结核病实验室诊断技术综合应用
- 格式:ppt
- 大小:4.93 MB
- 文档页数:42


结核病(tuberculosis, TB)是结核分枝杆菌(mycoba-cterium tuberculosis,MTB)感染引起的呼吸道传染病,目前该病疫情依然严峻。
据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)估计,2017年全球结核病新发病例数为1 000万例,中国有88.9万例;全球有157万人死于结核病;全球23%的人口(约17亿)存在潜伏结核感染[1]。
结核分枝杆菌属胞内寄生菌,其免疫主要是以T细胞为主的细胞免疫,这也是结核病诊断的困难所在。
控制结核病的关键在于控制传染源,高特异度和高灵敏度的早期诊断技术及试剂对结核病的早期诊断,及时有效治疗,有效切断传染源,控制疾病流行至关重要。
当前结核病的众多诊断方法或多或少存在缺陷。
传统的痰涂片镜检灵敏度低,而分离培养法鉴定菌种及药敏结果所需时间较长(4~6周)[2]。
病理学检查取材不易、灵敏度低且鉴别诊断困难。
结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test,TST)虽简便廉价,但其使用的抗原——结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)与卡介苗(bacille Calmette-Guérin,BCG)和非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)之间存在交叉反应,特异度较低;TST依赖人体的免疫反应,对免疫受损人群灵敏度不足[3];且TST耗时较长(48~72 h),易受操作者主观因素影响。
γ-干扰素释放试验(interferon gamma release assay,IGRA)作为一种新兴免疫学诊断方法,在控制结核感染及发病等方面得到迅速推广,且随着新的生物学标志物的寻找和IGRA方法学的改进,其在临床上具有广阔的发展前景。
1 IGRA原理和方法结核分枝杆菌中存在独有的“RD1”区域,医学界利用该基因区编码的抗原多肽作为特异性抗原,主要有早期分泌抗原靶分子6(early secreted antigenic target 6,ESAT-6)和培养滤液蛋白10(culture filtrate protein 10,CFP-10),有些产品在此基础上增加了TB7.7抗原多肽,体外刺激机体特异性效应T淋巴细胞,通过酶联免疫吸附试验或酶联免疫斑点试验(ELISA或ELISPOT)定量检测所释放的γ-干扰素水平,进而判定是否存在MTB,这便是IGRA的原理。
摘要:早期确诊和提高治愈率是控制结核病的现实目标。
结核病患者的发现率基本反映结核病发病趋势,而诊断技术决定了结核病患者的发现率水平。
当前对结核病的诊断主要依赖于患者的临床表现、影像学、病原学、血清抗体检测等技术。
近年来,结核病实验室诊断技术发展突飞猛进,然而,目前很多实验室对于结核病的诊断仍停留在痰涂片镜检、痰结核菌培养及PPD皮试等传统方法。
本文现将具有代表性的几项结核病实验室诊断新技术的进展进行综述。
关键词:结核分枝杆菌;实验室;诊断中图分类号R378.91+1,R52文献标识码A文章编号1674-1129(2012)06-0570-03doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2012.06.017·综述·结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)引起的结核病是常见的人类传染病之一。
约三分之一的世界人口曾经感染MTB,亚洲地区感染者占全世界的三分之二。
据WHO估计,2007年全球约有927万新发结核患者,175万人死于结核病,中国是全球22个结核病高发国之一,发病人数130万,居世界第2位,仅次于印度[1,2]。
结核病的实验室诊断是发现传染源的主要途径和手段,是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据,长期以来,结核病的实验室诊断主要依赖细菌学涂片和培养检查。
由于方法所限,严重影响了结核病的及时诊断,因此建立检测快速、灵敏度高、特异性强的诊断方法,对于结核病防治工作具有重要意义[3]。
现将近年来结核病实验室检测技术的进展综述如下。
1结核病病原菌检测技术1.1抗酸杆菌涂片镜检1.1.1萋-尼氏抗酸染色涂片萋-尼抗酸染色涂片镜检是经典的结核分枝杆菌检测方法,目前很多实验室仍然依靠此方法进行结核检测,但其灵敏度较低,仅20%~30%,而且此方法繁琐,假阳性和假阴性较高。
张立群对比了4种不同结核分枝杆菌检测方法,显示萋-尼抗酸染色涂片的阳性率为11.6%,灵敏度仅为26.3%[4]。