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AYL-S7-335 粪便标本细菌学检验标准操作规程3.0

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安徽医科大学第一附属医院检验科

作业指导书 文件编号: AYL-S7-335

版本:3.0 页码: 第1页 共3页

编写者：沈继录 审核者： 批准人： 生效日期：2012.1.1

文件发放范围：微生物组

文件年度审核

审核者： 审核者： 审核者： 审核者：

日期： 日期： 日期： 日期：

粪便标本细菌学检验标准操作规程

1．目的

规范粪便标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。

2．适用范围

粪便培养。

3．标本

3.3.1 标本类型 粪便、直肠拭子。

3.2 标本采集

3.2.1 自然排便采集 自然排便后，挑取其脓血、黏液部分2～3 g，液体粪便取絮状物2～3 ml，盛于灭菌容器内，或置于保存液(运送培养基)、增菌培养基中送检。

3.2.2 直肠拭子 如不易获得粪便时，或排便困难病人及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插入肛门内4～5 cm（幼儿 2～3 cm)轻轻转动取出，插入卡一布(Cary—Blair)运送培养基内或无菌容器内送检。

3.2.3 粪便标本应该立即送检，室温保存不能超过2小时，如不能及时送检可以放人磷酸盐甘油(pH 7 0)或转运培养基，但不能超过24小时。培养艰难梭菌的标本保于-20℃以下。培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。保存弯曲杆菌和弧菌的标本，需加CaCl2(100mg／L)试剂。

3.3 标本拒收标准

3.3.l 粪便标本放置时间超过2小时。

3.3.2 送检的粪便标本混有尿液。3．3 3直肠拭子未置于运送培养基中。

4．试剂、仪器

4.1 革兰染液、氧化酶试剂、麦康凯平板、SS平板、TCBS平板及相关生化试剂等。 安徽医科大学第一附属医院检验科

作业指导书 文件编号: AYL-S7-335 版本:3.0 页码: 第2页 共3页

4.2 VITEK鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。

4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、C02培养箱等。

4.4诊断血清。

5．细菌鉴定和药敏质控

参见《质量管理程序》。

6．检验步骤

接收标本后，立即对标本进行编号、登记。

6.1 涂片检查 粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辨是否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。只有怀疑霍乱弧菌及菌群失调所致腹泻时，才作直接涂片检查(观察动力和菌群比例)。

6.2 培养

6.2.1 沙门志贺菌培养 参见《沙门菌属检验标准操作规程》、《志贺菌属检验标准操作规程》。

6.2.2 致病性大肠埃希菌培养 参见《致病陛大肠埃希菌检验标准操作规程》。

6.2.3 霍乱弧菌培养 参见《霍乱弧菌检验标准操作规程》。

6.2.4 副溶血弧菌培养 参见《副溶血弧菌检验标准操作规程》。

6.2.5 小肠结肠炎耶尔森菌培养 参见《耶尔森菌属检验标准操作规程》。

6.2.6 空肠弯曲菌培养 参见《弯曲菌属检验标准操作规程》。

6.2.7 金黄色葡萄球菌培养 参见《葡萄球菌属检验标准操作规程》。

6.2.8 艰难梭菌培养 取水样或黏液样粪便立即接种于环丝氨酸头孢西丁果糖琼脂(简称CCFA)平板上，并将粪便作10^2～10^6稀释后定量接种。35℃厌氧环境下培养48小时后，选择粗糙型黄色菌落，移种于葡萄糖庖肉培养基作毒素测定；同时制涂片，悬滴检查动力、革兰染色及生化鉴定。

6.2.9 真菌培养 参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。

6.2.10 气单胞菌和邻单胞菌的培养 参见《气单胞菌属检验标准操作规程》和《邻单胞菌属检验标准操作规程》。

6.2.11 结核分枝杆菌培养 参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》。 安徽医科大学第一附属医院检验科

作业指导书 文件编号: AYL-S7-335 版本:3.0 页码: 第3页

共3页

7．操作流程

粪便或肛拭

根据临床需求

需氧培养

分离致病性大

SS，XLD或HE平板 分离弯曲菌 分离弧菌 肠埃希菌O157

35℃培养18～24h

观察菌落特征 Campy-BA平板，35℃ TCBS平板 山梨醇麦

涂片，染色 微需氧培养48 h 康凯平板

双糖铁或三糖铁 观察菌落特征 观察菌落特征及、

涂片、染色 涂片、染色

血清学鉴定 血清学鉴定

仪器或手工细菌 仪器或手工细菌 仪器或手工细菌

鉴定及药敏试验 鉴定及药敏试验 鉴定及药敏试验

发出报告 发出报告 发出报告

安徽医科大学第一附属医院检验科

作业指导书 文件编号: AYL-S7-335 版本:3.0 页码: 第4页 共3页

文件更改记录

修改后版本 更改概述 批准人 生效日期

3.0 增加“文件更改记录” 2012.1.1

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细菌性痢疾粪便标本检验的主要流程

细菌性痢疾粪便标本检验的主要流程

细菌性痢疾粪便标本检验的主要流程

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细菌性痢疾粪便标本检验的主要流程详解

一、引言

AYLS7345 血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程30

AYLS7345 血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程30

编写者:沈继录 审核者: 批准人: 生效日期:20１2。1。１

文件发放范围:微生物组

文件年度审核

审核者: 审核者: 审核者: 审核者:

日期: 日期: 日期: 日期:

血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程

1.目得

规范血液及骨髓标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。

2、适用范围

血液及骨髓、

3.标本

3。1 标本类型 血液及骨髓。

3。2 标本采集

３.2、1 采血时间 抗菌药物治疗前,发热初期或高峰时抽血。

3、２。2 采血频率 对怀疑菌血症得成年病人,推荐同时在不同部位采集2～3套(每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶或者两套需氧瓶),对感染性心内膜炎与真菌血症则应多次采集;婴幼儿病人,推荐同时在不同部位采集2套,可不做厌氧培养、

３。2、3 采血量 以培养基得1/１０为宜,成人一次采血5~１0 ml,婴幼儿为1～２ m1。

3、2、4 骨髓标本 用骨髓穿刺针从髂骨采集。

３。3标本拒收标准

3 3.1血培养瓶破裂或有明显污染、

３ ３ 2 培养瓶标识与化验申请单不符。

３.３ 3用过期得培养瓶采集标本、采血量不足等。

3.３。4 对于不合格标本,应及时通知采集人员重新留取标本。

3。4 标本保存 采集标本后立即送到实验室,不能及时送检可置室温,切勿放冰箱。冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定得保暖措施。

4.试剂、仪器

4。1 革兰染液、氧化酶试剂、3%过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等、

4。2 BAＣT/Alert 3Ｄ或ＢＡCTＥＣ 900０全自动血培养系统、ＶITＥK鉴定系统。成人需氧血培养瓶、厌氧血培养瓶、儿童血培养瓶、革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性菌药敏卡((ＧNS)、革兰阳性菌鉴定卡(GPＩ)、革兰阳性菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸片、ATB板条等、

4、３ 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、Ｃ02培养箱等、

医学检验-粪便标本处理

医学检验-粪便标本处理

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.

粪便标本

粪便标本中常见的病原菌:

革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌

金黄色葡萄球菌 伤寒及其他沙门氏菌

厌氧链球菌种 志贺菌属

结核分枝杆菌 致病大肠埃希氏菌

产气荚膜杆菌 弧菌属菌种

艰辨梭菌 气单胞菌种

白色念珠菌 邻单胞菌

小肠结肠炎耶尔森菌

弯曲菌

沙门-志贺氏菌:接种HE及麦康凯平板,35℃、18～24小时后检查平板,有疑似菌落,接种双糖,细菌分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定后与沙门、志贺氏菌因子血清凝集,以确诊.

霍乱弧菌培养:取疑似患者粪便接种于碱性蛋白胨水中,进行增菌,同时划线接种于碱性琼脂平板/双洗平板血琼脂平板,孵育.增菌培养孵育6小时后,取菌膜移种于上述平板,进行分离培养,并同时做涂片,行革兰染色和悬滴标本,检查形态和活动力.各种分离平板在孵育18-24小时。观察菌落,挑取可疑菌落,先与生理盐水混匀,观察有无自凝现象.再用O1群霍乱多价血清作玻片凝集试验. 如发现霍乱病人,立即向当地防疫部门提供及时准确的信息.

致病大肠埃希氏菌培养:引起腹泻的大肠杆菌有四种--ETEC、EPEC、EIEC、EHEC.取液体状、脓血或糊状粪便或肛拭子划线接种于麦康凯或伊红美兰及血琼脂平板上,35℃孵育18-24小时,挑选乳糖发酵菌落5个,移种于KIA和MIU孵育过夜,并同时进行细菌分纯，用细菌鉴定仪上板鉴定并进行血清学分型.

副溶血弧菌培养:取粪便接种于副溶血弧菌增菌液中,6-8小时后接种于TCBS和SS琼脂平板上,35℃孵育18-24小时后,观察菌落,挑取TCBS上绿色微隆、浑浊、湿润菌落,SS上挑取无色透明、不易挑起菌落进行分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定.

粪便常规检验标准操作程序SOP文件

粪便常规检验标准操作程序SOP文件

ＸＸＸＸ医院

临床检验实验室 文件编号：

ABCD-SOP-07-20

粪便常规检验 版序：ＸＸＸＸ

页码：第1 页，共4 页

[检测原理]

通过理化检测手段检测人粪便中的非正常成份。

[标本采集与处理]

1，采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，如一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检，标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒，便于检查后焚毁。血吸虫毛蚴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。

2，检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子，在清晨排便前由肛门四周拭取标本，也可用棉拭子拭取，但均须立即镜检。

3，检查阿米巴滋养体，应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施，迅速送检。

4，不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可使柔弱的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时，可因尿液中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、真菌抱子、植物种子、花粉易混淆实验结果。

5，盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分，若无病理成分，可多部位取材。采取标本后，应在一小时内完成检查，否则可因9H及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。

6，检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数，应收集24h粪便送验。

7，隐血试验，应嘱患者收集标本前3日禁食动物性食物。连续检查3天，并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查，以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。

8，粪胆原定量检查应收集二天的粪便，混合称量，从其中取出约20g送验。查胆汁成分的粪便标本不应在室温中长时间放置，以免阳性率减低。

9，脂肪定量检查时，应先食定量脂肪食，每天进食脂肪50—150g，连续6天。从第三天起，收集72h粪便，也可定时口服色素(刚果红)，作为留取粪便的指示剂，将收集的粪便混合称量，从中取出60g左右送检。简易法为在正常膳食情况下，收集24h的全部粪便，混合称量，从其中取出约60g送检，测脂肪含量。