序号科研热词推荐指数序号科研热词1表达141cdna文库2序列分析142rna干扰3原核表达133克隆4克隆114基因克隆5cdna文库115基因表达6真核表达载体106真核表达7rna干扰107序列分析8基因表达98原核表达9基因99生物信息学10启动子810表达11质粒711抑制性消减杂交12绿色荧光蛋白512基因13真核表达513启动子14基因突变514载体构建15分子克隆515转染16融合蛋白416融合蛋白17组织构建417突变18线粒体dna418表达序列标签19突变419真核表达载体20水稻420构建21构建421报告基因22sirna422慢病毒载体23釉原蛋白323多态性24载体构建324基因组25转染325rnai26表达载体326铜绿假单胞菌27表达序列标签(est)327遗传载体28表型328载体29腺病毒329转录因子30结核分枝杆菌330质粒31癌,肝细胞331致病性32生物信息学332系统发育33日本血吸虫333真核表达质粒34基因表达调控334慢病毒35免疫原性335小鼠36骨骺干细胞236基因治疗37骨形态发生蛋白质类237基因水平转移38锌指蛋白238变应原39铜绿假单胞菌239乙型肝炎病毒40重组质粒240丙型肝炎病毒41重组表达241shrna42重组融合蛋白质类242est43重组融合蛋白243重症肌无力44重组慢病毒载体244遗传多态性45重症肌无力245赖草属46重复序列246表达载体47遗传载体247荧光原位杂交48遗传多样性248花鳗鲡49遗传分化249自身抗原50逆转录病毒载体250肿瘤坏死因子-α51过氧化物酶体增殖子活化受体γ251肺炎克雷伯菌52表位252肝细胞2008年2009年53萤光素酶报告基因253肝炎病毒54自身抗原254肝炎,自身免疫性55自杀基因255绿色荧光蛋白56腺病毒载体256结核分枝杆菌57肿瘤坏死因子-α257细胞增殖58肾细胞癌258细胞凋亡59肾组织特异性启动子259粉尘螨60肺肿瘤260短发夹rna61肝炎病毒,乙型261癌,肝细胞62聚合酶链反应262癌63缺血再灌注损伤263病毒64结缔组织生长因子264猬草属65纯化265牛66系统树266比较基因组分析67系统发育267核蛋白质类68童虫268整合酶69突变体269拟南芥70稳定转染270山羊71生长激素基因271基因重组72猪瘟病毒272基因组岛73牛瑟氏泰勒虫273基因突变74牛274基因敲除75测序275基因岛76氯化镉276去唾液酸糖蛋白受体77棉铃虫多核衣壳型多角体病毒277原核表达载体78核衣壳蛋白基因278功能分析79杀虫活性279分子标记80未成熟树突状细胞280促性腺激素释放激素81抗病基因281伪狂犬病毒82抗原性282乙型83抗体283zα84感染284pkz85序列变异285pcr-sscp86序列286nirf基因87幽门螺杆菌287hepg2细胞88干细胞288黑斑狗鱼89小分子干扰rna289鹅新城疫病毒90大肠杆菌290鸭乙型肝炎病毒91基因转染291鸡福氏志贺菌92基因治疗292鸡法氏囊cdna文库93基因打靶293鸡传染性支气管炎病毒94同源重组294鸡传染件法氏囊病毒95同源性分析295鳜(siniperca chutasi)96卵巢肿瘤296鳜97功能297鲫鱼囊胚细胞98免疫筛选298鲫鱼99伪狂犬病病毒299鲨鱼肝100人遗传病2100鲨烯合酶基因101survivin基因2101鲍曼不动杆菌102rnai2102鲈103p332103高通量筛选104nanog2104高通量测序105klk1基因2105高迁移率族蛋白106gpx1基因2106高血压,肺性
禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军
【摘 要】为制备能够区分禽白血病A亚群和J亚群病毒的单克隆抗体,将J亚群病毒gp85基因构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的禽白血病J亚群GP85融合蛋白,用复性纯化的融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠.4次免疫后取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得1株稳定分泌针对GP85蛋白的杂交瘤细胞株,命名为3B6.经间接ELISA测定,小鼠腹水效价为6.4×105,亲和力解离常数(kD)为2.18×10-9,这株单抗的亚型为IgG1.通过Western Blot和IFA实验证实该株单抗是针对J亚群病毒蛋白GP85的特异性抗体.初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于GP85蛋白N端的1-50位氨基酸.该株单抗的制备为ALV-J病毒抗原检测以及致病机理的研究奠定了基础.
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2015(051)011
【总页数】5页(P23-26,29)
【关键词】禽白血病病毒;GP85;单克隆抗体
【作 者】王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军
【作者单位】中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193
【正文语种】中 文
【中图分类】S852.65+9.3
J亚群禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一类以生长抑制、免疫抑制和骨髓细胞癌变为特征的传染性肿瘤性疾病[1]，主要引起肉鸡的骨髓细胞瘤[2]。J亚群禽白血病自1988年首次发现以来在世界范围内广泛传播[3]。经垂直传播感染的雏鸡容易发生免疫抑制，降低其对其他病原的抵抗力和疫苗的免疫效果，引起更严重的危害[4]。
《中外医学研究》第19卷 第2期（总第478期）2021年1月 综 述 Zongshu
- 189 -*基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项项目（2019ZX09732002）①荣昌生物制药（烟台）股份有限公司 山东 烟台 264006 通信作者：姚雪静以Trop-2为靶标的抗肿瘤研究进展* 杨黎娜① 姚雪静① 【摘要】 Trop-2是一种跨膜糖蛋白，在多种肿瘤细胞中异常表达，作为细胞内钙信号的传递者参与多种肿瘤发生相关的细胞信号传导途径。以Trop-2为靶点的抗肿瘤药物主要是抗体药物偶联物，具有广阔的研究前景。本文针对Trop-2的作用机制、在不同肿瘤中的表达与功能，以及以Trop-2为靶标的抗肿瘤药物研究进行了综述。 【关键词】 Trop-2 靶向药 抗肿瘤 抗体-药物偶联物 doi：10.14033/ki.cfmr.2021.02.074文献标识码 A文章编号 1674-6805（2021）02-0189-03 Research Progress of Anti-tumor Drugs Targeting Trop-2/YANG Lina, YAO Xuejing. //Chinese and Foreign Medical Research, 2021, 19(2): 189-191 [Abstract] Trop-2 is one kind of transmembrane glycoprotein, and abnormally expressed on a variety of tumor cells. As a transmitter of intracellular calcium signal, Trop-2 is involved in tumor cell signaling pathways related to tumorigenesis. Most of anti-tumor drugs targeting Trop-2 are antibody-drug conjugates, which have broad research prospects. In this paper, the mechanism of action, expression and function of Trop-2 in different tumors, as well as the research of anti-tumor drugs targeting Trop-2 are reviewed. [Key words] Trop-2 Targeted drug Anti-tumor Antibody-drug conjugates First-author’s address: RemeGen Co., Ltd, Yantai, Yantai 264006, China Trop-2是一种以TACSTD2基因编码表达的细胞表面糖蛋白，为单次跨膜蛋白。Trop-2的一级结构是由323个氨基酸组成的36 KD肽，由一个细胞质尾部、胞外结构域、疏水性前导肽和一个跨膜结构组成[1]。Trop-2主要在上皮细胞中表达，正常情况下的表达量很低。Trop-2在胚胎器官的发育过程中起着重要的作用，但同时，它也是一种与恶性肿瘤的发生、侵袭和转移有关的癌基因，在乳腺癌、结肠癌、甲状腺乳头状癌、结肠癌、食管鳞状细胞癌等多种恶性肿瘤中过度表达。目前，研制以Trop-2为靶点的分子靶向药物已经成为肿瘤临床研究的热点。1 Trop-2介导的肿瘤细胞增殖和转移 目前，Trop-2介导的信号转导机制还没有被完全弄清楚，但是Trop-2可以通过调节细胞周期蛋白表达、钙离子相关信号途径和减少纤维粘连蛋白的黏附，支持肿瘤细胞的生长、转移和增殖。Trop-2细胞质结构域含有一个与蛋白激酶C磷酸化位点重叠的序列，磷脂酰肌苷4，5-二磷酸（PIP2）可以调节Trop-2钙信号转导的磷酸化，因此，Trop-2参与了一些与肿瘤发生有关的分子途径，在肿瘤的发生、发展中起着重要作用[2]。 Trop-2的过度表达增加了肿瘤细胞的侵袭性，当敲除Trop-2基因后，则降低了肿瘤细胞的侵袭性；Trop-2还可以通过ERK途径进行过度表达从而引起癌细胞侵袭，并且其在某些肿瘤中可以诱导金属基质蛋白酶（matrix metalloproteinase 2，MMP-2）。Zhao等[3]的试验显示，TNF-α通过ERK1/2途径上调Trop-2，来增强结肠癌细胞的侵袭，这一数据也支持了Trop-2通过ERK途径下调MMP-2在癌细胞侵袭中发挥作用的观点。Trerotola等[4]的研究指出，Trop-2和α5β1整合素通过它们的细胞外结构域缔合，从而调节α5β1相关的分子黏附；此外，Trop-2还可以调节Rac1 GTP酶活性并诱导PAK4活化，从而促进前列腺癌细胞迁移。2 Trop-2在不同肿瘤中的表达与功能2.1 宫颈癌 通过免疫沉淀方法和蛋白质亲和力测定方法，研究者检测了Trop-2与胰岛素样生长因子-1受体（insulin1ike growth factors-1 receptor，IGF-1R）及渐变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）配体之间的蛋白质相互作用，结果表明，Trop-2的过表达显著抑制宫颈癌细胞的致癌性，而敲除Trop-2则显示相反的效果。由此说明Trop-2通过双重抑制IGF-1R和ALK信号传导，在宫颈癌中表现出肿瘤抑制功能[5-6]。2.2 乳腺癌 相当数量的Trop-2以广泛异质的方式保留在乳腺癌肿瘤细胞内，Trop-2的信号功能可通过抗体介导的细胞表面分子交联或通过膜内切割激活[7]。表明这是Trop-2功能调节的一部分。研究发现细胞膜定位和成熟糖基化的Trop-2与癌症患者生存率的降低有关，而细胞内滞留的Trop-2与疾病复发率的降低和生存率的提高有关[8]。采用抗Trop-2抗体免疫组化方法证明，Trop-2激活状态是乳腺癌肿瘤进展的关键决定因素，是乳腺癌患者生存的有力指标。2.3 前列腺癌 Xie等[9]提出高Trop-2表达可在雄激素敏感和雄激素非依赖性前列腺肿瘤中识别出不同的细胞亚群，并且它可能是雄激素敏感肿瘤中前列腺癌（PCa）治疗反应的预测性生物标志物。 Trop-2通过其胞外结构域和α5β1整合素缔合，从而导致α5β1相关的分子从黏着斑重新定位到前沿，并通过调节Rac1 GTPase活性来增强定向前列腺癌细胞的迁移[10-12]。 Trerotola等[13]发现Trop-2在PCa细胞中促进α5β1整合素依赖性转移信号通路，并且Trop-2表达的改变可用于鉴定早综 述 Zongshu 《中外医学研究》第19卷 第2期（总第478期）2021年1月
序号科研热词推荐指数序号科研热词1原核表达21重组腺病毒2重组蛋白质类12锚定3遗传载体13链亲和素4转基因14载体构建5质拉15质粒构建6表面展示16质粒7表达载体17融合蛋白8融合表达18融合基因9融合蛋白19蝎毒素10蝎毒活性肽110蛋白纯化11绿色荧光蛋白基因111腺病毒12细胞毒性112肿瘤免疫13细胞凋亡113肿瘤14神经组织蛋白质类114肝肿瘤15真核表达载体115碱性磷酸酶16癌胚抗原116真核表达质粒17溶细胞素117白细胞介素218气味结合蛋白118现代空间19核蛋白质类119猪繁殖与呼吸综合征病毒20构建120活性21杭廷顿病121氧依赖性降解结构域22杆状病毒表达系统122核苷二磷酸激酶23杆状病毒123抗原,cd4024抗肿瘤缬精甘肽124弓形虫25工蜂触角125家蚕26可溶性表达126基因融合27创伤弧菌127基因克隆28信号肽融合蛋白的生物活性128地域性气候29伪病毒129可溶性30人表皮生长因子130口蹄疫病毒31人ecv304细胞131原核表达32乳头状瘤病毒132单链抗体33中华蜜蜂133免疫效应34东亚钳蝎134传统建筑35不定根135乙型肝炎36t淋巴细胞136rop2-p3037rvvha137rantes38ni2+螯合层析138pdc316质粒39hnp-1139iptg诱导40dsba140il-1841cd40ig141gpi融合蛋白42cd13单链抗体142e.coli origami(de3)43caspase143e.coli bl21(de3)44cd40配体45cd1346bmawd基因47agap48accb49accase502a多肽2008年2009年
