药位点 ， 故对 出现 ｒ ｔ Ｍ２ ０ ４ Ｖ／ Ｉ 等 位 点 变 异 者
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Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｈｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ，Ｎｏ ｖ ．２ ０１ ３， Ｖｏ １ ．１ ８， Ｎｏ ．１ １
利用病毒本身的 ｒ ｔ 进行的 ， 此酶 缺乏校正 活性 ， 例 如 子 链 合 成 碱 基 配 对互 补 时 本应 把 Ｇ 聚 合 添 加 上 去 ， “ 偶 然” 出 错 将 配 现 象 （ 反转 录失 真 ） 这 就 导致 了 碱
不主张换用 Ｅ ＴＶ。
Ｌ ＡＭ 引 起 的 碱基 突变 主要 见 于 ｒ ｔ 第 ２ ０ ４位 点 Ａ Ａ上 ， 即
脱
ＡＴ Ｇ（ 甲硫 氨 酸 ， Ｍ） 中 的 Ａ 变 成 Ｇ， Ａ Ｔ Ｇ— Ｇ ＴＧ（ 缬 氨酸 ， Ｖ） ，
写 做 Ｍ２ ０ ４ Ｖ， 即 ＹＭＤ Ｄ基序 的 Ｙ ＶＤ Ｄ变异 ； 或 ＡＴ Ｇ— ＡＴ Ｃ，