抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者调节性T细胞影响的研究进展

中国当代医药２０１５年８月第２２卷第２３期　・综　述・　抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者调节性Ｔ细胞　影响的研究进展‘　牟花妮　蒋玉凤　泸州医学院附属医院感染消化科．四川泸州６４６０００　【摘要】慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗在抑制病毒复制的同时也影响机体免疫功能。调节性Ｔ细胞为体内具有免　疫调节功能的Ｔ细胞亚群，能抑制ＨＢＶ感染者特异性Ｔ细胞反应。研究慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗对调节性　Ｔ细胞数量及功能的影响，可以为探索更理想的免疫学指标来评价抗病毒应答反应，治疗效果，预测治疗终点、　停药后复发，疾病预后等打下基础，也可能为慢性乙型肝炎患者制订更优化的抗病毒治疗策略确定方向。　【关键词】慢性乙型肝炎；抗病毒治疗；调节性Ｔ细胞　一　【中图分类号】Ｒ５１２．６２　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７４—４７２１（２０１５）ｏ８（ｂ）一００１５—０４　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｏｎ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ＭＯＵＨｕａ－ｎｉ　ＪＩＡＮＧ　Ｙｕ币，　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ，ｔｈｅ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｌｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｌｕｚｈｏｕ　６４６０００，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｖｉｒａｌ　ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｌｓｏ　ｈａｓ　ｓｏｍｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｂｏｄｙ　Ｓ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ，ａ　ｓｕｂｓｅｔ　ｏｆ　Ｔ　ｃｅＵｓ，ｈａｓ　ａｎ　ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｓｐｅ－　ｃｉｆｉｃ　Ｔ　ｃｅｌｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｉｎ　ＨＢＶ　ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ｔｈｅｒａｐｙ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｏｎ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｃａｎ　ｌａｙ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｐｒｏｂｉｎｇ　ｉｎｔｏ　ｍｏｒｅ　ｉｄｅａｌ　ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ　ｉｎｄｉｃａ—　ｔｏｒｓ　ｔｏ　ａｓｓｅｓｓ　ｔｈｅ　ａｎｔｉ－ｖｉｒａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｅｆｆｉｃａｃｙ，ｐｒｅｄｉｃｔ　ｔｈｅ　ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｆｔｅｒ　ｃｅａｓｉｎｇ　ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ，ｄｉｓｅａｓｅ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ，ａｎｄ　ｍａｙ　ａｌｓｏ　ｐｏｉｎｔ　ｏｕｔ　ｔｈｅ　ｄｉｒｅｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｍｏｒｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ　ｏｆ　ａｎ—　ｔｉｖｉｒａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ；Ａｎｔｉｖｉｒａｌ　ｔｈｅｒａｐｙ；Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ　乙型肝炎仍是威胁人类健康的公共卫生问题。目　前全球约有４亿乙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　ｖｉｒｕｓ。　ＨＢＶ）感染者．每年约有１００万人死于乙型肝炎所致　的肝衰竭、肝硬化及肝癌［１］。有效的抗病毒治疗能通过　抑制ＨＢＶ复制。阻止肝损害向肝硬化、终末期肝病、　肝细胞肝癌及死亡发展，从而提高患者的生活质量及　生存率嘲。调节性Ｔ细胞（ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌ，Ｔｒｅｇ）为体　内具有免疫调节功能的Ｔ细胞亚群，能抑制Ｔ细胞　增殖及炎性免疫反应［３１，与自身免疫病等多种疾病有　密切联系。其数量和功能可作为评价机体免疫功能状　态的指标嗍。Ｔｒｅｇ能抑制ＨＢＶ感染者特异性Ｔ细胞反　应［５１，影响慢性乙型肝炎（ｃｈｒｏｎｉｃ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ，ＣＨＢ）的　自然进程及治疗反应，过度激活的Ｔｒｅｇ导致ＨＢＶ持　续感染。并可导致肝细胞肝癌的发生［饲。这可能是通过　Ｔｒｅｇ—Ｔｅｆｆ细胞间接触、分泌白介素（ＩＬ）一１０和转化生　通讯作者　长因子（ＴＧＦ）一１３及抑制抗原递呈细胞（ＡＰＣｓ）的功　能　１等机制发挥作用。目前ＣＨＢ患者抗ＨＢＶ治疗　仍存在诸多问题。近年来有不少研究表明，Ｔｒｅｇ在　ＨＢＶ感染及抗病毒治疗中扮演着重要角色，本文就　近几年国内外有关ＣＨＢ患者抗病毒治疗对Ｔｒｅｇ影　响的研究做一综述。　１　Ｔｒｅｇ的研究概况　根据来源和特征不同，Ｔｒｅｇ可分为天然调节Ｔ细　胞（ｎａｔｕｒａｌｌｙ　ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ　Ｔｒｅｇｓ，ｎＴｒｅｇ）和诱导调节Ｔ细　胞（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　Ｔｒｅｇｓ，ｉＴｒｅｇ）ｔ“１。ｎＴｒｅｇ在胸腺中发育成　熟，ｉＴｒｅｇ在外周淋巴组织或体外ＩＬ一２和ＴＧＦ—Ｂ存　在下由ｎａｒｖｅ细胞转化而来。ｎＴｒｅｇ和ｉＴｒｅｇ都能够保　持机体内环境稳定，目前还没有公认的区分两者的方　法，神经纤毛蛋白只表达于ｎＴｒｅｇ表面，可能为鉴别　两者最可靠的标　心】。现研究最多的Ｔｒｅｇ为ＣＤ４　ＣＤ２５ｑ＇ｒｅｇ，后者表达ＣＴＬＡ一４、ＰＤ一１、ＧＩＴＲ、ＣＤ１０３、　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．２２　Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ　２０１　

５潮嘲　・综　述・　ＣＤ３９及叉头状转录因子３（ｆｏｒ￣ｈｅａｄ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃ—　ｔｏｒ　３，Ｆｏｘｐ３）为等多种分子。Ｆｏｘｐ３基因是控制Ｔｒｅｇ发　育及功能的关键基因【堋，编码一种独特的胞内蛋白——　Ｆｏｘｐ３．这是ＣＤ４　ＣＤ２５￣Ｔｒｅｇ最特异的标志。Ｔｒｅｇ分泌　ＩＬ一１０、ＴＧＦ一８及ＩＬ一３５等细胞因子，ＩＬ一１０在ｉＴｒｅｇ　发挥免疫抑制功能时不可或缺，ＴＧＦ—ｐ和ＩＬ一３５可直　接抑制效应性Ｔ细胞的增殖和功能【　。既往多以ＣＤ４　ＣＤ２５￣Ｆｏｘｐ３＋作为Ｔｒｅｇ的特异性标志，但少部分　ＣＤ８＋细胞也表达Ｆｏｘｐ３ｔ嘲，经Ｆｏｘｐ３标记得出的Ｔｒｅｇ　数目较ＣＤ２５￣Ｔ细胞少。且Ｆｏｘｐ３为胞内蛋白，检测　过程需要将细胞固定穿孑Ｌ。不能用于进一步培养和研　究，近年来认为ＣＤ４＋ＣＤ２５ｑ＇ｒｅｇＣＤ１２Ｔ￣ｗ／－是Ｔｒｅｇ更理　想的检测标志『ｌ６１。　２抗病毒治疗及其效果现状　目前抗ＨＢＶ的药物有核苷（酸）类似物（ＮＡｓ）和　干扰素（ＩＦＮ）两大类。临床上用于抗ＨＢＶ的ＮＡｓ有　拉米夫定（Ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ，ＬＡＭ）、替比夫定（Ｔｅｌｈｉｖｕｄｉｎｅ，　ＬＤＴ）、阿德福韦酯（Ａｄｅｆｏｖｉｒ，ＡＤＶ）、恩替卡韦（Ｅｎｔｅ．　ｃａｖｉｒ。ＥＴＶ）和替诺福韦（Ｔｅｎｏｆｏｖｉｏｒ，ＴＤＦ），这类药物　均作用于ＨＢＶ聚合酶，对ＨＢＶ—ＤＮＡ复制有很强的抑　制作用㈣。用于抗ＨＢＶ的ＩＦＮ有普通干扰素（ＩＦＮｏｔ）　和聚乙二醇干扰素（ｐｅｇｌＦＮａ），ＩＦＮ抑制ＨＢＶ的同时　具有持久的免疫调节作用，ＨＢｅＡｇ（＋）患者有机会在　有限的疗程（４８周）后获得停药后持续的应答效果［１８］。　现阶段抗ＨＢＶ治疗仍存在诸多问题：治疗药物　种类局限【ｔ９１；ＮＡｓ抑制ＨＢＶ复制作用是可逆的，肝细　胞内ｃｃｃＤＮＡ难以彻底耗竭，停药后残存的ｃｃｃＤＮＡ　又可开始复制［２０１：ＩＦＮｃ￣抗ＨＢＶ感染禁忌证及不良反　应较多，抑制ＨＢＶ复制的能力较弱；ＮＡｓ抗ＨＢＶ治　疗疗程长，无理想的停药指标［２１］，无明确的治疗终点，　易产生耐药　。停药后有复发的风　∞　；目前无更理想　的预测抗病毒应答反应和停药复发的指标。　３　Ｔｒｅｇ与ＨＢＶ感染及抗病毒治疗的相关性　近年来，不少研究者发现ＣＨＢ患者体内Ｔｒｅｇ具　有特征性变化，抗病毒治疗在抑制ＨＢＶ复制的同时　对Ｔｒｅｇ及其相关细胞和分子亦产生了一定的影响，　并认为Ｔｒｅｇ可能在抗病毒治疗应答反应、停药后复　发的预测等方面有一定的临床价值。　３．１抗病毒前后Ｔｒｅｇ变化与ＨＢＶ—ＤＮＡ载量的关系　Ｙａｎ等【２４】发现ＣＨＢ患者外周血ＣＤ４　ＣＤ２５ｑ＇ｒｅｇ　ＣＤ１２７１０＂细胞比例及Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ水平均较健康对　照组明显升高，经ＬＤＴ治疗２４周，上述指标下降至　正常．与ＨＢＶ—ＤＮＡ下降呈正相关。Ｚｈｅｎｇ等　也有类　鞫　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．２２　Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ　２０１　５　中国当代医药２０１５年８月第２２卷第２３期　似发现。Ａｒａｓｌｉ等［２６１在研究ＴＤＦ对ＣＨＢ患者外周血淋　巴细胞及病毒载量的影响时发现，治疗４８周后外周　血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋ｎＴｒｅｇ及病毒载量均明显下降，高　病毒载量的患者外周血Ｔｒｅｇ基线水平也有所升高；　经有效的ＴＤＦ抗病毒治疗，随着ＨＢＶ—ＤＮＡ的清除，　Ｔｒｅｇ水平明显降低。Ｃｈｅｎ等　】在研究ＣＨＢ患者经　ＡＤＶ及ＥＴｖ治疗效果及患者免疫应答时发现．较未　抗病毒的患者相比，经９６周抗病毒治疗的患者外周　血Ｔｒｅｇ水平明显降低．并与ＨＢＶ—ＤＮＡ的下降成正　相关．ＥＴＶ治疗组Ｔｒｅｇ水平下降至与健康对照组同　一水平。故推测抗病毒治疗降低ＨＢＶ—ＤＮＡ水平与体　内Ｔｒｅｇ有关。可能是抗病毒效应能显著下调外周血　Ｔｒｅｇ比例．从而间接影响了免疫系统。而Ｘｕ等［２８１检测　了经ＩＦＮｃ￣治疗前后ＣＨＢ患者外周血Ｔｒｅｇ比例。发　现Ｔｒｅｇ水平与ＨＢＶ—ＤＮＡ、ＡＬＴ及ＨＢｅＡｇ水平无明　显关系。　３．２　Ｔｒｅｇ与抗病毒治疗应答反应及远期疗效的关系　Ｍａ等［２９】发现经ｐｅｇｌＦＮｏｔ治疗的ＣＨＢ患者中，应　答者Ｆｏｘｐ３ｑ＇ｒｅｇ比例降低并在随访中持续保持低水　平．而无应答者仅有轻度降低并在停药后再次升高。　Ｘｕ等　发现经ＩＦＮｏｔ治疗２４周后应答者ＣＤ４＋ＣＤ２５　ＣＤ１２７１￣￣－Ｔｒｅｇ比例显著降低．无应答者治疗前后Ｔｒｅｇ　无明显变化。但　Ｓｐｒｅｎｇｅｒｓ等　报道对ＩＦＮｃｔ无反应的　ＣＨＢ患者体内Ｔｒｅｇ增高。Ｐａｎ等［３　研究显示，ＬＤＴ治　疗ＣＨＢ患者后外周血Ｔｒｅｇ占ＣＤ４　Ｔ细胞比例逐渐　下降．其中发生ＨＢｅＡｇ血清学转换者在治疗早期　Ｔｒｅｇ比例即降至正常人水平。可认为治疗后Ｔｒｅｇ频　率降低可能与患者对抗病毒药物有较好的应答有关；　抗病毒治疗过程中ＣＨＢ患者体内Ｔｒｅｇ的变化可能　对ＨＢｅＡｇ血清转换具有预测价值；治疗早期Ｔｒｅｇｓ比　例下降的患者ＨＢｅＡｇ血清学转换的可能性更高。　３．３抗病毒治疗对Ｔｒｅｇ相关细胞及分子的影响　人体的免疫系统为一复杂的平衡体。抗　ＨＢＶ引　起Ｔｒｅｇ的变化必然与其他细胞及分子的变化有关。　Ｓｈｅｒｍａｎ等同研究显示，ＣＨＢ患者外周血表达ＰＤ一１的　Ｔｒｅｇ的比例增高。ＡＤＶ治疗后ＨＢＶ—ＤＮＡ及外周血　ＰＤ—ｌ＋Ｔｒｅｇ比例降低．而体外实验证实，阻断ＰＤ一１能　够增强ＨＢＶ特异性ＣＤ８Ｃｒ细胞的免疫反应。Ｚｈａｎｇ　等［３２１在研究抗病毒治疗对ＣＨＢ患者外周血Ｔｒｅｇ／Ｔｈｌ７　的影响时发现ＣＨＢ患者外周血Ｔｒｅｇ频率在基线水　平与健康对照组无明显差异，而Ｔｈｌ７明显增高。经　ＥＴｖ治疗．Ｔｒｅｇ在前６个月逐渐降低．Ｔｈ１７在开始治　疗即逐渐升高．治疗１个月时Ｔｈｌ７升至最高，